專利名稱：抗乙肝轉移因子制備工藝的制作方法
技術領域：
本發明涉及生物化學制藥技術領域，確切地說是公開了一種抗乙肝轉移因子制備工藝。
以往的抗乙肝轉移因子的制備工藝是采用透析法或超濾法，截留分子量為10,000dt，該工藝制備的抗乙肝轉移因子雜質含量高、穩定性差、臨床效果不理想。
本發明公開了一種抗乙肝轉移因子制備工藝，目的旨在提高抗乙肝轉移因子的純度、增加制品的穩定性、改善臨床療效，使之更適用于臨床應用。
針對本發明的目的，采用的具體解決方案如下取用乙肝疫苗免疫合格的動物脾臟用注射用水洗凈，按1∶3～5的比例加入生理鹽水制成勻漿，經-10℃～-30℃反復凍融，經3000rpm離心，取上清液，用5000dt超濾膜超濾，取濾液凍干，既得本發明產品，取凍干粉測定活性，活性應大于50％(活性指數)本發明的關鍵在于采用5000dt超濾膜將截留分子量由10,000dt降至5,000dt，其積極效果是提高了產品的純度，去除了5,000dt～10,000dt間的雜質，增強了制品的活性和穩定性，改善了臨床療效。
下面結合實施例進一步說明本發明實施例1取用乙肝疫苗免疫合格的豬脾臟100克，用注射用水洗凈，加300ml生理鹽水通過勻漿機勻漿，在-10℃～-20℃反復凍融五次，在3000rpm低溫離心機上離心30分鐘，取上清液，經5000dt超濾膜超濾，凍干得本發明，經測定活性為84.8％活性指數。
實施例2取用乙肝疫苗免疫合格的羊脾臟180克，用注射用水洗凈，加750ml生理鹽水通過勻漿機勻漿，在-10℃～-30℃反復凍融七次，在3000rpm低溫離心機上離心30分鐘，取上清液，經5000dt超濾膜超濾，凍于得本發明，經測定活性為63.3％活性指數。
實施例3取用乙肝疫苗免疫合格的豬脾臟250克，用注射用水洗凈，加1250ml生理鹽水通過勻漿機勻漿，在-10℃～-25℃反復凍融六次，在3000rpm低溫離心機上離心30分鐘，取上清液，經5000dt超濾膜超濾，凍干得本發明，經測定活性為74.4％活性指數。
10,000dt膜與5,000dt膜超濾效果比較1、10,000dt抗乙肝轉移因子與5,000dt抗乙肝轉移因子治療乙型肝炎臨床療效比較
2、10,000dt抗乙肝轉移因子與5,000dt抗乙肝轉移因子純度的高效液相色譜(HPLC)比較，用10,000dt超濾膜獲得的抗乙肝轉移因子，HPLC分析有九個峰，即有九個成分。而5,000dt膜超濾后HPLC分析只有4個峰，即4種成分。而國際公認的抗乙肝轉移因子的分子量小于5,000dt，故上述結果表明改為5,000dt膜超濾后較10,000dt膜超濾時純度大為提高。
3、10,000dt抗乙肝轉移因子與5,000dt抗乙肝轉移因子活性比較<
4、10,000dt抗乙肝轉移因子與5,000dt抗乙肝轉移因子半衰期比較
半衰期為37℃，粘附抑制指數下降一半所需的時間
權利要求
1.一種抗乙肝轉移因子制備工藝，包括將用乙肝疫苗免疫合格的動物脾臟用注射用水洗凈，按1∶3～5的比例加入生理鹽水制成勻漿，經-10℃～-30℃反復凍融，經3000rpm離心，取上清液，超濾膜超濾，取濾液凍干，其特征在于用5000dt超濾膜進行超濾。
全文摘要
本發明公開了一種抗乙肝轉移因子制備工藝,采用超濾法從用乙肝疫苗免疫合格的動物脾臟中制備抗乙肝轉移因子,本發明的關鍵在于采用5000dt超濾膜將乙肝轉移因子截留分子量由10,000dt降至5,000dt,其積極效果是提高了產品的純度,去除了5,000dt～10,000dt間的雜質,增強了制品的活性和穩定性,改善了臨床療效。
文檔編號C12P21/00GK1229853SQ9911280
公開日1999年9月29日 申請日期1999年4月1日 優先權日1999年4月1日
發明者唐群雁, 孟慶文 申請人:長春高斯達生化藥業集團股份有限公司