農用新穎物質及其制備方法

專利名稱：農用新穎物質及其制備方法
技術領域：
本發明涉及被定義為“F-0368”的一種新穎的物質。更具體地說，本發明涉及可用作農用殺菌劑的這類“F-0368”物質;它的制備方法;含有該物質的農用化學組合物;作物病害和蔬菜病害的預防劑;農用殺菌劑;農用物料;采用該殺菌劑預防農業中疾病的方法;采用該殺菌劑的作物培育方法;和可產生F-0368物質的微生物。
作為對于稻瘟病的預防劑來說，通常已知的有iso-protiolane、2-苯并[C]呋喃酮、IBP、羧苯磺唑(probenazole)，EDDP等;作為對于細菌性白葉枯病的預防劑來說，已知的有吩嗪氧化物、羧苯磺唑(probenazole)、有機鎳化合物等。
因為當低劑量時，上述的常用的化學物質不能顯示出足夠的活性，至今已進行了采用相對較高劑量的這種化學物質的實驗，發現很可能會對環境如空氣、水、土壤等引起污染，且這種化學物質有一些對人體和動物是有害的。
因此，本發明的目的是提供一種低劑量下可顯示足夠活性的新的物質，該物質對于各種植物病害，尤其如稻瘟病和細菌性白葉枯病具有良好的預防效應。此外，本發明的目的還在于提供制備這種新物質的方法，含有該新物質的農用化學組合物、采用這種物質作為作物病害和蔬菜病害預防劑、采用這種物質的農用殺菌劑，含有這種物質的農用物料，采用這種殺菌劑來預防農業上的疾病的方法，采用這種殺菌劑來栽培作物的方法和提供可產生這種新的物質的微生物。
為了尋找有用的農用化學物質，本發明者通過從不同的土壤中分離出各種微生物，再分離出由微生物產生的物質，并鑒別所獲得的物質而進行活性的研究。結果，他們發現，被定義為“F-0368”的放線菌株屬于如從日本東京練馬區的蔬菜田里分離出來的北里孢菌(Kitasatosporia)屬，它能在培養基中積聚一種物質，它對于稻瘟病和細菌性白葉枯病具有良好預防效應。根據該發現，本發明者分離了由微生物所產生的物質，采用已知的多種物質比較了其理化性質，結果，他們證實了該物質是新的，迄今尚未被鑒定過，因此，完成了本發明。
本發明的新物質“F-0368”具有如下所描述的理化性質。
1)結構式
2)熔點165℃～168℃(采用自動熔點測量裝置“METLER-FPI”進行測定);
在133℃～134℃的溫度范圍內升華(采用熱分析裝置“SHIMADZUTG-30”測量)。
3)對于溶劑的溶解性在甲醇、乙醇和丙酮中易溶，在乙酸乙酯和水中溶解;在氯仿、苯和己烷中不溶解。
4)紫外線吸收光譜;
最大的吸收是在225nm處λMeOHmax(E1%1cm)＝225nm(1070)5)堿性、酸性和中性的區分酸性物質6)顯色反應
陽性高錳酸鉀陰性碘化物(iode)，(水合)茚三酮、三氯化鐵和2，4-二硝基苯肼。
7)元素分析CHO測定值(%)50.634.2545.10[理論值(%)]50.704.2245.078)紅外線吸收光譜采用KBr方法測定紅外線光譜3000，2740，2640，2520，1730，1670，1450，1430，1380，1360，1210，1150，1110，1020，890，880，760，710(cm)9)核磁共振光譜(60MHz)δ(ppm)測定系在重甲醇d6-DMSO中進行2.05(3H，t)，4.85(2H，q)，11.33(1H，S)從上述的理化性質來看，本發明的“F-0368”物質是一種酸性物質是明顯的，因此，它可以被改變為鹽的形式。這種鹽的實例如下堿金屬鹽，如鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽等;堿土金屬鹽，如鈣鹽、鎂鹽等;銨鹽;有機鹽，如三乙基銨鹽等;和鐵、銅、鈷等的復鹽。
