專利名稱：：從大豆廢糖蜜中回收異黃酮的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及從大豆廢糖蜜中回收異黃酮的方法。此外，本發(fā)明涉及含有異黃酮的所得產(chǎn)品。異黃酮出現(xiàn)在各種豆科植物，包括如大豆的植物蛋白原料中。這些化合物包括黃豆苷、黃豆苷6”-乙酸酯、黃豆苷6”-丙二酸酯、黃豆苷原、染料木苷、染料木苷6”-乙酸酯、染料木苷6”-丙二酸酯、染料木黃酮、大豆異黃酮(glycitin)、大豆異黃酮6”-乙酸酯、大豆異黃酮6”-丙二酸酯、黃豆黃素(glycitein)、鷹嘴豆芽素A，7-羥基-4’-甲氧異黃酮，以及擬雌內(nèi)酯。一般來說，這些化合物與大豆固有的苦味有關(guān)。大豆原料中的異黃酮包括異黃酮糖苷、異黃酮共軛物和配基異黃酮。異黃酮糖苷具有與異黃酮部分連接的葡萄糖分子。異黃酮共軛物具有與異黃酮糖苷的葡萄糖分子連接的附加部分，例如染料木苷6”-乙酸酯含有在染料木苷的葡萄糖分子的6位置上連接的乙酸酯基。配基異黃酮單獨(dú)由異黃酮部分組成。大豆包含具有對(duì)應(yīng)糖苷、共軛物和配基成員的三個(gè)“族”的異黃酮化合物染料木黃酮族、黃豆苷原族和黃豆黃素族。染料木黃酮族包括糖苷染料木苷、共軛物染料木苷6”-丙二酸酯(染料木苷的6”-丙二酸酯)和染料木苷6”-乙酸酯(染料木苷的6”-乙酸酯)、以及配基染料木黃酮。黃豆苷原族包括糖苷黃豆苷、共軛物黃豆苷6”-丙二酸酯和黃豆苷6”-乙酸酯；以及配基黃豆苷原。黃豆黃素族包括糖苷大豆異黃酮，共軛物大豆異黃酮6”-丙二酸酯，以及配基黃豆黃素。在生產(chǎn)市售產(chǎn)品如植物蛋白濃縮物時(shí)，關(guān)鍵在于除去這些物質(zhì)。例如，常規(guī)生產(chǎn)大豆?jié)饪s蛋白的方法中，用含水酸或含水乙醇提取大豆薄片，以便從大豆薄片中除去水溶性物質(zhì)，許多異黃酮溶解在提取物中。包含異黃酮的水溶性物質(zhì)提取物就是大豆廢糖蜜。大豆廢糖蜜是一般被丟棄的生產(chǎn)大豆?jié)饪s蛋白的副產(chǎn)品物質(zhì)。因此，大豆廢糖蜜價(jià)格便宜，而且是異黃酮理想的來源，只要能從大豆廢糖蜜中分離出異黃酮即可。近來人們認(rèn)識(shí)到含在植物蛋白原料如大豆中的異黃酮具有藥用價(jià)值。配基異黃酮特別有益。染料木黃酮和黃豆苷原可以明顯降低心血管危險(xiǎn)因子。參見“PlantandMammalianEstrogenEffectsonPlastmaLipidsofFemaleMonkeys”，Circulation，Vol.90，P.1259(1994年10月)。染料木黃酮和黃豆苷原還被認(rèn)為可以減少由于婦女內(nèi)生雌激素含量降低或改變而引起的癥狀，如絕經(jīng)或經(jīng)前綜合癥。此外，正如以下文章描述的，近來人們認(rèn)識(shí)到配基異黃酮可以抑制人體癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，如乳腺癌細(xì)胞和前列腺癌細(xì)胞，Peterson和Barnes的“GenisteinInhibitionoftheGrowthofHumanBreastCancerCells，IndependencefromEstrogenReceptorsandtheMulti-DrugResistanceGenne”，BiochemicalandBiophysicalResearch，Communications，Vol.179，No.1pp.661-667，1991年8月30日；Peterson和Barnes的“GenisteinandBiochaninAInhibittheGrowthofHumanProstrateCancerCellsbutnotEpidermalGrowthFactorReceptorTyrosineAutophosphorylation”，TheProstate，Vol.22，pp.335-345(1993)；以及Barnes等人的“SoybeansInhibitMammaryTumorsinModelsofBreastCancer”，MutagensandCarcinogensintheDiet，pp.239-253(1990)。配基異黃酮具有以下通式其中R1、R2、R3和R4可以選自H、OH和OCH3。染料木黃酮具有其中R1＝OH、R2＝H、R3＝OH而R4＝OH的上式，黃豆苷原具有其中R1＝OH、R2＝H、R3＝H而R4＝OH的上式，黃豆黃素具有其中R1＝OH、R2＝OCH3、R3＝H而R4＝OH的上式。因此，本發(fā)明涉及異黃酮，和從大豆廢糖蜜中回收富含異黃酮的物質(zhì)。本發(fā)明還涉及異黃酮糖苷和配基異黃酮——涉及將大豆廢糖蜜的異黃酮轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷和配基異基酮，以及從大豆廢糖蜜中回收富含異黃酮糖苷的物質(zhì)和富含配基異黃酮的物質(zhì)。將植物蛋白異黃酮共軛物轉(zhuǎn)變成配基異黃酮的一般方法是已知的，由本申請(qǐng)受讓人擁有的、于1995.6.7遞交的現(xiàn)在仍未決的申請(qǐng)US08/477,102中提供了這種方法。本領(lǐng)域其它已知將異黃酮糖苷轉(zhuǎn)變成配基異黃酮的方法在如Obata等人的JP申請(qǐng)258,669中有所描述。這些方法沒有提供從大豆廢糖蜜中回收富含異黃酮物質(zhì)的方法。這種方法也沒有提供將異黃酮共軛物轉(zhuǎn)變成異黃酮糖苷或轉(zhuǎn)變成配基異黃酮的方法。而且，這些方法僅僅達(dá)到中等程度地轉(zhuǎn)化異黃酮糖苷成為配基異黃酮，而且需要基本上一段時(shí)間去完成這個(gè)中等程度的轉(zhuǎn)變。因此，本發(fā)明的目的是提供富含異黃酮的物質(zhì)以及從大豆廢糖蜜中生產(chǎn)這種物質(zhì)的方法。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供富含異黃酮糖苷的物質(zhì)以及從大豆廢糖蜜中生產(chǎn)這種物質(zhì)的方法。本發(fā)明進(jìn)一步的目的是提供富含配基異黃酮的物質(zhì)以及從大豆廢糖蜜中生產(chǎn)這種物質(zhì)的方法。本發(fā)明涉及一種富含異黃酮的物質(zhì)，以及從含異黃酮的大豆廢糖蜜中回收這種物質(zhì)的方法。該方法包括提供含有異黃酮的大豆廢糖蜜原料，并且從大豆廢糖蜜原料中在足以使多數(shù)異黃酮含在豆粕中的pH和溫度下分離豆粕。分離過程中優(yōu)選pH為約3.0-約6.5，溫度為約0℃-約35℃。豆粕就是富含異黃酮的物質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案中，從富含異黃酮原料豆粕中形成富含糖苷的異黃酮原料。由富含異黃酮原料形成水漿液。