一種嗜酸乳桿菌飼料添加劑的制備方法

一種嗜酸乳桿菌飼料添加劑的制備方法
【專利摘要】本發明涉及一種嗜酸乳桿菌飼料添加劑的制備方法，該方法，將生淀粉用緩沖液調漿成醪液；將淀粉酶和糖化酶的混合酶加入到醪液中，反應，將反應后醪液離心，所得沉淀物熱風干燥，粉碎，得到混合物A；將嗜酸乳桿菌活化，擴大培養，接種到發酵液體培養基中，厭氧培養18?20h，得到嗜酸乳桿菌培養液；取黃精、芡實和赤小豆，超微粉碎，煎煮，濃縮，得濃縮液；將濃縮液加入到嗜酸乳桿菌培養液中，繼續厭氧培養3?4h，得到嗜酸乳桿菌發酵液；向發酵液中混合物A，攪拌，離心收集沉淀物；在所得沉淀物中加入碳酸鈣或氯化鈣后，制成顆粒料；將顆粒料，熱風干燥，即制備出嗜酸乳桿菌飼料添加劑。本發明飼料添加劑含水量低，活菌數為160?390億/g。
【專利說明】
一種嗜酸乳桿菌飼料添加劑的制備方法
技術領域
[0001] 本發明涉及一種飼料添加劑，具體的說是一種嗜酸乳桿菌飼料添加劑的制備方 法。
【背景技術】
[0002] 嗜酸乳桿菌屬于乳桿菌屬，革蘭氏陽性桿菌，桿的末端呈圓形，主要存在小腸中， 釋放乳酸，乙酸和一些對有害菌起作用的抗菌素，但是抑菌作用比較弱。嗜酸乳桿菌不僅在 胃中，它還是人體小腸內的主要益生菌。在胃中能存活的致病菌的胃部是個小型〃消毒車 間"，這是由于胃液具有很強的酸性。嗜酸乳桿菌調整腸道菌群平衡，抑制腸道不良微生物 的增殖。嗜酸乳桿菌對致病微生物具有拮抗作用。嗜酸乳桿菌能分泌抗生物素類物質(嗜酸 乳菌素(8(^(1〇1；[11)、嗜酸桿菌素(3(^(10卩11；[1；[11)、乳酸菌素（1361：0(^(1011)，對腸道致病菌產 生的拮抗作用。因此，將高活性嗜酸乳桿菌做成飼料添加劑，對家禽、家畜的生長均有較好 的促進作用，然而目前技術上存在活性低，含菌量少等等技術缺陷。

【發明內容】

[0003] 本發明目的是為解決上述技術問題的不足，提供一種嗜酸乳桿菌飼料添加劑的制 備方法，其具有方法簡單，所制備的嗜酸乳桿菌飼料添加劑含水量為4.0-6.5%，活菌數為 160-390億/g，添加劑保存兩年嗜酸乳桿菌仍然能保存96-98%菌種活性。
[0004] -種嗜酸乳桿菌飼料添加劑的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、將生淀粉用pH值4.6的緩沖液調漿，成生淀粉質量濃度為40-55%的醪液;將淀 粉酶和糖化酶按質量比1:4比例進行混合，得到混合酶;按照混合酶的質量為醪液質量的 1.5-2%，將混合酶加入到醪液中，混合均勻后，置于50-55°(：下反應16-3011，調整?!1值為4.5-4.7，得到反應后醪液;將反應后醪液4000-5000rpm離心15-20min，所得沉淀物在50-60 °C熱 風干燥，粉碎至80-160目，得到混合物A，備用； 步驟二、將嗜酸乳桿菌凍干菌粉采用質量百分比為9-12%滅菌脫脂乳水溶液，37°C的溫 度下活化3次;活化后的嗜酸乳桿菌劃線接種至MRS固體培養基;37°C培養24-32 h，長出單 個菌落后，采用接種環取1-2環接種至50-100mL的MRS液體培養基中，37°C的溫度下進行擴 大培養24-32 h，得到擴大培養后嗜酸乳桿菌菌液，備用； 步驟三、按照重量份數取黃精1-8份、芡實6-7份和赤小豆3-5份，置于超微粉碎機中進 