一種富含益生菌的動物保健營養液的制備方法

一種富含益生菌的動物保健營養液的制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及飼料添加劑領域，具體涉及一種富含益生菌的動物保健營養液的制備 方法。
【背景技術】
[0002] 隨著我國畜禽養殖業的發展和"菜籃子工程"的實施，規模化、集約化畜禽養殖業 迅速崛起，與此同時，對動物防疫的需求也大大增加，導致了抗生素在養殖業中的濫用。據 不完全統計，2013年中國抗生素總使用量約為16.2萬噸，占全球用量的一半，其中一半以上 用在了養殖上。養殖業中濫用抗生素，在給環境造成嚴重污染的同時，所生產的禽蛋和肉制 品中殘留的抗生素，也對人體產生了巨大危害。因此，減少抗生素在養殖業中的使用，推廣 無養殖和生態養殖，是關系到國民身體健康和環境保護的大事，也越來越得到各級政府和 養殖人員的重視。
[0003] 開展無抗養殖和生態養殖，最重要的是在維持禽畜營養需求的平衡的基礎上，通 過外在施用含有益生菌的營養液，幫助動物機體維持微生態平衡，減少疾病的發生，從而最 大程度上避免抗生素的使用。益生菌攝入動物體內，可以協助機體增強對腸道內有害微生 物的抑制，也可以通過增強非特異性免疫功能來預防疾病，促進動物生長，從而大大減少抗 生素在養殖業中的使用，同時大大提高養殖者的經濟收益。因此，開發富含益生菌的動物保 健營養液，平衡動物機體營養，促進飼料中營養物質的有效吸收利用，提高飼料轉化率，從 而提高機體免疫力，增強動物的抗病能力以減少疾病的發生，使禽畜健康生長，對于提高養 殖業的經濟效益，促進我國養殖業的健康發展具有重要意義。
[0004] 目前，市售的動物保健營養液產品雖不少，但是效果卻并不如人意。一方面，許多 產品的宣傳中標注有活菌數存在，事實上產品中并沒有存活的益生菌，或是益生菌含量達 不到所標注的濃度，從而使效果大打折扣;另一方面，許多產品簡單以多種益生菌株混合發 酵而成，各菌株之間的比例和含量并未得到充分優化，這也在很大程度上影響了營養液功 效的發揮。
[0005] 因此，亟需研發含有足夠數量的益生菌、且各益生菌比例達到最優組合的動物保 健營養液。

【發明內容】

[0006] 本發明針對現有技術的不足，提供一種富含益生菌的動物保健營養液的制備方 法。
[0007] 本發明主要通過以下技術手段去解決上述技術問題的：一種富含益生菌的動物保 健營養液的制備方法，包括以下步驟：
[0008] 1)單株益生菌發酵，獲得單株益生菌發酵菌液；
[0009] 2)將上述各單株益生菌發酵菌液進行混合，制備益生菌混合液；
[0010] 3)在所述益生菌混合液中加入新鮮培養基質-甘蔗糖蜜；
[0011] 4)向步驟3)中的益生菌混合液中加入山梨酸鉀，攪拌均勻，即制得動物保健營養 液。
[0012] 優選地，所述單株益生菌包括植物乳桿菌(保藏編號CGMCC1.2158)、動物雙歧桿菌 (保藏編號為CGMCCl. 2268)、枯草芽孢桿菌(藏編號為CGMCCl. 2162)、嗜熱鏈球菌(保藏編號 為CGMCC 1.2471)、地衣芽孢桿菌(保藏編號為CGMCCl. 1858)、腸膜明串珠菌（保藏編號為 CGMCC 1.10327)、產朊假絲酵母(保藏編號為CGMCC 2.1641)。
[0013] 優選地，所有益生菌均采用MYP培養基培養，所述MYP培養基包括糖蜜6.0%、酵母 抽提物〇 . 4 %、大豆蛋白胨0.2 %、氯化鈉1.0 %。接種量為1 % -2 %，180-200rpm，培養24-36h〇
