本發明屬于保健品領域,具體涉及一種增強免疫力的保健品組合物。
背景技術:
中醫學中免疫一詞出現較晚,最早見于19世紀《免疫類方》。從其本意來看,免疫就是要免除疾病危害,保障人體的健康。由此看來,祖國醫學對免疫的內涵界定和現代醫學早期對免疫的定義在精神實質上是基本一致的。這種功能體現在免疫防御、免疫穩定、免疫監視三個方面。
在免疫預防方面,主要體現在中醫理論上的整體觀和機體的協調統一。整體觀認為人體是一個整體,人體與自然也是一個整體,自然的晝夜交替、四季變化及環境的改變,都會影響人體的生理功能活動,通過人體本身的自我調節,以適應自然界的變化,實現人與自然界的對立統一,故提倡在養生保健方面要順四時變化,主動維持人體與外界環境的平衡,從而保持人體本身的內在協調平衡。若外界環境變化激烈,超越了人體的適應能力或適應能力下降,則會影響人體內部的平衡失調而發病。現代醫學也認為人體具有一個完整的免疫系統,有多種免疫活性細胞以其多種淋巴因子與抗體,在神經與內分泌激素調節下維持人的生理平衡。形成神經-內分泌-免疫調節網絡系統,發揮著防御與抵御疾病的作用。
在免疫穩定方面,中醫的陰陽平衡理論、五臟相關學說、五行制化理論等都與免疫穩定密切相關。正常情況下的陰陽處于一定“度”下的動態平衡,一旦“度”失衡,便會導致疾病的發生。正所謂“陽勝則陰病”,“陰勝則陽病”,“陽勝則熱”,“陰勝則寒”。陰陽學說的精髓在于“允執兩端而用其中””,追求“陰平陽秘”和“以平為期”;中醫學將人體看成是一個以五臟為中心的各臟腑相互影響與調控的有機整體,如陽明腑實而見胃不受納的不思飲食,或見肺氣上逆的咳嗽、喘息;心火下達,腎水上濟,則水火既濟,反之則心腎不交;又“五臟皆能令人咳,非獨肺也”;“見肝之病,知肝傳脾,當先實脾”等等。可見祖國醫學從病因病機、診斷及治療等各方面都顯示了五臟相關和五行生克制化的動態穩定。五行之間“亢則害,承乃制”。免疫穩定功能能清除損傷、衰老、死亡的細胞,并有效地進行免疫調節作用,如果穩定功能失調,則容易出現自身免疫疾病。
在免疫監視方面,主要體現在針對腫瘤發生的認識上,中醫學認為,腫瘤的形成是機體“正氣不足”,而后“邪氣踞之”所致。當機體受到某些因素的影響或外邪的侵襲,致臟腑、經絡等生理活動發生異常,氣血陰陽平衡協調關系受到破壞時,人體便會患病。完善的免疫監視功能是建立在健全的免疫系統功能(包括非特異性和特異性免疫)基礎之上,如免疫監視失司,則腫瘤細胞免遭監視而逃逸,如免疫缺陷患者或大量使用免疫抑制劑者,因免疫監視受損,常易發生腫瘤。
免疫系統的免疫防御、免疫穩定和免疫監視功能也處于一定的動態平衡之中,適度為宜。并且機體的免疫功能受限于體內外多種因素的影響,維持機體免疫功能的動態平衡,才能保持人體的健康。
現代社會,由于競爭激烈,壓力增大,生活節奏越來越快,對于飲食,人們往往顧不上合理搭配,均衡營養,造成免疫力下降。在面臨外界病毒流行的時期,此類人群最易受到感染。體弱多病人群的一大特征就是免疫力低,工作壓力大的上班族尤其明顯。這種生活狀態主要與學習、工作過于疲勞、精神壓力、職業應激等誘因有關。通常從事研究工作的腦力勞動者、商人等最易進入這種狀態。現代社會激烈競爭、快節奏、高壓力,加重了人們的身心負擔;環境污染、不良的生活習慣和飲酒習慣等,例如暴飲暴食、嗜煙酗酒、食用三高食品,導致缺乏維生素和微量元素等,從另一方面降低了人們的身體素質,這些都是導致亞健康狀態出現的誘因。