行超微粉碎，過60-80目篩，在所得中藥粉末中添加其重量15-25倍的水，浸泡5-8小時，然后 置于容器中煎煮，先煮沸騰半小時再文火煎2-3小時，煎煮后進行過濾，除去渣滓，所得濾液 進行5-6倍濃縮，得到濃縮液，備用； 步驟四、將擴大培養后嗜酸乳桿菌菌液接種到發酵液體培養基中，接種量為發酵液體 培養基質量的3%_5%，37°C的溫度下厭氧培養，18-20h，得到嗜酸乳桿菌培養液;在嗜酸乳桿 菌培養液中加入其體積2%_3%的濃縮液，37°C的溫度下繼續厭氧培養3-4h，得到嗜酸乳桿菌 發酵液； 所述發酵液體培養基中各成分的質量百分比含量為：1.5-3%乳清粉，1.5%牛肉霄， 1.5 %蛋白胨，0.058 %硫酸鎂，0.025 %硫酸錳，0.22 %乙酸鈉和0.2 %磷酸氫二鉀，余量為 水，pH值為5.8; 步驟五、向培養的嗜酸乳桿菌發酵液中加入其質量1-10%的混合物A，在20-25Γ下， 180-220rpm攪拌30-60min，然后10000-15000rpm離心收集沉淀物;在所得沉淀物中加入其 質量0.5-1.5%的碳酸鈣或氯化鈣，混合均勻，采用制粒機將其制備成粒度大小為20-40目的 顆粒料； 步驟六、將所制備的顆粒料在低溫熱風沸騰干燥機中，用40-55Γ熱風進行干燥，顆粒 料在低溫熱風沸騰干燥機中停留10_20min，即制備出嗜酸乳桿菌飼料添加劑。
[0005] 所述pH值4.6的緩沖液優選為磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液或醋酸-醋酸鈉緩沖液。
[0006] 有益效果是： 1、本發明嗜酸乳桿菌飼料添加劑，針對嗜酸乳桿菌菌體特點，利用本發明中的混合物A 對乳酸菌進行包埋；因包埋菌種自生的差異，不同的包埋原料和包埋工藝，對菌種的保護效 果千差萬別。本發明與其他的包埋體相比，具有耐熱性好、硬度大和安全性好等優點，且保 護效果好;結合各步驟中中藥成分的添加，可增加菌種活性，延長其保持活性的周期，使所 制備的菌粉活菌數在160-390億/g，保存兩年仍然能保存95%菌種活性。
[0007] 2、本發明工藝中各步驟的有機結合，保證采用的原料中藥與飼用枯草芽孢桿菌相 互作用，最終使所制備的飼料添加劑適用于各種動物，包括家禽，家畜等，可促進動物腸胃 對營養物質的吸收，可促進動物健康快速生長。實驗驗證，本發明飼料添加劑在飼料中添加 后，可明顯提高動物機體的抗病性，加快動物生長速度。且本發明飼料添加劑不含防腐劑， 對畜體無損害，具有廣闊的市場應用前景。
【具體實施方式】
[0008] 一種嗜酸乳桿菌飼料添加劑的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、將生淀粉用pH值4.6的緩沖液調漿，成生淀粉質量濃度為40-55%的醪液;將淀 粉酶和糖化酶按質量比1:4比例進行混合，得到混合酶;按照混合酶的質量為醪液質量的 1.5-2%，將混合酶加入到醪液中，混合均勻后，置于50-55°(：下反應16-3011，調整?!1值為4.5-4.7，得到反應后醪液;將反應后醪液4000-5000rpm離心15-20min，所得沉淀物在50-60 °C熱 風干燥，粉碎至80-160目，得到混合物A，備用； 步驟二、將嗜酸乳桿菌凍干菌粉采用質量百分比為9-12%滅菌脫脂乳水溶液，37°C的溫 度下活化3次;活化后的嗜酸乳桿菌劃線接種至MRS固體培養基;37°C培養24-32 