一種以太行菊為主要原料的防霉抗氧化食品保鮮劑的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于食品領域，涉及食品保鮮劑，具體涉及一種以太行菊為主要原料的防 霉抗氧化食品保鮮劑。
【背景技術】
[0002] 食品保鮮劑是指用于防止食品在儲存、流通過程中，由于微生物繁殖引起的變質， 或由于儲存銷售條件不善，食品內在品質發生劣變、色澤下降，為提高保存期，延長食用價 值而在食品中使用的添加劑。
[0003] 太行菊，又稱野菊花，為菊科太行菊屬下的一個種，多年生草本植物。生于山坡巖 石上，為中國特有。太行菊為國家第二批珍稀瀕危保護植物，與太行花、獨根草并稱為三大 絕壁奇花。太行菊產在南太行的山西陵川、晉城、河南濟源、新鄉、輝縣、林州市茶店鎮等太 行山區。據科學研究，太行菊清肝明目比菊花效果要好。太行菊富含黃酮等抗氧化成分。
[0004] 重葉蓮為毛茛科植物太白美花草的全草。夏季采收，陰干。原植物為多年生草本， 全體無毛。根莖暗褐色，有多數須根。羽狀復葉;基生葉3~5枚，具長柄，基部擴大成鞘狀，小 葉片羽狀深裂，輪廓近圓形，常呈覆瓦狀重迭;莖生葉具鞘狀短柄。花單一，頂生；萼片5,帶 藍紫色；花瓣7~13，白色，近倒卵形，基部有短爪，橘紅色;雄蕊多數；心皮多數，有胚珠一 顆。瘦果多數，聚合成球果狀。生于高山山坡草叢。分布陜西等地。
【發明內容】
[0005] 本發明的目的在于提供一種以太行菊為主要原料的防霉抗氧化食品保鮮劑，該防 霉抗氧化食品保鮮劑主要原料為天然植物太行菊和重葉蓮，該提取物具有非常強的自由基 清除作用和防霉變作用。
[0006] 上述目的是通過如下技術方案實現的：
[0007] -種防止食品氧化和霉變的太行菊提取物，由以下步驟制備：（a)將干燥的太行菊 和重葉蓮混合，粉碎，用60~70 %乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液； (b)對步驟(a)濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用大孔樹脂富集，先用5~15%乙 醇沖洗10~14個柱體積除去大極性物質，再用65~75%乙醇洗脫11~15個柱體積，收集65 ~75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥；其中，重葉蓮占太行菊與重葉蓮總重的5 %~ 15%〇
[0008] 進一步地，太行菊提取物制備方法中步驟(a)中所述熱回流提取采用的乙醇濃度 為 65%。
[0009] 進一步地，所述的太行菊提取物制備方法中，步驟(C)中所述大孔樹脂為AB-8型大 孔樹脂。
[0010] 進一步地，所述的太行菊提取物制備方法中，步驟(C)中先用10%乙醇沖洗12個柱 體積除去大極性物質。
[0011] 進一步地，所述的太行菊提取物制備方法中，步驟(c)中除去大極性物質后，再用 70 %乙醇洗脫13個柱體積，收集70 %乙醇洗脫液。
[0012] -種防霉抗氧化食品保鮮劑，含有權利要求1~5任一所述的太行菊提取物。
[0013] 本發明的有益效果：
[0014] 本發明提供的防霉抗氧化食品保鮮劑主要原料為天然植物太行菊和重葉蓮，該提 取物具有非常強的自由基清除作用和防霉變作用，對食品的防霉抗氧化效果非常好。
【具體實施方式】
[0015] 下面結合實施例進一步說明本發明的實質性內容，但并不以此限定本發明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發明作了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對 本發明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發明技術方案的實質和范圍。
[0016] 藥材來源:藥材太行菊和重葉蓮購自安徽亳州中藥材市場。
[0017]主要試劑:食品級乙醇購自上海凌峰化學試劑有限公司；AB-8型大孔樹脂購自天 津波鴻樹脂有限公司；乙腈為HPLC級，購于TEDIA;甲酸為HPLC級，購于TEDIA;色譜用純凈水 為哇哈哈純凈水。所用試劑和材料均為可以購買到的常規商品。
[0018]實施例1:提取物1的制備
[0019] (a)將5kg干燥的太行菊和重葉蓮（占總重10%)混合，粉碎，用65%乙醇熱回流提 取3次(25LX3次），每次2小時，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液(3L);(b)對步驟(a) 濃縮液依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次)和水飽和的正丁醇(3L X 3次)萃取，分 別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔樹 脂富集，先用10%乙醇沖洗12個柱體積除去大極性物質，再用70 %乙醇洗脫13個柱體積，收 集70 %乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。
