專利名稱：一種蝸牛酶的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是一種從動(dòng)物廢棄臟器中提取回收蝸牛酶制劑的方法。
自從蝸牛人工飼養(yǎng)供人們作為美味佳肴后，蝸牛的內(nèi)臟等下腳料一直未有被利用，長(zhǎng)期以來蝸牛的下腳料丟棄不用，既浪費(fèi)了資源，又污染了環(huán)境。雖然也有用蝸牛下腳料烘干作飼料用，但是利用率太低，遠(yuǎn)未發(fā)揮其應(yīng)有的作用，十分可惜。如何發(fā)揮富有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的蝸牛其下腳料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，使其物盡其用，事半功倍，是人們一直尋求的目標(biāo)。
本發(fā)明的目的是發(fā)明一種工藝簡(jiǎn)單、利用率高的提取蝸牛酶的方法，本發(fā)明生產(chǎn)蝸牛酶的方法如下(1)蝸牛取來餓養(yǎng)2∽5天，盡可能排泄掉體內(nèi)食物，洗盡蝸牛體表污泥和排泄物；(2)用簡(jiǎn)易裝置研散或敲散外殼，分離外殼，取出可食用的蝸牛肉；(3)收集下腳料中胃、嗉囊和肝臟部分，放入預(yù)冷至2∽8℃的玻璃杯中；(4)用高速勻漿器或絞肉機(jī)絞碎胃等內(nèi)臟；(5)用醋酸鹽、磷酸鹽、tris等緩沖液在2∽8℃冰箱中攪拌2～3小時(shí)提取蝸牛酶；(6)在上述溫度范圍內(nèi)的離心機(jī)中以8000-12000轉(zhuǎn)/分，離心20～30分鐘，上清液放于4℃冰箱保存。為了充分提取蝸牛酶，沉淀部分再以一倍內(nèi)臟漿液體積的緩沖液，同上方法重復(fù)一次。
(7)合并兩次離心液，用0.45u過濾器過濾除菌。沉淀部分可做飼料使用；(8)除菌液在-30℃冰箱冰凍兩天，然后轉(zhuǎn)入-30℃的冷凍干燥器中制成凍干品；(9)凍干品適當(dāng)磨散，按需要分裝，在-18℃冰箱保存。
本發(fā)明的制備方法中，酶的提取液是緩沖液，但是以NaH2PO4H2O和NaHPO42H2O為好，提取效果好，后處理方便，更易操作。
上述緩沖液的用量以內(nèi)臟漿液體積的1∽4倍為好，緩沖液少了提取效果不高，多了造成浪費(fèi)，且使后道工藝費(fèi)時(shí)費(fèi)力，增加了制備成本。
緩沖液NaH2PO4H2O和NaHPO42H2O的濃度分別是20.0-26.0g/L和2.00-3.00g/L，其余是水。
本發(fā)明用離心機(jī)的離心速度是8000-12000轉(zhuǎn)/分，離心后能有效分離酶液和雜質(zhì)。
本發(fā)明方法簡(jiǎn)便，易工業(yè)化生產(chǎn)，所用試劑和設(shè)備均為常規(guī)物品，對(duì)建立工業(yè)化生產(chǎn)容易為企業(yè)接受。本發(fā)明方法制得的蝸牛酶經(jīng)測(cè)試，結(jié)果表明其活性與標(biāo)準(zhǔn)蝸牛酶基本相同，且其中的淀粉酶，纖維素酶和果膠酶都保留著相當(dāng)高的活性，以一公斤蝸牛8元計(jì)算，則一公斤蝸牛留下的下腳料制成的蝸牛酶可得60元左右。因此本方法是提取蝸牛酶后，再進(jìn)行飼料加工，不僅清潔了環(huán)境，還大大提高了蝸牛下腳料的有效利用率，取得良好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。
本發(fā)明蝸牛酶的測(cè)定方法如下采用酵母菌細(xì)胞的顯微鏡計(jì)數(shù)方法測(cè)定蝸牛酶活性相對(duì)值。