本發明的物質“F-0368”可以從屬于能夠產生物質“F-0368”的北里孢菌(Kitasatosporia)屬的菌株中制得。
一個實例中，本發明者從日本東京練馬區的蔬菜田的土壤中分離出了具有下列真菌性能的屬于北里孢菌(Kitasatosporia)屬的放線菌綱，且他們將該菌株或微生物命名為北里孢菌(Kitasatosporia)SP.F-0368。該菌株于1988年1月28日保藏于日本“Ferme-tationResearchInstitute”(發酵研究院)，并得到保藏號“FERM·P-9845”，又于1989年1月26日轉移到國際保藏中心，保藏號為“FERMBP-2259”。
很自然地，上述的北里孢菌(Kitasatosporia)SP·F-0368菌株的天然或人工的突變菌株屬于北里孢菌(Kitasatosporia)屬。因此，對于本發明來說，所有能夠產生本發明的物質“F-0368”的微生物均可使用，并無例外，因此，它們均被包括于本發明所使用的菌株中。
產生本發明的物質“F-0368”的菌株“F-0368”的真菌學性質如下。
(Ⅰ)形態特征本發明中所采用的放線菌“F-0368”菌株具有分支菌絲，它延伸于空氣中的氣生菌絲是片段的，且其末端形成一條5～20個孢子數的長鏈。在淀粉-瓊脂培養基、酵母-麥芽-瓊脂培養基和酵母-淀粉-瓊脂培養基中，菌株非常令人滿意地生長并形成孢子。它的基質菌絲的顏色從黃褐色變為褐色，它的氣生菌絲的顏色從白色變為灰色。用電子顯微鏡觀察發現，從主軸方向來看，已分支的孢子的末端呈直一屈曲的形式，僅在極少的情況下，呈鉤狀。孢子具有光滑的表面或不規則的多皺的表面。它呈大小為3μm～4μm×1.7μm-2.0μm的圓形或橢圓的形狀。未觀察到孢子囊、菌核和菌絲束。
(Ⅱ)培養特性采用不同的培養基來考察菌株“F-0368”的性能。根據E·B·Sharring等人(“InternationalJournalofSystematicBacteriology”Vol.16，313～340頁，1966)所報道的方法進行實驗，此外采用已知的培養基和實驗方法。通過采用“ColorHarmonyManual”(顏色調和手冊)第4版，Container公司的方法，在用氙燈作為標準光光源的情況下，所測得的顏色作為標準顏色圖，如果發現相同的顏色，則首先可定出菌屬的名稱，然后，可用圓括號表示出顏色圖的編號。在下面除非特別注明外，在培養基中菌種的生長均在瓊脂平板培養中，在28℃下培養三周。實驗的詳細結果列于下面表1中。
表1
(Ⅲ)生理特性1)生長的溫度范圍(在麥芽糖-Bennet-瓊脂培養基中，滅菌前pH為7.3，并采用溫度梯度設備，在第二周末的生長情況)合適的溫度19.2℃～36.2℃可生長的溫度14.0℃～42.3℃2)明膠的液化作用(在葡萄糖-蛋白胨-明膠培養基中穿刺培養)20℃陰性27℃假陽性3)牛奶的凝固和胨化(Difco，脫脂牛奶培養基，依次在28℃和37℃)28℃胨化陽性;凝固陰性37℃胨化陽性;凝固陰性4)黑素的形成酪氨酸-瓊脂培養基陰性形成黑素的培養基陰性蛋白胨-酵母-鐵-瓊脂培養基陰性胰化胨-酵母-液體培養基陰性5)在腺嘌呤、黃嘌呤、次黃嘌呤和酪氨酸中的溶解作用腺嘌呤，黃嘌呤和酪氨酸的溶解作用陰性。
次黃嘌呤陽性6)耐鹽性(在麥芽糖-Bennet-瓊脂培養基+NaCl中，28℃)當培養基(NaCl)濃度2%時觀察到生長(3%時無生長)7)利用碳源的能力(在Difco培養基中，采用碳的瓊脂培養基，28℃，第二周末)陽性D-葡萄糖，L-阿拉伯糖，D-木糖，鼠李糖，水揚苷陰性蔗糖，D-果糖，蜜三糖，i-肌醇，D-甘露糖醇(Ⅳ)化學性質從完整細胞的水解產物中測得有LL-二氨基庚二酸和內消旋-二氨基庚二酸。