h，長出單 個菌落后，采用接種環取1-2環接種至50-100mL的MRS液體培養基中，37°C的溫度下進行擴 大培養24-32 h，得到擴大培養后嗜酸乳桿菌菌液，備用； 步驟三、按照重量份數取黃精1-8份、芡實6-7份和赤小豆3-5份，置于超微粉碎機中進 行超微粉碎，過60-80目篩，在所得中藥粉末中添加其重量15-25倍的水，浸泡5-8小時，然后 置于容器中煎煮，先煮沸騰半小時再文火煎2-3小時，煎煮后進行過濾，除去渣滓，所得濾液 進行5-6倍濃縮，得到濃縮液，備用； 步驟四、將擴大培養后嗜酸乳桿菌菌液接種到發酵液體培養基中，接種量為發酵液體 培養基質量的3%_5%，37°C的溫度下厭氧培養，18-20h，得到嗜酸乳桿菌培養液;在嗜酸乳桿 菌培養液中加入其體積2%-3%的濃縮液，37°C的溫度下繼續厭氧培養3-4h，得到嗜酸乳桿菌 發酵液； 所述發酵液體培養基中各成分的質量百分比含量為：1.5-3%乳清粉，1.5%牛肉霄， 1.5 %蛋白胨，0.058 %硫酸鎂，0.025 %硫酸錳，0.22 %乙酸鈉和0.2 %磷酸氫二鉀，余量為 水，pH值為5.8; 步驟五、向培養的嗜酸乳桿菌發酵液中加入其質量1-10%的混合物A，在20-25Γ下， 180-220rpm攪拌30-60min，然后10000-15000rpm離心收集沉淀物;在所得沉淀物中加入其 質量0.5-1.5%的碳酸鈣或氯化鈣，混合均勻，采用制粒機將其制備成粒度大小為20-40目的 顆粒料； 步驟六、將所制備的顆粒料在低溫熱風沸騰干燥機中，用40-55Γ熱風進行干燥，顆粒 料在低溫熱風沸騰干燥機中停留10_20min，即制備出嗜酸乳桿菌飼料添加劑。
[0009] 所述pH值4.6的緩沖液優選為磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液或醋酸-醋酸鈉緩沖液。
[0010] 實施例1 一種嗜酸乳桿菌飼料添加劑的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、將生淀粉用pH值4.6的磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液調漿成生淀粉質量濃度為 40%的醪液;將淀粉酶和糖化酶按質量比1:4比例進行混合，得到混合酶;按照混合酶的質量 為醪液質量的1.5%，將混合酶加入到醪液中，混合均勻后，置于50°C下反應16-30h，調整pH 值為4.5，得到反應后醪液;將反應后醪液4000rpm離心20min，所得沉淀物在50 °C熱風干燥， 粉碎至80目，得到混合物A，備用； 步驟二、將嗜酸乳桿菌凍干菌粉采用質量百分比為9%滅菌脫脂乳水溶液，37°C的溫度 下活化3次;活化后的嗜酸乳桿菌劃線接種至MRS固體培養基;37°C培養24 h，長出單個菌落 后，采用接種環取1環接種至50mL的MRS液體培養基中，37 °C的溫度下進行擴大培養24h，得 到擴大培養后嗜酸乳桿菌菌液； 步驟三、按照重量份數取黃精1份、芡實6份和赤小豆3份，置于超微粉碎機中進行超微 粉碎，過60目篩，在所得中藥粉末中添加其重量15倍的水，浸泡5小時，然后置于容器中煎 煮，先煮沸騰半小時再文火煎2小時，煎煮后進行過濾，除去渣滓，所得濾液進行5倍濃縮，得 到濃縮液，備用； 