在約2℃-約120℃溫度且約6-約13.5pH值下處理漿液，處理的時(shí)間要足以將富含異黃酮原料中的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。然后可以從漿液中分離富含異黃酮糖苷物質(zhì)的豆粕。在另一實(shí)施方案中，從富含異黃酮原料豆粕中形成富含配基異黃酮的原料。由富含異黃酮的原料形成水漿液。在約2℃-約120℃溫度且約6-約13.5pH下以足以將富含異黃酮原料中的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷的時(shí)間處理漿液。將能夠裂解1，4-糖苷鍵的酶與漿液中的異黃酮糖苷在約5℃-約75℃溫度且約3-約9pH值下接觸，接觸的時(shí)間要足以將異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮?？梢詮臐{液中分離富含配基異黃酮物質(zhì)的豆粕。另一方面，本發(fā)明涉及富含異黃酮糖苷的物質(zhì)，以及從大豆廢糖蜜中回收這種物質(zhì)的方法。在約2℃-約120℃溫度下且pH值為約6-約13.5之間以足以將含在大豆廢糖蜜中的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷的時(shí)間處理大豆廢糖蜜。從大豆廢糖蜜原料中在足以使多數(shù)異黃酮糖苷含在豆粕的pH和溫度下分離富含異黃酮糖苷物質(zhì)的豆粕。再一方面，本發(fā)明涉及富含配基異黃酮的物質(zhì)，以及從大豆廢糖蜜中回收這種物質(zhì)的方法。在約2℃-約120℃溫度下且pH值為約6-約13.5之間，以足以將含在大豆廢糖蜜中的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷的時(shí)間處理大豆廢糖蜜。用能夠裂解1，4-糖苷鍵的酶在約5℃-約75℃溫度且約3-約9pH下與大豆廢糖蜜原料中的異黃酮糖苷以足以將異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮的時(shí)間接觸。從大豆廢糖蜜原料中在足以使多數(shù)配基異黃酮含在豆粕的pH和溫度下分離富含配基異黃酮物質(zhì)的豆粕。這里用于所描述方法的起始原料是大豆廢糖蜜。大豆廢糖蜜是許多涉及大豆或大豆衍生物的商業(yè)方法的副產(chǎn)品，例如生產(chǎn)提取蛋白、蛋白乳清和濃縮蛋白產(chǎn)品的方法的副產(chǎn)物。因此，得到大豆廢糖蜜的量大到可以使大豆廢糖蜜成為相對(duì)便宜的商品的程度。一般認(rèn)為大豆廢糖蜜是通過醇或酸的洗滌從大豆不溶物中除去的大豆可溶物。大豆廢糖蜜一般是含有約50％或更多固形物的含水混合物，其中固形物包含約6％(基于大豆廢糖蜜的總重量)的蛋白、約3％灰分、約5％脂肪和約36％的碳水化合物。本領(lǐng)域還已知大豆廢糖蜜是大豆的可溶物質(zhì)。這里使用的術(shù)語“大豆廢糖蜜原料”是指含有大豆廢糖蜜和/或大豆廢糖蜜衍生物的組分，如富含異黃酮糖苷的大豆廢糖蜜原料和富含配基異黃酮的大豆廢糖蜜原料。因此，這些術(shù)語可以在這里互換使用。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，大豆廢糖蜜起始原料從已經(jīng)按常規(guī)方式由溶劑提取除去油的脫脂大豆薄片中得到。用加入一種或多種合適酸如醋酸、硫酸、磷酸、鹽酸或任何其它合適試劑調(diào)節(jié)成酸性pH、優(yōu)選約pH4-約pH5的水提取脫脂大豆薄片。酸性提取劑與大豆薄片的重量比優(yōu)選為約16∶1-約20∶1。為提高提取的效果，可將提取劑的溫度升高于室溫之上，優(yōu)選約32℃和約55℃之間。提取之后，從大豆不溶物中除去大豆廢糖蜜提取液。在另一實(shí)施方案中，用含水的醇提取脫脂大豆薄片得到大豆廢糖蜜起始原料。優(yōu)選用約80％的含水乙醇以提取劑與大豆薄片的重量比為約16∶1-約20∶1，提取薄片?？蓪⒋继崛┑臏囟壬哂谑覝刂?，優(yōu)選約32℃-約55℃，以便提高提取的效果。從大豆不溶物中除去大豆廢糖蜜提取液，得到大豆廢糖蜜起始原料。從大豆廢糖蜜起始原料中可以回收到富含異黃酮的物質(zhì)?？梢杂盟畬⒋蠖箯U糖蜜原料稀釋至固形物含量達(dá)約6％-約13％，首選13％。本方法并不要求稀釋大豆廢糖蜜原料，但是稀釋相對(duì)稠的大豆廢糖蜜原料便于加工原料。在多數(shù)異黃酮于實(shí)行分離過程時(shí)會(huì)從大豆廢糖蜜中分離的pH和溫度下處理大豆廢糖蜜原料，優(yōu)選稀釋的原料。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，在約3.0-約6.5的pH及約0℃-約35℃溫度下處理大豆廢糖蜜原料，使大豆廢糖蜜中異黃酮的不溶性最大化。在優(yōu)選范圍之外的pH值及35℃以上的溫度下可以從大豆廢糖蜜中分離出異黃酮，但很少選擇這些條件，這是因?yàn)樵诜蛛x過程中從大豆廢糖蜜中分離的異黃酮很少。如果需要，可用適宜的常規(guī)酸性或堿性試劑調(diào)整大豆廢糖蜜的pH。大豆廢糖蜜最優(yōu)選的pH應(yīng)調(diào)整至約4.5。還優(yōu)選將大豆廢糖蜜冷凝或冷卻至約0℃-約10℃的溫度，首選約4℃-約7℃。然后對(duì)大豆廢糖蜜原料實(shí)行分離過程，從大豆廢糖蜜原料中分離富含異黃酮物質(zhì)的豆粕。進(jìn)行分離的同時(shí)保持大豆廢糖蜜在前述的pH和溫度條件。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過離心大豆廢糖蜜并從豆粕中潷析上清液，分離富含異黃酮物質(zhì)的豆粕。優(yōu)選在約0℃-約10℃下進(jìn)行大約30分鐘的約3,000-約10,000rpm的離心。另一實(shí)施方案中，通過過濾從大豆廢糖蜜中分離富含異黃酮的豆粕。優(yōu)選在前述pH和溫度條件下完成過濾過程，首選在約4.5的pH及約0℃-約10℃溫度下進(jìn)行。本發(fā)明的另一個(gè)方面，從大豆廢糖蜜中回收富含異黃酮糖苷物質(zhì)的豆粕。如上述得到大豆廢糖蜜起始原料。為便于原料加工，盡管并不需要，但還是優(yōu)選將大豆廢糖蜜原料稀釋至約6％-約13％的固形物含量，首選約13％。然后對(duì)大豆廢糖蜜實(shí)行轉(zhuǎn)化操作，使大豆廢糖蜜中的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。大豆廢糖蜜中異黃酮的基本部分是異黃酮共軛物，因此轉(zhuǎn)化過程實(shí)際上是增加大豆廢糖蜜原料中異黃酮糖苷的量。早已發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化依賴于大豆廢糖蜜的pH和溫度。轉(zhuǎn)化大豆廢糖蜜中異黃酮共軛物成異黃酮糖苷的pH范圍為約6-約13.5。如果需要，應(yīng)當(dāng)將大豆廢糖蜜的pH調(diào)至所需pH，若pH需要增加，可用適宜的堿、苛性劑或堿試劑，或者，若pH需要降低，可用適宜的酸或酸試劑。