專利名稱：慶大霉素的發酵生產方法
專利說明 本發明是關于抗生素的發酵生產方法，特別是慶大霉素地發酵生產。
慶大霉素是由絳紅小單孢菌(MICromons Pora PUrPUrea)發酵代謝而產生的一族氨基糖甙抗生素。它主要由慶大霉素C1和C2C1a三種成份組成。美國專利US-3，091，572首次公開了實驗室小量制取慶大霉素的方法“以牛肉膏0.3%、色氨酸鹽0.5%、右旋糖0.1%、可溶性淀粉2.4%、酵母膏0.5%為種子培養基，在37℃、280rPm，培養5天，進而以酵母膏1%、右旋糖1%和碳酸鈣0.1%為發酵培養基，在26℃、培養5天，最后進行化學提純”。此后，經多年的生產實踐逐步形成現有的慶大霉素發酵與化學提純的工業生產工藝，其中發酵生產工藝流程為 砂土孢子→母瓶孢子 (37℃)/(9～10天) 子瓶孢子 (37℃)/(9～10天) 種子(罐)培養 (35℃)/(36小時左右) 繁殖(罐)培養 (34℃)/(25～30小時) 發酵(罐)培養 (32～34℃)/(132小時左右) 放罐→化學提純。
慶大霉素是一種副作用小，殺菌力強的廣譜抗生素，然而現有發酵生產所能合成的慶大產量低，我國的發酵單位一般在1000r/ML左右，無法滿足需求。分析其原因是由于現有發酵生產工藝落后，存在不利于菌種正常生長的因素，主要體現在種子培養、繁殖培養及發酵培養等工序中，表現于如下二個方面 一、種子、繁殖、發酵培養三道工序的基礎培養基組成不合理 1、由于現有的種子、繁殖和發酵培養的培養基中含有魚粉、酵母粉，這兩種成份內含有不利(甚至可抑制)菌種正常生長的某些氨基酸，以至菌種在培養中易老化，生長能力衰退。
2、在發酵培養中，蛋白胨和黃豆餅粉對菌種的發酵代謝起著積極的作用，它們可使慶大霉素合成量增加，同時可促進微生物的И-CH3化，使有效組分增加，但是現有的發酵培養的基礎培養基中這兩種成份含量卻偏少。
二、種子、繁殖、發酵培養三道工序中的工藝不合理 由于現有的工藝采取“單種法”，即將一個種子罐內，經培養后的種子培養液全部移入一個繁殖罐內培養后，再全部移種入一個發酵罐內，經發酵培養至放罐。這種采用一罐移入一罐的工藝流程很容易引起菌種老化，最終將導致如下后果 1、現有的繁殖培養是將種子罐內經種子培養后的種子培養液全部移入裝有繁殖培養基礎培養基的繁殖罐內，進行25～30小時的繁殖培養。經12～14小時的繁殖培養后，培養液內菌種的濃度相應增加，通入的空氣又不斷將水份帶走，培養液不斷濃縮，營養成份不斷減少，溶解氧的速率不斷下降，菌種生長環境不斷惡化，使菌種正常、持續的繁殖和生長受影響。
2、現有發酵培養工藝中，長達132小時左右的發酵培養始終處于一個發酵罐內進行，這樣就出現以下三種不利情況 (1)、當發酵培養至一定的時候(一般為發酵至75～95小時)，培養液中慶大霉素的合成量增加至一定量時即產生“反饋抑制”，使菌種合成慶大霉素受抑制。
(2)、慶大霉素合成中大量的消耗養份，通入的空氣帶走水份，在發酵培養的后期，培養液的濃度、粘度相應增加，物理狀況產生變化，溶解氧的速率不斷下降，至使合成抗生素的酶的活力降低。
(3)、慶大霉素合成的高峰期一般處于發酵培養至36～76小時之間，此后，由于菌齡過大，菌絲衰退化，產抗生素(即慶大霉素)的能力降低。
以上(1)～(3)的情況造成在發酵培養的中、后期，慶大霉素的合成量低，特別是在發酵培養至72小時之后到132小時放罐的這段約60小時的時間內，慶大霉素的合成基本處于停滯。
3、現有工藝中所采用的“單種法”渲蟹⒔團嘌慕又至慷嗌儆梢桓齜敝徹弈諗嘌憾嗌倮淳齠ǎ又至可伲值姆⒀柯實停ㄒ話憬鑫 5～25%)，直接影響菌種的數量，以至產抗生素的量也低。