免疫增強劑也稱免疫佐劑,是一類通過非特異性途徑提高機體對抗原或微生物特異性反應的物質。近年來,在國內外學者為尋找特性確定、高效、穩定、無毒的理想免疫增強劑的努力下,免疫增強劑的研究領域不斷拓寬,新成員、新劑型不斷發現,機理探討不斷深入,臨床應用范圍越來越廣。
免疫增強劑按原料分類如下:
a礦物質類,硒、鋅等;
b中草藥類,當歸、人參、靈芝、蟲草、茯苓、枸杞等及其多糖、甙類和揮發成分;
c免疫佐劑類,蜂膠等;
d微生物制劑類,卡介苗、霍亂毒素B亞單位等;
e維生素類,維生素A、維生素E、維生素D、維生素C等;
f氨基酸類,精氨酸、亮氨酸等;
g核酸制劑類,多(聚)核苷酸、免疫核糖核酸等。
硒是影響機體免疫功能的重要因素之一,可以從多方面影響機體的免疫功能。對硒在免疫功能中的作用的認識,主要是通過正反兩個方面來著手的:觀察硒缺乏動物免疫功能的變化;給硒缺乏動物補硒,觀察動物免疫功能的變化。研究發現,硒對免疫功能的影響非常廣泛復雜,雖然一些報道結果尚有差異,但綜合有關資料,硒對免疫系統的作用包括:硒參與細胞免疫過程:硒能夠影響淋巴細胞的增殖和分化,可以促進淋巴細胞分泌淋巴因子(如干擾素,白介素等):硒能夠增強淋巴細胞的細胞毒作用;硒也能促進特異性體液免疫功能,使體內抗體水平升高:硒改善非特異性免疫作用:動物實驗研究和人體流行病學調查還發現,硒能在一定程度上提高機體對寄生蟲和傳染病病原體的抵抗能力。
因此,在較多的保健品中都會加入富含硒的原料,比如有機硒:富硒酵母、硒化卡拉膠、硒蛋白、富硒食用菌粉和甲基硒半胱氨酸等等,還有部分無機硒也作為硒源補充劑,比如硒酸鈉和亞硒酸鈉。亞硒酸鈉為無色結晶、易溶于水,是目前用途最廣泛的硒強化劑,常作為硒源補充人體硒。雖然亞硒酸鈉作為硒源補充劑,成本低易制備,但是對人體有毒副反應和胃腸刺激,而且機體對硒的吸收利用度低。從而有較多產品采用有機硒,尤其優選富硒酵母,其避免了亞硒酸鈉的毒副反應和胃腸刺激,但是同于其他生物原料,富硒酵母同樣存在成本高的問題。
技術實現要素:
為解決上述技術問題,本發明的目的在于提供一種增強免疫力的保健品組合物,該組合物以亞硒酸鈉為硒源,成本低,補硒效果好,提高免疫力效果確切。
本發明的上述目的是通過以下技術方案實現的:
一種增強免疫力的保健品組合物,該組合物包括靈芝提取物100-150重量份、蝙蝠蛾擬青霉菌粉100-150重量份、亞硒酸鈉0.01-0.1重量份,所述組合物還包括L-谷氨酰胺50-150重量份。
靈芝提取物是靈芝熱水提取物,靈芝(Ganoderma lucidum)是一類大型真菌,屬于擔子菌綱、多孔菌屬、靈芝科。近年來的研究表明,靈芝的主要化學成分有多糖類、核苷類、呋哺類、甾醇、生物堿類及氨基酸類。
蝙蝠蛾擬青霉菌粉:經中國醫科院藥物研究所等單位研究證明蝙蝠蛾擬青霉菌粉化學成分與天然冬蟲夏草相似,具有冬蟲夏草之功效,并且還有舒張血管、降低血壓、減緩心率、增加cAMP、刺激腎上腺生成甾體激素、抑制血小板聚集、松馳血管平滑肌、鎮靜和抗驚厥等多種生理活性。
亞硒酸鈉:Na2SeO3,分子量172.94,CAS號:10102-18-8,白色結晶或結晶性粉末,溶于水,不溶于乙醇。