從瓊脂板上的氣生菌絲中，測得大量的LL-二氨基庚二酸，而內消旋二氨基庚二酸只測得少量。
作為糖的組分來說，所測得的有半乳糖和甘露糖。主要的甲基萘醌是MK-9(H6·H8)。脂肪酸組成是支鏈型的。胞壁酸中氨基的酰基形式是乙酰基。
如前所描述的，本發明的微生物F-0368的菌株已被鑒定是屬于北里孢菌(Kitasatosporia)屬的，因為它具有真實的分支菌絲;被分段以形成孢子長鏈，而且延伸到空氣中的氣生菌絲在完整的細胞中的氨基酸組合物含有LL-二氨基庚二酸和內消旋二氨基庚二酸，大量的LL-二氨基庚二酸通過分析氣生菌絲中的二氨基庚二酸而檢測;甲萘醌類組分主要是組成MK-9(H6·H8)，因此，該微生物菌株被鑒定是北里孢菌(Kitasatosporia)SP·F-0368。
本發明的物質F-0368可以通過培養屬于北里孢菌(Kitasatosporia)屬的產生F-0368的微生物，如將KitasatosporiaSP·F-0368在含有通常可被微生物所利用的營養物質的培養基中培養，分離和抽提培養液中的物質F-0368而得到。可用于本發明的營養物質的實例是(1)作為碳源的為葡萄糖、甘油、蔗糖、糊精、淀粉等;(ⅱ)作為氮源的為大豆粉、小麥胚芽、蛋白胨、肉抽提物，酵母膏、玉米漿、銨鹽等。除這些物質外，根據需要還可以使用碳酸鈣、氯化鉀、硫酸鎂、磷酸鹽和其它無機鹽。
就培養微生物的方法來說，液體培養方法是合適的。培養條件，如溫度、時間和其它要進行如此的選擇，即使其適宜于所使用的微生物的生長，這樣，物質F-0368的產量就可能變為最大。例如，培養在需氧條件下進行，培養溫度為25℃～35℃，較佳為28℃。當培養在通氣和攪拌下進行92～144小時的時間周期后，物質F-0368的產量達到其最大值。
為了分離和純化在培養液中所產生和積聚的物質F-0368，可對通常所使用的各種方法進行合適的選擇并使用。例如，利用培養物和雜質之間的溶解性不同的方法;利用化合物的官能團不同的方法，如陰離子交換樹脂法，和利用對于硅膠，DIAIONHP-20(日本，MitsubishiKasei公司的產品的商標)的吸附親和力的不同的方法等等，它們可以單獨地，或結合地，或重復地使用。
培養物質的活性部分的確證可以借助硅膠薄層層析法(TLC)進行。
分離和純化物質F-0368的方法的一個實例如下就是說，盡管物質F-0368也存在于菌絲體中，但它主要存在于培養過濾液中;因此，首先將助濾劑加至發酵培養液中通過過濾或離心分離將菌絲體除去，然后用鹽酸將所獲得的培養液調節至酸性(pH值為2)，通過裝有吸附樹脂(DIAIONHP-20)的層析柱除去一些有色物質，由此，洗提出活性物質。
然后，收集該活性部分并通過采用乙酸乙酯，利用其在酸性下可以溶解于有機溶劑中的性能萃取該活性部分。然后，減壓濃縮抽提液，由此而獲得物質F-0368的粗抽提物。
隨后，采用吸附層析法，如硅膠柱層析法使該粗抽提物經歷純化過程，收集活性部分，然后將其濃縮和干燥，結果得到呈游離酸形式的物質F-0368的晶體。
進一步地，可以通過常用的方法將分離得的呈游離酸形式的晶體修飾成為各種鹽的形式。
就其它的方法來看，下面的合成方法也可以產生本發明的物質F-0368。
在溶劑，如鹽酸、硫酸、甲苯磺酸，甲磺酸等的存在下，將由下列通式所表示的3-甲基-4-低級烷氧基羰基-2(5H)-呋喃酮[用S·W·Pelletier等人“Tetrahedron，31，(15)1659”所描述的合成方法制備)溶解于諸如水或水和醇，如甲醇，乙醇等的混合物中，然后將它們在室溫～100℃的溫度下經歷1～24小時的一個時間周期以進行反應，由此可以獲得作為最終產物的物質F-0368。