[0014] 優選地，上述各單菌株發酵結束后，將植物乳桿菌、動物雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌、 嗜熱鏈球菌、地衣芽孢桿菌、腸膜明串珠菌、產朊假絲酵母按照3-5:0.5-2:3-4:1-2:0.5-2: 1-3:2-4的體積比混合，制得益生菌混合液，其有效活菌數為I. I X 109-2.2 X 109cfu/ml。
[0015] 優選地，按質量濃度3 %-5 %向益生菌混合液中加入新鮮培養基質-甘蔗糖蜜。
[0016] 優選地，所述甘蔗糖蜜其含糖分50%以上，錘度(Bx)85%以上。
[0017]優選地，按質量濃度I -1.5%。向步驟3)中得到的益生菌混合液中加入山梨酸鉀。 [0018] 優選地，步驟4)中的攪拌參數為：IOOrpm，2h。
[0019] 優選地，山梨酸鉀的純度為99%以上。
[0020] 本發明的優點在于：
[0021] 本發明提供的動物保健營養液將益生菌分別發酵，然后組合，發揮各益生菌之間 的協同作用，具有菌株組合新、結構穩、酶活強、活菌數高等特點，同時解決了傳統動物保健 營養液中益生菌活力弱、有效活菌數不達標、見效慢等問題。一方面，保健營養液中的益生 菌富含蛋白質等，可以為禽畜生長提供豐富的營養物質，起到明顯促生長效果。同時，保健 營養液內富含的益生菌可以協助動物機體維持腸道菌群平衡，抑制腸道內病原菌的生長繁 殖，進而增強機體的抗病防病能力，可替代或部分替代抗生素，減少抗生素對環境和人體造 成的危害，促進無抗、生態養殖在我國的推廣。
【具體實施方式】
[0022] 以下實施例進一步說明本發明的內容，但不應理解為對本發明的限制。在不背離 本發明精神和實質的情況下，對本發明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬于本發明 的范圍。
[0023]實施例1、動物保健營養液 桔物乳樸菌ton,"，/ 3.0 x 10xcfu/ml 動物雙歧樸菌 5訴/o&/c 紀 r//備纖/mi7//.s'0.5、χ. 108_cfti/rnl. 枯八1·芽孢樸 3.0 χ 10<scfu/ml
[0024] 嗜熱鏈球菌沒re/靡1.0 χ 10,scfu/inl 地衣芽抱樸菌//dw丨/brMs' 0.5 x 108cfu/mI 版膜「! 丨ΚΠ 珠菌Ζ?:·Μ?:^70、'/?(77??'?你7·以 1.0 X 10xcfu/ml 廣'1I兒假絲酵付x 10scfu/ml
[0025] 構成方式如上的菌劑由以下步驟制得
[0026] 1)單株菌發酵:植物乳桿菌、動物雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌、嗜熱鏈球菌、地衣芽孢 桿菌、腸膜明串珠菌、產朊假絲酵母等七株益生菌分別進行發酵，獲得單株益生菌發酵菌 液。
[0027] 所有益生菌發酵培養基均采用MYP培養基(糖蜜6.0 %、酵母抽提物0.4%、大豆蛋 白胨0.2%、氯化鈉1.0%，其他成份為純水)培養;接種量為l%，180rpm，培養24h。
[0028] 2)益生菌混合液制備：上述各單菌株發酵結束后，將植物乳桿菌、動物雙歧桿菌、 枯草芽孢桿菌、嗜熱鏈球菌、地衣芽孢桿菌、腸膜明串珠菌、產朊假絲酵母按照3:0.5:3:1: 0.5:1:2的體積比混合，制得益生菌混合液。所制得的益生菌混合液的有效活菌數為1.1 X 109cfu/ml〇
[0029] 3)按質量濃度3%向益生菌混合液中加入新鮮培養基質-甘蔗糖蜜(含糖分50 %以 上，錘度(Bx)85%以上）。
[0030] 4)按質量濃度1.0%。向3)中制得的益生菌混合液中加入山梨酸鉀（純度99 %以 上），攪拌均勻（1〇〇印111，攪拌211)，即制得富含益生菌的動物保健營養液。
[0031 ]該動物保健營養液試驗效果研究