步驟四、將擴大培養后嗜酸乳桿菌菌液接種到發酵液體培養基中，接種量為發酵液體 培養基質量的3%，37°C的溫度下厭氧培養，18h，得到嗜酸乳桿菌培養液;在嗜酸乳桿菌培養 液中加入其體積2%_3%的濃縮液，37°C的溫度下繼續厭氧培養3-4h，得到嗜酸乳桿菌發酵 液； 所述發酵液體培養基中各成分的質量百分比含量為：1.5%乳清粉，1.5%牛肉霄， 1.5 %蛋白胨，0.058 %硫酸鎂，0.025 %硫酸錳，0.22 %乙酸鈉和0.2 %磷酸氫二鉀，余量為 水，pH值為5.8; 步驟五、向培養的嗜酸乳桿菌發酵液中加入其質量1%的混合物A，在20°C下，180rpm攪 拌30min，然后lOOOOrpm離心收集沉淀物;在所得沉淀物中加入其質量0.5-1.5%的碳酸f丐或 氯化鈣，混合均勻，采用制粒機將其制備成粒度大小為20-40目的顆粒料； 步驟六、將所制備的顆粒料在低溫熱風沸騰干燥機中，用40°C熱風進行干燥，顆粒料在 低溫熱風沸騰干燥機中停留l〇min，即制備出嗜酸乳桿菌飼料添加劑。
[0011] 所制備的嗜酸乳桿菌飼料添加劑含水量為6.5%，活菌數為160億/g，添加劑保存兩 年嗜酸乳桿菌仍然能保存96%菌種活性。
[0012] 實施例2 一種嗜酸乳桿菌飼料添加劑的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、將生淀粉用pH值4.6的醋酸-醋酸鈉緩沖液調漿成生淀粉濃度為55%(W/V)的醪 液;將淀粉酶和糖化酶按質量比1:4比例進行混合，得到混合酶;按照混合酶的質量為醪液 質量的2%，將混合酶加入到醪液中，混合均勻后，置于55°C下反應30h，調整pH值為4.7,得到 反應后醪液;將反應后醪液5000rpm離心20min，所得沉淀物在60 °C熱風干燥，粉碎至160目， 得到混合物A，備用； 步驟二、將嗜酸乳桿菌凍干菌粉采用質量百分比為12%滅菌脫脂乳水溶液，37°C的溫度 下活化3次;活化后的嗜酸乳桿菌劃線接種至MRS固體培養基;37°C培養32 h，長出單個菌落 后，采用接種環取2環接種至100mL的MRS液體培養基中，37°C的溫度下進行擴大培養32 h， 得到擴大培養后嗜酸乳桿菌菌液；所述發酵液體培養基中各成分的質量百分比含量為： 3%乳清粉，1.5%牛肉膏，1.5%蛋白胨，0.058%硫酸鎂，0.025%硫酸錳，0.22%乙酸鈉和 0.2 %磷酸氫二鉀，余量為水，pH值為5.8; 步驟三、按照重量份數取黃精8份、芡實7份和赤小豆5份，置于超微粉碎機中進行超微 粉碎，過80目篩，在所得中藥粉末中添加其重量25倍的水，浸泡8小時，然后置于容器中煎 煮，先煮沸騰半小時再文火煎3小時，煎煮后進行過濾，除去渣滓，所得濾液進行6倍濃縮，得 到濃縮液，備用； 步驟四、將擴大培養后嗜酸乳桿菌菌液接種到發酵液體培養基中，接種量為發酵液體 培養基質量的5%，37°C的溫度下厭氧培養，20h，得到嗜酸乳桿菌培養液;在嗜酸乳桿菌培 養液中加入其體積3%的濃縮液，37 °C的溫度下繼續厭氧培養4h，得到嗜酸乳桿菌發酵液； 步驟五、向培養的嗜酸乳桿菌發酵液中加入其質量10%的混合物A，在25°C下，220rpm 攪拌60min，然后15000rpm離心收集沉淀物;在所得沉淀物中加入其質量1.5%的碳酸|丐或氯 化鈣，混合均勻，采用制粒機將其制備成粒度大小為40目的顆粒料； 步驟六、將所制備的顆粒料在低溫熱風沸騰干燥機中，用55°C熱風進行干燥，顆粒料在 低溫熱風沸騰干燥機中停留20min，即制備出嗜酸乳桿菌飼料添加劑。