通式
其中R代表具有1～6個碳原子的直鏈或支鏈的低級烷基在低劑量下，本發明的物質F-0368具有足夠的預防活性，并且對于稻瘟病和細菌性白葉枯病具有極好的預防效應。
這就是說，預防稻瘟病的實驗的結果，本發明的物質F-0368不僅通過被噴灑在葉子的表面上，顯示了這種預防效應，而且，尤其，在土壤處理和噴灑于水表面的實驗中也顯示了很好的預防效應。通過將該物質噴灑于水表面，它顯示出對于細菌性白葉枯病(它是稻類植物的細菌病)具有極好的預防效應。
本發明的物質F-0368的這種高活性不僅可以通過將其噴灑于作物葉子的表面上來體現，而且可以通過土壤處理和將其噴灑于水表面來體現，這表明該物質具有卓越的預防效應。
此外，本發明的物質F-0368所顯示的對于稻瘟病(它是由于真菌而引起的稻類作物病)和對于細菌性白葉枯病(它是由于細菌引起的稻類作物病)的極好的預防效應是一種獨特的現象。
偶然地，當濃度為500μg/ml時，物質F-0368在體外對于細菌、酵母菌和絲狀真菌不顯示其抗微生物的活性。
此外，物質F-0368對于鼠具有低的急性毒性，可以看出它對于人類和動物的傷害很小，因此，它是一種極好的農用滅菌劑。
本發明的農用滅菌劑中含有作為活性組分的物質F-0368和/或它的鹽，可以列出下列的實例(1)其中采用F-0368物質的滅菌劑;(2)用水稀釋物質F-0368，和固體粉末，或其它合適的載體，根據需要，可加入輔料，如擴展劑等而獲得的滅菌劑;(3)通過農用化學物質的生產所通常采納的方法，其中將物質與各種液體或固體載體相混合，如果需要的話，再加入輔助劑，如調濕劑，擴展劑，分散劑，乳化劑，粘結劑等而制得的各種滅菌劑配方，如此制得的物質呈水分散性的粉末，液體，水溶性粉末，溶膠，乳濁液，粉末，顆粒，油等形式。根據使用目的，合適地使用這些不同的產品是所需要的。
在制備這些配方時，所用的載體可以是固體或液體。這些合適的固體載體可以列舉出小麥麩皮;大豆粉，纖維質粉末，植物抽提后的殘余物，樹皮和其它植物載體;和粘土，滑石，高嶺土，膨潤土，中國陶土，碳酸鈣，硅藻土，二氧化硅;合成硅酸鈣，和其它無機物質。合適的液體載體可以列舉出水;脂族烴，如輕石油，煤油，礦物油等;芳族烴，如苯，甲苯，二甲苯，甲基萘等;氯代烴，如氯仿，二氯乙烷等;醇，如甲醇，乙醇，異丙醇，正丁醇等;酮，如丙酮，甲乙酮，環己酮等;含氮有機溶劑，如乙醇胺，二甲基甲酰胺等，和其它種種。
從改善配方的性能或增加生物效應的觀點來看，將不同的輔助劑加入本發明的農用的滅菌劑中是合理的。實例是各種陰離子或離子化的表面活性劑;高分子量的化合物，如藻酸鈉，羧甲基纖維素，甲基纖維素，聚乙烯醇，阿拉伯樹膠，明膠，酪蛋白等;紙漿亞硫酸鹽廢液，“DORILESS”(由日本SankyoCo.Ltd制造和銷售的產品的商標)等。
本發明的農用滅菌劑中可能含有各種其他的活性組分，它們不會削弱物質F-0368的預防效應。這些活性組分是，例如殺真菌劑，殺蟲劑，除草劑，殺螨劑，植物生長調節劑，殺線蟲劑，殺菌劑，防護劑，誘引劑等。
本發明還提供了其中含有物質F-0368和/或它的鹽的農用物料。這些農用物料可以通過將物質F-0368和/或它的鹽與肥料，培養稻類作物種子系的土壤，園藝中使用的培養土，營養液培養的肥料等相混合或拌和而獲得。
為了用本發明的物質F-0368來滅除農業中的致病真菌，可以將物質F-0368摻入至上述的農用滅菌劑和農用物料中，由此可殺死農業上的致病真菌。
為了采用物質F-0368防止農業病害，可通過在作物的莖和葉上噴灑以使用物質F-0368，或通過土壤灌溉而使植物的根部吸收該物質來進行處理是足夠的。
