一種益生菌蜂蜜組合物及其制備方法

一種益生菌蜂蜜組合物及其制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種益生菌蜂蜜組合物，以蜂蜜為主要原料，首先以部分蜂蜜、麥芽提取物和韭花、益生菌粉劑為原料，經低溫酶解、高壓脈沖電場殺菌、變溫發酵、分次益生菌接種、超濾濃縮等工藝，制備出酸甜適宜、益生菌含量及其功能性代謝物含量高的蜂蜜益生菌發酵濃縮液，其益生菌含量可達8.12×1012?9.58×1012CFU/ml，益生性極強，然后與剩余蜂蜜、麥芽提取物和生姜提取物及功能性輔料制備出一種蜂蜜含量高、口感酸甜適宜、長期保存(36?48個月)不結晶、保健效果顯著的益生菌蜂蜜組合物。CGMCC NO.1176320151130
【專利說明】
一種益生菌蜂蜜組合物及其制備方法
技術領域
[0001] 本發明涉及蜂蜜制品，特別涉及一種益生菌蜂蜜組合物及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 蜂蜜是蜜蜂采集植物花蜜釀成的一種理想的天然保健品。其主要成分有：（1)葡萄 糖、果糖:這兩種糖在蜂蜜中占65%以上。它賦予蜂蜜的甜味、吸濕性和能量的價值及有形 的特征。（2)酸類:蜂蜜中的酸類包括有機酸、無機酸和氨基酸。有機酸主要是葡萄糖酸和檸 檬酸。無機酸包括磷酸、鹽酸、硼酸和碳酸。蜂蜜中的氨基酸大約有17種，其中脯氨酸是主要 的氨基酸，其次是賴氨酸和天門冬氨酸。（3)酶類:主要是轉化酶和淀粉酶。（4)維生素:蜂蜜 中的維生素以B族最為豐富，其次是維生素 C。常見的維生素有核黃素、吡多酸(VB6)、煙酸、 葉酸、抗壞血酸。還有生物素、生育酚等。蜂蜜中的維生素主要來自蜂蜜中的花粉，少量來自 花蜜。（5)礦物質:蜂蜜中的礦物質含量差異很大，與植物生長的土壤有密切關系。蜂蜜中的 礦物質含量和種類與人體血液中的含量、種類十分相近，而且深色蜂蜜中的礦物質含量比 淺色蜂蜜高。棗花蜜屬深色蜜，經測定其含有的礦物質、微量元素均高于其它蜂蜜。如鉀、 鈉、鈣、磷等比其它蜂蜜高出4~10倍。鐵、銅、硒高10倍左右。（6)蛋白質:蜂蜜中的蛋白質有 4~7種，其中3種來自花蜜，另有4種來自蜜蜂。蜂蜜中含有一種膠體物質，它是由蛋白質、蠟 類、戊聚糖和無機物組成，在深色蜂蜜中含量約為1 %。它對蜂蜜的色澤和渾濁度有影響。 (7)芳香物質:蜂蜜中的芳香物質主要是醇和醛的衍生物及其相應的脂類化合物。這些芳香 物質大部分來自花蜜，少部分在蜂蜜釀制過程中產生的，它賦予蜂蜜獨特的香氣。（8)其它 物質:蜂蜜中還含有色素、花粉、糖醇類、丹寧類、樹脂及其它生物活性物質。
[0003] 蜜制膏是以蜂蜜為主要原料配以其它功能性食品或藥品原料而制備的一種膏劑， 目前，蜜制膏的品種較多，中國專利CN 102334626 B公開了一種蜂產品復合配方的膏劑制 品及制備方法，用蜂蜜、破壁蜂花粉、鮮蜂王漿、蜂王幼蟲凍干粉、雄蜂蛹凍干粉五種具有保 健作用的原料來制備的，本發明公開了蜂五寶膏的配方，成分是以重量計，分別是蜂蜜60-85%、破壁蜂花粉10-15%、鮮蜂王漿3-10%、蜂王幼蟲凍干粉0.5-2%、雄蜂蛹凍干粉0.5-2%。本發明還公開了該蜂五寶膏的制備方法，制備方法是將水分控制在19-22%的蜂蜜60 °C預熱，并開啟攪拌裝置，將鮮王漿、破壁蜂花粉、蜂王幼蟲凍干粉、雄蜂蛹凍干粉等加入到 蜂蜜中，混合均勻，再過膠體磨均質、裝瓶。這樣將富有營養的蜂產品集合在一起，充分發揮 對于補充營養，改善體質的作用，另外也可將該產品稀釋或直接用于面部營養美白滋潤。
[0004] 中國專利CN 103519041 B-種蔬果米汁蜂蜜膏及其制作方法，其特征在于，由下 列重量份的原料制成:蜂蜜50-55、果葡糖漿10-12、芋頭粉4-5、紅薯粉12-14、大米5-7、胡蘿 卜12-15、南瓜10-13、芹菜20-30、山楂2-3、淡竹葉3-4、竹葉菜4-5、三七花1-2、地黃葉3-4、楊 梅葉4-5、板栗殼20-12、鈣果葉4-5、水適量。本發明中蜂蜜補脾胃，潤腸道，滋潤皮膚;蔬菜 瓜果能夠補充人體所需的維生素與微量元素;大米、芋頭粉、紅薯粉補充碳水化合物；中藥 提取物增加了保健功效，能夠清熱解毒、滋補肝腎;而且味道醇厚、口感獨特。
[0005] 中國專利CN 103039774 B公開了一種復方羅漢果蜜膏的加工方法。將羅漢果、百 合、川貝和甘草加水洗凈，加水煮沸提取3次，合并提取液，濾過，濾液濃縮至流浸膏;將流浸 膏加入蜂蜜中混勻，加熱煮沸，趁熱裝瓶，密封，即得復方羅漢果蜜膏。本發明產品具有潤 肺、清肺利咽、化痰止咳的功效。適合演員、教師、廣播員、營業員等需保護發音器官者、慢性 咽炎患者。增加了羅漢果精深加工產品品種，利于工業化生產。
[0006] 中國專利CN 101869235 B公開了一種營養蜂蜜制品的配方及制備方法，具體來說 就是用具有營養保健作用的幾味中藥和蜂蜜來制備的，本發明公開了中藥的配方，包括決 明子、茯苓、枸杞子、菊花、白果、郁李仁、火麻仁、蘇葉、甘草。成分是以重量計，制品含有 3.0 %~5.0 %的中藥提取物，含有95 %~97 %的蜂蜜。本發明還公開了該制品的制備方法， 制備方法是將決明子、茯苓、枸杞子、菊花、白果、郁李仁、火麻仁、蘇葉、甘草混合后提取，提 取液濃縮后加到蜂蜜中，并將二者混合均勻，再濃縮、裝瓶。在服用蜂蜜制品的過程中可以 將上述幾味中藥的有效成分攝入到體內，既減少了服用這幾味中藥的麻煩，也減輕了不同 藥味對人體的刺激，同時又增強了蜂蜜和中藥的保健作用。
[0007] 中國專利CN 104757363 A公開了一種解酒蜂蜜膏，屬于食品技術加工領域，包括 如下重量份數的各組分:紅率4-8份;枸杞4-8份;生姜5-10份;橘皮5-10份;維生素 C 1-3份； 維生素 E 1-3份;橄欖油2-5份;醋10-15份;蜂蜜50-70份。本發明還提供了上述解酒蜂蜜膏 的制備方法及使用方法。本發明使醉酒的人在短時間內醒酒，緩解和解除因醉酒而引起的 身體不適及痛苦感覺，解決了單純食醋進行解酒的效果有限的問題，簡單方便，既有解酒作 用，又能養肝護胃，飲用方便。
[0008] 中國專利CN 105192506 A公開了一種鹿茸蜂蜜膏的加工方法。主要是為解決目前 服用鹿茸與蜂蜜混合的產品會產生燥熱或者腹瀉等不良反應的問題而發明的。它是由下述 原料按如下重量份制得的：蜂蜜80~90份，酶解鹿茸粉8~18份，黃柏提取物2份;蜂蜜由重 量百分比為85%的洋槐蜜、10%的桂花蜜和5%的椴樹蜜組成;具體制備方法是:將洋槐蜜、 桂花蜜、椴樹蜜混合于不銹鋼容器中后置于水中加熱，加熱55°C預融，待其具有較好的流動 性后加入酶解鹿茸粉及黃柏提取物，邊加入邊攪拌，攪拌12min待其充分混勻后，過膠體磨 研磨5min，過180目篩，入滅菌罐，81°C滅菌30min。優點是蜂蜜和黃柏對鹿茸起到降燥、收斂 的作用。
[0009] 中國專利CN 103637218 B公開了一種保健蜂蜜及其制備方法，原料組成為：黑蜂 蜂蜜100份，茯苓5-15份，黃芪5-15份，紅棗5-15份。本發明針對蜂蜜單一產品保健功效起效 慢的不足，根據多年的經驗以及大量的實驗篩選，將多種成分按照特定的比例加入黑蜂蜂 蜜中，獲得本發明保健蜂蜜。本發明保健蜂蜜營養豐富，具有抗衰老、增強免疫力、強身健 體、滋潤養顏、潤腸通便等功效，特別適合體質虛弱、便秘人群，能快速調理體質，使身體恢 復健康狀態。本發明的方法制備簡單，易于實現，便于工業化生產。
[0010] 上述公開的蜂蜜膏均以蜂蜜為主要原料，加入功能性原料，以解決相應的功能性 問題，但是，質量較好，蜂蜜含量較高、水分含量較低的蜜制膏隨著環境溫度的不同，會出現 不同程度的局部結晶，雖然不影響蜜制膏的內在質量，但也不會像純蜂蜜那樣整體、均一的 結晶，會出現不均一的結晶而影響外觀質量，誤導消費者的質量意識，降低顧客的購買欲和 食欲;同時，不論是純蜂蜜還是蜜制膏長期飲用會出現胃脹、胃酸等情況，個別的會出現"蜂 蜜不適應癥"，情況更加嚴重;并且因蜂蜜中含有特殊的有機酸、礦物質等，口感酸澀，糖酸 比例失調，不適用廣大的消費群體。中國專利CN 104757357 A公開了防止蜂蜜結晶的處理 方法，屬于食品加工技術領域。該方法在瓶裝蜂蜜傳統生產工藝步驟中，濃縮蜂蜜過程中同 時加入融化結晶核的環節，其操作方法是:在濃縮蜂蜜開始時，先將蜂蜜溫度升高到77°C， 保溫5分鐘，接著關閉進氣閥進行濃縮，當蜂蜜溫度降到50-60°C時，控制在該溫度范圍內繼 續濃縮，至蜜的含水量符合標準，然后將蜜栗入外有保溫層的儲蜜罐，進行超聲波處理30 秒，即破壞了蜂蜜的結晶核，防止蜂蜜降溫后再次結晶。本發明直接在生產線上安裝保溫儲 蜜罐，蜂蜜在濃縮步驟中經冷熱處理初步破壞結晶核，再在儲蜜罐中超聲波處理，徹底破壞 結晶核，所得到的蜂蜜不僅滋味好，而且保持了原來的透明流質狀態，比一般的加熱解晶法 所用成本低。上述處理方法得到的蜂蜜當溫度降低時還會出現出現結晶現象，具有可逆性， 并且工藝復雜，成本高。中國專利CN 101785539 B-種不易結晶蜂蜜及其制備方法。通過對 蜂蜜加工的工藝流程和工藝參數進行調整和優化，經過融蜜、粗濾、配料、中濾、真空脫水、 破晶核、精濾、冷卻、灌裝、裝箱工序得到不易結晶蜂蜜。本發明與現有技術相比，實現了不 添加任何物質延緩蜂蜜結晶，延長了蜂蜜的貨架期。上述制備方法工藝復雜，采取多級過 濾，蜂蜜有效成分含量降低，并且經過12個月結晶仍然會產生。