L-谷氨酰胺:C5H10N2O3,分子量146.15,CAS號:56-85-9,白色結晶或晶性粉末,能溶于水,無臭,無毒,常做營養增補劑,調香增補劑,是肌肉中最豐富的游離氨基酸,約占人體游離氨基酸總量的60%。空腹血漿谷氨酰胺濃度為500-750umol/L。谷氨酰胺不是必需氨基酸,它在人體內可由谷氨酸、纈氨酸、異亮氨酸合成。在疾病、營養狀態不佳或高強度運動等應激狀態下,機體對谷氨酰胺的需求量增加。
在本發明的組合物中,亞硒酸鈉是硒源,通過向機體補充硒從多方面影響機體的免疫功能,如細胞免疫過程:硒能夠影響淋巴細胞的增殖和分化,可以促進淋巴細胞分泌淋巴因子(如干擾素,白介素等);硒能夠增強淋巴細胞的細胞毒作用;硒也能促進特異性體液免疫功能,使體內抗體水平升高;硒還可以改善非特異性免疫作用等。
然而機體對無機硒的吸收利用并不好,如果簡單通過增加亞硒酸鈉的含量提高吸收利用度,又受到亞硒酸鈉的毒副作用和胃腸刺激的限制,特別是無機硒不容易在臟器如肝腎中積累利用,即使血硒濃度較高,仍然不能促進人體含硒蛋白的含量增加,選用有機硒成本又過高。本發明的發明人在研究保健品的配方過程中發現,當加入適量的L-谷氨酰胺時,亞硒酸鈉的吸收利用度大大提高,而且不僅增加血硒水平,同時增加肝腎等臟器含硒蛋白的含量水平。
而本發明含靈芝提取物、蝙蝠蛾擬青霉菌粉、亞硒酸鈉和L-谷氨酰胺的保健品組合物也在協同作用下表現出優異的免疫力增強作用。
作為優選,所述組合物包括靈芝提取物120-150重量份、蝙蝠蛾擬青霉菌粉100-130重量份、亞硒酸鈉0.01-0.05重量份,L-谷氨酰胺80-120重量份。
作為一種優選的技術方案,所述組合物包括靈芝提取物130重量份、蝙蝠蛾擬青霉菌粉120重量份、亞硒酸鈉0.03重量份,L-谷氨酰胺100重量份。
作為另一種優選的技術方案,該保健品組合物包括靈芝提取物120重量份、蝙蝠蛾擬青霉菌粉130重量份、亞硒酸鈉0.05重量份,L-谷氨酰胺120重量份。
一種含本發明增強免疫力的保健品組合物的制劑,所述制劑由上述組合物與輔料制得,該制劑可以為片劑、丸劑、膠囊劑、散劑或顆粒劑。所述輔料根據劑型需要進行選擇常規輔料即可。
作為優選,本發明增強免疫力的保健品組合物的制劑為膠囊劑。
本發明還提供了一種制備增強免疫力的保健品組合物的制劑的方法,包括如下步驟:
備料:稱取靈芝提取物、蝙蝠蛾擬青霉菌粉,Co-60輻照滅菌,4kGy;輻照后分別粉碎過80目篩,備用;亞硒酸鈉、微晶纖維素、淀粉、二氧化硅原料分別粉碎過80目篩,備用;
混合:將亞硒酸鈉與淀粉等量遞增法混合均勻,得到混合粉,將混合粉與靈芝提取物、蝙蝠蛾擬青霉菌粉、微晶纖維素、二氧化硅和硬脂酸鎂等物料一并放入混合機內混合40min,使物料混合均勻,得總混合粉;
膠囊填充:將混合物料,在自動膠囊填充機上進行填充,操作條件:18~26℃,相對濕度:45%~60%。
本發明的有益效果在于:本發明的保健品組合物選用靈芝提取物、蝙蝠蛾擬青霉菌粉、亞硒酸鈉和L-谷氨酰胺配伍,出人意料的在不出現亞硒酸鈉毒副作用和胃腸刺激的情況下,大大增加機體對硒的吸收利用,不但提高血硒含量,還能提高機體臟器含硒蛋白的水平,并且在功能實驗中表現出優異的增強免疫力作用,本發明增強人體免疫力的保健品組合物具有成本低,效果好的優勢。
具體實施方式
以下通過具體實施方式,對本發明的上述內容做進一步的詳細說明。但不應該將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發明上述內容所實現的技術均屬于本發明的范圍。