在物質F-0368被施用于滅除或防止農業病害的情況下，當該物質是被噴灑于葉子表面時，所使用的物質的濃度通常為10ppm～5，000ppm，或較佳地為100ppm～2，000ppm。
在本發明的物質F-0368被施用于育苗箱和水表面的情況下，顆粒狀的該物質的濃度應在0.1%～50%，或較佳地是0.2%～20%的范圍內。
上述顆粒的施用量通常是每一個育苗箱(大小為30×60×3cm，其中約含有51土)30～100g的范圍內，和每10公畝水稻田用3～5Kg。
從上面的解釋中可以明顯地看到，且從下列的較佳實例中變得更明顯，本發明的物質F-0368在低劑量時防止疾病的效應是極好的尤其，它對于稻瘟病和稻類作物的細菌性白葉枯病具有卓越的防止作用，而對于人和動物則很少毒性。因此，從工業的觀點來看，農用的滅菌劑，農用物料，殺滅農業上的致病真菌和細菌的方法，和防止農業病的方法是很有意義的。另外，物質F-0368可以用屬于北里孢菌(Kitasatosporia)屬的產生F-0368物質的微生物而有效地產生。
下面，應該注意到本發明不受這些實例和實驗的例子的限制，但是，它包括了從前面已經描述了的發現很容易推斷的所有可能的實施例。
在附圖中

圖1表示本發明的物質F-0368的紫外線吸收光譜2表示物質F-0368的紅外吸收光譜。
實施例1(制備物質F-0368的實例)1.北里孢菌(Kitasatosporia)SP·F-0368微生物的培養菌株
種子培養基中采用下列組成1.5%糊精，3%淀粉，1%大豆粉，0.3%肉抽提物，0.3%多元蛋白胨，0.3%酵母膏，0.3%碳酸鈣，和0.1%氯化鈉(滅菌以前培養基的pH值為7.0)。
將各自均為70ml的上述種子培養基分別放入多個錐形瓶中，每個瓶子的容積均是500ml。然后，將北里孢菌(Kitasatosporia)SP·F-0368微生物菌株接入每一個這種錐形瓶中，然后在28℃下搖瓶培養72小時。
然后，將1l這種種子培養物轉移至其中含有1001生產培養基的罐中。該生產培養基含有1.5%精精，3%淀粉，1%大豆粉，0.3%內抽提物，0.3%多元蛋白胨，0.3%酵母膏，0.3%碳酸鈣，0.1%氯化鈉，和0.2%消沫劑CA-123(滅菌前培養基的pH為6.5)。
培養是在通氣和攪拌下，于28℃進行96小時。培養中的通氣量是1001/分。攪拌轉速是200rpm。
2.物質F-0368的分離和收集培養完成后，用鹽酸將培養液(其pH值為8.4)的pH調節至2.5，然后，將作為過濾輔助物的“硅藻土”(Celite)(美國Johns-ManvilleProductsCorp的硅藻土和有關產品的商標)以4%的比例加入到培養液中，用于過濾。接著用50ml乙酸乙酯將約501經過濾的培養液(pH值為2.5)抽提二次，此后，減壓下濃縮乙酸乙酯層，由此可獲得約180g其中含有物質F-0368的干固體物質。將該固體物質進一步溶解于少量乙酸乙酯中，并將其通過預先用乙酸乙酯充入的硅膠柱，從而用乙酸乙酯展開該固體物質，收集活性部分，并用氫氧化鈉將它的pH值調節至8.0后，用11蒸餾水抽提。以這種方法，將經抽提的活性部分完全轉移至蒸餾水中(pH值為8.0)。然后，用鹽酸將蒸餾水的pH值調節至2.0，將干的固體物質置于pH值調節至2.0的層析柱(DIAIONHP-20)中，用該酸性水溶液(pH值為2.0)展開該物質。然后，收集活性部分(約1.51)并用1.51乙酸乙酯將其抽提二次，然后在減壓下濃縮乙酸乙酯層，由此獲得約18g物質F-0368的白色的平面形晶體。