[0032] 試驗地點:浙江省衢州市衢江區欣祥生豬養殖場
[0033] 試驗設計:設置兩個處理，每個處理仔豬100頭。
[0034]處理1:仔豬按照正常飼養條件飼養，喂食量、抗生素使用同其他正常仔豬。
[0035]處理2:仔豬按照正常飼養條件飼養，喂食量同其他正常仔豬，在飼料中按照2%〇的 重量比例拌施動物保健營養液，不使用抗生素。
[0036]試驗結果:與對照相比，施用該動物保健營養液的仔豬黃白俐發生率降低85%，豬 胃腸脹氣病發病率下降80%，刨去動物保健營養液使用成本，每頭仔豬可節約抗生素使用 成本50元。同時，施用該動物保健營養液的仔豬生長速度提高了 3.3%，可提前6天出欄，刨 去動物保健營養液使用成本，平均每頭仔豬節約飼料成本40元。
[0037]實施例2、動物保健營養液 柏物乳樸菌4.0 x 10xcfu/ml 動物雙歧樸菌辦/VWo6?c?t，n'?."n劇1.5 xI 08cfu/m] 枯-1T1.芽孢樸齒5t?c///w.y .s、》/;i/7/x 3.5 χ 108cfu/nil
[0038] 嗜熱鏈球菌、&r￡，/;/ocwY:w.st/2?prmo/?/7//i5 1.5 χ I O8CfuZmI 地衣芽孢豐丨· 沿 1.0 ^ 10Kcfu/mI 腸膜丨叩_Π 珠菌乙肌tor/肥S'677/.C7.O/<：fcv 2.0 X 丨 0'、cfu/lTll 產朊假絲酵母流s 3.0 XlO8CfuZml
[0039] 構成方式如上的菌劑由以下步驟制得
[0040] 1)單株菌發酵:植物乳桿菌、動物雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌、嗜熱鏈球菌、地衣芽孢 桿菌、腸膜明串珠菌、產朊假絲酵母等七株益生菌分別進行發酵，獲得單株益生菌發酵菌 液。
[0041 ]所有益生菌發酵培養基均采用MYP培養基(糖蜜6.0 %、酵母抽提物0.4%、大豆蛋 白胨0.2 %、氯化鈉1.0 %，其他成份為純凈水)培養;1.5 %接種量接種，190rpm，培養30h。 [0042] 2)益生菌混合液制備：上述各單菌株發酵結束后，將植物乳桿菌、動物雙歧桿菌、 枯草芽孢桿菌、嗜熱鏈球菌、地衣芽孢桿菌、腸膜明串珠菌、產朊假絲酵母按照4:1.5:3.5: 1.5:1: 2:3的體積比混合，制得益生菌混合液。所制得的益生菌混合液的有效活菌數為1.65 X109cfu/ml〇
[0043] 3)按質量濃度4%向益生菌混合液中加入新鮮培養基質-甘蔗糖蜜(含糖分50 %以 上，錘度(Bx)85%以上）。
[0044] 4)按質量濃度1.2%。向3)中制得的益生菌混合液中加入山梨酸鉀（純度99 %以 上），攪拌均勻（1〇〇印111，攪拌211)，即制得富含益生菌的動物保健營養液。
[0045]該動物保健營養液試驗效果研究
[0046] 試驗地點:浙江省衢州市衢江區欣祥生豬養殖場
[0047] 試驗設計:設置兩個處理，每個處理仔豬100頭。
[0048]處理1:仔豬按照正常飼養條件飼養，喂食量、抗生素使用同其他正常仔豬。
[0049]處理2:仔豬按照正常飼養條件飼養，喂食量同其他正常仔豬，在飼料中按照2%。比 例拌施動物保健營養液，不使用抗生素。
[0050]實驗結果:與對照相比，施用該動物保健營養液的仔豬黃白俐發生率降低95%，豬 胃腸脹氣病發病率下降90%，刨去動物保健營養液使用成本，每頭仔豬可節約抗生素使用 成本65元。施用該動物保健營養液的仔豬生長速度提高了 8.3%，可提前15天出欄，刨去動 物保健營養液使用成本，平均每頭仔豬節約飼料成本100元。
[0051 ]實施例3、動物保健營養液 植物乳樸 _仍伽廠ww 5.0 X 10xcfu/rn!