靈芝提取物購自西安三江生物工程有限公司;蝙蝠蛾擬青霉菌粉購自浙江萬豐企業集團制藥有限公司。
實施例1
表1配方
按配方量稱取靈芝提取物、蝙蝠蛾擬青霉菌粉,Co-60輻照滅菌,4kGy;輻照后分別粉碎,過80目篩,備用。亞硒酸鈉、微晶纖維素、淀粉、二氧化硅原料分別粉碎過80目篩,備用。
混合:將亞硒酸鈉與淀粉等量遞增法混合均勻,得到混合粉I。混合粉I與靈芝提取物、蝙蝠蛾擬青霉菌粉、微晶纖維素、二氧化硅和硬脂酸鎂等物料一并放入混合機內混合40min,使物料混合均勻,得混合粉II。
膠囊填充:將混合物料,在自動膠囊填充機上進行填充,每粒含內容物0.4g,操作條件:18~26℃,相對濕度:45%~60%。
膠囊拋光:對灌裝好的膠囊在膠囊拋光機上進行拋光,除盡表面藥粉。
實施例2
表2配方
根據表2配方按照實施例1制備產品。
實施例3
表3配方
根據表3配方按照實施例1制備產品。
實施例4
表4配方
根據表4配方按照實施例1制備產品。
對比例1
表5配方
根據表5配方按照實施例1制備產品,每粒含內容物0.4g。
實施例5增強免疫力功能試驗
1.1樣品:根據實施例1和對比例1制備的樣品(分別稱為樣品1和樣品2)進行功能學試驗。樣品置陰涼干爽通風處保存。人口服推薦用量為每人(成人體重按60kg計算)每日6粒,即0.04g/kg BW每天。取膠囊內容物進行試驗。
1.2實驗動物與分組:選用中國醫學科學院實驗動物研究所繁育繁殖的清潔級健康昆明種雄性小鼠210只,體重為18—22克,許可證號:SCXK-京2004-001。共分為3組,每組70只,免疫I組,進行ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉化實驗;免疫II組,進行遲發型變態反應實驗;免疫III組,進行血清溶血素測定和抗體生成細胞數測定。
1.3實驗環境條件:實驗動物室溫度:22—25℃,相對濕度:55—70%。
1.4劑量選擇與受試物給予方式:根據人口服推薦用量,各樣品設低、中、高劑量組,分別為0.20g、0.40g、1.20g/kg/日(分別相當于人體推薦用量的5、10、30倍),設一個陰性對照組,每組10只動物。受試物用水配制,每日一次經口給予,連續灌胃33天后測各項免疫指標。小鼠灌胃體積為0.1mL/10g鼠重。陰性對照組用水代替受試物。
1.5主要儀器與試劑:動物臺秤、電子分析天平、離心機、潔凈工作臺、二氧化碳培養箱、恒溫水浴箱、顯微鏡、半自動生化儀、酶標儀等。
無菌手術器械、微量注射器、細胞計數器、24孔和96孔平底細胞培養板、96孔U型細胞培養板、玻璃平皿、紗布、載玻片、試管、200目篩網、計時器血色素吸管等。
綿羊紅細胞(SRBC)、生理鹽水、Hank's液(pH 7.2—7.4)、RPMI1640培養液、小牛血清、青霉素、鏈霉素、ConA、1%冰醋酸、1mol/L的HCL溶液、異丙醇、MTT、DNFB、PBS緩沖液(pH7.2—7.4)、補體(豚鼠血清)、SA緩沖液、瓊脂糖、YAC-1細胞、乳酸鋰、硝基氯化四氮唑、吩嗪二甲酯硫酸鹽、氧化型輔酶I、0.2mol/L的Tris-HCL緩沖液、1%的NP40、印度墨汁、0.l%的碳酸鈉、雞紅細胞、甲醇、Gimsa染液等。
1.6實驗方法