[0011] 因此，制備一種蜂蜜含量高、口感酸甜適宜、長期保存不結晶、保健效果顯著的益 生菌蜂蜜組合物很有必要。

【發明內容】

[0012] 本發明所解決的技術問題是克服現有蜜制膏的缺陷，以蜂蜜為主要原料，科學復 配可提供全面、天然植物酶和多種營養物質的麥芽提取物;可有效防止蜜制膏結晶以提高 蜜制膏外觀質量和穩定性、增強食欲的生姜提取物;可有機調節人體整體免疫力、增強巨噬 細胞吞噬能力、抑制有害菌在人體腸道粘附和侵襲以增強益生性的益生菌粉;可促進蜂蜜 消化吸收、防止胃腸脹氣的韭花等，以此為蜜制膏的主要制備原料，科學復配少量一種或多 種功能性輔料，制備出一種蜂蜜含量高、口感酸甜適宜、長期保存不結晶、保健效果顯著的 益生菌蜂蜜組合物。
[0013]為了達到上述目的，本發明采用以下技術方案：
[0014] -種益生菌蜂蜜組合物，主要由以下重量份數的原料制備：
[0015] 蜂蜜155-185份，麥芽提取物4-10份，生姜提取物2-6份，益生菌粉劑1-3份，韭花1-3份；
[0016] 優選地，所述益生菌蜂蜜組合物，主要由以下重量份數的原料制備：
[0017] 蜂蜜165-175份，麥芽提取物6-8份，生姜提取物3-5份，益生菌粉劑1.5-2.5份，韭 花 1.5-2.5份；
[0018]更優選地，所述益生菌蜂蜜組合物，主要由以下重量份數的原料制備：
[0019]蜂蜜170份，麥芽提取物7份，生姜提取物4份，益生菌粉劑2份，韭花2份；
[0020]進一步地，所述益生菌蜂蜜組合物還包括以下重量份數的一種或幾種輔料：
[0021 ] 水果粉0.6-1.2份，藻類0.5-1份，庫拉索蘆薈凝膠0.5-1份，蜂花粉0.2-0.8份，低 聚木糖0.2-0.8份，殼寡糖0.1-0.7份，海洋魚骨膠原低聚肽粉0.1-0.7份，中草藥提取物 0.1-0.6份，蛹蟲草 0.1-0.5份；
[0022] 優選地，所述益生菌蜂蜜組合物還包括以下重量份數的一種或幾種輔料：
[0023] 水果粉0.8-1.0份，藻類0.7-0.9份，庫拉索蘆薈凝膠0.7-0.9份，蜂花粉0.4-0.6 份，低聚木糖0.4-0.6份，殼寡糖0.3-0.5份，海洋魚骨膠原低聚肽粉0.3-0.5份，中草藥提取 物0.2-0.4份，蛹蟲草0.2-0.4份；
[0024] 更優選地，所述益生菌蜂蜜組合物還包括以下重量份數的一種或幾種輔料：
[0025] 水果粉0.9份，藻類0.8份，庫拉索蘆薈凝膠0.8份，蜂花粉0.5份，低聚木糖0.5份， 殼寡糖〇. 4份，海洋魚骨膠原低聚肽粉0.4份，中草藥提取物0.3份，蛹蟲草0.3份；
[0026] 進一步地，所述蜂蜜至少含有80-100 %的洋槐蜂蜜；
[0027] 進一步地，所述麥芽提取物中不僅含有豐富的植物蛋白酶、淀粉酶、半纖維素酶、 酯酶、氧化還原酶等多種植物酶而且含有植物多糖和單糖、植物淀粉、植物蛋白等營養物 質，不僅可為益生菌蜂蜜組合物提供全面、天然的植物酶，還可為益生菌提供全面、豐富的 營養物質；
[0028] 優選地，所述麥芽提取物采用超聲清洗、微波輔助超聲提取和高壓脈沖電場提取、 減壓濃縮等低溫提取技術，有效提高了原料利用率、植物酶活性和產率;有效保證了麥芽提 取物的食品安全性；
[0029] 更優選地，所述麥芽提取物的制備方法為:將大麥芽和小麥芽按質量比8-10:1-3 均勻混合，粉碎至粒度0.5-lmm，得粉碎麥芽;然后將木瓜、菠蘿、無花果分別于超聲波清洗 機中在功率200W、頻率30KHz條件下超聲清洗5-10min，瀝干，室溫下破碎至粒度0.5-lmm，并 按質量比7-9:1-3:1-2均勻混合，加入混合物質量3-5倍的粉碎麥芽得原料混合物，加入原 料混合物質量1-3倍的水，用檸檬酸調節pH值為3-4,在功率150-300W、頻率2000Hz條件下進 行微波提取，其中，每次微波輻照總時間60-SOs，進行間隔式輻照:輻照10s，間隔10s，控制 溫度20-35°C，如此輻照10次，同時在功率200-300W，頻率30-40KHZ條件下進行超聲波輔助 提取;保溫l_3h，然后，在功率200-400W、頻率2000Hz條件下進行微波提取，其中，每次微波 輻照總時間90-105S，進行間隔式輻照：輻照15s，間隔10s，控制溫度40-60°C，如此輻照10 次，同時在功率300-500W，頻率40-50KHZ條件下進行超聲波輔助提取，最后自然降溫至室 溫，于電場強度25-35kV/cm，脈沖時間400-600ys，脈沖頻率200-300HZ條件下進行高壓脈沖 電場提取15_20min;提取液過濾得第一濾液，加濾渣4倍的水漂洗、過濾得第二濾液，將第一 濾液和第二濾液按質量比1:3-5均勻混合，減壓濃縮至固形物含量為20%以上，即得麥芽提 取物；
[0030] 優選地，所述超聲波清洗機中清洗液為0.3-0.5%的碳酸氫鈉溶液。
[0031] 進一步地，所述生姜提取物是將黃姜和生姜科學復配，經超聲清洗、冷凍破碎后經 高壓脈沖電場提取和微波提取，最后經生物酶解而制得的，在本發明中，其獨特作用是可有 效防止高含量蜂蜜益生菌蜂蜜組合物在儲存過程發生局部、分散性重結晶，提高益生菌蜂 蜜組合物的儲存穩定性，延長益生菌蜂蜜組合物的貨架期，提高益生菌蜂蜜組合物的商品 價值，并且還會協同提升純天然蜂蜜的香氣，增強消費者食欲；當然，同時還具備其原料有 效成分的功能特性；
[0032] 優選地，所述生姜提取物的制備方法，包括如下步驟:將生姜和黃姜分別放入裝有 0.1-0.3 %碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中于200-400W、30-40KHZ清洗5-10min，瀝干，按質 量比6-9:1-3均勻混合，然后于-20-24°(：冷凍8-101^11 ;立即粉碎至粒徑0.2-0.4111111;置容器 中并添加4-6倍重量的水，得混合物料，用乳酸調節pH值為4.5,于室溫下在電場強度15-25kV/cm，脈沖數30-50條件下進行高壓脈沖電場處理;然后升溫至30-40°C，保溫，在功率 300-500W條件下進行微波輻照提取，其中，每次微波輻照總時間70s，進行間隔式輻照:輻照 10s，間隔10s，如此輻照10次;繼續升溫至40-50°C，保溫，首先，向提取液中加入金屬離子， 使得金屬離子含量為:鈉離子28-30mg/L、鋅離子20-22mg/L、鉀離子15-18mg/L、鈣離子10-12mg/L和鎂離子6-8mg/L，然后加入混合物料總重量0.5-1.5 %的復合酶酶解40-60min，布 袋過濾，得濾液;濾渣用2倍重量60-70 °C水漂洗3次，漂洗液與濾液合并，均勻混合，減壓濃 縮至固形物含量為20 %以上，即得生姜提取物；
[0033]所述復合酶質量組成為:纖維素酶:葡聚糖酶:木聚糖酶:甘露糖酶:漆酶=5-7:3-5:3-5:2-4:1-3〇
[0034] 進一步地，所述益生菌粉劑益生菌活菌含量為:6X1012-8X1012cfu/g;
[0035] 所述益生菌粉劑包括以下益生菌粉劑中的任意一種或多種：例如：植物乳桿菌 (Lactobacillus plantarum)、兩岐雙岐桿菌（Bifidobacterium bifidum)、嬰兒雙岐桿菌 (B. infantis)、長雙岐桿菌（B. longum)、短雙岐桿菌（B.breve)、青春雙岐桿菌 (B.adolescentis)、乳雙歧桿菌（Bifidobacterium lactis)、保加利亞乳桿菌 (Lactobacillus .Bulgaricus)、嗜酸乳桿菌（L.acidophilus)、干酪乳桿菌（Lactobacillus casei)、鼠李糖乳桿菌（Lactobacillus rhamnosus )、嗜熱鏈球菌（Streptococcus thermophilus)；
[0036] 優選地，所述益生菌粉劑由以下重量份數的粉劑均勻混合而成:植物乳桿菌30-40 份，兩岐雙岐桿菌25-35份，乳雙歧桿菌20-30份，嗜熱鏈球菌10-20份，保加利亞乳桿菌12-15份，嗜酸乳桿菌12-15份，干酪乳桿菌8-10份，鼠李糖乳桿菌5-10份；