[0052] 動物雙歧桿菌 細 膽·細 2.0 xlOscfu/ml 粘7勢孢樸 1?'/SizcZZZas^wMto 4.0 χ 108cfu/ml 嗜熱鏈球菌5AY7，f〇cot.ri?/7zm?o/，/n7fAs' 2.0 χ 10xcfu/inl 地衣芽抱豐I·靡& 2.0 > IoxCfuZiTil
[0053] 腸膜明巾i:采菌^wco肌ytor服3.0 xIOs cfu/inl 產朊假絲酵母CVwiZ/ifotti/to 4.0 χ IO8CfWinl
[0054] 構成方式如上的菌劑由以下步驟制得
[0055] 1)單株菌發酵:植物乳桿菌、動物雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌、嗜熱鏈球菌、地衣芽孢 桿菌、腸膜明串珠菌、產朊假絲酵母等七株益生菌分別進行發酵，獲得單株益生菌發酵菌 液。
[0056] 所有益生菌發酵培養基均采用MYP培養基(糖蜜6.0 %、酵母抽提物0.4%、大豆蛋 白胨0.2 %、氯化鈉 1.0 %，其他成份為純凈水）；2 %接種量接種，200rpm，培養36h。
[0057] 2)益生菌混合液制備：上述各單菌株發酵結束后，將植物乳桿菌、動物雙歧桿菌、 枯草芽孢桿菌、嗜熱鏈球菌、地衣芽孢桿菌、腸膜明串珠菌、產朊假絲酵母按照5: 2:4:2: 2: 3: 4的體積比混合，制得益生菌混合液。所制得的益生菌混合液的有效活菌數為2.2 X 109cfu/ml〇
[0058] 3)按質量濃度5 %向益生菌混合液中加入新鮮培養基質-甘蔗糖蜜(含糖分50 %以 上，錘度(Bx)85%以上）。
[0059] 4)按質量濃度1.5%。向3)中制得的益生菌混合液中加入山梨酸鉀（純度99 %以 上），攪拌均勻（1〇〇印111，攪拌211)，即制得富含益生菌的動物保健營養液。
[0060] 該動物保健營養液試驗效果研究
[0061] 試驗地點:浙江省衢州市衢江區欣祥生豬養殖場
[0062] 試驗設計:設置兩個處理，每個處理仔豬100頭。
[0063]處理1:仔豬按照正常飼養條件飼養，喂食量、抗生素使用同其他正常仔豬。
[0064]處理2:仔豬按照正常飼養條件飼養，喂食量同其他正常仔豬，在飼料中按照2%〇比 例拌施動物保健營養液，不使用抗生素。
[0065]試驗結果:與對照相比，施用該動物保健營養液的仔豬黃白俐發生率降低90%，豬 胃腸脹氣病發病率下降90%，刨去動物保健營養液使用成本，每頭仔豬可節約抗生素使用 成本60元。同時，施用該動物保健營養液的仔豬生長速度提高了 5.5%，可提前10天出欄，刨 去動物保健營養液使用成本，平均每頭仔豬節約飼料成本67元。
【主權項】