為此，本發明的任務在于對現有慶大霉素的發酵生產工藝進行改進，以除去影響菌種生長的不利因素，提高慶大霉素發酵生產的產量(即慶大霉素合成量)。并通過其一，設計種子、繁殖、發酵培養的基礎培養基及中間補料培養基;其二，改進并設計種子、繁殖、發酵培養的工藝，實現完成本發明的任務。
在實驗和生產實踐的基礎上，本發明提出如下的技術解決方案 一、本發明所設計的各種培養基配方 根據蛋白胨、黃豆餅粉、酵母粉、魚粉及其它組成在菌種所生長培養中所起的作用，以及各工藝的需要，采取如下措施在各種培養基中不使用魚粉與酵母粉類成份，適當的增加發酵培養的基礎培養基、發酵培養第一、二次中間補料培養基中蛋白胨、黃豆餅粉的用量，適當的增加繁殖培養的基礎培養基中玉米淀粉的用量，并為新設的繁殖培養中間補料工藝設計相應的繁殖培養中間補料培養基。所以，在本發明所設計的種子、繁殖、發酵培養的基礎培養基和繁殖培養中間補料培養基，以及發酵培養的第一、二次中間補料培養基均不含酵母粉類和魚粉成份，這些培養基的組成分別為 1、種子培養(罐)的基礎培養基〔基礎配方Ⅰ〕 玉米淀粉1.0～1.5%、玉米粉1.5～2.0%、 蛋白胨0.2～0.4%、黃豆餅粉1.0～1.5%、 碳酸鈣0.6～0.8%、硝酸鉀0.05%、 氯化鈷1～2r/ML、葡萄糖0.1～0.2% 2、繁殖培養(罐)的基礎培養基〔基礎配方Ⅱ〕 玉米淀粉1.5%、玉米粉1.5%、 蛋白胨0.2～0.4%、黃豆餅粉2.0%、 碳酸鈣0.5～0.8%、氯化鈷8～10r/ML、 葡萄糖0.3～0.5%、 3、發酵培養(罐)的基礎培養基〔基礎配方Ⅲ〕 玉米淀粉5.5～6.5%、玉米粉1.0～1.5%、 蛋白胨0.2～0.5%、黃豆餅粉2.0～5.0%、 碳酸鈣0.50～0.80%、氯化鈷8～12r/ML、 硝酸鉀0.01～0.02%、硫酸銨0.1～0.2%、 4、繁殖培養(罐)的中間補料培養基〔補料配方Ⅰ〕 玉米淀粉2.0～2.5%、玉米粉1.0～1.5%、 蛋白胨0.3～0.4%、黃豆餅粉2.0～3.0%、 碳酸鈣0.60～0.65%、硝酸鉀0.01%、 氯化鈷8～10r/ML、硫酸銨0.10～0.15%、 葡萄糖0.2～0.3%、 二、本發明所設計的發酵生產工藝 發酵生產工藝由前期工藝和后期工藝組成。
1、前期工藝采用以麩皮1.6%、可溶性淀粉0.75%、硫酸鎂0.05%、硝酸鉀0.1%、磷酸二氫鉀0.03%、天門冬素0.002%、氯化鈉0.05%、碳酸鈣0.1%、瓊脂1.6～2.5%為培養基進行砂土孢子、母瓶孢子和子瓶孢子的培養，隨后為后期提供合格的孢子液的現有技術。
2、后期工藝是采取如下措施。
其一，設置一套具有二個或二個以上的種子罐、二個或二個以上的繁殖罐、一個或一個以上的發酵罐和一個或一個以上的中轉罐的設備。這些罐均為采用發凸ひ瞪諧Ｓ玫拇薪漣琛⑼ㄆ爸玫姆⒔陀霉蕖 其二，采取“雙種法”，即將二個繁殖罐內的繁殖培養液接種入同一個發酵罐內，以加大發酵培養的接種量，使一個發酵罐內菌種的發芽率提高(約為30～50%)的方法。
其三，在繁殖培養工序中，于繁殖培養至12～14小時，采取中間補料工藝，以改善菌種的生長環境。
其四，為使菌種能夠向著正常代謝合成抗生素的方向順利發展，在發酵培養工序中采取 (1)、在發酵培養過程中實行四次中間補料工藝，第一次與第二次為補加培養基料，第三次與第四次為補加無菌水。
(2)、對處于發酵中期的發酵液(罐)進行發酵中期強化處理對所設置的中轉罐進行備料消毒后備用，在繁殖罐移種時，將少量的繁殖培養液移入備用的中轉罐內進行38～54小時的培養，隨后適用將中轉罐內的培養液全部移入盛有正處于發酵中期發酵液的中期發酵罐內(該罐已預先進行過發酵后期強化的倒種處理)，實現向該中期發酵罐內補入菌齡相對小而生命力強的菌種。