早已發(fā)現(xiàn)將異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷需要堿催化，所以最優(yōu)選使用高pH以達(dá)到快速轉(zhuǎn)化。異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷的首選pH是pH為約9-約11。轉(zhuǎn)化大豆廢糖蜜中異黃酮共軛物成異黃酮糖苷的溫度范圍為約2℃-約120℃。容易發(fā)生轉(zhuǎn)化的溫度范圍取決于大豆廢糖蜜原料的pH。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)當(dāng)pH相對(duì)高時(shí)較低溫度下易發(fā)生轉(zhuǎn)化。例如，pH約11時(shí)快速且有效發(fā)生轉(zhuǎn)化的溫度范圍為約5℃-約50℃。pH約9時(shí)，有效發(fā)生轉(zhuǎn)化的溫度位于約45℃-約75℃范圍內(nèi)。當(dāng)大豆廢糖蜜的pH相對(duì)低時(shí)，轉(zhuǎn)化發(fā)生在較高溫度下。例如，pH約6時(shí)，轉(zhuǎn)化發(fā)生在約80℃-約120℃的溫度范圍內(nèi)。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，轉(zhuǎn)化是在約35℃及pH約11下完成的。另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，轉(zhuǎn)化是在約73℃溫度及pH約9下完成的。將異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷所要求的時(shí)間主要取決于大豆廢糖蜜所運(yùn)用的pH和溫度。一般這個(gè)轉(zhuǎn)化時(shí)間從15分鐘至最長(zhǎng)達(dá)幾個(gè)小時(shí)或更長(zhǎng)。高pH和高溫下轉(zhuǎn)化發(fā)生得較迅速。pH為約9時(shí)，轉(zhuǎn)化基本上在73℃下在約4小時(shí)至約6小時(shí)下完成。在首選的實(shí)施方案中，異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷的pH為約11，溫度約35℃，時(shí)間為約30分鐘-約1小時(shí)，優(yōu)選約45分鐘。轉(zhuǎn)化異黃酮共軛物成異黃酮糖苷是非常有效的，將至少多數(shù)的、且優(yōu)選基本上全部存在的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。術(shù)語“多數(shù)”指至少約50％的轉(zhuǎn)化程度。術(shù)語“基本上全部”指至少約80％首選至少約90％的轉(zhuǎn)化程度。將異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷之后，可以從大豆廢糖蜜原料中分離富含異黃酮糖苷物質(zhì)的豆粕。在多數(shù)異黃酮糖苷于分離過程中會(huì)從大豆廢糖蜜原料中分離的pH和溫度下處理大豆廢糖蜜原料。在一優(yōu)選的實(shí)施方案中，在分離過程中將大豆廢糖蜜原料保持在約3-約6.5、首選約4.5的pH以及約0℃-約35℃、優(yōu)選約0℃-約10℃、首選約4℃-約7℃的溫度下。如果需要，可以用合適的常規(guī)酸性或堿性試劑調(diào)節(jié)大豆廢糖蜜的pH。分離可以通過常規(guī)用于從液體中分離固體的方式來完成。優(yōu)選通過如上述相應(yīng)于從大豆廢糖蜜原料中分離富含異黃酮豆粕的離心或過濾方式分離富含異黃酮糖苷豆粕。本發(fā)明還有的另一個(gè)方面，從大豆廢糖蜜中回收富含配異基黃酮物質(zhì)的豆粕。如上述得到大豆廢糖蜜起始原料，優(yōu)選用水稀釋至固形物含量為約6％-約13％。如上所述處理大豆廢糖蜜起始原料，將異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。然后在適合轉(zhuǎn)化異黃酮糖苷成配基異黃酮的pH和溫度下，通過合適的酶和大豆廢糖蜜原料中的異黃酮糖苷接觸，對(duì)富含異黃酮糖苷的大豆廢糖蜜原料進(jìn)行酶的轉(zhuǎn)化操作。兩步轉(zhuǎn)化過程有效地將大豆廢糖蜜原料中基本上全部的異黃酮共軛物和異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮，即實(shí)際上增加大豆廢糖蜜原料中配異基黃酮的量。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮取決于各種因素，包括存在于大豆廢糖蜜原料的酶的類型、酶濃度分布、酶活性以及轉(zhuǎn)化過程中大豆廢糖蜜原料的pH和溫度。完成轉(zhuǎn)化所需要的酶是能夠裂解異黃酮糖苷中異黃酮部分和葡萄糖分子間糖苷連接鍵的酶。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，酶是能夠裂解1，4-糖苷鍵的糖酶或葡糖淀粉酶。酶可以是大豆廢糖蜜原料中固有存在的，也可以是加到大豆廢糖蜜原料的可商購的酶。固有存在的酶在這里稱作“殘余的”酶，而加到大豆廢糖蜜的酶這里稱作“補(bǔ)充的”酶。大豆廢糖蜜原料中應(yīng)當(dāng)存在足夠的酶，將至少多數(shù)、優(yōu)選基本上全部的異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮。普遍認(rèn)為，如果大豆廢糖蜜原料中的殘余酶不足以完成轉(zhuǎn)化，則應(yīng)當(dāng)向大豆廢糖蜜原料加入補(bǔ)充酶。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，不管是否大豆廢糖蜜原料中存在足夠的殘余酶，大豆廢糖蜜原料中都加入補(bǔ)充酶，這是因?yàn)榧尤胙a(bǔ)充酶大大減少了實(shí)現(xiàn)基本上完全轉(zhuǎn)化糖苷至配基所必需的時(shí)間。如果加補(bǔ)充酶，則應(yīng)當(dāng)加補(bǔ)充酶使得大豆廢糖蜜原料中所存在的酶的總濃度以干基計(jì)為固體重量的約0.1％-約10％。在所選pH和溫度下基于其最佳活性選擇補(bǔ)充酶，選擇的依據(jù)還有經(jīng)濟(jì)效率。補(bǔ)充酶是能夠裂解異黃酮糖苷中異黃酮部分和葡糖分子間鍵的酶，如能夠裂解1，4-糖苷鍵的糖酶和葡糖淀粉酶。優(yōu)選的補(bǔ)充酶是可商購得到的α-和β-葡糖苷酶、β-半乳糖苷酶、葡糖淀粉酶和果膠酶。