具有最佳抗氧化協同增效作用的桂花茶在制備降血糖保健品或食品中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明設及茶飲料技術領域，更具體地設及一種具有抗氧化協同增效作用最佳配 比的桂花茶及其制法和用途-用于抗衰老、抗癌、降血糖。
【背景技術】
[0002] 桂花，又名木禪、巖桂，是中國傳統十大花弁之一，原產于中國西南喜馬拉雅山東 段。現廣泛栽種于淮河流域及W南地區，其適合生長的區域北可抵黃河下游，南可至兩廣、 海南等地。桂花品種繁多，大約有152個品種，可分為四個品系，即四季桂、丹桂、銀桂、金 桂。桂花除了觀賞美化W外，還具有較高的營養和藥用價值。對于桂花的成分研究已經具 備一定的基礎，其主要活性成分為黃酬類化合物、Ξ祗類化合物、苯乙醇巧類化合物等。桂 花提取物具有抗氧化及清除自由基、抗炎、降血糖、降血脂及抑菌等生理作用。茶葉作為我 國重要經濟作物，在中國已經有3000余年的歷史，民間素有"不可一日無茶"之說，而對它 的成分研究也是比較成熟。茶葉中所含的生物活性成分主要有生物堿、茶多酪、多糖等，在 抗癌、抗衰老、降血脂等方面也有重要的作用。
[0003]W桂花和茶葉做原料制作的桂花茶是中國特產茶，它香氣柔和、味道可口，為大眾 所喜愛。桂花茶是時下比較受歡迎的飲品，在我國的消費市場已具有一定的規模。它是兩 種單品的復合物，而它們各自所含的部分化學成分都有清除自由基的作用。然而，迄今為止 人們對桂花茶混合物中兩種單品相互作用的研究非常少。
【發明內容】
[0004] 本發明要解決的技術問題是提供一種具有最佳抗氧化協同增效作用的桂花茶在 制備降血糖保健品或食品中的應用。
[0005] 為了解決上述技術問題，本發明提供一種具有最佳抗氧化協同增效作用的桂花茶 在制備降血糖保健品或食品中的應用，該桂花茶由桂花干：茶葉=3~5:1的質量比混合而 得。
[0006] 作為本發明的具有最佳抗氧化協同增效作用的桂花茶在制備降血糖保健品或食 品中的應用的改進：桂花為四季桂、丹桂、金桂、銀桂。
[0007] 作為本發明的具有最佳抗氧化協同增效作用的桂花茶在制備降血糖保健品或食 品中的應用的進一步改進：茶葉為西湖龍井、祁口紅茶、安溪鐵觀音、普巧茶。
[0008] 作為本發明的具有最佳抗氧化協同增效作用的桂花茶在制備降血糖保健品或食 品中的應用的進一步改進：桂花干：茶葉=4:1的質量比。
[0009] 作為本發明的具有最佳抗氧化協同增效作用的桂花茶在制備降血糖保健品或食 品中的應用的進一步改進：桂花茶的制備方法包括W下步驟：
[0010](a)、利用凍干-真空微波聯合干燥技術制備桂花干：
[0011] 先進行真空冷凍干燥：將桂花在-55~-65°c(較佳為-60°c)的超低溫中速凍 2. 5~3.化（較佳為3h)后，于冷阱溫度0°C、真空度1化的條件下干燥，直至桂花中的水分 含量為35~45% (質量％，例如為37%);
[0012] 然后將上述真空冷凍干燥處理后的桂花進行真空微波干燥，直至所得的桂花干中 的水分含量為9~11% (質量％ );
[0013] 該桂花干作為加工桂花茶的原料； 陽014] 化）、加工桂花茶：將桂花干和茶葉按相應質量比（即桂花干：茶葉=3~5:1，較 佳為4:1)拼和后，先于48~52°C(較佳為50°C)加溫誓制22~28min(較佳為25min)， 然后于8~12°C冷卻25~50分鐘（從而實現快速充分冷卻），最后置于密閉的環境中做 后續的吸香處理18~22天（較佳為20天）；得桂花茶。
[0015] 備注說明：上述吸香處理能讓茶葉更加充分吸收花香和實現更加牢固的吸附作 用，從而獲得作為成品的桂花茶。
[0016] 作為本發明的具有最佳抗氧化協同增效作用的桂花茶在制備降血糖保健品或食 品中的應用的進一步改進：所述步驟（a)中真空微波干燥為：真空度為0. 〇95MPa，微波功率 2W/g〇
[0017] 作為本發明的具有最佳抗氧化協同增效作用的桂花茶在制備降血糖保健品或食 品中的應用的進一步改進：所述步驟化）中吸香處理時的密閉環境的溫度為25~35°C。
[0018] 在本發明中，茶葉均是通過市購的方式獲得，其含水量《5%。
[0019] 本發明為選擇抗氧化協同最佳配比，曾采用等高線圖解分析法比較桂花茶的抗氧 化能力，W下為具體的實驗步驟：
[0020] 一、檢測桂花茶葉抗氧化能力的方法如下：