[0037]更優選地，所述植物乳桿菌粉劑是以植物乳桿菌CGMCC N0.11763為出發菌按按常 規方法制備的，其中的冷凍保護劑以含有抗凍蛋白的動物或植物為原料，經高壓脈沖電場 提取、超聲波輔助微波提取和復配酶酶解而制得的，可有效提高植物乳桿菌粉劑在冷凍干 燥過程活菌存活率；
[0038] 優選地，所述保護劑的制備方法，包括如下步驟:將冬黑麥、沙冬青、鯊魚皮膠原蛋 白分別清洗、瀝干，按質量比8-10: 3-5: 2-4均勻混合，加入混合物料質量0.1-1倍的pH值為 3.8-4.5的乳酸潤濕3-811，于-18-22°(：冷凍1-211后立即進行粉碎，冷凍料層厚度3-5〇11，粉 碎物粒徑0.5-3mm，接著加入粉碎物質量10-20倍的水，用乳酸調節pH值為3.5-5.5，于室溫 下在電場強度25-35kV/cm，脈沖時間300-500ys，脈沖頻率200-300HZ條件下進行高壓脈沖 電場處理20-30min;然后于室溫在功率150-300W條件下進行微波輻照提取15-20min，同時 在功率200-300W，頻率30-40KHZ條件下進行超聲波輔助提取;加入提取液質量1-2%的復配 酶，于45-55 °C酶解30-50min;酶解液過濾、濾液濃縮、低溫粉碎至粒徑為0.1-0.3mm即得保 護劑；
[0039] 所述復配酶為纖維素酶、蛋白酶、淀粉酶、果膠酶、單寧酶按質量比3-5:2-4:1-3: 1-3:1-2均勻混合；
[0040] 更優選地，所述微波輻照提取為間歇式提取，即微波輻照10s，間隔20s。
[0041] 進一步地，所述水果粉為諾麗果粉、芒果粉、雪梨粉、沙棘粉、瑪咖粉中的任意一 種。
[0042] 進一步地，所述藻類為雨生紅球藻、鹽藻、鈍頂螺旋藻中的任意一種。
[0043] 進一步地，所述蜂花粉為芝麻花粉、油菜花粉中的任意一種。
[0044] 進一步地，所述中草藥提取物是以百合、金銀花、薄荷、羅漢果、阿膠、菊花、葛根、 紅棗、火麻仁、蓮子、酸棗仁、黃精、枸杞、玉竹、白J￡、人參、荷葉、決明子、枳犋子中的一種或 幾種為原料而制備的；
[0045] 優選地，所述中草藥提取物的制備方法，包括如下步驟:按重量份數計，稱取上述 一種或幾種中草藥，置盛有〇. 1-0.3 %碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中于200W、30KHZ清洗 10-15min，瀝干，將上述中藥粉碎至粒徑為2_以下，置容器中均勻混合并添加3-6倍重量的 水，得混合物料，控制溫度70-90°C保持2-4h，接著降溫至40-50 °C，用乳酸調節pH值為3.5-4.5，在功率150-3001條件下進行微波提取10-1511^11，同時在功率200-3001，頻率30-401〇^ 條件下進行超聲波輔助提取;然后加入混合物料總重量〇. 5-1.5 %的混合酶進行酶解，用乳 酸調節pH值為5.5-6.8，酶解2-4h，最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，乙 醇和丙醇混合的質量比為1:1-3,控制溫度至60-78Γ保持3-4h，過濾，得第一濾液;添加濾 渣1-3倍重量的水，控制溫度85-95°C保持l_3h，然后降溫至25-35°C，過濾，得第二濾液;將 第一濾液和第二濾液按照質量比2-4:1-3合并，均勻混合，即得中草藥提取物；
[0046] 所述混合酶為葡聚糖酶、戊聚糖酶、木聚糖酶、酸性蛋白酶、單寧酶按質量比3-5: 3- 5:2-4:1-3:1-2 均勻混合。
[0047] 本發明另一目的是提供上述益生菌蜂蜜組合物的制備方法，包括如下步驟：
[0048] 1)按照配方，首先取韭花，清洗、瀝干，破碎至粒徑0.3-0.5mm，向其中加入20-50份 蜂蜜和2-5份麥芽提取物，均勻混合，加入混合物料2-4倍的去離子水，用乳酸調節pH值為5-7，升溫至55-65°C，保溫30-50min，然后降溫至32-35°C于電場強度20-30kV/cm，脈沖時間 200-400ys，脈沖頻率200-400HZ進行高壓脈沖電場殺菌5-10min，調整pH值為6.0-7.0，加入 益生菌粉劑質量的40-50%恒溫發酵0.5-lh，接著以0.8-1.0°C/min的速率升溫至40-45°C， 加入益生菌粉劑質量的50-60%恒溫發酵2-4h，最后以0.6-0.8°C/min的速率升溫至50-55 °C，繼續發酵0.5-lh，發酵液依次經40目、80目雙聯過濾器過濾，濾液經循環超濾濃縮至固 形物含量為60 %以上得蜂蜜益生菌發酵濃縮液；
[0049] 2)將剩余蜂蜜放入不銹鋼容器中，置于裝有50_60°C水的預溶裝置中，預溶30- 50min，過100-120目篩，轉入調配罐，保溫50-60 °C，邊攪拌邊依次加入剩余麥芽提取物、生 姜提取物，充分溶解l〇_15min;接著加入輔料充分溶解4-6min得初混料;然后過膠體磨研磨 4- 6min，調整物料細度，過160-200目篩，入滅菌罐80-83°C滅菌28-32min，轉入貯罐降溫至 48-52Γ，最后灌裝、封口、包裝即得益生菌蜂蜜組合物。
[0050] 經上述方法制備的益生菌蜂蜜組合物結晶出現時間為36-48個月。
[0051 ] 本發明植物乳桿菌(1^(：1：(^&(3；[11118口1&1^&1'11111)乂!1于2015年11月30日保藏于中國 微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC)，保藏號為CGMCC N0.11763,保藏 地址為：中國北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編：100101。 [0052] 植物乳桿菌益生特性如下：
[0053]本發明所提供的植物乳桿菌CGMCC N0.11763經實驗發現能夠在pH為1.50的條件 下存活，在1%膽鹽培養4小時后仍處于存活狀態;植物乳桿菌CGMCC N0.11763降解亞硝酸 鹽速度快，分解能力達到10.9mg/h/kg，該菌種在生產泡菜時，整個發酵過程中亞硝酸鹽濃 度在4.8mg/kg以下；CGMCC N0.11763在發酵60h小時后，對膽固醇降解率可達到64.76%。 CGMCC N0 · 11763黏附能力測定的自凝集率為95 · 71 %。
[0054] 植物乳桿菌CGMCC NO. 11763對膽固醇降解能力研究和測定：
[0055] 取lml CGMCC N0.11763母液接種于10mL的MRS膽固醇液體培養基（膽固醇含量 0. 1mg/ml，pH 6.2)中，37°C的恒溫靜置分別培養20h、40h、60h備用，以接入lmL無菌水的MRS 膽固醇培養基為對照，取以上培養不同時間的菌液樣品及對照液各lml，9000r/min，4°C下 離心10min，得到發酵上清液，鄰苯二甲醛法測定上清液中膽固醇含量(具體為:取各上清液 0 . lml于相應的試管中，加冰醋酸0.3ml，lmg/ml的鄰苯二甲醛0.15ml，緩緩加入濃硫酸 1. 〇ml，混合均勻。室溫靜置lOmin，于550nm下測吸光值）。每一處理3個重復，以同樣方法制 作膽固醇標準曲線，計算上清液中膽固醇含量及降解率，結果見表1。可知，CGMCCN0.11763 對膽固醇有很好的降解作用，在發酵60h小時后，降解率可達到64.76%。
[0056]表1對膽固醇的降解情況。
[0058] 植物乳桿菌CGMCC NO. 11763菌株的耐膽鹽試驗：
[0059] 取CGMCCN0.11763菌液lmL接種菌種于含有不同膽鹽（含量梯度為0.0%、0.2%、 0.4%、0.6%、0.8%、1%)的1011^]\?5液體培養基(？!1=6.4)，置于37°(：下分別培養0、2、411， 每個處理3個重復。各取lml樣品菌液于9ml生理鹽水中混勻，制備稀釋度溶液，取0.1ml稀釋 液于MRS中涂布，于37°C生化培養箱中倒置培養48小時(每個稀釋度做3個平行)記錄計算平 板上的菌數個數。結果見表2。可知該菌在膽鹽濃度為1 %處理4h后菌的生長量依然達到 0· 59±0·92 X 107(cfu/ml)，有很好的耐膽鹽能力。
[0060] 表2耐膽鹽能力檢測[(土s) X 107cfu/ml]
[0061]
[0062] 植物乳桿菌CGMCC NO. 11763菌株的耐酸試驗
[0063] 取HLX37母液按lml接種菌種于不同pH值(pH梯度為1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0)的 lOmLMRS液體培養基，置于37°C下分別培養0、2、4h，每一處理3個重復。各取lml樣品菌液于 9ml生理鹽水中混勻，制備稀釋溶液，取0 . lml稀釋液于MRS中涂布，于37 °C生化培養箱中倒 置培養48小時(每個稀釋度做3個平行)記錄平板上的菌落個數。結果見表3。說明該菌具有 很強的耐酸能力。