[0020]實施例2:提取物2的制備
[0021] (a)將5kg干燥的太行菊和重葉蓮（占總重5% )混合，粉碎，用60 %乙醇熱回流提取 3次(25LX3次），每次2小時，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液(3L);(b)對步驟(a)濃 縮液依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯(3LX3次)和水飽和的正丁醇(3LX3次)萃取，分別 得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔樹脂 富集，先用5 %乙醇沖洗14個柱體積除去大極性物質，再用65 %乙醇洗脫15個柱體積，收集 65 %乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。
[0022]實施例3:提取物3的制備
[0023] (a)將5kg干燥的太行菊和重葉蓮（占總重15 % )混合，粉碎，用70 %乙醇熱回流提 取3次(25LX3次），每次2小時，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液(3L);(b)對步驟(a) 濃縮液依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次)和水飽和的正丁醇(3L X 3次)萃取，分 別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔樹 脂富集，先用15%乙醇沖洗10個柱體積除去大極性物質，再用75 %乙醇洗脫11個柱體積，收 集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。
[0024]實施例4:實施例1的對比，不含重葉蓮
[0025] (a)將5kg干燥的太行菊粉碎，用65%乙醇熱回流提取3次(25L X 3次），每次2小時， 合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液（3L);(b)對步驟(a)濃縮液依次用石油醚（3LX 3 次）、乙酸乙酯（3LX 3次)和水飽和的正丁醇（3LX 3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸 乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔樹脂富集，先用10%乙醇沖洗 12個柱體積除去大極性物質，再用70 %乙醇洗脫13個柱體積，收集70 %乙醇洗脫液，減壓濃 縮，噴霧干燥，得提取物4。
[0026]實施例5:實施例1的對比，重葉蓮占總重
[0027] (a)將5kg干燥的太行菊和重葉蓮（占總重20 % )混合，粉碎，用65 %乙醇熱回流提 取3次(25LX3次），每次2小時，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液(3L);(b)對步驟(a) 濃縮液依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次)和水飽和的正丁醇(3L X 3次)萃取，分 別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔樹 脂富集，先用10%乙醇沖洗12個柱體積除去大極性物質，再用70 %乙醇洗脫13個柱體積，收 集70 %乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥，得提取物5。
[0028]實施例6:自由基清除作用試驗
[0029] 按照實施例1~5制備得到提取物1~5。分別用純凈水溶解，配制成每毫升含Img提 取物的供試品溶液1~5。
[0030] 參考Fenton反應體系模型，利用H2O2與Fe 2+混合產生· OH，但由于· OH具有很高的 反應活性，存活時間短，若在體系中加入水楊酸，就能有效地捕捉· 0H，并產生有色產物。該 產物在波長510nm處有強吸收，若在反應體系中加入具有清除· OH功能的被測物，便會與水 楊酸競爭· 0H，而使有色產物生成量減少。采用固定反應時間法，在相同體積的反應體系 (8·8mmol · L-1IfeCfeCLSmLdmmol · L-1FG2+CLSmLdmmol · L-1 水楊酸-乙醇溶液0.4mL)中分別 加入供試品溶液1~5各0.1 mL，并以蒸餾水為參比，與試劑空白液比較，在510nm處測量各濃 度下的吸光度Ax，便能測定被測物對· OH的清除作用，計算公式為：
[0031 ]消除率（％ ) = (Aq-Ax)/Aq X 100%。