[0021] (a)、清除ABTS自由基能力測定方法 陽02引分別配置7. 4mMABTSW及2. 6mM過硫酸鐘水溶液，臨用前等體積混合，37°C避光 反應12h，配成ABTS膽備液，稀釋45倍后使用，膽備液可保存一周，稀釋液現配現用。取稀釋 一定倍數的樣品6μL于96孔板，加入180μL稀釋過的ABTS儲備液，37°C避光反應60min 后于734nm處測定吸光度，平行Ξ組實驗測定。
[0023] 化）、清除DPPH自由基能力測定方法
[0024] 實驗前精確稱取2m曲PPH溶于適量甲醇中，定容至lOmL現配現用。取稀釋一定倍 數的所得6μL樣品，加入234uLDPPH，37°C避光反應60min，于515皿波長處測吸光度，平行 Ξ組實驗測定。
[00巧]二、運用等高線圖解分析法對其抗氧化協同增效作用進行評價，通常包括W下幾 個步驟：
[0026](a)、
[0027] 樣品提取：稱取桂花茶Ig于燒杯中，加入45血沸水后55 °C水浴中放置30min，然 后使用紗布過濾，定容到50mL容量瓶中，得桂花提取液；長期保存需置于-20°C冰箱中。
[0028] 在實際中，桂花茶對人體的作用是在經過唾液、胃液及腸液的消化吸收之后發揮 作用，故此，對桂花茶進行模擬消化實驗。根據人類攝食的特點，將體外消化模型分為Ξ個 階段，分別為口腔消化階段、胃消化階段和腸消化階段，模擬消化液配制見表1。
[0029] 表1模擬消化液組成
[0030]
[0031] 提取液的預處理（即進行模擬消化實驗）：
[0032] 配制完成后，取lOmL桂花茶提取液與燒杯中，加入3mL唾液，37°C條件下水浴恒溫 5min，加入6mL胃液37°C條件下避光化，加6mL腸液于其中搖勻，然后加入到透析袋中并將 其放入500mL大燒杯中，在其中加入約150mL0. 9%化C1使消化液浸沒，繼續37°C條件避 光反應化。將透析液在47°C下旋蒸，并用蒸饋水定容到lOmU分裝后存放在-20°C冰箱中。 樣品預處理完成，即，得到桂花茶消化后樣品。 陽〇3引備注說明：
[0034] 將上述"桂花茶"相應的改成"茶"、"桂花"，如同上文進行樣品提取、提取液的預處 理（即進行模擬消化實驗），從而相應獲得茶消化后樣品、桂花消化后樣品。
[0035] 化）、測定桂花茶在抗氧化實驗中的IC50值，構建等高線圖，W桂花的IC50值為橫 坐標，W茶葉的IC50值為縱坐標，連接橫縱坐標的IC50值，構成相加線及其95%置信區間， 各個提取物的IC50W及相連的95%的置信限可W通過各個提取物的對數劑量-效應關系 線性回歸曲線得出（至少四個劑量）。
[0036] (C)、從理論上選取桂花茶葉的固定比例，固定比例的混合藥物的IC50,add值，可 通過下述公式計算：1巧0,add=I巧0, A/(P1+RXP2)其中，R為兩物質單獨應用時的效價 比，PI為桂花在混合物中所占比例，P2為茶葉在混合物中所占比例。
[0037] (d)、確定固定桂花茶比例的混合物在實驗中實際得到的ICwmJ直，ICwmu即由實 驗確定的固定比例的桂花茶獲得50%效應時所需的總量，該值可W從桂花茶的劑量-效應 曲線上求得。
[003引 （e)、采用Studenttest等統計方法對各比例比較。
[0039] 訊、根據桂花茶的ICs。值位置判斷他們之間的相互作用。當理論ICsegdd和各自 的實驗ICwmu沒有顯著性差異時，則表明桂花和茶葉相互作用的類型為相加；如果ICeemu顯 著低于ICsCadd(在相加線下方）時，則說明桂花和茶葉具有協同作用；如果ICsCmu顯著高于 ICwgdd(在相加線上方）時，則說明桂花和茶葉具有括抗作用。 W40] 備注說明：圖2和圖3中，CI是指相互作用指數；
[0041 ]
[00創式中，瓜5。止》瓜5。止》分別為復合組中4,6兩種抗氧化劑的^5。值，^5。,、咕。^ 分別為AB兩種抗氧化劑單獨作用時的IC50值。
[0043] 本發明還利用UPLC方法分析了桂花茶（桂花：茶葉配比為3:1~5:1)的主要功 能性成分。具體操作如下：
[0044] (a)、W色譜級甲醇為溶劑，將心茶氨酸化-CA巧、沒食子酸（GA)、沒食子兒茶素 (GC)、紅景天巧（SAL)、表沒食子兒茶素巧GC)、兒茶素（C)、咖啡因（CAF)、咖啡酸（CAC)、 表沒食子兒茶素沒食子酸醋巧GCG)、沒食