1.6.1ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉化實驗(MTT法):
無菌取脾,置于盛有適量無菌Hank's液的平皿中,制成細胞懸液,經200目篩網過濾。用Hank's液洗2次,每次離心l0min(1000r/min)。然后將細胞懸浮于1mL完全培養液中,計數活細胞數,用RPMI1640培養液調整細胞濃度為3*106個/mL.。再將細胞懸液分兩孔加入24孔培養板中,每孔1mL,在其中一孔加入75uL ConA液(相當于7.5uL/mL),另一孔作為對照,置5%CO2,37℃二氧化碳孵箱中培養72h。培養結束前4h輕輕吸去上清液0.7mL,加入0.7mL不含小牛血清的RPMI1640培養液,同時加入MTT(5mg/mL)50uL/孔,繼續培養4h。培養結束后,每孔加入1mL酸性異丙醇,吹打混勻,使紫色結晶完全溶解,然后分裝到96孔培養板中,每個孔作3個平行孔,用酶標儀,以570nm波長測定光密度值。淋巴細胞的增殖能力用加ConA孔的光密度值減去不加ConA孔的光密度值表示。
1.6.2遲發型變態反應(DTH)(足跖增厚法)
給小鼠腹腔注射2%壓積SRBC(0.2mL/每鼠)致敏4天后,測量左后足跖厚度,然后在測量部位皮下注射20%(v/v)SRBC(20ul/每鼠),于注射后24h測量左后足跖厚度,同一位置測量三次,取平均值,以攻擊前后足跖厚度差值(足跖腫脹程度)來表示DTH的程度,受試樣品組的差值顯著高于對照組的差值,可判定該項實驗結果陽性。
1.6.3抗體生成細胞檢測(Jerne改良玻片法)
取羊血,用生理鹽水洗滌3次,每次離心l0min(2000r/min),用生理鹽水將壓積SRBC配成2%(v/v)的細胞懸液,每鼠腹腔注射0.2mL。將免疫后5天的小鼠處死,取脾,輕輕磨碎,用Hank's液制成細胞懸液,200目篩網過濾,洗滌、離心2次,最后將細胞懸浮在5mL Hank's液中。將表層培養基(lg瓊脂糖加雙蒸水至l00mL)加熱溶解后,放45~50℃水浴保溫,與等量pH7.2—74、2倍濃度的Hank’s液混合,分裝小試管,每管0.5mL,再向管內加用SA液配制的10%SRBC50uL(v/v)、25uL脾細胞懸液,迅速混勻后傾倒于已刷瓊脂糖薄層的玻片上,待凝固后,將玻片平扣放在玻片架上,放入二氧化碳培養箱中孵育1.5h,用SA緩沖液稀釋的補體(1:8)加入玻片架凹槽內,繼續孵育1.5h,計數溶血空斑數。用空斑數/全脾細胞表示抗體生成細胞數。受試樣品組的空斑數顯著高于對照組的空斑數,可判定該項實驗結果陽性。
1.6.4半數溶血值的測定(HC50)
取羊血,用生理鹽水洗滌3次,每次離心l0min(2000r/min),用生理鹽水將壓積SRBC配成2%(v/v)的細胞懸液,每鼠腹腔注射0.2mL。免疫5天后,摘除小鼠的眼球,取血于離心管內,放置約1h,2000r/min離心l0min,分離、收集血清。用SA緩沖液將血清稀釋為300倍,取1mL置試管內,依次加入10%SRBC 0.25mL,補體1mL。另設不加血清的對照管,以SA緩沖液代替。置于37℃恒溫水浴中保溫15min后,冰浴終止反應。2000r/min離心10min,取上清1mL,加都氏試劑3mL。同時取10%的SRBC 0.25mL,加都氏試劑至4mL,于另一試管中,充分混勻,放置10min后,于540nm處對照管作空管,分別測定各管光密度值。溶血素的量以半數溶血數(HC50)表示,按下式計算:
樣品半數溶血值=樣品光密度值/SRBC半數溶血時的光密度值*稀釋倍數
受試樣品組的HC50顯著高于對照組的HC50,可判斷實驗結果為陽性。
1.7實驗數據統計:應用SPSS統計軟件進行方差分析統計處理。
2.結果
2.1樣品對小鼠細胞免疫功能的影響
2.1.1樣品對小鼠遲發型變態反應(DTH)的影響
表6樣品對小鼠遲發型變態反應(DTH)的影響
注:*與陰性對照組比較,P<0.05;**與陰性對照組比較,P<0.01。
由上表可見,經口給予小鼠不同劑量的樣品33天后,各劑量組的足跖腫脹度差值均大于陰性對照組,但是僅有樣品1達到顯著差異,并且中高劑量組差異具有非常顯著性(P<0.01),樣品2各劑量組差異均不具有顯著性(P>0.05)。
2.12樣品對淋巴細胞轉化試驗的影響
表7樣品對淋巴細胞轉化試驗的影響
注:*與陰性對照組比較,P<0.05;**與陰性對照組比較,P<0.01。
由上表可見,樣品1和2各劑量組與陰性對照組比較,淋巴細胞增殖能力有所提高,但樣品2無明顯差異(P>0.05),只有樣品1表現出顯著差異性(P<0.05),且高劑量組差異性非常顯著,說明樣品1具有促進小鼠的淋巴細胞增殖、轉化能力的作用。
2.2樣品對小鼠體液免疫功能的影響
2.2.1樣品對小鼠抗體生成細胞的影響
表8樣品對小鼠抗體生成細胞檢測實驗結果
注:*與陰性對照組比較,P<0.05;**與陰性對照組比較,P<0.01。
由上表可見,樣品1和2各劑量組與陰性對照組比較,溶血空斑數有所增加,但樣品2中低劑量組無明顯差異(P>0.05),而樣品1所有劑量組和樣品2高劑量組表現出顯著差異性(P<0.05),特別是樣品1高劑量組,其差異具有非常顯著性(P<0.01)。
2.2.2樣品對小鼠半數溶血值(HC50)的影響
表8樣品對小鼠半數溶血值(HC50)的影響
注:*與陰性對照組比較,P<0.05;**與陰性對照組比較,P<0.01。
由上表可見,樣品1和2各劑量組與陰性對照組比較,樣品半數溶血值有所增加,但樣品2各劑量組均無顯著差異(P>0.05),而樣品1所有劑量組均表現出顯著差異性(P<0.05),特別是樣品1高劑量組,其差異具有非常顯著性(P<0.01)。
上述功能試驗證明本發明的保健品組合物具有確切的增強免疫力的功能,并且因為L-谷氨酰胺的協同作用,與對比例的組合物或陰性對照組相比較,都具有意想不到的效果。
實施例6大鼠對亞硒酸鈉的吸收利用試驗
血清硒可以反映機體近期硒的攝入情況,硒作為動物必需的微量元素在機體內主要以硒蛋白(如含硒半胱氨酸)的形式發揮作用,谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)是研究較多的硒蛋白之一,并且硒蛋白的表達及活性均受硒營養水平調節;GSH-PX是哺乳動物含量最豐富的硒蛋白,其活性由動物臟器中的硒水平所調節,可將GSH-PX活力作為生物將血硒加以利用的一個指標。
1.1材料與方法
1.1試驗動物:選用中國醫學科學院實驗動物研究所繁育繁殖的SPF級健康SD雄性大鼠70只,體重為140—160克,許可證號:SCXK-京2009-002。