[0064] 表3 耐酸能力檢測[(土s) X 107cfu/ml]
[0065]
[0066] 植物乳桿菌CGMCC NO. 11763的黏附能力測定
[0067] 培養CGMCC NO. 11763(MRS液體培養基）、大腸桿菌DH5a(LB液體培養基)24h得發酵 液，分別置于3000r/min、4°C下離心10min，收集菌泥，分別用pH = 7.0的無菌磷酸鹽緩沖液 (PBS)洗滌菌泥2次（即在菌落中加入PBS，震蕩混合均勻后，置于3000r/min、4°C下離心 lOmin，收集菌體）。自凝集率（％ :用無菌的roS將菌泥CGMCC NO. 11763制成在波長600nm處 的吸光值為0.4 ±0.1 (A 0)的懸浮菌液及菌懸液，靜置24h后測定吸光值A 24,自凝集率 (%)公式為(A 0-A 24)/A 0。；他凝集率（％):將CGMCC如.11763和大腸桿菌0耶€[的懸菌 液調節成在波長600nm處的吸光值為0.6±0.1 (A 0)的混合懸浮菌液。靜置24H后測定吸光 值A 24,他凝集率（％ )公式為(A 0 -A 24)/A 0。測定結果見表5,可知CGMCC N0.11763的自 凝集率為95.71 %，有很強的黏附能力。
[0068]表4黏附能力表
[0070] 植物乳桿菌CGMCC N0.11763的菌株生理特性
[0071 ] 所述植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)XH于2015年11月30日保藏于中國微 生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC)，保藏號為CGMCC N0.11763,保藏地 址為：中國北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編：100101。
[0072] 該菌株特點如下:在顯微鏡下觀察，該菌株為短桿狀，革蘭氏染色呈陽性，無鞭毛， 不產芽孢;在固體培養基上，該菌菌落為白色，表面光滑，致密，形態為圓形，邊緣較整齊。
[0073] 理化特征為:過氧化氫酶(-)，明膠液化(-)，吲哚實驗( + )，運動性(-)，發酵產氣 (_)，亞硝酸鹽還原(_)，發酵產氣(_)，產硫化氫氣體(_)，pH4.0MRS培養基中生長(+ )。經過 生理生化鑒定為為植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum)，命名為植物乳桿菌 (Lactobacillus plantarum)XH〇
[0074] 菌株能夠在57°C下生長良好，葡萄糖耐受能力為275g/L。
[0075] 本發明植物乳桿菌由采集人李建樹，從新疆維吾爾族老鄉家中酸奶中分離得到， 采集時間2015年6月2日。
[0076]本發明植物乳桿菌CGMCC N0.11763經實驗發現能夠在pH為1.50的條件下存活，在 1 %膽鹽培養4小時后仍處于存活狀態;植物乳桿菌CGMCC N0.11763降解亞硝酸鹽速度快， 分解能力達到10.9mg/h/kg，該菌種在生產泡菜時，整個發酵過程中亞硝酸鹽濃度在4.8mg/ kg以下；CGMCCN0.11763在發酵60h小時后，對膽固醇降解率可達到64.76 %。CGMCC NO. 11763黏附能力測定的自凝集率為95.71 %，菌株能夠在57°C下生長良好，葡萄糖耐受能 力為 275g/L。
[0077] 有益效果：
[0078] 本發明以蜂蜜為主要原料，首先以部分蜂蜜、麥芽提取物和韭花、益生菌粉劑為原 料，經低溫酶解、高壓脈沖電場殺菌、變溫發酵、分次益生菌接種、超濾濃縮等工藝，制備出 酸甜適宜、益生菌含量及其功能性代謝物含量高的蜂蜜益生菌發酵濃縮液，其益生菌含量 可達8.12 X 1012-9.58 X 1012CFU/ml，益生性極強，然后與剩余蜂蜜、麥芽提取物和生姜提取 物及功能性輔料制備出一種蜂蜜含量高、口感酸甜適宜、長期保存(36-48個月）不結晶、保 健效果顯著的益生菌蜂蜜組合物。具體技術效果見實施例七至九;具體技術原理如下：
[0079] 1.本發明的益生菌劑科學復配多種乳酸菌劑，種類多，功能全，益生性強，特別是 植物乳桿菌CGMCC NO. 11763經實驗發現能夠在pH為1.50的條件下存活，在1 %膽鹽培養4小 時后仍處于存活狀態;植物乳桿菌CGMCC N0.11763降解亞硝酸鹽速度快，分解能力達到 10.9mg/h/kg，該菌種在生產泡菜時，整個發酵過程中亞硝酸鹽濃度在4.8mg/kg以下;CGMCC NO. 11763在發酵60h小時后，對膽固醇降解率可達到64.76 %。CGMCC NO. 11763黏附能力測 定的自凝集率為95.71 %。
[0080] 需要說明的是本發明益生菌蜂蜜組合物中含有大量的功能性益生菌代謝物和死 菌體，雖為死菌體，但死菌體、細胞碎片與代謝產物與活菌一樣，可抑制病原菌對腸壁的粘 附和侵襲、有機調節人體整體免疫力、增強巨噬細胞吞噬能力、抑制腫瘤生長、提高自然殺 傷細胞(NK細胞）的活性、改善粘膜表面病菌和溶菌酶平衡等，其效果同死菌體數量成正比 例，滅活的蜂蜜益生菌發酵濃縮液同樣具備其益生菌的較強的益生性。
[0081] 2.本發明在制備植物乳桿菌粉劑時采用的冷凍保護劑將含有抗凍蛋白較高的冬 黑麥、沙冬青和鯊魚皮膠原蛋白科學復配，經高壓脈沖電場提取、超聲波輔助微波提取和生 物酶解而制得，全程低溫提取，抗凍蛋白提取率高，損失少，得到的保護劑抗凍多肽含量高、 種類全、功能性強、抗凍效果好，提高了植物乳桿菌粉劑中的活菌含量。
[0082] 3.本發明制備的麥芽提取物中不僅含有豐富的植物蛋白酶、淀粉酶、半纖維素酶、 酯酶、氧化還原酶等多種植物酶而且含有植物多糖和單糖、植物淀粉、植物蛋白、可溶性纖 維等營養物質，不僅可為益生菌蜂蜜組合物提供全面、天然的植物酶，還可為益生菌提供全 面、豐富的營養物質；同時將其與生姜提取物科學復配，可協同增強蜂蜜的儲存穩定性，進 而可防止蜂蜜重結晶，經超聲清洗、微波輔助超聲提取和高壓脈沖電場提取、減壓濃縮等低 溫提取后，其效果更加顯著，并且有效提高了原料利用率、植物酶活性和產率;有效保證了 麥芽提取物的食品安全性。
[0083] 4.本發明制備的生姜提取物是將黃姜和生姜科學復配，經超聲清洗、冷凍破碎后 經高壓脈沖電場提取和微波提取，最后經生物酶解而制得的，在本發明中，其獨特作用是可 有效提高高含量蜂蜜益生菌蜂蜜組合物在儲存過程的穩定性，提高產品的外觀質量，防止 益生菌蜂蜜組合物在溫度、水分、微生物污染等環境條件下發生局部、分散性重結晶，延長 益生菌蜂蜜組合物的貨架期，提高益生菌蜂蜜組合物的商品價值，并且還會協同提升純天 然蜂蜜的香氣，增強消費者食欲，與麥芽提取物科學復配，協同作用更強；當然，同時還具備 黃姜和生姜有效成分的功能特性。
[0084] 5.本發明將韭花科學復配于益生菌蜂蜜組合物中，突破了傳統的韭花與蜂蜜不可 同食的理論，將少量韭花與蜂蜜、麥芽提取物科學復配，并經益生菌發酵，不但不會產生腹 痛、腹瀉等癥狀，而且還會促進蜂蜜消化、吸收，防止胃腸脹氣，特別適合因食用蜂蜜而胃 酸、胃脹、腹瀉消費者，拓展了益生菌蜂蜜組合物的消費群體。
[0085] 6.本發明科學復配了諾麗果粉、芒果粉、雪梨粉、沙棘粉、瑪咖粉等水果粉;雨生紅 球藻、鹽藻、鈍頂螺旋藻等藻類;庫拉索蘆薈凝膠;芝麻花粉、油菜花粉等蜂花粉;低聚木糖； 殼寡糖;海洋魚骨膠原低聚肽粉;百合、金銀花、薄荷、羅漢果、阿膠、紅棗、火麻仁、蓮子、酸 棗仁、黃精、枸杞、玉竹、白芷、人參、荷葉、決明子、枳犋子等中草藥提取物;蛹蟲草；以上述 原料中的一種或幾種作為輔料，更加增強了益生菌蜂蜜組合物的功能特性及保健效果，可 制備出多種功能性保健系列益生菌蜂蜜組合物。
[0086]需要說明的是本發明益生菌蜂蜜組合物的技術效果是各組分技術特征相互協同、 相互作用的結果，并非簡單的技術特征(組分功能）的疊加，各組分技術特征的有機結合和 協同產生的效果遠遠超過各單一技術特征功能和效果的疊加，具有較好的先進性和實用 性。
【具體實施方式】
[0087]下面通過具體的實施方案敘述本發明。除非特別說明，本發明中所用的技術手段 均為本領域技術人員所公知的方法。另外，實施方案應理解為說明性的，而非限制本發明的 范圍，本發明的實質和范圍僅由權利要求書所限定。對于本領域技術人員而言，在不背離本 發明實質和范圍的前提下，對這些實施方案中的物料成分和用量進行的各種改變或改動也 屬于本發明的保護范圍。
[0088] 實施例一：
[0089] 原料制備
[0090] 1、麥芽提取物的制備