特別優(yōu)選的酶有Biopectinase100L(優(yōu)選在約3-約6的pH范圍下使用)、Biopectinase300L(最佳pH范圍約3-約6)、BiopectinaseOK70L(最佳pH范圍約3-約6)、Biolactase30,000(最佳pH范圍約3-約6)、NeutralLactase(最佳pH范圍約6-約8)，所有這些可從QuestInternational，183357thStreet，郵政信箱3917，Sarasota，佛羅里達(dá)34243中得到。特別優(yōu)選的還有從AmanoInternationalEnzymeCo.Inc。郵政信箱1000，Troy，弗吉尼亞22974中得到的兩種酶LactaseF(優(yōu)選在約4-約6的pH范圍下使用)和Lactase50,000(最佳pH范圍約4-約6)。其它特別優(yōu)選的補(bǔ)充酶包括從EnzymeDevelopmentCorporation，2PennPlaza，Suite2439，NeWYork，紐約10121得到的G-ZymeG990(最佳pH約4-約6)以及EnzecoFungalLactaseConcentrate(最佳pH約4-約6)；從NovoNordiskBioindustrials，Inc.，33TurnerRoad，Danbury，康涅狄格06813得到的Lactozyme3000L(優(yōu)選在約6-約8的pH范圍下使用)和α-Gal600L(優(yōu)選在約4-約6.5的pH范圍下使用)；從GistBrocadesFoodIngredients，Inc.，KingofPrussia，賓夕法尼亞，19406得到的MaxilactL2000(優(yōu)選在約4-約6的pH范圍下使用)；以及從PfizerFoodScienceGroup，205East42ndStreet，NewYork，紐約10017得到的NeutralLactase(優(yōu)選在約6-約8的pH范圍下使用)。轉(zhuǎn)化異黃酮糖苷成配基異黃酮的pH范圍為約3-約9。所用的pH主要取決于所使酶的類型，并且應(yīng)當(dāng)以此作為選擇。雖然據(jù)信大豆廢糖蜜原料在轉(zhuǎn)化過程期間pH降低，但殘余酶在約7-約9的pH范圍內(nèi)具有活性。補(bǔ)充酶在酶制造商說明的最佳pH范圍內(nèi)具有活性，這一點(diǎn)如上所示的幾種具體酶。一般，在中性pH范圍約6-約8，或在酸性pH范圍約3-約6內(nèi)補(bǔ)充酶都具活性。大豆廢糖蜜原料的pH可以調(diào)整至實(shí)施轉(zhuǎn)化異黃酮糖苷至配基異黃酮所需的值。在大部分實(shí)例中，通過添加一種或幾種合適的酸如醋酸、硫酸、磷酸、鹽酸或任何其它合適的試劑，將相對(duì)高的pH或轉(zhuǎn)化異黃酮共軛物成異黃酮糖苷所需的堿性pH降低下來。轉(zhuǎn)化糖苷成配基的大豆廢糖蜜原料的溫度范圍為約5℃-約75℃。溫度非常影響酶的活性，以及由此的轉(zhuǎn)化率。補(bǔ)充酶可在70℃以上有活性，例如α-Gal600L在75℃時(shí)具活性，但優(yōu)選在較低溫下實(shí)施轉(zhuǎn)化，以避免酶失活。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，轉(zhuǎn)化在約35℃-約45℃之間完成。將糖苷轉(zhuǎn)化成配基所需的時(shí)間取決于與酶相關(guān)的因素，特別是濃度，以及系統(tǒng)的溫度和pH。在大部分的實(shí)例中，在24小時(shí)之內(nèi)便可以達(dá)到基本上完全的轉(zhuǎn)化，但是，為大大加快反應(yīng)速率，優(yōu)選添加補(bǔ)充酶。所選擇的補(bǔ)充酶、酶濃度、pH和溫度應(yīng)當(dāng)優(yōu)選造成在約2小時(shí)內(nèi)基本上完成轉(zhuǎn)化，首選在1小時(shí)內(nèi)。異黃酮糖苷到配基異黃酮的轉(zhuǎn)化非常有效，將存在的至少多數(shù)、優(yōu)選基本上全部的糖苷轉(zhuǎn)化成配基。術(shù)語“多數(shù)”指至少約50％的轉(zhuǎn)化程度。術(shù)語“基本上全部”指至少約80％的轉(zhuǎn)化程度，最優(yōu)選至少約90％。將異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮之后，可從大豆廢糖蜜原料中分離富含配基異黃酮物質(zhì)的豆粕。在多數(shù)配基異黃酮于分離過程中會(huì)從大豆廢糖蜜原料中分離的pH和溫度下處理大豆度糖蜜原料。分離過程中優(yōu)選將大豆廢糖蜜原料保持在約3-約6.5、首選約4.5的pH及約0℃-約35℃、優(yōu)選約0℃-約10℃、首選約4℃-約7℃的溫度下。如果需要，可用合適的常規(guī)酸性或堿性試劑調(diào)整大豆廢糖蜜原料的pH?？梢酝ㄟ^從液體中分離固體的常規(guī)方式實(shí)現(xiàn)分離過程。優(yōu)選通過如上述相應(yīng)于從大豆廢糖蜜原料中分離富含異黃酮豆粕的離心或過濾方式分離富含配基異黃酮的豆粕。富含配基異黃酮物質(zhì)還可以從由大豆廢糖蜜中回收的富含異黃酮物質(zhì)中得到，其中從大豆廢糖蜜中回收富含異黃酮物質(zhì)的方法描述如上。把水加到富含異黃酮物質(zhì)的回收豆粕中，形成富含異黃酮物質(zhì)的漿液。優(yōu)選將漿液稀釋至約6％-約13％固形物，但較高固形物含量的也可以使用。然后在上述相應(yīng)于轉(zhuǎn)化大豆廢糖蜜中異黃酮共軛物成異黃酮糖苷的同等條件下處理漿液，使?jié){液中異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。具體說，在約6-約13.5、優(yōu)選約pH9-約pH11的pH以及約2℃-約120℃的溫度下處理漿液約15分鐘至幾個(gè)小時(shí)的時(shí)間。首選在pH約11和溫度約5℃-約50℃、優(yōu)選約35℃下處理漿液約30分鐘-約1小時(shí)；或者在pH約9和溫度約45℃-75℃、優(yōu)選約73℃下處理約4小時(shí)-約6小時(shí)。如果需要，可以按上述從大豆廢糖蜜中分離富含異黃酮物質(zhì)的相似方式將富含異黃酮糖苷的物質(zhì)從漿液中分離出來。然后在上述相應(yīng)于轉(zhuǎn)化大豆廢糖蜜原料中的異黃酮糖苷成配基異黃酮的等同條件下將漿液中的異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮。具體說，在合適的pH和溫度下在一段時(shí)間內(nèi)將漿液中異黃酮糖苷與能夠裂解異黃酮糖苷的異黃酮部分和葡糖分子間糖苷連接鍵的酶接觸，接觸時(shí)間足以將異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮。優(yōu)選的酶、pH條件、溫度和時(shí)間描述如上。按上述從大豆廢糖蜜中分離富含異黃酮物質(zhì)的相似方式從漿液中分離富含配基異黃酮的物質(zhì)。