(3)、對處于發酵后期的發酵液(罐)進行發酵后期強化處理從正處于發酵中期的中期發酵罐內取出少量的發酵培養液倒入相對于該中期發酵罐而言的后期發酵罐內，實現將正處于發酵中期的、菌齡相對小而生命力強的菌種補入以上正處于發酵后期的、菌齡大、生命力弱的菌種中去的發酵后期強化處理工藝 后期工藝所采取的措施詳述如下 (1)、中間補料工藝 繁殖培養工序的中間補料當繁殖罐內菌種繁殖生長至12～14小時，以〔補料配方Ⅰ〕向繁殖罐內補加，其補料量為繁殖罐內培養液體積的30～50%。
發酵培養工序的中間補料第一次中間補料是當發酵培養至12～24小時，以〔以基礎配方Ⅲ〕向發酵罐內補加，補料量為此時發酵罐內培養液體積的40～50%;第二次中間補料是當發酵培養至30～36小時，以〔基礎配方Ⅲ〕向發酵罐內補加，補料量為此時發酵罐內培養液體積的25～35%;第三次中間補料是當發酵培養至56～78小時，向發酵罐內補加消毒后的無菌水，補加量為此時發酵罐內培養液體積的20～30%;第四次中間補料是當發酵培養至80～94小時，向發酵罐內補加消毒后的無菌水，補加量為此時發酵罐內培養液體積的10～20%。
(2)、發酵培養工序中的發酵中期、后期強化處理工藝 發酵中期強化處理首先按〔基礎配方Ⅲ〕對每個中轉罐進行備料消毒后備用。將經過繁殖培養后的一個繁殖罐內的培養液移出15～25%(體積比)至備用的中轉罐內，并將繁殖罐內剩余的培養液全部接種入發酵罐內，分別進行培養。將經38～54小時培養后的中轉罐內的培養液作為此時已發酵運行56～78小時(即此時菌種在發酵罐內培養的時間與在中轉罐內培養的時間相差24小時)的中期發酵罐經倒種后的中期強化補充液補入罐內，補液量為中期發酵罐內培養液體積的10～15%，補入時該中期發酵罐應是已進行過倒出小部份培養液作發酵后期強化處理液的發酵罐。
發酵后期強化處理該工藝是一個倒種過程，將已發酵運行57～69小時的中期發酵罐內的中期發酵液倒種入已發酵運行82～100小時的后期發酵罐內，實行對處于發酵后期的發酵液中補入正處于發酵中期的發酵液的后期強化工藝，倒種量控制在后期發酵罐內發酵液體積的8～12%。
發酵中期-后期強化處理工藝這部份是將上述兩強化處理聯合起來先進行后期強化倒種處理，倒出種后的中期發酵罐內經1～9小時的繼續發酵運行后，再將中轉罐內給培養后的培養液移種入該中期發酵罐內進行中期強化處理。這樣可以一罐連一罐的進行發酵中期、后期強化處理。
本發明由于改進了慶大霉素的發酵生產的各種培養基和生產工藝，克服了現有技術所存在的問題，使菌種在全部的培養過程中均處于良好的環境，使得菌種產抗活力強，能夠旺盛的合成抗生素(即慶大霉素)。改變了過去在長達60小時左右的發酵后期慶大霉素的合成處于停滯的情況。采用本發明的方法，具有很高的效益，慶大霉素的發酵單位和發酵指數完全超過我國醫藥總局頒布的“七·五”慶大霉素攻關指標發酵單位1700r/ML、發酵指數0.090總億/噸·小時的指標，最高已達發酵單位2385r/ML、發酵指數0.1090總億/噸·小時以上。
圖1是本發明的工藝流程示意圖，圖中“→”所指為工藝流程的方向。
圖2是本發明實施例工藝圖(包括發酵中、后期強化處理工藝過程)。圖中〔102-1〕、〔102-2〕、〔103-1〕、〔103-2〕〔104-1〕、〔104-2〕等為種子罐，〔202-1〕、〔202-2〕、〔203-1〕、〔203-2〕、〔204-1〕、〔204-2〕等為繁殖罐，〔301〕、〔302〕、〔303〕、〔304〕、〔305〕、等為發酵罐，〔401〕、〔402〕、〔403〕、〔404〕、等為中轉罐。圖中“→”表示主要接種(或移種)及放罐的方向，圖中“→”表示少量移種入中轉罐培養后再送入中期發酵罐進行中期強化處理的方向，“·-·-·→”表示從中期發酵罐內取少量中期發酵液倒種入后期發酵罐內進行后期強化處理的方向。