[0091] 其制備方法為：
[0092] 將大麥芽和小麥芽按質量比9:2均勻混合，粉碎至粒度0.8mm，得粉碎麥芽;然后將 木瓜、菠蘿、無花果分別于裝有0.4%碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中在功率200W、頻率 30KHz條件下超聲清洗8min，瀝干，室溫下破碎至粒度0.8mm，并按質量比8:2:1.5均勾混合， 加入混合物質量4倍的粉碎麥芽得原料混合物，加入原料混合物質量2倍的水，用檸檬酸調 節pH值為3.5,在功率225W、頻率2000Hz條件下進行微波提取，其中，每次微波輻照總時間 70s，進行間隔式輻照：福照10s，間隔10s，控制溫度28°C，如此輻照10次，同時在功率250W， 頻率35KHz條件下進行超聲波輔助提取;保溫2h，然后，在功率300W、頻率2000Hz條件下進行 微波提取，其中，每次微波輻照總時間95s，進行間隔式輻照:輻照15s，間隔10s，控制溫度50 °C，如此輻照10次，同時在功率400W，頻率45KHz條件下進行超聲波輔助提取，最后自然降溫 至室溫，于電場強度30kV/cm，脈沖時間500ys，脈沖頻率250Hz條件下進行高壓脈沖電場提 取18min;提取液過濾得第一濾液，加濾渣4倍的水漂洗、過濾得第二濾液，將第一濾液和第 二濾液按質量比1:4均勻混合，減壓濃縮至固形物含量為30%，即得麥芽提取物。
[0093] 2、生姜提取物的制備
[0094]其制備方法，包括如下步驟：
[0095]將生姜和黃姜分別放入裝有0.2%碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中于300W、35KHz 清洗8min，瀝干，按質量比7.5:2均勾混合，然后于-22°C冷凍9min;立即粉碎至粒徑0.3mm; 置容器中并添加5倍重量的水，得混合物料，用乳酸調節pH值為4.5,于室溫下在電場強度 20kV/cm，脈沖數40條件下進行高壓脈沖電場處理;然后升溫至35°C，保溫，在功率400W條件 下進行微波輻照提取，其中，每次微波輻照總時間70s，進行間隔式輻照:輻照10s，間隔10s， 如此輻照10次;繼續升溫至45°C，保溫，首先，向提取液中加入金屬離子，使得金屬離子含量 為：鈉離子29mg/L、鋅離子21mg/L、鉀離子16. Sing/Ul1?離子llmg/L和鎂離子7mg/L，然后加 入混合物料總重量1.0%的復合酶酶解50min，布袋過濾，得濾液;濾渣用2倍重量65°C水漂 洗3次，漂洗液與濾液合并，均勻混合，減壓濃縮至固形物含量為30%，即得生姜提取物； [0096]上述復合酶質量組成為:纖維素酶:葡聚糖酶:木聚糖酶:甘露糖酶:漆酶=6:4:4: 3:2〇
[0097] 3、植物乳桿菌粉劑的制備
[0098]植物乳桿菌粉劑是以植物乳桿菌CGMCC N0.11763為出發菌按按常規方法制備的， 其中的冷凍保護劑以含有抗凍蛋白的動物或植物為原料，經高壓脈沖電場提取、超聲波輔 助微波提取和復配酶酶解而制得的，可有效提高植物乳桿菌粉劑在冷凍干燥過程活菌存活 率；
[0099] 上述保護劑的制備方法，包括如下步驟：
[0100] 將冬黑麥、沙冬青、鯊魚皮膠原蛋白分別清洗、瀝干，按質量比9:4:3均勻混合，加 入混合物料質量〇. 5倍的pH值為4.2的乳酸潤濕6h，于-20°C冷凍1.5h后立即進行粉碎，冷凍 料層厚度4cm，粉碎物粒徑2mm，接著加入粉碎物質量15倍的水，用乳酸調節pH值為4.5，于室 溫下在電場強度30kV/cm，脈沖時間400ys，脈沖頻率250Hz條件下進行高壓脈沖電場處理 25min;然后于室溫在功率225W條件下進行微波輻照提取18min，同時在功率250W，頻率 35KHz條件下進行超聲波輔助提取;加入提取液質量1.5 %的復配酶，于50 °C酶解40min;酶 解液過濾、濾液濃縮、低溫粉碎至粒徑為0.2_即得保護劑；
[0101] 上述復配酶為纖維素酶、蛋白酶、淀粉酶、果膠酶、單寧酶按質量比4:3:2:2:1.5均 勻混合；
[0102] 上述微波輻照提取為間歇式提取，即微波輻照10s，間隔20s。
[0103] 以下實施例二至六所用麥芽提取物、生姜提取物、植物乳桿菌粉劑均由實施例一 制備。
[0104] 實施例二：
[0105] -種雨生紅球藻益生菌蜂蜜組合物，主要由以下重量份數的原料制備：
[0106] 蜂蜜170份，麥芽提取物7份，生姜提取物4份，益生菌粉劑2份，韭花2份，雨生紅球 藻0.8份；
[0107] 其中蜂蜜含有90%的洋槐蜂蜜；
[0108] 上述益生菌粉劑益生菌活菌含量為:7 X 1012cfu/g;
[0109] 益生菌粉劑由以下重量份數的粉劑均勻混合而成:植物乳桿菌35份，兩岐雙岐桿 菌30份，乳雙歧桿菌25份，嗜熱鏈球菌15份，保加利亞乳桿菌13份，嗜酸乳桿菌13份，干酪乳 桿菌9份，鼠李糖乳桿菌8份；
[0110] 雨生紅球藻益生菌蜂蜜組合物的制備方法，包括如下步驟：
[0111] 1)按照配方，首先取韭花，清洗、瀝干，破碎至粒徑0.4mm，向其中加入35份蜂蜜和 2.5份麥芽提取物，均勻混合，加入混合物料3倍的去離子水，用乳酸調節pH值為6，升溫至60 °C，保溫40min，然后降溫至33.5°C于電場強度25kV/cm，脈沖時間300ys，脈沖頻率300Hz進 行高壓脈沖電場殺菌8min，調整pH值為6.5，加入益生菌粉劑質量的45 %恒溫發酵0.8h，接 著以0.9°C/min的速率升溫至43°C，加入益生菌粉劑質量的55%恒溫發酵3h，最后以0.7°C/ min的速率升溫至52.5 °C，繼續發酵0.8h，發酵液依次經40目、80目雙聯過濾器過濾，濾液經 循環超濾濃縮至固形物含量為70 %得蜂蜜益生菌發酵濃縮液；
[0112] 2)將剩余蜂蜜放入不銹鋼容器中，置于裝有55°C水的預溶裝置中，預溶40min,過 110目篩，轉入調配罐，保溫55°C，邊攪拌邊依次加入剩余麥芽提取物、生姜提取物，充分溶 解13min;接著加入雨生紅球藻充分溶解5min得初混料;然后過膠體磨研磨5min，調整物料 細度，過180目篩，入滅菌罐82°C滅菌30min，轉入貯罐降溫至50°C，最后灌裝、封口、包裝即 得雨生紅球藻益生菌蜂蜜組合物。
[0113] 經上述方法制備的益生菌蜂蜜組合物結晶出現時間為48個月。
[0114] 實施例三：
[0115] -種菊花葛根益生菌蜂蜜組合物，主要由以下重量份數的原料制備：
[0116] 蜂蜜165份，麥芽提取物6份，生姜提取物3份，益生菌粉劑1.5份，韭花1.5份，中草 藥提取物0.3份，芒果粉0.9份；
[0117] 其中蜂蜜含有80%的洋槐蜂蜜；
[0118] 上述益生菌粉劑益生菌活菌含量為:6 X 1012cfu/g;
[0119] 益生菌粉劑由以下重量份數的粉劑均勻混合而成:植物乳桿菌30份，兩岐雙岐桿 菌25份，乳雙歧桿菌20份，嗜熱鏈球菌10份，保加利亞乳桿菌12份，嗜酸乳桿菌12份，干酪乳 桿菌8份，鼠李糖乳桿菌5份；
[0120] 上述中草藥提取物是以菊花、葛根、紅棗為原料而制備的；
[0121] 其制備方法包括如下步驟：
[0122] 按重量份數計，稱取上述菊花、葛根、紅棗，置盛有0.2%碳酸氫鈉溶液的超聲波清 洗機中于200W、30KHz清洗13min，瀝干，將上述菊花、葛根、紅率粉碎至粒徑為1mm，置容器中 均勻混合并添加5倍重量的水，得混合物料，控制溫度80°C保持3h，接著降溫至45°C，用乳酸 調節pH值為4.0，在功率225W條件下進行微波提取13min，同時在功率250W，頻率35KHz條件 下進行超聲波輔助提取;然后加入混合物料總重量1. 〇 %的混合酶進行酶解，用乳酸調節pH 值為6.2，酶解3h，最后添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物，乙醇和丙醇混合的質量 比為1:2，控制溫度至69 °C保持3.5h，過濾，得第一濾液;添加濾渣2倍重量的水，控制溫度90 °C保持2h，然后降溫至30°C，過濾，得第二濾液;將第一濾液和第二濾液按照質量比3: 2合 并，均勻混合，即得中草藥提取物；
[0123] 上述混合酶為葡聚糖酶、戊聚糖酶、木聚糖酶、酸性蛋白酶、單寧酶按質量比4:4: 3:2:1.5均勻混合。
[0124] 菊花葛根益生菌蜂蜜組合物的制備方法，包括如下步驟：