還可以從由大豆廢糖蜜原料回收的富含異黃酮糖苷物質(zhì)中生產(chǎn)富含配基異黃酮的物質(zhì)，其中從大豆廢糖蜜原料中回收富含異黃酮糖苷物質(zhì)的方法描述如上。把水加到富含異黃酮糖苷物質(zhì)的回收豆粕中，形成富含異黃酮糖苷物質(zhì)的漿液。優(yōu)選稀釋漿液至約6％-約13％固形物，但較高固形物含量的也可以使用。按上述相應(yīng)于從富含異黃酮漿液中形成富含異黃酮糖苷漿液的同樣方式將漿液中的異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮。轉(zhuǎn)化后按上述從大豆廢糖蜜中分離富含異黃酮物質(zhì)的相似方式從漿液中分離富含配基異黃酮物質(zhì)。本發(fā)明通過以下的實(shí)施例作更詳細(xì)地說明。實(shí)施例旨在舉例說明，而無論如何不應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是限制或者說限定本發(fā)明的范圍。如上提及的，包括大豆廢糖蜜的大豆原料包括具有對(duì)應(yīng)糖苷、共軛物和配基成員的染料木黃酮、黃豆苷原和黃豆黃素“族”異黃酮，其中染料木黃酮族含有共軛物染料木苷6”-丙二酸酯(6”-OMal染料木苷)、染料木苷6”-乙酸酯(6”-OAc染料木苷)、糖苷染料木苷和配基染料木苷；黃豆苷原族含有共軛物黃豆苷6”-丙二酸酯(6”-OMal黃豆苷)、黃豆苷6”-乙酸酯(6”-OAc黃豆苷)、糖苷黃豆苷和配基黃豆苷；而黃豆黃素族含有共軛物大豆異黃酮6”-丙二酸酯(6”-OMal大豆異黃酮)、大豆異黃酮6”-乙酸酯(6”-OAc大豆異黃酮)、糖苷大豆異黃酮和配基大豆異黃酮。在以下實(shí)施例中，異黃酮的相對(duì)濃度或者以異黃酮族的總濃度計(jì)，或者以一個(gè)異黃酮族中每種異黃酮的單獨(dú)的百分?jǐn)?shù)計(jì)。例如，異黃酮的染料木黃酮族的總濃度是6”-OMal染料木苷、6”-OAc染料木苷、染料木苷和染料木黃酮濃度的總和；且染料木黃酮族中每個(gè)異黃酮的百分?jǐn)?shù)是相對(duì)于其它染料木黃酮族異黃酮作的測(cè)定％染料木苷+％6”O(jiān)Mal染料木苷+％6”O(jiān)Ac染料木苷+％染料木黃酮＝100％。實(shí)施例1第一個(gè)實(shí)驗(yàn)，在各種大豆廢糖蜜濃度下檢驗(yàn)從大豆廢糖蜜中富含異黃酮物質(zhì)的回收率。在具有選擇濃度的大豆廢糖蜜樣品中、在根據(jù)本發(fā)明方法由大豆廢糖蜜樣品分離的豆粕中、以及在經(jīng)分離過程除去豆粕的液體乳清中測(cè)定每個(gè)異黃酮族的總濃度。分析大豆廢糖蜜中所存在的所有形式異黃酮的總濃度。用水將大豆廢糖蜜的樣品稀釋至固形物含量為28％(1∶2稀釋)、13.7％(1∶4稀釋)和6.6％(1∶8稀釋)。所有樣品調(diào)至pH4.5，然后以3000rpm之間的速率離心經(jīng)處理的樣品30分鐘，從樣品中分離并產(chǎn)生液體乳清和豆粕部分。一組樣品在0.6℃溫度下離心。在60℃溫度下離心具有28％和13.7％大豆廢糖蜜固形物的樣品，用以和具有相同大豆廢糖蜜固形物濃度而在0.6℃下分離的樣品作比較。將樣品所得的液體和豆粕部分用于分析所存在各種形式異黃酮的總濃度。表1顯示從前述試驗(yàn)中獲得的各種豆粕和液體部份中異黃酮的濃度。所示的全部是所有形式具體異黃酮(包括共軛物、糖苷和配基形式)的全部，用每克豆粕或液體部份固體中mg異黃酮表達(dá)。</tables>在所有分離后的樣品中，豆粕中的異黃酮濃度明顯高于大豆廢糖蜜起始原料中的，并且大大高于液體乳清部份固體中的異黃酮濃度。0.6℃下分離的樣品在豆粕中比60℃下分離的相應(yīng)樣品含有更高的異黃酮濃度，而60℃下分離的樣品在乳清部份固體中具有較高的異黃酮濃度。實(shí)施例2另一個(gè)實(shí)驗(yàn)，檢驗(yàn)從大豆廢糖蜜中富含異黃酮糖苷物質(zhì)的回收率。將大豆廢糖蜜中的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷，并從大豆廢糖蜜原料中分離富含異黃酮糖苷豆粕。異黃酮族丙二酸酯和乙酸酯的百分比和濃度定量減少，同時(shí)同一異黃酮族的糖苷的百分比相應(yīng)地定量增加，據(jù)此測(cè)定轉(zhuǎn)化的程度。分析大豆廢糖蜜起始原料中各個(gè)異黃酮化合物的濃度。通過用水按下列比例稀釋大豆廢糖蜜制作大豆廢糖蜜的兩個(gè)樣品1∶4(100g廢糖蜜+300g水)以及1∶8(50g廢糖蜜+350g水)。樣品調(diào)至pH11，樣品溫度在35℃下持續(xù)30分鐘。然后將樣品調(diào)至pH4.5及溫度4℃。4℃下以10,000rpm離心樣品，將廢糖蜜樣品分成豆粕和液體乳清。分析乳清和豆粕中各個(gè)異黃酮化合物的濃度。表2表示與大豆廢糖蜜起始原料相比，由異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷所得各種形式異黃酮之間的比例變化。異黃酮濃度表示為樣品中的每百萬份中的份數(shù)(ppm)，并且表示為液體或豆粕部分中具體異黃酮總量(共軛物、糖苷和配基形式的總和)的百分比。表2<tablesid="table2"num="002"><tablewidth="870">樣品染料木苷6”-OMAL-染料木苷6”-OAC-染料木苷染料木黃酮黃豆苷6”-OMAL-黃豆苷6”-OAC-黃豆苷黃豆苷原大豆異黃酮6”-OMAL-大豆異黃酮黃豆黃素大豆廢糖蜜ppm％異黃酮1∶4稀釋乳清ppm％異黃酮1∶4稀釋豆粕ppm％異黃酮1∶8稀釋乳清ppm％異黃酮1∶8稀釋豆粕ppm％異黃酮46787722219828621992852982751799132922171680241101000000000008813012611361272135337426529216133973356941261797928201796192118751381210429100000084221123212712452500523419214429640694114610010511288002860036037006640000</table></tables>在所有受到調(diào)節(jié)使異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷的樣品中，豆粕和液體部分二者中的異黃酮糖苷百分比明顯高于相應(yīng)未轉(zhuǎn)化的大豆廢糖蜜樣品，且這些樣品中對(duì)應(yīng)的異黃酮共軛物的百分比明顯地較低，這證明大部分異黃酮共軛物被轉(zhuǎn)化成它們的糖苷形式。另外，正如從大豆廢糖蜜起始原料與每個(gè)樣品中乳清和豆粕部分的相關(guān)濃度中可以看出，當(dāng)分離過程時(shí)，大部分糖苷異黃酮被分離在豆粕中，形成了富含異黃酮糖苷的物質(zhì)。實(shí)施例3再一個(gè)實(shí)驗(yàn)，檢驗(yàn)大豆廢糖蜜中異黃酮成為配基異黃酮的轉(zhuǎn)化率。