實例2將5ml3N鹽酸水溶液加入150mg(0.96mM)的3-甲基-4-甲氧基羰基-2(5H)呋喃酮中，在80℃-85℃的溫度下攪拌3小時。然后用乙酸乙酯抽提反應產物，在減壓下分餾溶劑。結果獲得油狀的物質。然后將乙酸乙酯-正己烷加入這樣所獲得的油狀物質中，并將其結晶，由此可獲得110mg物質F-0368，產率為80.9%。
下面，將列舉本發明的農用滅菌劑的配方的實例。但是，應該看到對于物質F-0368的添加劑的種類和它們的混合比例不受這些實例的限制，并可在很廣的范圍內變化。
實例3粉末將3份(重量)物質F-0368，2份(重量)滑石和55份(重量)粘土在混合機中均勻地混合，然后，將混合后的物料磨碎而獲得粉末。
實例4水分散性粉末將20份(重量)物質F-0368，5份(重量)調濕劑(烷基苯磺酸型)，2份(重量)白炭和73份(重量)粘土在混合機中均勻地混合，然后，將經混合的物料磨碎而獲得水分散性的粉末。
實例5顆粒將20份(重量)物質F-0368，5份(重量)“TOXANON”(由日本SanyoKaseiK.K.制造并注冊的表面活性劑商標)和90份膨潤土采用濕型擠壓法制成顆粒，然后，干燥并篩分顆粒而獲得所需要的顆粒大小。
下面，將列舉出實驗實例以測試本發明的農用滅菌劑的有效性和急性毒性。
實驗1預防稻瘟病試驗(噴灑在葉子上的試驗)用噴灑槍將上面實例3中所制備的含有物質F-0368的水分散性粉末以15ml/每缽的定額噴灑到栽培于直徑為9cm的植物缽中的稻類作物上(CV.“Nihonbare”，在2-2.5葉子階段)。噴灑一天后，將稻瘟病(即Pyriculariaoryzae)的致病真菌的孢子懸浮液通過噴灑而接種到該稻類作物上，然后將其置放于溫度為24℃-26℃，相對濕度為90%或更高的恒濕箱中。4天后，清點病變的葉子的斑點數目以檢查滅菌劑的預防效應。結果列于下面表2中。但應注意預防效應的值是用下列方程式計算的。
從上面的表2中可以明顯地看出，通過噴灑于葉子上，物質F-0368對于稻瘟病呈現出優良的預防效應。
實驗2預防稻瘟病的試驗(通過施用于育苗箱中的試驗)將50g如上面的實例4中所制備的其中含有1%物質F-0368的顆粒均勻地分散于在尺寸為長30cm，寬60cm，高3cm的育苗箱中生長的稻類作物上(CV.“Nihonbare”，在2.5葉子階段)。顆粒分散后24小時，將幼種系連同土壤(1×1×3cm)一起取出，移植至1/15000公畝的Wagner體中，土壤粘附到種子的根部。移植40天后，將Pyriculariaoryzae(即稻瘟病的致病真菌)的孢子懸浮液通過噴灑而接種于該幼種系上進行接種，然后，將其置于溫度為24℃-26℃，相對濕度為90%或以上的恒濕箱內，保持該狀態。7天后，清點病變斑點數以檢查該顆粒狀滅菌劑的防病效應。以與上面的實驗1相同的方法來計算預防效應的值。
實驗結果列于下面的表3中。
表3
從表3中可以很明顯地看到，通過施用于育苗箱中，物質F-0368比通常的稻瘟病滅菌劑呈現出更好的預防效應。
實驗3稻瘟病預防效應的試驗(施用于水表面上的試驗)將其中分別含有1%，2.5%和5%的根據實例3所制備的物質F-0368的三種顆粒各自從上層水表面均勻地撒播于在1/10000公畝的Wagner缽(充入的水深為3cm)中生長的稻類作物上。
自撒播顆粒7天后，將稻瘟病的致病真菌(Pyriculariaoryzae)的孢子懸浮液噴灑于該稻類作物上進行接種，將其置于溫度維持在24℃-26℃，相對濕度為90%的恒濕箱中。置于箱內7天后，清點該稻類作物的上面兩片葉子的病變葉斑的數目以檢查該顆粒狀滅菌劑的預防效應。然后，也用與上面的實驗1相同的方法來計算預防效應的值。實驗結果列于下面的表4中。