[0013] 所制備的嗜酸乳桿菌飼料添加劑含水量為4.0%，活菌數為300億/g，添加劑保存兩 年嗜酸乳桿菌仍然能保存97%菌種活性。
[0014] 實施例3 一種嗜酸乳桿菌飼料添加劑的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、將生淀粉用pH值4.6的磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液調漿成生淀粉濃度為45%(W/ V)的醪液;將淀粉酶和糖化酶按質量比1:4比例進行混合，得到混合酶;按照混合酶的質量 為醪液質量的1.8%，將混合酶加入到醪液中，混合均勻后，置于52°C下反應20h，調整pH值為 4.6，得到反應后醪液;將反應后醪液4500rpm離心18min，所得沉淀物在55 °C熱風干燥，粉碎 至100目，得到混合物A，備用； 步驟二、將嗜酸乳桿菌凍干菌粉采用質量百分比為10%滅菌脫脂乳水溶液，37°C的溫度 下活化3次;活化后的嗜酸乳桿菌劃線接種至MRS固體培養基;37°C培養30h，長出單個菌落 后，采用接種環取2環接種至80mL的MRS液體培養基中，37 °C的溫度下進行擴大培養30h，得 到擴大培養后嗜酸乳桿菌菌液； 所述發酵液體培養基中各成分的質量百分比含量為:2%乳清粉，1.5%牛肉膏，1.5% 蛋白胨，0.058 %硫酸鎂，0.025 %硫酸錳，0.22 %乙酸鈉和0.2 %磷酸氫二鉀，余量為水，pH 值為5.8; 步驟三、按照重量份數取黃精5份、芡實6.5份和赤小豆4份，置于超微粉碎機中進行超 微粉碎，過70目篩，在所得中藥粉末中添加其重量20倍的水，浸泡6小時，然后置于容器中煎 煮，先煮沸騰半小時再文火煎2.6小時，煎煮后進行過濾，除去渣滓，所得濾液進行5.5倍濃 縮，得到濃縮液，備用； 步驟四、將擴大培養后嗜酸乳桿菌菌液接種到發酵液體培養基中，接種量為發酵液體 培養基質量的4%，37°C的溫度下厭氧培養，19h，得到嗜酸乳桿菌培養液;在嗜酸乳桿菌培養 液中加入其體積2.5%的濃縮液，37 °C的溫度下繼續厭氧培養3.5h，得到嗜酸乳桿菌發酵液； 步驟五、向培養的嗜酸乳桿菌發酵液中加入其質量8%的混合物A，在22°C下，200rpm攪 拌50min，然后12000rpm離心收集沉淀物;在所得沉淀物中加入其質量1.0%的碳酸|丐或氯化 鈣，混合均勻，采用制粒機將其制備成粒度大小為30目的顆粒料； 步驟六、將所制備的顆粒料在低溫熱風沸騰干燥機中，用45°C熱風進行干燥，顆粒料在 低溫熱風沸騰干燥機中停留15min，即制備出嗜酸乳桿菌飼料添加劑。
[0015] 所制備的嗜酸乳桿菌飼料添加劑含水量為5.6%，活菌數為390億/g，添加劑保存兩 年嗜酸乳桿菌仍然能保存98%菌種活性。