1.2實驗材料:低硒飼料:原料小麥、玉米、大豆等購自河南省三門峽市靈寶低硒地區,由河南省實驗動物中心加工,并經Co60照射滅菌,硒含量≤0.03ug/g;分別由實施例1和對比例1制備的樣品1和樣品2。
1.3儀器和試劑
ADVIA1200全自動生化分析儀,KY-2000半自動生化分析儀,DS-671型電子天平、DTS-3低速自動平衡離心機、DY89-1型電動玻璃勻漿機、ASF-930雙道原子熒光光度計;谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)試劑盒(批號20090522);大鼠硫氧還蛋白還原酶(TrxR)、ELISA檢測試劑盒(LOT:08-12)。
1.4實驗方法
將70只雄性SD大鼠按體重隨機分為7組,飼以低硒飼料建立低硒動物模型。每周從每組抽取1只進行尾靜脈采血,測其血硒濃度,7周后當血硒平均值降為0.25mg/L左右時,再按體重隨機分為7組,對照組1組,樣品1和樣品2各3組,每組10只,對照組每日灌胃純水,樣品1和樣品2組每日分別灌胃相對應的樣品,根據樣品每日推薦量大鼠灌胃的劑量分別為0.4、0.8、1.2g/kg(相當于人推薦用量10、20、30倍)體重,連續灌胃1個月,末次灌胃24h后斷頭取血,離心分離血清,并摘取肝腎組織,用冰冷生理鹽水沖洗后濾紙吸干待用。
1.5指標測定
血硒含量:氫化物原子熒光光譜法測定。稱取適量的肝和腎臟組織制備10%的的組織勻漿,3000r/min離心15min,取上清,按試劑盒說明分別測定谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力含量。勻漿中蛋白的測定用雙縮脲法。
1.6統計學分析數據采用表示,平均值的比較用兩獨立樣本的t檢驗。
2.結果
2.1大鼠血硒水平
表9樣品對血硒濃度的影響
注:*與陰性對照組比較,P<0.05。
由上表可見,樣品1和2均可增加大鼠血硒含量,且樣品1各劑量組和樣品2中、高劑量組與陰性對照組比較,差異具有顯著性(P<0.05)。
2.2大鼠肝臟和腎臟谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活力比較
表10樣品對肝臟GSH-PX活力的影響
注:*與陰性對照組比較,P<0.05;**與陰性對照組比較,P<0.01。
由上表可見,樣品1和樣品2各劑量組與陰性對照組比較,肝臟谷胱甘肽過氧化物酶活力增加,樣品1各劑量組和樣品2高劑量組活力增加差異具有顯著性P<0.05,特別是樣品1各劑量組的差異非常顯著(P<0.01)。
表11樣品對腎臟GSH-PX活力的影響
注:*與陰性對照組比較,P<0.05;**與陰性對照組比較,P<0.01。
由表11可見,樣品1和樣品2各劑量組與陰性對照組比較,腎臟GSH-PX活力均有增加,但是,樣品2的低、高劑量組與對照組比較差異不顯著,而樣品1中、高劑量組與對照組比較,差異非常顯著(P<0.01)。
綜上所述,本發明的保健品組合物配方合理,各組分達到較佳配伍效果,L-谷氨酰胺的合理搭配顯著增加機體對硒的吸收和利用,血硒含量明顯增高,并促進血硒在各臟器的充分利用,肝腎GSH-PX活力非常顯著的增加,并最終對小鼠免疫力提升表現出優異的效果。
本發明并不局限于前述的具體實施方式。本發明擴展到任何在本說明書中披露的新特征或任何新的組合,以及披露的任一新的方法或過程的步驟或任何新的組合。