取酵母菌培養(yǎng)液1.5毫升，離心收集菌體，以一定量的標(biāo)準(zhǔn)蝸牛酶作破壁處理，其中一半在再生培養(yǎng)基(A)上生長(zhǎng)，另一半在非再生培養(yǎng)基(B)上生長(zhǎng)，酵母菌菌落之差為破壁數(shù)。以相同量自制蝸牛酶在相同條件下測(cè)定，同樣計(jì)算破壁數(shù)。對(duì)兩者的破壁數(shù)作比較，以標(biāo)準(zhǔn)蝸牛酶的破壁數(shù)為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算自制蝸牛酶的相對(duì)活性。每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次。如有一次實(shí)驗(yàn)結(jié)果是標(biāo)準(zhǔn)蝸牛酶的破壁數(shù)為(83,97,89)/皿，平均89.7，自己提取的蝸牛酶破壁數(shù)為(92,86,94)/皿，平均90.7。結(jié)果表明，自制的蝸牛酶其活性與標(biāo)準(zhǔn)蝸牛酶基本相同。
實(shí)施例(以實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)蝸牛酶為例)(1)蝸牛取來后餓養(yǎng)2天，盡可能排泄掉體內(nèi)食物，洗盡蝸牛體表污泥和排泄物。
(2)敲散外殼，并分離外殼，取出可食用的蝸牛肉。
(3)收集下腳料中的胃、嗉囊部分，放入預(yù)冷的玻璃杯中。
(4)用高速勻漿器勻漿胃等內(nèi)臟。
(5)用兩倍內(nèi)臟勻液體積的緩沖液，在4℃冰箱中攪拌3小時(shí)提取蝸牛酶。
(6)在4℃離心機(jī)中以10000轉(zhuǎn)/分，離心25分鐘，上清液放于4℃冰箱保存。沉淀部分再以1倍內(nèi)臟勻漿液體積的緩沖液，同上方法再重復(fù)一次。
(7)合并兩次離心液，用0.45u過濾器過濾除菌。沉淀部分可做飼料使用。
(8)除菌液在-30℃冰凍兩天，然后轉(zhuǎn)入-30℃的冷凍干燥器中制成凍干品。
(9)凍干品適當(dāng)磨散，按需要分裝，在-18℃冰箱保存。
權(quán)利要求
1．一種蝸牛酶的制備方法，其特征在于(1)蝸牛酶提取前，蝸牛餓養(yǎng)2∽5天；(2)取出可食用的蝸牛肉后下腳料置2∽8℃低溫下粉碎待用；(3)用緩沖液在上述溫度范圍下攪拌；(4)在上述溫度下離心；(5)過濾除菌，冷凍干燥。
2．根據(jù)權(quán)利要求1所述的蝸牛酶的制備方法，其特征在于其緩沖液是NaH2PO4H2O、Na2HPO42H2O。
3．根據(jù)權(quán)利要求1所述的蝸牛酶的制備方法，其特征在于緩沖液的用量是內(nèi)臟漿液體積的1∽4倍。
4．根據(jù)權(quán)利要求1所述的蝸牛酶的制備方法，其特征在于緩沖液NaH2PO4H2O和Na2HPO42H2O的濃度分別是20.0-26.0g/L和2.00-3.00g/L，其余是水。
5．根據(jù)權(quán)利要求1所述的蝸牛酶的制備方法，其特征在于離心機(jī)的離心速度是8000∽12000轉(zhuǎn)/分。
全文摘要
本發(fā)明是一種從原料蝸牛中生產(chǎn)蝸牛肉后產(chǎn)生的下腳料中回收生產(chǎn)蝸牛酶的方法。目前的蝸牛下腳料丟棄不用,既浪費(fèi)了資源,又污染了環(huán)境;即使直接烘干作飼料用,利用率也很低。本發(fā)明將蝸牛下腳料經(jīng)處理后,用緩沖液提取蝸牛酶后,經(jīng)除菌、干燥,制成凍干品,再進(jìn)行飼料加工等,極大地提高了蝸牛下腳料的利用率,獲得了十分良好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。
文檔編號(hào)C12N9/00GK1216778SQ9812194
公開日1999年5月19日 申請(qǐng)日期1998年10月10日 優(yōu)先權(quán)日1998年10月10日
發(fā)明者梁雪寶, 張培德 申請(qǐng)人:復(fù)旦大學(xué), 上海東地實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司