[0016] 實施例4 一種嗜酸乳桿菌飼料添加劑的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、將生淀粉用pH值4.6的緩沖液調漿，成生淀粉質量濃度為45%的醪液;將淀粉酶 和糖化酶按質量比1:4比例進行混合，得到混合酶;按照混合酶的質量為醪液質量的1.7%， 將混合酶加入到醪液中，混合均勻后，置于52°C下反應16-30h，調整pH值為4.6,得到反應后 醪液;將反應后醪液4500rpm離心18min，所得沉淀物在55 °C熱風干燥，粉碎至180目，得到混 合物A，備用； 步驟二、將嗜酸乳桿菌凍干菌粉采用質量百分比為10%滅菌脫脂乳水溶液，37°C的溫度 下活化3次;活化后的嗜酸乳桿菌劃線接種至MRS固體培養基;37°C培養28h，長出單個菌落 后，采用接種環取2環接種至80mL的MRS液體培養基中，37 °C的溫度下進行擴大培養3 lh，得 到擴大培養后嗜酸乳桿菌菌液，備用； 步驟三、按照重量份數取黃精7份、芡實6份和赤小豆5份，置于超微粉碎機中進行超微 粉碎，過60-80目篩，在所得中藥粉末中添加其重量19倍的水，浸泡7小時，然后置于容器中 煎煮，先煮沸騰半小時再文火煎2.5小時，煎煮后進行過濾，除去渣滓，所得濾液進行6倍濃 縮，得到濃縮液，備用； 步驟四、將擴大培養后嗜酸乳桿菌菌液接種到發酵液體培養基中，接種量為發酵液體 培養基質量的5%，37°C的溫度下厭氧培養，20h，得到嗜酸乳桿菌培養液;在嗜酸乳桿菌培 養液中加入其體積3%的濃縮液，37 °C的溫度下繼續厭氧培養3-4h，得到嗜酸乳桿菌發酵液； 所述發酵液體培養基中各成分的質量百分比含量為：2.5%乳清粉，1.5%牛肉霄， 1.5 %蛋白胨，0.058 %硫酸鎂，0.025 %硫酸錳，0.22 %乙酸鈉和0.2 %磷酸氫二鉀，余量為 水，pH值為5.8; 步驟五、向培養的嗜酸乳桿菌發酵液中加入其質量8%的混合物A，在22°C下，200rpm攪 拌50min，然后12000rpm離心收集沉淀物;在所得沉淀物中加入其質量1.2%的碳酸|丐或氯化 鈣，混合均勻，采用制粒機將其制備成粒度大小為30目的顆粒料； 步驟六、將所制備的顆粒料在低溫熱風沸騰干燥機中，用50°C熱風進行干燥，顆粒料在 低溫熱風沸騰干燥機中停留15min，即制備出嗜酸乳桿菌飼料添加劑。
[0017] 所述PH值4.6的緩沖液優選為磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液或醋酸-醋酸鈉緩沖液。
[0018] 所制備的嗜酸乳桿菌飼料添加劑含水量為5.6%，活菌數為190億/g，添加劑保存兩 年嗜酸乳桿菌仍然能保存98%菌種活性。
[0019] 相關動物實驗 采用由本發明中的嗜酸乳桿菌飼料添加劑，對其效果進行相關實驗驗證。選300只剛斷 奶的仔兔，平均分成三組，每組1〇〇只，分別為試驗組、對照組和空白組，三組飼喂不同的嗜 酸乳桿菌飼料添加劑，試驗組在斷奶后飼喂的添加本發明所制備的嗜酸乳桿菌飼料添加劑 的飼料，對照組飼喂的飼料中添加普通飼料添加劑，空白組飼喂的兔飼料中不添加飼料添 加劑。空白組、試驗組和對照組飼喂斷奶仔兔在其他條件完全相同的環境中讓仔兔盡可能 高性能生長，統計斷奶后6周的生長過程中斷奶仔兔的平均日采食量、平均日增重和平均生 病率，其中平均生病率為一組仔兔6周所有生病次數與仔兔數量的比值。經統計，結果如表1 所示： 表1:
由以上數據可知，試驗組的仔兔的平均日采食量和平均日增重均較對照組和空白組 高，平均生病率明顯較低，本發明制備的嗜酸乳桿菌飼料添加劑可明顯增加動物體重，提高 免疫力，有效減輕食欲不振、消化不良、飼料利用率低、抗病力下降、生長緩慢、甚至死亡等 問題，從而提高仔兔的生長性能。對動物的生長，具有明顯的促進作用。
