專利名稱：食用菌種更新換代的方法
技術領域：
本發明是食用菌種更新換代的方法。
在食用菌栽培中普遍存在一個問題，就是在同樣的栽培條件下，新培育出的一種優良菌種在開始使用的1～2年內能保持原來的優良特性，如產量高，抗雜能力強，子實體肥厚等，但再繼續使用其優良特性變得越來越差，這究競是什么原因呢？福建三明真菌研究所的黃年來同志針對這一生產中存在的問題指出了菌種的老化問題，并發表一篇《菌種的退化，老化和復壯》文章，刊登在《食用菌》雜志1984年第三期上，在談到菌種老化的問題時他指出“大家都知道，食用菌的生活史是從擔孢子萌發開始的，經菌絲產生子實體，再產生下一代的孢子。因此，孢子最年輕，菌絲比孢子老，子實體比菌絲老。所以用擔孢子分離得到的雙核菌絲和用組織分離得到的雙核菌絲，在發育程序上有差別。播種后出菇的快慢是有差別的，菌絲隨著菌齡的增加，新陳代謝機能逐漸降低，失去自控能力，最后趨于滅亡。這種衰老的過程是一種不可拒絕的自然規律”。也就是說上述情況的發生是由菌種老化而引起的，在生產中不能反復地進行無性繁殖，即采用組織分離法，從組織到菌絲，到長出子實體，如果反復地進行無性繁殖，菌種就會老化，生命力減弱，從而導致菌種的優良特性變差，即使菌種保存的很好，也存在老化問題，因為老化是不可拒絕的自然規律，保存得好，只能延緩老化，而不能阻止老化，因此，保存較好的菌種也不能長期使用，所以，解決菌種老化的問題是一個重要課題，為了解決老化問題黃年來同志又為我們提供了理論指導，他在談到菌種的復壯問題時指出“復壯是指恢復健康，不是恢復年輕。當一個菌種因環境條件不適宜，生長發育不良時，如果給與適宜的環境條件，菌株長得比原來旺盛，但實際上菌齡繼續增加，也就是說只恢復了健康，不能阻止老化。在自然條件下，食用菌種的“復壯”只有靠產生新一代才能實現。”在文章的最后他還指出“總而言之，為了保證菌種的質量，有性繁殖和無性繁殖要交替使用”。有性繁殖就是從擔孢子、經菌絲到長出子實體，再產生擔孢子，完成一個生活史，雖然黃年來同志提出了菌種的“復壯”只有靠產生新的一代來實現，但目前本領域的技術人員認為已有技術很難實現，因為一提到有性繁殖，他們就會想到生物的變異性，象食用菌一類的低等植物變異性更大，一種食用菌的優良菌株通過有性生殖由孢子萌發成菌絲后，有相當一部分已發生變異，在發生變異的菌株中，有的可能比原菌種的優良特性差，有的可能比原菌種的優良特性好，當然，根據生物的遺傳性，也有相對沒產生變異的，因此，采用孢子分離而萌發的菌絲中除去沒產生變異的還可能存在許多不同株系的菌絲，也有不同種的菌絲，又由于在已有技術中，鑒定菌種的優良指標和鑒別菌種品種只能靠栽培實驗來實現，所以，人們認為在有性生殖產生的后代中用栽培實驗去篩選與原菌種的優良特性一致的菌絲真是如大海撈針，其工作量是不可想象的。因此，雖然本領域的技術人員認識到了菌種老化的問題，但總是沒有提出一個很好解決辦法，造成種質資源的大量浪費。
本發明的目的是為了解決食用菌種的老化問題，提供一種簡單、易行的菌種更新換代的方法。
本發明的解決方案如下先用多孢分離法采收孢子并萌發菌絲，或者將孢子直接收集到固體培養基上，并萌發菌絲直到長出子實體，實驗表明，食用菌中不同種或不同株系的菌絲相互接觸，便產生拮抗，即出現拮抗線或空白帶，而同一株系的菌絲接觸不產生拮抗，根據這一實驗原理，將已萌發的各個菌落的菌絲或各個子實體組織塊分別轉接進行純化培養，然后利用拮抗線切割提純，初步篩選出生命力強和生長快的純菌絲;最后再采用兩點接種法把已提純的菌絲和原菌種兩兩進行拮抗實驗，發生拮抗現象的是變異菌絲，未發生拮抗現象的是非變異菌絲，這樣，就在孢子分離而萌發的菌絲中找出了與原菌種一樣的非變異菌絲。
本發明僅利用拮抗現象就從孢子分離的菌絲中篩選出了非變異菌絲，實現了菌種的更新換代，而且方法簡單，易行、經濟。
下面根據實施例詳細說明。
步驟1，用常規的多孢分離法，如孢子采集器法，鉤懸法，褶上涂抹法等采收孢子，并在黑暗適溫處培養，使其萌發菌絲，或者將孢子直接收集到木屑或棉殼固體培養基中，讓其萌發直到長出子實體。
步驟2，當孢子萌發的菌落出現時，將各個菌落的菌絲挑取一點依次轉到試管斜面PDA培養基上，一般可轉20～40支試管，若是在上述固體培養基中萌發的菌絲，須待長出子實體后，將各處的子實體組織塊轉接到試管斜面PDA培養基上，被接種的菌絲或組織塊放在試管斜面的尖端，經培養后，生活力強或數量多的菌絲向前延伸至試管底部，而其它長得慢的不同種或不同株系的菌絲由橫截的拮抗線將其限制住，不能再向前生長，然后用接種鏟將有拮抗線的菌絲連同培養基一起除去，剩下試管底部的純菌絲，也有可能在試管中出現一直延伸至試管底部的縱向拮抗線，遇到這種情況應繼續進行分離提純，直到得到純菌絲為止。
步驟3，把每一個試管中的純菌絲，依次轉接到試管斜面PDA培養基的底端，再把用組織分離的原菌種依次接到試管斜面的尖端，置適溫下培養，若是變異菌株，兩端菌絲連接處出現拮抗現象，若是非變異菌株，兩端菌絲長連，無拮抗現象。
上述方法主要是用于食用菌種的更新換代。
權利要求
1.食用菌種更新換代的方法，其特征是a、用多孢分離法采收孢子，并萌發菌絲，或者將孢子直接收集到固體培養基上，并萌發菌絲直到長出子實體。b、將萌發的各個菌落的菌絲或者各個子實體組織塊分別轉接進行純化培養，再利用拮抗線切割提純。c、采用兩點接種法把已提純的菌絲和原菌種兩兩進行拮抗實驗，利用拮抗現象鑒定出非變異菌絲。
全文摘要
本發明是食用菌種更新換代的方法，先用多孢分離法采收孢子，并萌發菌絲，或者將孢子直接收集到固體培養基中并萌發直到長出子實體，然后將萌發的各個菌落的菌絲或者各個子實體組織塊分別轉接進行純化培養，再利用拮抗線切割提純，最后采用兩點接種法把已提純的純菌絲和原菌種兩兩進行拮抗實驗，利用拮抗現象鑒定出非變異菌株，本發明僅利用拮抗現象就從孢子分離的菌絲中篩選出了非變異菌株，實現了菌種的更新換代，而且方法簡單、易行、經濟。
文檔編號C12N1/14GK1056123SQ9010243
公開日1991年11月13日 申請日期1990年4月25日 優先權日1990年4月25日
發明者齊惠琴 申請人:陜西省食用菌專業協會