將大豆廢糖蜜中的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷，再將異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮。測(cè)定異黃酮糖苷至配基異黃酮的轉(zhuǎn)化程度根據(jù)的是異黃酮族糖苷濃度的定量減少，同時(shí)同一異黃酮族配基百分比相應(yīng)地定量增加。用水將大豆廢糖蜜起始原料稀釋成1∶4，并且分析各個(gè)異黃酮化合物的濃度。然后將廢糖蜜的pH調(diào)至11。大豆廢糖蜜置于室溫下持續(xù)1小時(shí)，以便產(chǎn)生富含糖苷的大豆廢糖蜜原料。分析富含糖苷的大豆廢糖蜜原料中各個(gè)異黃酮化合物的濃度。原料的pH調(diào)至4.5之后從富含糖苷的大豆廢糖蜜原料中準(zhǔn)備四份樣品。在每份樣品中分別按廢糖蜜固體的重量添加10％的以下酶G-Zyme990，Biopectinase100L，Lactase50,000和α-Gal600L。然后在50℃將樣品處理6小時(shí)，形成富含配基異黃酮的大豆廢糖蜜原料。分析富含配基異黃酮大豆廢糖蜜的異黃酮含量。表3表示從前述試驗(yàn)中所得各種形式異黃酮之間的分布。異黃酮濃度表示為樣品中的每百萬份中的份數(shù)(ppm)，還表示為具體異黃酮總量(共軛物、糖苷和配基形式的總和)的百分比。表3酶處理樣品的配基異黃酮含量明顯高于大豆廢糖蜜和富含糖苷的大豆廢糖蜜原料，這說明酶處理將基本數(shù)量上的糖苷異黃酮轉(zhuǎn)化成了配基異黃酮。通過Lactase50,000和α-Gal600L樣品中的異黃酮分布，證明了選擇合適的酶、酶濃度、轉(zhuǎn)化pH和溫度能允許將基本上全部的的異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮。實(shí)施例4最后一個(gè)實(shí)驗(yàn)，檢驗(yàn)富含異黃酮物質(zhì)、富含異黃酮糖苷物質(zhì)和富含配基異黃酮物質(zhì)的異黃酮含量，并比較這些物質(zhì)中異黃酮的分布。用水按1∶4比稀釋大豆廢糖蜜。將稀大豆廢糖蜜的一份樣品調(diào)至pH4.5，在冰浴中冷凝30分鐘至0.6℃溫度，并以3000rpm的速率離心30分鐘分離富含異黃酮物質(zhì)的豆粕。然后將剩余的稀大豆廢糖蜜用氫氧化鈉調(diào)至pH11，并在50℃下處理1小時(shí)，使廢糖蜜中異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。將富含糖苷廢糖蜜的一份樣品調(diào)至pH4.5，冰浴中冷凝30分鐘至0.6℃溫度，并以3000rpm的速率離心30分鐘分離富含異黃酮糖苷物質(zhì)的豆粕。將剩余的富含異黃酮糖苷大豆廢糖蜜原料調(diào)至pH4.5，并以2.6g酶/100g廢糖蜜原料的濃度加入酶G-Zyme990。然后在50℃下處理酶和富含異黃酮糖苷大豆廢糖蜜原料18-20小時(shí)，將異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮。將富含配基異黃酮的大豆廢糖蜜原料于冰浴中冷凝30分鐘至0.6℃溫度，并以3000rpm的速率離心30分鐘分離富含配基異黃酮物質(zhì)的豆粕。然后分析富含異黃酮物質(zhì)、富含異黃酮糖苷物質(zhì)和富含配基異黃酮物質(zhì)的豆粕中的異黃酮含量。表4表示富含異黃酮物質(zhì)、富含異黃酮糖苷物質(zhì)和富含配基異黃酮物質(zhì)的豆粕中異黃酮的分布。異黃酮分布表示為具體異黃酮總量(共軛物、糖苷和配基形式的總和)的百分比。</tables>從物質(zhì)的異黃酮分布中可以看到轉(zhuǎn)化步驟的效率。富含異黃酮糖苷物質(zhì)含有異黃酮糖苷的量明顯高于富含異黃酮物質(zhì)和富含配基異黃酮物質(zhì)，它具有的異黃酮含量幾乎完全由異黃酮糖苷組成。富含配基異黃酮物質(zhì)含有配基異黃酮的量明顯高于富含異黃酮物質(zhì)和富含異黃酮糖苷物質(zhì)，它具有的異黃酮含量幾乎全部由配基異黃酮組成。在以上實(shí)施例中，所有表示的6”-OMal-染料木苷、6”-OAc-染料木苷、6”-OMal-黃豆苷、6”-OAc-黃豆苷、大豆異黃酮、6”-OMal-大豆異黃酮和黃豆黃素的百分比皆是計(jì)算值。下面描述確定大豆產(chǎn)品中異黃酮數(shù)量的方法。將0.75g樣品(噴霧干燥或精磨的粉)和50ml80/20甲醇/水溶劑混合，從大豆產(chǎn)品中提取異黃酮。用軌道搖動(dòng)器在室溫下?lián)u動(dòng)混合物2小時(shí)。2小時(shí)后，通過WhatmanNo.42濾紙過濾除去剩余的未溶物質(zhì)。用4ml水和1ml甲醇稀釋5ml的濾液。使用HewlettPackardC18Hypersil反相柱，通過HPLC(高效液相色譜)分離提取異黃酮。將異黃酮注到柱上并用溶劑梯度洗脫，梯度開始時(shí)為88％甲醇、10％水和2％冰醋酸，結(jié)束時(shí)為98％甲醇和2％冰醋酸。在0.4ml/min的流速下，所有異黃酮-染料木苷、6”-0-乙酰染料木苷、6”-0-丙二酰染料木苷、染料木黃酮、黃豆苷、6”-0-乙酰黃豆苷、6”-0-丙二酰黃豆苷、黃豆苷、大豆異黃酮及其衍生物和黃豆黃素-被清晰地解析了。測(cè)定260mm下UV吸收的峰。用HPLC-質(zhì)譜儀進(jìn)行峰鑒定。使用由IndofineChemicalCompany，Sommerville，NJ得到的純標(biāo)準(zhǔn)樣(染料木苷、染料木黃酮、黃豆苷和黃豆苷原)作定量。計(jì)算上述每個(gè)化合物的響應(yīng)系數(shù)(積分面積/濃度)并且用它測(cè)定未知樣品的數(shù)量。對(duì)沒有純標(biāo)準(zhǔn)樣可得到的共軛形式來說，假定響應(yīng)系數(shù)是母體分子的響應(yīng)系數(shù)，但母體分子對(duì)分子量差異作了校正。假定大豆異黃酮的響應(yīng)系數(shù)是對(duì)分子量差異作過校正的染料木苷的響應(yīng)系數(shù)。該方法提供了對(duì)各種異黃酮的定量。為方便起見，可以計(jì)算所有的染料木黃酮、所有的黃豆苷原和所有的黃豆黃素，并且如果所有的共軛形式都轉(zhuǎn)化成它們分別的非共軛形式，則表示為這些化合物的聚集重量。還可以使用酸水解轉(zhuǎn)化共軛形式的方法直接測(cè)定這些所有的異黃酮。前述的內(nèi)容僅是本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案。在不超出后面權(quán)利要求書要求的實(shí)質(zhì)和更寬方面的范圍可以作出各種變化和改換，根據(jù)專利法包括DoctrineofEquivalents的基本原則可以解釋這一點(diǎn)。權(quán)利要求1.