從上面的表4中可以明顯地看到，通過施用于水表面，本發明的物質F-0368對于稻瘟病比通常的滅菌劑具有更好的預防效應。
實驗4稻類白葉枯病的預防效應試驗(施用于水表面的試驗)將其中分別含有2.5%和5%根據上面的實例3所制得的物質F-0368的兩種顆粒各自從上層水表面均勻地撒播于在1/1000公畝的Wagner缽(充入的水的深度為3cm)中生長的稻類作物上(CV.“Nihonbare”，在生長出第五葉子的階段)。
從撒播顆粒起7天后，將稻類白葉枯病的致病菌，稻白葉枯病黃單孢菌(Xathomonasoytzae)的懸浮液通過針刺法接種到葉子上，將這樣接種的稻類作物置于暖房中，在暖房里20天后，測量病變損傷部分的長度以檢查顆粒狀滅菌劑的預防效應。結果列于下面的表5中。然后，用下面的方程式來計算預防效應的值。
從上面的表5中可以明顯地看到，通過施用于水表面，本發明的物質F-0368對于稻類作物的白葉枯病具有極好的預防效應。
實驗5急性毒性采用JCL/ICR種的雄性小鼠(年齡5星期;重量28±1g)，LD50的值(通過向腹膜腔給藥始二周后的死亡率而測定)顯示出化學物質的量約為200mg/kg。
權利要求
1.一種物質F-0368，其特征在于它包含下列結構式
2.一種制備物質F-0368或它的鹽的方法，其特征在于培養屬于北里孢菌(Kitasatosporia)屬的產生物質F-0368的微生物;從經培養的物質中分離和收集所說的物質F-0368。
3.一種制備物質F-0368或它的鹽的方法，其特征在于將由下列分子式所表示的3-甲基-4-低級烷氧基羰基-2(5H)-呋喃酮進行水解反應。
(其中R代表具有1-6個碳原子的直鏈或支鏈的低級烷基)。
4.一種組合物，其特征在于它主要包括物質F-0368或它的鹽，可作為農用化合物的一種稀釋劑和載體或賦形劑。
5.一種作物病害預防劑，其特征在于它主要包括作為活性組分的有效量的物質F-0368或它們的鹽，可作為農用化學物質的一種稀釋劑和載體或賦形劑。
6.如權利要求5所述的作物病害預防劑，其特征在于所述的作物病是稻瘟病和白葉枯病。
7.一種預防作物病害的方法，其特征在于用權利要求5中所提出的預防劑處理作物。
8.一種防止作物病害的農用滅菌劑，其特征在于它主要包括作為活性組分的有效量的物質F-0368或它們的鹽，可作為農用化學物質的稀釋劑或載體或賦形劑。
9.如權利要求8所述的農用滅菌劑，其特征在于所述的作物病是稻瘟病和細菌性白葉枯病。
10.一種農用物料，其特征在于它含有物質F-0368或它們的鹽。
11.一種培養作物的方法，其特征在于用權利要求10中所提出的農用物料來栽培作物。
12.一種產生物質F-0368的微生物北里孢菌(Kitasatospori SP.F-0368;FERM BP-2259)。
全文摘要
本發明揭示了一種新的物質F-0368，或它的鹽，制備物質F-0368或它的鹽的方法，一種主要包括物質F-0368或它的鹽，可作為農用物質的稀釋劑和載體或賦形劑，一種對于作物病，如稻瘟病和細菌性白葉枯病的預防劑，一種用預防劑處理作物來預防植物病的方法，一種防止諸如稻瘟病和細菌性白葉枯病的作物病害的農用滅菌劑，其中含有物質F-0368或它的鹽的農用物料，一種用該農用物料來栽培植物的方法和產生物質F-0368的微生物。
文檔編號C12R1/01GK1036955SQ89101378
公開日1989年11月8日 申請日期1989年3月15日 優先權日1988年3月11日
發明者田口龍祐, 菅原日出男, 齊藤英夫, 宮崎幸雄, ∴田五郎, 水野卓, 古市昭也, 野村昌秀, 浜崎泰彥, 杉山待子, 中村克広 申請人:科研制藥株式會社