[0125] 1)按照配方，首先取韭花，清洗、瀝干，破碎至粒徑0.3mm，向其中加入20份蜂蜜和2 份麥芽提取物，均勻混合，加入混合物料2倍的去離子水，用乳酸調節pH值為5，升溫至55°C， 保溫30min，然后降溫至32 °C于電場強度20kV/cm，脈沖時間200ys，脈沖頻率200Hz進行高壓 脈沖電場殺菌5min，調整pH值為6.0，加入益生菌粉劑質量的40 %恒溫發酵0.5h，接著以0.8 °C/min的速率升溫至40 °C，加入益生菌粉劑質量的50%恒溫發酵2h，最后以0.6°C/min的速 率升溫至50°C，繼續發酵0.5h，發酵液依次經40目、80目雙聯過濾器過濾，濾液經循環超濾 濃縮至固形物含量為65 %得蜂蜜益生菌發酵濃縮液；
[0126] 2)將剩余蜂蜜放入不銹鋼容器中，置于裝有50°C水的預溶裝置中，預溶30min,過 100目篩，轉入調配罐，保溫50°C，邊攪拌邊依次加入剩余麥芽提取物、生姜提取物，充分溶 解lOmin;接著加入中草藥提取物、芒果粉，充分溶解4min得初混料；然后過膠體磨研磨 4min，調整物料細度，過160目篩，入滅菌罐80°C滅菌28min，轉入貯罐降溫至48°C，最后灌 裝、封口、包裝即得菊花葛根益生菌蜂蜜組合物。
[0127] 經上述方法制備的益生菌蜂蜜組合物結晶出現時間為45個月。
[0128] 實施例四：
[0129] -種低聚木糖益生菌蜂蜜組合物，主要由以下重量份數的原料制備：
[0130] 蜂蜜175份，麥芽提取物8份，生姜提取物5份，益生菌粉劑2.5份，韭花2.5份，低聚 木糖0.5份；
[0131] 其中蜂蜜含有99%的洋槐蜂蜜；
[0132] 上述益生菌粉劑益生菌活菌含量為:8 X 1012cfu/g;
[0133] 益生菌粉劑由以下重量份數的粉劑均勻混合而成:植物乳桿菌40份，兩岐雙岐桿 菌35份，乳雙歧桿菌30份，嗜熱鏈球菌20份，保加利亞乳桿菌15份，嗜酸乳桿菌15份，干酪乳 桿菌10份，鼠李糖乳桿菌10份；
[0134] 低聚木糖益生菌蜂蜜組合物的制備方法，包括如下步驟：
[0135] 1)按照配方，首先取韭花，清洗、瀝干，破碎至粒徑0.5mm,向其中加入50份蜂蜜和5 份麥芽提取物，均勻混合，加入混合物料4倍的去離子水，用乳酸調節pH值為7，升溫至65°C， 保溫50min，然后降溫至35°C于電場強度30kV/cm，脈沖時間400ys，脈沖頻率400Hz進行高壓 脈沖電場殺菌lOmin，調整pH值為7.0，加入益生菌粉劑質量的50 %恒溫發酵lh，接著以1.0 °C/min的速率升溫至45°C，加入益生菌粉劑質量的60%恒溫發酵4h，最后以0.8°C/min的速 率升溫至55°C，繼續發酵lh，發酵液依次經40目、80目雙聯過濾器過濾，濾液經循環超濾濃 縮至固形物含量為75 %得蜂蜜益生菌發酵濃縮液；
[0136] 2)將剩余蜂蜜放入不銹鋼容器中，置于裝有60°C水的預溶裝置中，預溶50min,過 120目篩，轉入調配罐，保溫60°C，邊攪拌邊依次加入剩余麥芽提取物、生姜提取物，充分溶 解15min;接著加入低聚木糖充分溶解6min得初混料;然后過膠體磨研磨6min，調整物料細 度，過200目篩，入滅菌罐83°C滅菌32min，轉入貯罐降溫至52°C，最后灌裝、封口、包裝即得 低聚木糖益生菌蜂蜜組合物。
[0137] 經上述方法制備的益生菌蜂蜜組合物結晶出現時間為40個月。
[0138] 實施例五：
[0139] -種蛹蟲草益生菌蜂蜜組合物，主要由以下重量份數的原料制備：
[0140] 蜂蜜155份，麥芽提取物4份，生姜提取物2份，益生菌粉劑1份，韭花1份，蛹蟲草0.3 份；
[0141] 其中蜂蜜含有85%的洋槐蜂蜜；
[0142] 上述益生菌粉劑益生菌活菌含量為:6.5 X 1012cfu/g;
[0143] 益生菌粉劑為植物乳桿菌粉劑；
[0144] 蛹蟲草益生菌蜂蜜組合物的制備方法，包括如下步驟：
[0145] 1)按照配方，首先取韭花，清洗、瀝干，破碎至粒徑0.35mm,向其中加入30份蜂蜜和 3份麥芽提取物，均勻混合，加入混合物料2.5倍的去離子水，用乳酸調節pH值為5.5,升溫至 58°C，保溫35min，然后降溫至33°C于電場強度23kV/cm，脈沖時間250ys，脈沖頻率250Hz進 行高壓脈沖電場殺菌7min，調整pH值為6.3，加入益生菌粉劑質量的43 %恒溫發酵0.7h，接 著以0.85°C/min的速率升溫至42°C，加入益生菌粉劑質量的53%恒溫發酵2.5h，最后以 0.65°C/min的速率升溫至52°C，繼續發酵0.6h，發酵液依次經40目、80目雙聯過濾器過濾， 濾液經循環超濾濃縮至固形物含量為80 %得蜂蜜益生菌發酵濃縮液；
[0146] 2)將剩余蜂蜜放入不銹鋼容器中，置于裝有53°C水的預溶裝置中，預溶35min，過 105目篩，轉入調配罐，保溫53°C，邊攪拌邊依次加入剩余麥芽提取物、生姜提取物，充分溶 解12min;接著加入蛹蟲草充分溶解4.5min得初混料;然后過膠體磨研磨4.5min，調整物料 細度，過170目篩，入滅菌罐81°C滅菌29min，轉入貯罐降溫至49°C，最后灌裝、封口、包裝即 得蛹蟲草益生菌蜂蜜組合物。
[0147] 經上述方法制備的益生菌蜂蜜組合物結晶出現時間為36個月。
[0148] 實施例六：
[0149] -種殼寡糖益生菌蜂蜜組合物，主要由以下重量份數的原料制備：
[0150] 蜂蜜185份，麥芽提取物10份，生姜提取物6份，益生菌粉劑3份，韭花3份，殼寡糖 0 · 4份；
[0151] 其中蜂蜜含有95%的洋槐蜂蜜；
[0152] 上述益生菌粉劑益生菌活菌含量為:7.5 X 1012cfu/g;
[0153] 益生菌粉劑為干酪乳桿菌粉劑；
[0154] 殼寡糖益生菌蜂蜜組合物的制備方法，包括如下步驟：
[0155] 1)按照配方，首先取韭花，清洗、瀝干，破碎至粒徑0.45mm,向其中加入40份蜂蜜和 4份麥芽提取物，均勻混合，加入混合物料3.5倍的去離子水，用乳酸調節pH值為6.5,升溫至 63°C，保溫45min，然后降溫至34°C于電場強度28kV/cm，脈沖時間350ys，脈沖頻率350Hz進 行高壓脈沖電場殺菌9min，調整pH值為6.8，加入益生菌粉劑質量的48 %恒溫發酵0.9h，接 著以0.95°C/min的速率升溫至44 °C，加入益生菌粉劑質量的58%恒溫發酵3.5h，最后以 0.75°C/min的速率升溫至54°C，繼續發酵0.9h，發酵液依次經40目、80目雙聯過濾器過濾， 濾液經循環超濾濃縮至固形物含量為85 %得蜂蜜益生菌發酵濃縮液；
[0156] 2)將剩余蜂蜜放入不銹鋼容器中，置于裝有58°C水的預溶裝置中，預溶45min,過 115目篩，轉入調配罐，保溫58°C，邊攪拌邊依次加入剩余麥芽提取物、生姜提取物，充分溶 解14min;接著加入殼寡糖充分溶解5.5min得初混料;然后過膠體磨研磨5.5min，調整物料 細度，過190目篩，入滅菌罐82°C滅菌31min，轉入貯罐降溫至51°C，最后灌裝、封口、包裝即 得殼寡糖益生菌蜂蜜組合物。
[0157] 經上述方法制備的益生菌蜂蜜組合物結晶出現時間為38個月。
[0158] 實驗例七食用雨生紅球藻益生菌蜂蜜組合物后總膽固醇的變化
[0159] 選總膽固醇180mg/dl-250mg/dl的成年人48名，男女各半，隨機分成三組；第一組 每天晚餐飲用150毫升礦泉水;第二組每天晚餐沖飲普通市售雨生紅球藻蜜制膏150g，第三 組每天晚餐沖飲本發明實施例2的雨生紅球藻益生菌蜂蜜組合物150g，期間每天食用同樣 的食物，食物包括肉、蛋、蔬菜和水果。分別在實驗開始的前一天和第20、40、60天采集試驗 者的血液，測定血液中的總膽固醇含量，結果如表1:
[0160]表1:血液中總膽固醇含量檢測結果
[0162] 由上表可知沖飲本發明實施例2的雨生紅球藻益生菌蜂蜜組合物后，成年人血液 中的總膽固醇的含量發生明顯變化。與普通市售雨生紅球藻蜜制膏相比，本發明雨生紅球 藻益生菌蜂蜜組合物對成年人血液中的總膽固醇的含量明顯的降低，而礦泉水組成年人血 液中的總膽固醇的含量明顯的增加，市售雨生紅球藻蜜制膏雖然有所降低，但與本發明產 品相比，效果不顯著，由此可知，本發明采用具有降低膽固醇特性的特定菌株制備的雨生紅 球藻益生菌蜂蜜組合物具有很好的降低膽固醇的保健效果。
[0163] 需要說明的是:本發明實施例3-6所制備的益生菌蜂蜜組合物同樣具有上述技術 效果，各實施例之間差異性不顯著。
[0164] 實施例八本發明雨生紅球藻益生菌蜂蜜組合物的感官品評試驗
[0165] 邀請24名人員對本發明實施例2制備的雨生紅球藻益生菌蜂蜜組合物與市售兩種 同類相同生產日期的雨生紅球藻蜜制膏進行品評，感官打分，其中專業和非專業人員各12 名，專業人員青年、中年、老年各4名，男女各半，非專業人員少年、青年、中年、老年各3名，男 女各半;打分包括外觀(20分）、質地(25分）、風味(30分）、口感(25分）四個方面，打分人員獨 立進行，互不影響，以保證品評結果準確。對品評結果進行了統計，均分值取近似值，保留整 數，具體見表2:
[0166] 表2:感官品評統計結果
[0169] 注：同一行內標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，標不同大寫字母表示差異 極顯著(P<〇.01)，標有相同字母表示差異不顯著(P>〇.05)。
[0170] 以上結果表明，本發明制備的雨生紅球藻益生菌蜂蜜組合物從外觀、質地、風味和 口感任何一方面都要明顯優于市售雨生紅球藻蜜制膏，特別是外觀、風味和口感極好，同時 也適合不同年齡段、不同消費層次的消費者食用。
[0171] 需要說明的是:本發明實施例3-6制備的益生菌蜂蜜組合物同樣具有上述實驗效 果，各實施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
[0172] 實施例九本發明益生菌蜂蜜組合物對機體免疫力的影響
[0173] 1實驗目的
[0174] 通過運動耐力測試（小鼠游泳試驗），驗證本發明益生菌蜂蜜組合物的提高免疫 力、抗疲勞作用。
[0175] 2實驗材料與試劑
[0176] 2.1供試藥物：
[0177] 市售益生菌蜂蜜組合物(G1);市售益生菌蜂蜜組合物(G2);本發明實施例2-6制備 的益生菌蜂蜜組合物(G3-G7)。
[0178] 2.2 試劑：
[0179] 肝/肌糖原測試盒，購自南京建成生物制品研究所;濃硫酸(AR)，南京化學試劑有 限公司；生理鹽水，山東長富潔晶藥業有限公司。
[0180] 3.實驗動物
[0181] ICR小鼠，d，清潔級，體重18_22g，由寧夏醫科大學比較醫學中心提供，實驗期間小 鼠自由飲食。
[0182] 4.主要儀器
[0183] 錯制游泳箱（50cmX 50cmX 40cm)，鉛絲，低溫高速離心機：5804R型，Eppendrof公 司；水浴鍋:DK-S26型，上海精宏實驗設備有限公司；電子稱:BS224S型，Sartorius公司；秒 表，溫度計
[0184] 5.實驗分組
[0185] 5.1劑量分組及受試樣品給予時間隨機將小鼠分為8組，每組10只，第1組至第7組 分別給G1~G7的藥物，第8組為空白對照組，給予等體積的雙蒸水，每組每日均灌胃1次，灌 胃體積為0.2ml/10g，連續給予受試樣品30天。
[0186] 5.2樣品配制第1組至第7組:稱取2.25g藥物樣品，用蒸餾水配至150ml;空白對照 組:雙蒸水150ml。
[0187] 6.實驗方法
[0188] 6.1負重游泳實驗末次給藥30min后，置小鼠于游泳箱中，水深不少于30cm，水溫25 ±1°C，鼠尾根部負荷5%體重的鉛皮，記錄小鼠游泳開始至死亡的時間，作為小鼠游泳時 間。
[0189] 6.2小鼠血清尿素測定末次給藥3〇11^11后，在溫度為30°(：的水中不負重游泳9〇1^11， 休息60min后摘眼球采血0.5mL (不加抗凝劑），置4°C冰箱3h，血凝固后2000r/min離心 15min，取血清送寧夏醫科大學附屬醫院檢驗科檢測。
[0190] 6.3肝糖原的測定末次給藥3〇11^11后，在溫度為25±1°(：的水中不負重游泳9〇1^11， 頸椎脫臼處死小鼠，用生理鹽水洗凈，并用濾紙吸干水分后，準確稱取肝臟l〇〇mg，肝糖原檢 測試劑盒檢測小鼠肝糖原含量。
[0191] 6.4血乳酸的測定末次給藥30min后采血，然后不負重在溫度為30 °C的水中游泳 lOmin后停止。乳酸儀測定方法:分別在游泳前、游泳后、游泳后休息20min后各采血20yL加 入40yL破膜液中，立即充分振蕩破碎細胞用乳酸儀測定。（血乳酸曲線下面積= 5X(游泳前 血乳酸值+3 X游泳后Omin的血乳酸值+2 X游泳后20min的血乳酸值）
[0192] 7.觀察指標負重游泳時間，血乳酸、尿素、肝糖原值
[0193] 8.統計方法實驗數據用^ ± 表示，采用t檢驗進行組間比較
[0194] 9.實驗結果
[0195] 9.1本發明益生菌蜂蜜組合物對小鼠體重的影響
[0196] 各組小鼠在給予G1~G9藥物后，前、中，后期體重分別見下表所示，各組小鼠的初 始體重和增重體重與對照組比較均無統計學差異(P>〇.05)，表明G1~G9藥物均無明顯的 毒性。實驗結果詳見表3。
[0197] 表3負重游泳實驗小鼠的初始體重、中期體重和結束體重土幻
[0200] 9.2本發明益生菌蜂蜜組合物對小鼠負重游泳時間的影響
[0201] 經口給予小鼠 G1~G7藥物后，G1~G2藥物與空白對照組比較，可以明顯延長小鼠 負重游泳時間，具有顯著性差異(Ρ<〇. 05)，本發明益生菌蜂蜜組合物G3~G7藥物與空白對 照組比較，可以顯著延長小鼠負重游泳時間，具有極顯著性差異(Ρ<〇.01)，且明顯優于G1 ~G2藥物。結果詳見表4。
[0202] 表4益生菌蜂蜜組合物對小鼠負重游泳時間的影響土沒）
[0203]
[0204] "*"p〈0.05vs 空白對照；
[0205] "**"？〈0.01￥8空白對照；
[0206] 9.3本發明益生菌蜂蜜組合物對小鼠運動前后血乳酸的影響
[0207] 經口給予小鼠本發明的益生菌蜂蜜組合物后，本發明益生菌蜂蜜組合物G3~G7藥 物對小鼠運動后血乳酸曲線下面積與對照組比較有統計學差異(P<〇.05)，G1~G2藥物組 小鼠血乳酸曲線下面積與對照組比較雖有所降低，但并無統計學差異(P>〇.05)。結果見表 5〇
[0208] 表5本發明益生菌蜂蜜組合物對小鼠運動前后血乳酸水平的影響
[0211] "*"p〈0.05vs 空白對照；
[0212] 9.4本發明益生菌蜂蜜組合物對小鼠肝糖原的影響
[0213] 經口給予小鼠 G1~G7藥物后，G1~G2藥物與空白對照組比較，小鼠肝糖原含量均 有明顯的升高，具有顯著性差異(P<〇.05)，本發明益生菌蜂蜜組合物G3~G7藥物與與空白 對照組比較，小鼠肝糖原含量均有明顯的升高，具有極顯著性差異(P<〇.01)，且明顯優于 G1~G2藥物。結果詳見表6。
[0214] 表6本發明益生菌蜂蜜組合物對小鼠肝糖原含量的影響(Ι·±.ν)
[0215]
[0216] "*"p〈〇.〇5vs 空白對照；
[0217] "#"？〈〇.〇1以空白對照；
[0218] 9.5本發明益生菌蜂蜜組合物對小鼠血清尿素的影響
[0219] 經口給予小鼠 G1~G7藥物后，G1~G2藥物組與空白對照組比較，小鼠運動后血清 尿素含量均有明顯的降低，具有顯著性差異(P<〇.05)，本發明益生菌蜂蜜組合物G3~G7藥 物與與空白對照組比較，小鼠運動后血清尿素含量均有明顯的降低，具有極顯著性差異(P <0.01)，且明顯優于G1~G2藥物。結果詳見表7。
[0220] 表7本發明益生菌蜂蜜組合物對小鼠血清尿素含量的影響
[0223] "*"p〈0.05vs 空白對照；
[0224] "**"p〈0.01vs 空白對照；
[0225] 10.實驗結論
[0226] 本實驗主要通過小鼠負重游泳實驗，同時檢測小鼠肝糖原的儲備來觀察本發明益 生菌蜂蜜組合物提高免疫力、抗疲勞的效果。初步研究結果顯示如下：
[0227] 1、本發明G3~G7益生菌蜂蜜組合物均能延長小鼠負重游泳時間（P<0.01)，且效 果明顯優于其它G1~G2的益生菌蜂蜜組合物。
[0228] 2、生化檢測方面顯示，本發明G3~G7益生菌蜂蜜組合物各劑量組均能減少運動后 小鼠血清中葡萄糖無氧酵解所產生的乳酸含量，與對照組比較有顯著性差異(P<〇.05)，而 其它G1~G2的益生菌蜂蜜組合物雖然也能減少運動后小鼠血清中葡萄糖無氧酵解所產生 的乳酸含量，但與對照組比較，無統計學差異(P>〇.05);
[0229] 3、本發明G3~G7益生菌蜂蜜組合物各劑量組均能顯著提高小鼠肝臟中糖原的儲 備(P<0.01)，且效果明顯優于其它G1~G2的益生菌蜂蜜組合物；
[0230] 4、高尿酸模型發現，本發明G3~G7益生菌蜂蜜組合物能顯著降低小鼠游泳后血清 中尿素的含量(P<〇.01)，且效果明顯優于其它G1~G2益生菌蜂蜜組合物；
[0231] 11.結論
[0232]上述實驗證明本發明益生菌蜂蜜組合物能顯著提高機體免疫力，提高小鼠的體力 和耐力，降低小鼠運動后血清中尿素及乳酸的含量，且能顯著提高小鼠肝臟中糖原的儲備， 有助于緩解運動負荷引起的疲勞;能延長小鼠負重游泳至力竭的時間。
【主權項】