實施例1 取2個1000立升的種子罐〔103-1〕、〔103-2〕進行種子培養，采用含玉米淀粉1.0%、玉米粉1.5%、蛋白胨0.2%、黃豆餅粉1.0%、碳酸鈣0.6%、硝酸鉀0.05%、氯化鈷1r/ML、葡萄糖0.1%的種子培養的基礎培養基，每個種子罐分別投入料300立升，每個種子罐的接菌量為360ML的孢子懸浮液(含約孢子量數2760～3660億個)，培養溫度33℃，通氣量1∶2.4～2.8，攪拌速度280轉/分。培養28小時后，于種子罐〔103-1〕、〔103-2〕得培養液各250立升。將兩種子罐〔103-1、〕〔103-2〕內的培養液分別全部接種入繁殖罐〔203-1〕、〔203-2〕內，兩個繁殖罐〔203-1〕、〔203-2〕均采用含玉米淀粉1.5%、玉米粉1.5%、蛋白胨0.2%、黃豆餅粉2.0%、碳酸鈣0.5%、氯化鈷8r/ML、葡萄糖0.3%的繁殖培養的基礎培養基，每個繁殖罐均為5000立升的工業發酵罐設備，并分別投料為2000立升。繁殖培養溫度34℃，通氣量1∶2.0～2.5，攪拌速度200轉/分。繁殖培養至14小時，采用含玉米淀粉2.5%、玉米粉1.0%、蛋白胨0.3%、黃豆餅粉2.0%、碳酸鈣0.6%、硝酸鉀0.05%、氯化鈷8r/ML、硫酸銨0.10%、葡萄糖0.3%的繁殖培養的中間補料培養基，兩繁殖罐〔203-1〕、〔203-2〕分別補料800立升和900立升。繼續繁殖培養至25小時，將繁殖罐〔203-1〕內的培養液取出500立升接種入中轉罐〔402〕中培養備用，隨后將罐〔203-1〕內剩余的2000立升的培養液與繁殖罐〔203-2〕內2600立升的培養液一同全部移種入發酵罐〔303〕內，發酵罐〔303〕采用含玉米淀粉5.5%、玉米粉1.0%、蛋白胨0.4%、黃豆餅粉3.5%、碳酸鈣0.65%、氯化鈷10r/ML、硝酸鉀0.01%、硫酸銨0.1%的發酵培養的基礎培養基，培養基投料7000立升，采用20000立升的工業發酵罐設備。發酵培養溫度33～35℃，通氣量1∶1.5～1.8攪拌速度140轉/分。當發酵培養至16小時，進行第一次中間補料，采用本例以上的發酵基礎培養基為補料培養基，補料量為4000立升。當發酵培養至35小時，進行第二次中間補料，并采用與第一次中間補料相同的培養基，補料量為3000立升。當發酵培養至60小時，補加2000立升無菌水。當發酵培養至70小時，壓出2000立升的培養液倒種入后期(相對于發酵酵〔303〕而言)發酵〔302〕，實現對發酵罐〔302〕進行后期強化處理。當發酵培養至71小時，將中轉罐〔403〕中經培養后的全部約2000立升的培養液移種入本發酵罐〔303〕內，實現對本罐〔303〕的中期強化處理。當發酵運行至85小時，補加無菌水1500立升。繼續培養至97小時，將中期(相對本罐〔303〕而言)發酵罐〔304〕內取出2000立升培養液倒種入本發酵罐〔303〕，實現對本發酵罐的后期強化處理。隨后繼續發酵培養至131小時，進行放罐送往化學提純，測得慶大霉素的發酵單位為2092r/ML，發酵指數為0.1072總億/噸·小時，全部培養液為13000立升。