一種從大豆廢糖蜜中獲得富含異黃酮物質(zhì)的方法，包括提供含有異黃酮的大豆廢糖蜜原料；在有效造成多數(shù)異黃酮將含在富含異黃酮物質(zhì)的pH和溫度下，從所說的大豆廢糖蜜原料中分離所說的富含異黃酮物質(zhì)。2.根據(jù)前述權(quán)利要求1的方法，其中所說的富含異黃酮物質(zhì)是在pH約3-約6.5且溫度約0℃-約35℃下從所說大豆廢糖蜜原料中分離的。3.根據(jù)前述權(quán)利要求2的方法，其中所說的富含異黃酮物質(zhì)是在pH約4.5時(shí)從所說大豆廢糖蜜原料中分離的。4.根據(jù)前述權(quán)利要求2的方法，其中所說的富含異黃酮物質(zhì)是在約0℃-約10℃溫度下從所說大豆廢糖蜜原料中分離的。5.權(quán)利要求1的方法，還包括在從所說大豆廢糖蜜原料中分離所說富含異黃酮物質(zhì)之前，形成具有固形物含量約3％-約28％的大豆廢糖蜜原料的含水混合物。6.根據(jù)前述權(quán)利要求1的方法，其中所說的富含異黃酮物質(zhì)是通過離心從所說大豆廢糖蜜原料中分離的。7.根據(jù)前述權(quán)利要求6的方法，其中所說的離心是當(dāng)所說大豆廢糖蜜原料在溫度約0℃-約10℃且pH約3-約6.5時(shí)進(jìn)行的。8.根據(jù)前述權(quán)利要求1的方法，其中所說的富含異黃酮物質(zhì)是通過過濾從所說大豆廢糖蜜原料中分離的。9.根據(jù)前述權(quán)利要求8的方法，其中所說的過濾是當(dāng)所說大豆廢糖蜜原料在溫度約0℃-約10℃且pH約3-約6.5時(shí)進(jìn)行的。10.權(quán)利要求1的方法，還包括形成所說的分離后的富含異黃酮物質(zhì)的含水漿液，所說的富含異黃酮物質(zhì)含有異黃酮共軛物；并且在一定溫度和一定pH下以足夠的時(shí)間處理所說的漿液，以便將所說漿液中的所說異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷，形成富含異黃酮糖苷的漿液。11.根據(jù)前述權(quán)利要求10的方法，其中所說的富含異黃酮物質(zhì)的含水漿液具有約6％-約13％固形物含量。12.根據(jù)前述權(quán)利要求10的方法，其中將所說的漿液在pH約6-約13.5且溫度約2℃-約120℃下處理約15分鐘-約6小時(shí)的時(shí)間，以便將所說的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。13.根據(jù)前述權(quán)利要求12的方法，其中將所說的漿液在pH約9-約11且溫度約5℃-約75℃下處理約15分鐘-約6小時(shí)的時(shí)間，以便將所說的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。14.權(quán)利要求10的方法，還包括從所說的漿液中分離富含異黃酮糖苷的物質(zhì)。15.根據(jù)前述權(quán)利要求14的方法，其中所說富含異黃酮糖苷的物質(zhì)是在pH約3-約6.5且溫度約0℃-約35℃下從所說漿液中分離的。16.根據(jù)前述權(quán)利要求15的方法，其中所說富含異黃酮糖苷的物質(zhì)是在溫度約0℃-約10℃下從所說漿液中分離的。17.權(quán)利要求10的方法，還包括將所說異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成所說異黃酮糖苷之后，在一定溫度和一定pH下將酶和所說漿液中的異黃酮糖苷接觸足夠的時(shí)間，使異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮，形成富含配基異黃酮的漿液。18.根據(jù)前述權(quán)利要求17的方法，其中所說的酶與所說漿液中的所說異黃酮糖苷在pH約3-約9且溫度約5℃-約75℃下接觸至少約1小時(shí)。19.根據(jù)前述權(quán)利要求17的方法，其中酶與所說漿液中所說異黃酮糖苷的接觸包括向所說漿液添加有效量的補(bǔ)充酶。20.根據(jù)前述權(quán)利要求19的方法，其中所說的補(bǔ)充酶包括能夠裂解1，4-糖苷鍵的糖酶。21.權(quán)利要求17的方法，還包括從所說的漿液中分離富含配基異黃酮的物質(zhì)。22.根據(jù)前述權(quán)利要求21的方法，其中所說富含配基異黃酮的物質(zhì)是在pH約3-約6.5且溫度約0℃-約35℃下從所說漿液中分離的。23.根據(jù)前述權(quán)利要求22的方法，其中所說富含配基異黃酮的物質(zhì)是在溫度約0℃-約10℃下從所說漿液中分離的。24.一種從含有異黃酮共軛物的大豆廢糖蜜中獲得富含異黃酮糖苷物質(zhì)的方法，包括在有效使異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷的pH及溫度下以足夠的時(shí)間處理所說的大豆廢糖蜜，將所說異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷；并且從所說的大豆廢糖蜜中分離富含異黃酮糖苷的物質(zhì)。25.根據(jù)前述權(quán)利要求24的方法，其中將所說的漿液在pH約6-約13.5且溫度約2℃-約120℃下處理，以便將所說的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。26.根據(jù)前述權(quán)利要求25的方法，其中將所說的大豆廢糖蜜在pH約9-約11且溫度約5℃-約75℃下處理至少約15分鐘的時(shí)間，以便將所說的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。27.根據(jù)前述權(quán)利要求26的方法，其中將所說的大豆廢糖蜜在pH約11且溫度約5℃-約50℃下處理約15分鐘-約1小時(shí)的時(shí)間，以便將所說的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。28.根據(jù)前述權(quán)利要求27的方法，其中將所說的大豆廢糖蜜在pH約11且溫度約35℃下處理約30分鐘-約1小時(shí)，以便將所說的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。29.根據(jù)前述權(quán)利要求26的方法，其中將所說的大豆廢糖蜜在pH約9且溫度約45℃-約75℃下處理約4小時(shí)-約6小時(shí)，以便將所說的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。30.根據(jù)前述權(quán)利要求24的方法，其中所說富含異黃酮糖苷的物質(zhì)是在pH約3-約6.5且溫度約0℃-約35℃下從所說大豆廢糖蜜中分離的。31.根據(jù)前述權(quán)利要求30的方法，其中所說富含異黃酮糖苷的物質(zhì)是在溫度約0℃-約10℃下從所說大豆廢糖蜜原料中分離的。32.