1. 一種富含益生菌的動物保健營養液的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 1) 單株益生菌發酵，獲得單株益生菌發酵菌液； 2) 將上述各單株益生菌發酵菌液進行混合，制備益生菌混合液； 3) 在所述益生菌混合液中加入新鮮培養基質-甘蔗糖蜜； 4) 向步驟3)中的益生菌混合液中加入山梨酸鉀，攪拌均勻，即制得動物保健營養液。2. 根據權利要求1所述的一種富含益生菌的動物保健營養液的制備方法，其特征在于， 所述單株益生菌包括植物乳桿菌（保藏編號CGMCC1.2158)、動物雙歧桿菌（保藏編號為 CGMCC1.2268)、枯草芽孢桿菌（藏編號為CGMCC1.2162)、嗜熱鏈球菌（保藏編號為CGMCC 1.2471)、地衣芽孢桿菌（保藏編號為CGMCC1.1858)、腸膜明串珠菌（保藏編號為CGMCC 1.10327)、產朊假絲酵母(保藏編號為CGMCC 2.1641)。3. 根據權利要求1所述的一種富含益生菌的動物保健營養液的制備方法，其特征在于， 所有益生菌均采用MYP培養基培養，所述MYP培養基包括糖蜜6.0%、酵母抽提物0.4%、大豆 蛋白胨0.2 %、氯化鈉1.0 % ;接種量為1 % -2 %，180-200rpm，培養24-36h。4. 根據權利要求1所述的一種富含益生菌的動物保健營養液的制備方法，其特征在于， 上述各單菌株發酵結束后，將植物乳桿菌、動物雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌、嗜熱鏈球菌、地衣 芽孢桿菌、腸膜明串珠菌、產朊假絲酵母按照3-5:0.5-2:3-4:1-2:0.5-2:1-3:2-4的體積比 混合，制得益生菌混合液，其有效活菌數為1.1 X 1〇9_2.2 X 109cfu/ml。5. 根據權利要求1所述的一種富含益生菌的動物保健營養液的制備方法，其特征在于， 按質量濃度3 % -5 %向益生菌混合液中加入新鮮培養基質-甘蔗糖蜜。6. 根據權利要求5所述的一種富含益生菌的動物保健營養液的制備方法，其特征在于， 所述甘蔗糖蜜其含糖分50%以上，錘度(Bx)85%以上。7. 根據權利要求1所述的一種富含益生菌的動物保健營養液的制備方法，其特征在于， 按質量濃度1 -1.5%。向步驟3)中得到的益生菌混合液中加入山梨酸鉀。8. 根據權利要求1所述的一種富含益生菌的動物保健營養液的制備方法，其特征在于， 步驟4)中的攪拌參數為:1 OOrpm，2h。9. 根據權利要求1所述的一種富含益生菌的動物保健營養液的制備方法，其特征在于， 山梨酸鉀的純度為99%以上。
【專利摘要】本發明公開一種富含益生菌的動物保健營養液的制備方法，包括以下步驟：單株益生菌發酵，獲得單株益生菌發酵菌液；將上述各單株益生菌發酵菌液進行混合，制備益生菌混合液；在所述益生菌混合液中加入新鮮培養基質?甘蔗糖蜜；向益生菌混合液中加入山梨酸鉀，攪拌均勻，即制得動物保健營養液。一方面，保健營養液中的益生菌富含蛋白質等，可以為禽畜生長提供豐富的營養物質，起到明顯促生長效果。同時，保健營養液內富含的益生菌可以協助動物機體維持腸道菌群平衡，抑制腸道內病原菌的生長繁殖，進而增強機體的抗病防病能力，可替代或部分替代抗生素，減少抗生素對環境和人體造成的危害，促進無抗、生態養殖在我國的推廣。
【IPC分類】A23K10/18
【公開號】CN105707439
【申請號】CN201610156495
【發明人】吳麗芳, 高戰元, 黃勝威, 潘高志, 蔡冬清, 李明浩, 趙薇薇, 吳正巖
【申請人】中國科學院合肥物質科學研究院