實施例2 取2個1000立升的工業發酵罐作種子罐〔102-1〕、〔102-2〕進行種子培養，兩種子罐〔102-1〕、〔102-2〕經種子培養均得約有250立升的培養液分別全部送入繁殖罐〔202-1〕、〔202-2〕內進行繁殖培養，當繁殖培養至14小時，進行補料，每罐均補料800立升，繼續繁殖培養至29小時，兩罐都得約2400立升的培養液，將繁殖罐〔202-1〕內取出400立升培養液送入中轉罐〔401〕內培養備用，將繁殖罐〔202-1〕剩余的培養液與繁殖罐〔202-1〕內的2400立升培養液一同送入發酵罐〔302〕內進行發酵培養。當發酵培養至20小時進行第一次中間補料，補料量為4000立升。當發酵培養至34小時進行第二次中間補料，補料量為3000立升。當發酵培養至68小時，壓出約2000立升的培養液送往發酵罐〔301〕。當發酵培養至69小時，將中轉罐〔402〕經培養后全部約2000立升的培養液補入本發酵罐〔302〕內。繼續發酵培養至70小時，補加1000立升的無菌水。當發酵培養至92小時，將發酵罐〔303〕中的培養液取出2000立升補入本發酵罐〔302〕內。當發酵培養至93小時，補加2700立升無菌水。繼續發酵培養至133小時，放罐送往化學提純，此時得發酵培養液14100立升，測含慶大霉素發酵單位為1785r/ML，發酵指數為0.0934總億/噸·小時。
實施例3 將在種子罐〔104-1〕、〔104-2〕中經種子培養后的培養液分別全部送入兩個繁殖罐〔204-1〕、〔204-2〕內進行繁殖培養，當繁殖培養至14小時，于兩繁殖罐〔204-1〕、〔204-2〕分別補料各700立升。繼續繁殖培養至26小時，將繁殖罐〔204-1〕內的培養液取出500立升送入中轉罐〔403〕內進行培養后備用，再將剩余的約1900立升的培養液同繁殖罐〔204-2〕內的2400立升的培養液送入發酵罐〔304〕內進行發酵培養。當發酵培養至12小時進行第一次中間補料，補料量為4000立升。當發酵培養至35小時進行第二次中間補料，補料量為3000立升。當發酵培養至59小時，補加1500立升無菌水。當發酵培養至62小時，壓出2000立升的培養液送入發酵罐〔303〕。發酵培養至63小時，將中轉罐〔404〕內約2000立升的培養液全部移入本發酵罐〔304〕內，發酵培養至82小時，從發酵罐〔305〕內取出約2000立升的培養液送入本發酵罐〔304〕內。發酵培養至83小時，補加2000立升無菌水。繼續培養至129小時，得約14000立升培養液，放罐送往化學提純。測得培養液中含慶大霉素的發酵單位1827r/ML，發酵指數0.1090總億/噸·小時。
注以上“實施例2”和“實施例3”中未說明部份均按“實施例1”實施。中轉罐〔401〕、〔402〕、〔403〕、〔404〕等全部是采用“實施例1”中的發酵培養的基礎培養基，投料量均為2000立升，其中中轉罐〔402〕培養49小時，中轉罐〔403〕培養47小時，中轉罐〔404〕培養40小時，中轉罐〔401〕培養45小時。各實施例中各階段培養過程中數據見“表1～表3”。
權利要求
1、一種利用絳紅小單孢菌經，砂土孢子、母瓶孢子、子瓶孢子、種子、繁殖和發酵等培養工藝合成慶大霉素的方法，本發明的特征在于
1、1、采取將二個繁殖罐的繁殖培養液接種入同一個發酵罐內進行發酵培養，以加大發酵培養的接種量的方法，
1、2、在繁殖培養液接種入發酵罐的同時，將其中一個繁殖罐內約15～25%的繁殖培養液移種入備用的中轉罐內進行38～54小時的培養后，適時再將該中轉罐內全部的培養液移種入已經進行過發酵后期強化處理倒過種的并且罐內還盛有正處于發酵培養中期的中期發酵罐內，實現向該中期發酵罐內補入菌齡相對小、生命力強的菌種的發酵中期強化處理，
1、3、從正處于發酵中期的中期發酵罐內取出少量的中期發酵培養液倒種入相對于該中期發酵罐而言的后期發酵罐內，倒種量應控制在后期發酵罐內發酵培養液體積的8～12%，實現將正處于發酵中的菌齡相對小、生命力強的菌種補入正處于發酵后期、菌齡小、生命力弱的菌種中去的發酵后期強化處理，