[0020] 本發明中所述嗜酸乳桿菌為普通菌株，可通過市場購買得到。
【主權項】
1. 一種嗜酸乳桿菌飼料添加劑的制備方法，其特征在于:包括以下步驟： 步驟一、將生淀粉用pH值4.6的緩沖液調漿，成生淀粉質量濃度為40-55%的醪液;將淀 粉酶和糖化酶按質量比1:4比例進行混合，得到混合酶;按照混合酶的質量為醪液質量的 1.5-2%，將混合酶加入到醪液中，混合均勻后，置于50-55°(：下反應16-3011，調整?!1值為4.5-4.7，得到反應后醪液;將反應后醪液4000-5000rpm離心15-20min，所得沉淀物在50-60 °C熱 風干燥，粉碎至80-160目，得到混合物A，備用； 步驟二、將嗜酸乳桿菌凍干菌粉采用質量百分比為9-12%滅菌脫脂乳水溶液，37°C的溫 度下活化3次;活化后的嗜酸乳桿菌劃線接種至MRS固體培養基;37°C培養24-32 h，長出單 個菌落后，采用接種環取1-2環接種至50-100mL的MRS液體培養基中，37°C的溫度下進行擴 大培養24-32 h，得到擴大培養后嗜酸乳桿菌菌液，備用； 步驟三、按照重量份數取黃精1-8份、芡實6-7份和赤小豆3-5份，置于超微粉碎機中進 行超微粉碎，過60-80目篩，在所得中藥粉末中添加其重量15-25倍的水，浸泡5-8小時，然后 置于容器中煎煮，先煮沸騰半小時再文火煎2-3小時，煎煮后進行過濾，除去渣滓，所得濾液 進行5-6倍濃縮，得到濃縮液，備用； 步驟四、將擴大培養后嗜酸乳桿菌菌液接種到發酵液體培養基中，接種量為發酵液體 培養基質量的3%_5%，37°C的溫度下厭氧培養，18-20h，得到嗜酸乳桿菌培養液;在嗜酸乳桿 菌培養液中加入其體積2%_3%的濃縮液，37°C的溫度下繼續厭氧培養3-4h，得到嗜酸乳桿菌 發酵液； 所述發酵液體培養基中各成分的質量百分比含量為：1.5-3%乳清粉，1.5 %牛肉霄， 1.5 %蛋白胨，0.058 %硫酸鎂，0.025 %硫酸錳，0.22 %乙酸鈉和0.2 %磷酸氫二鉀，余量為 水，pH值為5.8; 步驟五、向培養的嗜酸乳桿菌發酵液中加入其質量1-10%的混合物A，在20-25Γ下， 180-220rpm攪拌30-60min，然后10000-15000rpm離心收集沉淀物;在所得沉淀物中加入其 質量0.5-1.5%的碳酸鈣或氯化鈣，混合均勻，采用制粒機將其制備成粒度大小為20-40目的 顆粒料； 步驟六、將所制備的顆粒料在低溫熱風沸騰干燥機中，用40-55Γ熱風進行干燥，顆粒 料在低溫熱風沸騰干燥機中停留10_20min，即制備出嗜酸乳桿菌飼料添加劑。2. 如權利要求1所述嗜酸乳桿菌飼料添加劑的制備方法，其特征在于:所述pH值4.6的 緩沖液為磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液或醋酸-醋酸鈉緩沖液。3. 如權利要求1所述嗜酸乳桿菌飼料添加劑的制備方法所制備的嗜酸乳桿菌飼料添加 劑，其特征在于:含水量為4.0-6.5%，活菌數為160-390億/g。
【文檔編號】C12N1/20GK105994959SQ201610500890
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年6月30日
【發明人】岳占州, 王新昌, 安建軍, 楊雪蓮, 岳朝鵬, 張亞飛
【申請人】河南省岳氏精忠科技有限公司