1. 一種益生菌蜂蜜組合物，主要由以下重量份數的原料制備:蜂蜜155-185份，麥芽提 取物4-10份，生姜提取物2-6份，益生菌粉劑1-3份，韭花1-3份； 所述益生菌蜂蜜組合物還包括以下重量份數的一種或幾種輔料:水果粉0.6-1.2份，藻 類0.5-1份，庫拉索蘆薈凝膠0.5-1份，蜂花粉0.2-0.8份，低聚木糖0.2-0.8份，殼寡糖0. ΙΟ.7份，海洋魚骨膠原低聚肽粉 0.1-0.7份， 中草藥提取物0.1-0.6份，蛹蟲草 0.1-0.5份； 所述益生菌粉劑由以下重量份數的粉劑均勻混合而成:植物乳桿菌30-40份，兩岐雙岐 桿菌25-35份，乳雙歧桿菌20-30份，嗜熱鏈球菌10-20份，保加利亞乳桿菌12-15份，嗜酸乳 桿菌12-15份，干酪乳桿菌8-10份，鼠李糖乳桿菌5-10份。2. 如權利要求1所述的益生菌蜂蜜組合物，其特征在于，植物乳桿菌粉劑是以植物乳桿 菌CGMCC NO. 11763為出發菌按按常規方法制備。3. 如權利要求2所述的益生菌蜂蜜組合物，其特征在于，所述植物乳桿菌粉劑制備時冷 凍保護劑的制備方法，包括如下步驟:將冬黑麥、沙冬青、鯊魚皮膠原蛋白分別清洗、瀝干， 按質量比8-10:3-5:2-4均勻混合，加入混合物料質量0.1-1倍的pH值為3.8-4.5的乳酸潤濕 3-811，于-18-22°(：冷凍1-211后立即進行粉碎，冷凍料層厚度3-5〇11，粉碎物粒徑0.5-3111111，接 著加入粉碎物質量10-20倍的水，用乳酸調節pH值為3.5-5.5，于室溫下在電場強度25-35kV/cm，脈沖時間300-500ys,脈沖頻率200-300HZ條件下進行高壓脈沖電場處理20-30min;然后于室溫在功率150-300W條件下進行微波輻照提取15-20min，同時在功率200-300W，頻率30-40KHZ條件下進行超聲波輔助提取;加入提取液質量1-2 %的復配酶，于45-55 °C酶解30-50min;酶解液過濾、濾液濃縮、低溫粉碎至粒徑為0.1 -0.3mm即得保護劑； 所述復配酶為纖維素酶、蛋白酶、淀粉酶、果膠酶、單寧酶按質量比3-5:2-4:1-3:1-3: 1-2均勻混合。4. 如權利要求3所述的益生菌蜂蜜組合物，其特征在于，所述微波輻照提取為間歇式提 取，即微波輻照1 〇s，間隔20s。5. 如權利要求1所述的益生菌蜂蜜組合物，其特征在于，所述生姜提取物的制備方法， 包括如下步驟:將生姜和黃姜分別放入裝有〇. 1-0.3 %碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中于 200-400W、30-40KHZ清洗5-10min，瀝干，按質量比6-9:1-3均勻混合，然后于-20-24°C冷凍 8-10min;立即粉碎至粒徑0.2-0.4mm;置容器中并添加4-6倍重量的水，得混合物料，用乳酸 調節pH值為4.5，于室溫下在電場強度15-25kV/cm，脈沖數30-50條件下進行高壓脈沖電場 處理;然后升溫至30-40°C，保溫，在功率300-500W條件下進行微波輻照提取，其中，每次微 波輻照總時間70s，進行間隔式輻照：輻照10s，間隔10s，如此輻照10次；繼續升溫至40-50 °C，保溫，首先，向提取液中加入金屬離子，使得金屬離子含量為:鈉離子28-30mg/L、鋅離子 20-22mg/L、鉀離子15-18mg/L、鈣離子10-12mg/L和鎂離子6-8mg/L，然后加入混合物料總重 量0.5-1.5%的復合酶酶解40-60min，布袋過濾，得濾液;濾渣用2倍重量60-70°C水漂洗3 次，漂洗液與濾液合并，均勻混合，減壓濃縮至固形物含量為20%以上，即得生姜提取物； 所述復合酶質量組成為:纖維素酶:葡聚糖酶:木聚糖酶:甘露糖酶:漆酶=5-7:3-5:3-5:2-4:1-3〇6. 如權利要求1所述的益生菌蜂蜜組合物，其特征在于，所述麥芽提取物的制備方法 為:將大麥芽和小麥芽按質量比8-10:1-3均勻混合，粉碎至粒度0.5-1_，得粉碎麥芽;然后 將木瓜、菠蘿、無花果分別于盛有〇 . 3-0.5 %碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中在功率200W、 頻率30KHz條件下超聲清洗5-10min，瀝干，室溫下破碎至粒度0.5-lmm，并按質量比7-9:1-3:1-2均勻混合，加入混合物質量3-5倍的粉碎麥芽得原料混合物，加入原料混合物質量1-3 倍的水，用檸檬酸調節pH值為3-4,在功率150-300W、頻率2000Hz條件下進行微波提取，其 中，每次微波輻照總時間60-SOs，進行間隔式輻照:輻照10s，間隔10s，控制溫度20-35Γ，如 此輻照10次，同時在功率200-300W，頻率30-40KHZ條件下進行超聲波輔助提取;保溫l-3h， 然后，在功率200-400W、頻率2000Hz條件下進行微波提取，其中，每次微波輻照總時間90-l〇5s，進行間隔式輻照：輻照15s，間隔10s，控制溫度40-60°C，如此輻照10次，同時在功率 300-500W，頻率40-50KHZ條件下進行超聲波輔助提取，最后自然降溫至室溫，于電場強度 25-35kV/cm，脈沖時間400-600ys，脈沖頻率200-300HZ條件下進行高壓脈沖電場提取15-20min;提取液過濾得第一濾液，加濾渣4倍的水漂洗、過濾得第二濾液，將第一濾液和第二 濾液按質量比1:3-5均勻混合，減壓濃縮至固形物含量為20%以上，即得麥芽提取物。7. 如權利要求1所述的益生菌蜂蜜組合物，其特征在于，所述中草藥提取物是以百合、 金銀花、薄荷、羅漢果、阿膠、菊花、葛根、紅棗、火麻仁、蓮子、酸棗仁、黃精、枸杞、玉竹、白 芷、人參、荷葉、決明子、枳犋子中的一種或幾種為原料而制備的；制備方法包括如下步驟： 按重量份數計，稱取上述一種或幾種中草藥，置盛有〇. 1-0.3 %碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗 機中于200W、30KHz清洗10-15min，瀝干，將上述中藥粉碎至粒徑為2mm以下，置容器中均勻 混合并添加3-6倍重量的水，得混合物料，控制溫度70-90°C保持2-4h，接著降溫至40-50°C， 用乳酸調節pH值為3.5-4.5，在功率150-3001條件下進行微波提取10-1511^11，同時在功率 200-300W，頻率30-40KHZ條件下進行超聲波輔助提取;然后加入混合物料總重量0.5-1.5% 的混合酶進行酶解，用乳酸調節pH值為5.5-6.8，酶解2-4h，最后添加混合物料0.5-3倍重量 乙醇和丙醇的混合物，乙醇和丙醇混合的質量比為1:1-3，控制溫度至60-78°(：保持3-41 1，過 濾，得第一濾液；添加濾渣1-3倍重量的水，控制溫度85-95°C保持l_3h，然后降溫至25-35 °C，過濾，得第二濾液;將第一濾液和第二濾液按照質量比2-4:1-3合并，均勻混合，即得中 草藥提取物； 所述混合酶為葡聚糖酶、戊聚糖酶、木聚糖酶、酸性蛋白酶、單寧酶按質量比3-5:3-5: 2-4:1-3:1-2均勻混合。8. 如權利要求1-7任一所述益生菌蜂蜜組合物的制備方法，其特征在于，包括如下步 驟： 1) 按照配方，首先取韭花，清洗、瀝干，破碎至粒徑0.3-0.5mm，向其中加入20-50份蜂蜜 和2-5份麥芽提取物，均勻混合，加入混合物料2-4倍的去離子水，用乳酸調節pH值為5-7，升 溫至55-65°C，保溫30-50min，然后降溫至32-35°C于電場強度20-30kV/cm，脈沖時間200-400ys，脈沖頻率200-400HZ進行高壓脈沖電場殺菌5-10min，調整pH值為6.0-7.0，加入益生 菌粉劑質量的40-50%恒溫發酵0.5-lh，接著以0.8-1.0°C/min的速率升溫至40-45°C，加入 益生菌粉劑質量的50-60%恒溫發酵2-4h，最后以0.6-0.8°(：/1^11的速率升溫至50-55°(：，繼 續發酵〇. 5-lh，發酵液依次經40目、80目雙聯過濾器過濾，濾液經循環超濾濃縮至固形物含 量為60 %以上得蜂蜜益生菌發酵濃縮液； 2) 將剩余蜂蜜放入不銹鋼容器中，置于裝有50-60°C水的預溶裝置中，預溶30-50min， 過100-120目篩，轉入調配罐，保溫50-60°C，邊攪拌邊依次加入剩余麥芽提取物、生姜提取 物，充分溶解10-15min;接著加入輔料充分溶解4-6min得初混料；然后過膠體磨研磨4- 6min，調整物料細度，過160-200目篩，入滅菌罐80-83 °C滅菌28-32min，轉入貯罐降溫至48-52°C，最后灌裝、封口、包裝即得益生菌蜂蜜組合物。9. 如權利要求8所述益生菌蜂蜜組合物的制備方法，其特征在于，輔料中的藻類為雨生 紅球藻、鹽藻、鈍頂螺旋藻中的任意一種。10. 如權利要求8所述益生菌蜂蜜組合物的制備方法，其特征在于，輔料中的水果粉為 諾麗果粉、芒果粉、雪梨粉、沙棘粉、瑪咖粉中的任意一種。
【文檔編號】A23L33/135GK105831666SQ201610178652
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年3月25日
【發明人】李建樹
【申請人】天津中天精科科技有限公司