根據(jù)前述權(quán)利要求30的方法，其中所說富含異黃酮糖苷的物質(zhì)是在pH約4.5時(shí)從所說大豆廢糖蜜原料中分離的。33.根據(jù)前述權(quán)利要求30的方法，其中所說富含異黃酮糖苷的物質(zhì)是通過離心從所說大豆廢糖蜜中分離的。34.根據(jù)前述權(quán)利要求30的方法，其中所說富含異黃酮糖苷的物質(zhì)是通過過濾從所說大豆廢糖蜜中分離的。35.權(quán)利要求24的方法，還包括形成所說的分離后的富含異黃酮糖苷物質(zhì)的含水漿液；并且在一定溫度和一定pH下以足夠的時(shí)間將酶與所說漿液中的所說異黃酮糖苷接觸以便將所說的異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮，形成富含配基異黃酮的漿液。36.根據(jù)前述權(quán)利要求35的方法，其中所說的酶與所說漿液中的所說異黃酮糖苷在pH約3-約9且溫度約5℃-約75℃下接觸至少約1小時(shí)。37.根據(jù)前述權(quán)利要求35的方法，其中酶與所說漿液中所說異黃酮糖苷的接觸包括向所說漿液添加有效量的補(bǔ)充酶。38.根據(jù)前述權(quán)利要求37的方法，其中所說的補(bǔ)充酶包括能夠裂解1，4-糖苷鍵的糖酶。39.權(quán)利要求35的方法，還包括在將所說異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮之后，從所說的漿液中分離富含配基異黃酮的物質(zhì)。40.根據(jù)前述權(quán)利要求39的方法，其中所說富含配基異黃酮的物質(zhì)是在pH約3-約6.5且溫度約0℃-約35℃下從所說漿液中分離的。41.根據(jù)前述權(quán)利要求40的方法，其中所說富含配基異黃酮的物質(zhì)是在溫度約0℃-約10℃下從所說漿液中分離的。42.一種從含有異黃酮共軛物的大豆廢糖蜜中獲得配基異黃酮的方法，包括在一定pH和一定溫度下以足夠的時(shí)間處理所說的大豆廢糖蜜，使所說異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷；在一定pH及一定溫度下將酶和所說大豆廢糖蜜中異黃酮糖苷接觸足夠的時(shí)間，使所說的異黃酮糖苷轉(zhuǎn)化成配基異黃酮；并且從所說的大豆廢糖蜜中分離富含配基的異黃酮物質(zhì)。43.權(quán)利要求42的方法，還包括在轉(zhuǎn)化所說異黃酮共軛物成異黃酮糖苷之前，形成具有固形物含量約3％-約28％的大豆廢糖蜜的含水混合物。44.根據(jù)前述權(quán)利要求42的方法，其中將所說的大豆廢糖蜜在pH約6-約13.5且溫度約2℃-約120℃下處理至少約15分鐘以便將所說的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。45.根據(jù)前述權(quán)利要求44的方法，其中將所說的大豆廢糖蜜在pH約9-約11且溫度約5℃-約75℃下處理約15分鐘-約6小時(shí)的時(shí)間，以便將所說的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。46.根據(jù)前述權(quán)利要求45的方法，其中將所說的大豆廢糖蜜在pH約11且溫度約5℃-約50℃下處理約30分鐘-約1小時(shí)的時(shí)間，以便將所說的異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成異黃酮糖苷。47.根據(jù)前述權(quán)利要求42的方法，其中所說的酶與所說大豆廢糖蜜中所說的異黃酮糖苷在pH約3-約9且溫度約5℃-約75℃下接觸至少約1小時(shí)。48.根據(jù)前述權(quán)利要求47的方法，其中所說的酶與所說大豆廢糖蜜中所說異黃酮糖苷是在溫度約35℃-約60℃下接觸的。49.根據(jù)前述權(quán)利要求42的方法，其中所說的酶與所說大豆廢糖蜜中所說異黃酮糖苷的接觸包括向所說大豆廢糖蜜中添加有效量的補(bǔ)充酶。50.根據(jù)前述權(quán)利要求49的方法，其中所說的補(bǔ)充酶包括能夠裂解1，4-糖苷鍵的糖酶。51.根據(jù)權(quán)利要求49的方法，其中補(bǔ)充酶選自α-葡糖苷酶、β-葡糖苷酶、β-半乳糖苷酶、萄糖淀粉酶、果膠酶，及其混合物。52.根據(jù)前述權(quán)利要求42的方法，其中所說富含配基異黃酮的物質(zhì)是在pH約3-約6.5且溫度約0℃-約35℃下從所說大豆廢糖蜜中分離的。53.根據(jù)前述權(quán)利要求52的方法，其中所說富含配基異黃酮的物質(zhì)是在溫度約0℃-約10℃下從所說大豆廢糖蜜中分離的。54.根據(jù)前述權(quán)利要求52的方法，其中所說富含配基異黃酮的物質(zhì)是在pH約為4.5時(shí)從所說大豆廢糖蜜中分離的。55.根據(jù)前述權(quán)利要求52的方法，其中所說富含配基異黃酮的物質(zhì)是通過離心從所說大豆廢糖蜜中分離的。56.根據(jù)前述權(quán)利要求52的方法，其中所說富含配基異黃酮的物質(zhì)是通過過濾從所說大豆廢糖蜜中分離的。57.由前述權(quán)利要求1所述方法生產(chǎn)的富含異黃酮的物質(zhì)。58.由前述權(quán)利要求14所述方法生產(chǎn)的富含異黃酮糖苷的物質(zhì)。59.由前述權(quán)利要求21所述方法生產(chǎn)的富含配基異黃酮的物質(zhì)。60.由前述權(quán)利要求24所述方法生產(chǎn)的富含異黃酮糖苷的物質(zhì)。61.由前述權(quán)利要求39所述方法生產(chǎn)的富含配基異黃酮的物質(zhì)。62.由前述權(quán)利要求42所述方法生產(chǎn)的富含配基異黃酮的物質(zhì)。63.從大豆廢糖蜜中分離的富含異黃酮的物質(zhì)。64.從大豆廢糖蜜中分離的富含異黃酮糖苷的物質(zhì)。65.從大豆廢糖蜜中分離的富含配基異黃酮的物質(zhì)。全文摘要本發(fā)明公開了從大豆廢糖蜜中回收異黃酮及其衍生物的方法。第一個(gè)實(shí)施方案中,公開了一種沒有任何明顯將異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成其它形式的回收異黃酮的方法。第二個(gè)實(shí)施方案中,公開了一種方法,其中于回收它們之前在大豆原料中將異黃酮共軛物轉(zhuǎn)化成糖苷。第三個(gè)實(shí)施方案中,公開了一種方法,其中于回收它們之前在大豆原料中將異黃酮轉(zhuǎn)化成配基形式。本發(fā)明還公開了從大豆廢糖蜜中得到的富含各種異黃酮的產(chǎn)品。文檔編號(hào)A23J3/16GK1174839SQ9711499公開日1998年3月4日申請(qǐng)日期1997年6月11日優(yōu)先權(quán)日1996年6月11日發(fā)明者D·H·韋格爾,B·A·布賴恩申請(qǐng)人:蛋白質(zhì)技術(shù)國際公司