[0032]其中Ao為空白對照液的吸光度，Ax為加入供試品溶液后的吸光度。
[0033]試驗結果表明，供試品溶液1~3均具有非常高的自由基清除作用，清除率約為 85% ;供試品溶液4和5對自由基清除率僅為22%，顯著低于供試品溶液1~3。
[0034]實施例7:防霉作用試驗
[0035]按照實施例1~5制備得到提取物1~5。分別用純凈水溶解，配制成每毫升含Img提 取物的供試品溶液1~5。
[0036] 量取IOmL新鮮牛奶置于經過滅菌處理的塑料杯中，分別添加供試品溶液1~5各 ImL(液面直徑5. Ocm)，于35 °C培養箱中自然生菌，以添加 ImL質量體積分數0.01 %山梨酸鉀 溶液的新鮮牛奶作為陽性對照，以不添加任何物質的新鮮牛奶作為空白對照。培養72h后， 按照文獻方法(杜敏華等，超聲波提取油菜花黃色素及其防腐作用研究，中國油料作物學 報，2007年02期)觀察牛奶表面的霉變程度，根據菌斑數量和級別計算病情指數，并統計霉 菌孢子數。按直徑(D)可將霉斑大小分為5個級別：I級，D < Imm; Π 級，lmm〈D < 2mm; ΙΠ 級，2_ 〈0仝3111111;1￥級，3111111〈0<6111111;/^級，0>61111]1。病情指數(1〇的計算公式為 ：
[0037] K= Σ (各級霉斑數X各級級別)/M
[0038] 其中，M =觀察樣面面積/各級霉斑面積X最高級別=(π X625)/(31 X9) X 5 = 347。
[0039]向培養72h的牛奶樣品中加入玻璃球，振蕩攪拌均勻后，取1滴牛奶于載玻片上制 片，每個樣品制片3張，在SZXlO顯微鏡（日本Olympus公司生產）下觀察，每個載玻片隨機選 取3個視野，統計霉菌孢子數，計算平均值。結果見表1。
[0040]表1提取物1~5防霉變能力分析結果(X±SD，n = 9)
[0042] 結果表明：供試品溶液1~3能使牛奶中各級霉斑數總體上均減少，霉斑總數也減 少，病情指數也隨之減小，牛奶中的霉菌孢子數也減少。供試品溶液1~3的防霉效果接近于 陽性對照山梨酸鉀。供試品溶液4和5防霉效果較差，明顯不如供試品溶液1~3。
[0043] 上述實施例的作用在于說明本發明的實質性內容，但并不以此限定本發明的保護 范圍。本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發明的技術方案進行修改或者等同替換， 而不脫離本發明技術方案的實質和保護范圍。
【主權項】
1. 一種防止食品氧化和霉變的太行菊提取物，其特征在于由以下步驟制備：（a)將干燥 的太行菊和重葉蓮混合，粉碎，用60~70%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味得 到濃縮液；（b)對步驟(a)濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到 石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用大孔樹脂富集，先用5 ~15%乙醇沖洗10~14個柱體積除去大極性物質，再用65~75 %乙醇洗脫11~15個柱體 積，收集65~75%乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥;其中，重葉蓮占太行菊與重葉蓮總重的 5% ~15%〇2. 根據權利要求1所述的太行菊提取物，其特征在于：步驟(a)中所述熱回流提取采用 的乙醇濃度為65 %。3. 根據權利要求1所述的太行菊提取物，其特征在于:步驟(c)中所述大孔樹脂為AB-8 型大孔樹脂。4. 根據權利要求1所述的太行菊提取物，其特征在于:步驟(c)中先用10%乙醇沖洗12 個柱體積除去大極性物質。5. 根據權利要求1所述的太行菊提取物，其特征在于:步驟(c)中除去大極性物質后，再 用70 %乙醇洗脫13個柱體積，收集70 %乙醇洗脫液。6. -種防霉抗氧化食品保鮮劑，其特征在于:含有權利要求1~5任一所述的太行菊提 取物。
【專利摘要】本發明公開了一種以太行菊為主要原料的防霉抗氧化食品保鮮劑，含有太行菊提取物。太行菊提取物由以下步驟制備：(a)將干燥的太行菊和重葉蓮混合，粉碎，用60～70％乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液；(b)對步驟(a)濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(c)正丁醇萃取物用大孔樹脂富集，先用5～15％乙醇沖洗10～14個柱體積除去大極性物質，再用65～75％乙醇洗脫11～15個柱體積，收集65～75％乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥；其中，重葉蓮占太行菊與重葉蓮總重的5％～15％。
【IPC分類】A23L3/3472
【公開號】CN105707645
【申請號】CN201610124280
【發明人】吳正鋒
【申請人】吳正鋒