1、4、于繁殖培養至12～14小時，按[補料配方I]進行繁殖培養工序的中間補料，補料量為繁殖罐內培養液體積的30～50%，
1、5、在發酵培養工序中設計了四次中間補料工藝在發酵12～24小時進行第一次補料，補料40～50%，于發酵30～36小時進行第二次補料，補料25～35%，于發酵56～78小時進行第三次補料，補加無菌水20～30%，于發酵80～94小時進行第四次補料，補加無菌水10～20%，第一、第二次補料為采用[基礎配方Ⅲ]，四次補料的量為當時發酵罐內培養液體積比，
1、6、為實現本發明工藝相應的設置一套具有二個或二個以上的種子罐、二個或二個以上的繁殖罐、一個或一個以上的發酵罐和一個或一個以上的中轉罐的設備，這些罐均采用發酵工業生產中常用的帶有攪拌、通氣裝置的發酵用罐，
1、7、設計了種子、繁殖、發酵培養的基礎培養基，與繁殖培養中的中間補料和發酵培養中的第一次、第二次中間補料培養基，這些培養基均為不含酵母粉、魚粉成份，所設計的各種培養基分別為
種子培養的基礎培養基玉米淀粉1.0～1.5%、玉米粉1.5～2.0%、蛋白胨0.2～0.4%、黃豆餅粉1.0～1.5%、碳酸鈣0.6～0.8%、硝酸鉀0.05%、氯化鈷1～2r/ML、葡萄糖0.1～0.2%。
繁殖培養的基礎培養基玉米淀粉1.5%、玉米粉1.5%、蛋白胨0.2～0.4%、黃豆餅粉2.0%、碳酸鈣0.5～0.8%氯化鈷8～10r/ML、葡萄糖0.3～0.5%。
發酵培養的基礎培養基及第一次、第二次中間補料培養基玉米淀粉5.5～6.5%、玉米粉1.0～1.5%、蛋白胨0.2～0.5%、黃豆餅粉2.0～5.0%、碳酸鈣0.50～0.80%、氯化鈷8～12r/ML、硝酸鉀0.01～0.02%、硫酸銨0.1～0.2%。
繁殖培養的中間補料培養基玉米淀粉2.0～2.5%、玉米粉1.0～1.5%、蛋白胨0.3～0.4%、黃豆餅粉2.0～3.0%、碳酸鈣0.60～0.65%、硝酸鉀0.01%、氯化鈷8～10r/ML、硫酸銨0.10～0.15%、葡萄糖0.2～0.3%。
2、根據權利要求1所述的種子培養的基礎培養基，其特征在于含有玉米淀粉1.0%、玉米粉1.5%、蛋白胨0.2%、黃豆餅粉1.0%、碳酸鈣0.6%、硝酸鉀0.05%、氯化鈷1r/ML、葡萄糖0.1%。
3、根據權利要求1所述的繁殖培養的基礎培養基，其特征在于含有玉米淀粉1.0%、玉米粉1.5%、蛋白胨0.2%、黃豆餅粉2.0%、碳酸鈣0.5%、氯化鈷8r/ML、葡萄糖0.3%。
4、根據權利要求1所述的繁殖培養的中間補料培養基，其特征在于含有玉米淀粉2.5%、玉米粉1.0%、蛋白胨0.3%、黃豆餅粉2.0%、碳酸鈣0.6%、碳酸鉀0.01%、氯化鈷8r/ML、硫酸銨0.10%、葡萄糖0.3%。
5、根據權利要求1所述的發酵培養的基礎培養基及第一次和第二次中間補料培養基，其特征在于均含有玉米淀粉5.5%、玉米粉1.0%、蛋白胨0.4%、黃豆餅粉3.5%、碳酸鈣0.65%、氯化鈷10r/ML、硝酸鉀0.01%、硫酸銨0.1%。
全文摘要
一種利用絳紅小單孢菌合成慶大霉素的方法。采用不含酵母粉類和魚粉的培養基設置繁殖培養的中間補料工藝，和發酵培養中二次補加培養基料、二次補水料的四次中間補料工藝。通過設置中轉罐，實現向處于發酵中期的培養液內補入菌齡小、生命力強的菌種液。通過倒種的方式向處于發酵后期的培養液內補入菌齡小、生命力強的菌種液。以“雙種法”加大發酵培養的接種量。本發明的方法可以提高慶大霉素的合成量，其發酵單位最高可達2385r/ML。
文檔編號C12N15/82GK1037924SQ8910206
公開日1989年12月13日 申請日期1989年4月10日 優先權日1988年4月11日
發明者沈棨 申請人:福州抗菌素廠