多功能細胞洗脫罐的制作方法
【專利摘要】本實用新型提供一種多功能細胞洗脫罐，該洗脫罐下部裝有可拆卸的不同濾網及相應的閥門，有效解決了細胞貼壁培養，換液、消化、細胞洗滌收集、微載體排放等問題，消化下來的細胞加入新培養液可直接轉移去擴增。該多功能細胞洗脫罐包括細胞培養罐、濾網支架和閥門，所述濾網支架中部開有閥門孔，閥門孔上安裝第一閥門；濾網支架上至少還開有兩組開槽，其中一組開槽上安裝有過濾微載體的濾網，該濾網下面設有排液腔，排液腔底部設有排液孔，并在該排液孔上安裝有第二閥門；另一組開槽上安裝有過濾細胞的濾網，濾網下面設有排液腔，該排液腔底部也設有排液孔，該排液孔上安裝有第三閥門。
【專利說明】多功能細胞洗脫罐
[0001]【技術領域】:
[0002]本實用新型屬生物【技術領域】，涉及一種多功能細胞洗脫罐，該洗脫罐集細胞貼壁培養、換液、細胞消化、細胞洗滌收集、微載體排放等多功能為一體。
[0003]【背景技術】:
[0004]培養貼壁細胞一般是在攪拌式細胞培養罐中，用微載體懸浮培養，貼壁培養的優點是細胞緊密貼附于固相表面，可直接傾去舊培養液，清洗后直接加入新培養液，易更換培養液，因細胞固定于固相表面，不需要復雜的細胞截留系統，便于采用灌注培養，達到提高細胞的目的，對于牢固貼附在固體介質表面上生長的細胞要進行傳代培養，消化是必不可少的操作步驟，消化后的細胞加入營養液制成細胞懸浮液，接種后細胞可以再次貼壁和增值。
[0005]但是用普通的細胞培養罐進行消化十分困難，往往需將細胞連同微載體從培養罐中取出，放入專用的細胞洗脫罐進行消化，然后將消化下來的細胞再放入另一個大罐進行放大培養，另一方面，在普通細胞罐中換液培養也十分困難，需要將攪拌停下來，讓培養罐靜止下來，待微載體沉淀，再將沉淀物上面的培養液抽吸掉，再加新培養液，這樣做換液不但不徹底，同時也會因細胞靜止缺氧而遭到損傷。
[0006]
【發明內容】
:
[0007]為解決上述問題，本實用新型在攪拌式細胞培養罐下部裝有可拆卸的不同濾網及排放裝置，有效解決了細胞貼壁(微載體)培養，換液、消化、細胞洗滌收集、微載體排放等問題，細胞加入新培養液可直接轉移去擴增。
[0008]本實用新型的具體技術方案如下:
[0009]多功能細胞洗脫罐，包括細胞培養罐、濾網支架和閥門，所述濾網支架中部開有閥門孔，閥門孔上安裝第一閥門；濾網支架上至少還開有兩組開槽，其中一組開槽上安裝有過濾微載體的濾網，該濾網下面設有排液腔，排液腔底部設有排液孔，并在該排液孔上安裝有第二閥門；另一組開槽上安裝有過濾細胞的濾網，濾網下面設有排液腔，該排液腔底部也設有排液孔，該排液孔上安裝有第三閥門。
[0010]本實新型的進一步設計在于:
[0011]所述濾網支架上的開槽為扇形槽、半圓環槽、同心圓環槽、矩形槽或多邊形槽，其上的濾網形狀與開槽結構相適配。
[0012]所述濾網支架上的開槽優選為二組。
[0013]所述排液腔截面呈矩形或V字形，排液孔設于矩形或V字形排液腔的底部。
[0014]在攪拌式細胞培養罐底部焊接或連接一個法蘭，濾網支架與細胞培養罐底部法蘭通過緊固件連為一體。
[0015]濾網支架采用不銹鋼板制成，濾網與濾網支架采用焊接或通過粘合劑連接。
[0016]本實用新型相比現有技術具有如下優點:
[0017]1、本實用新型設計巧妙，集多功能于一體，換液不需要將微載體沉淀下來，再抽出上面清液，省時省力，而且采用該裝置換液簡單、徹底。
[0018]2、本實用新型使用時，細胞洗脫、收集不需要從罐里取出，可直接在罐中洗脫，收集細胞，可滿足不同的洗脫、收集細胞的要求，可直接進行細胞轉移，生產安全、可靠。
[0019]3、本實用新型解決了大規模生產貼壁細胞的瓶頸問題，可使微載體貼壁培養任意放大。
[0020]【專利附圖】
【附圖說明】:
[0021]圖1為本實用新型的結構示意圖。
[0022]圖2為本實用新型中濾網支架和濾網的示意圖。
[0023]圖3為本實用新型中濾網支架的結構示意圖。
[0024]圖4為本實用新型的整體結構示意圖。
[0025]圖中:1-第二閥門；2_第二閥門；3-第一閥門；4-第一濾網；5_第二濾網；6-濾網支架；7_閥門孔；8_環形槽；9_排液腔；10_細胞培養罐。
[0026]【具體實施方式】:
[0027]實施一:
[0028]本實例中，多功能細胞洗脫罐包括細胞培養罐(可采用攪拌式細胞培養罐)和閥門，細胞培養罐底部安裝濾網支架，該濾網支架中部開有閥門孔，閥門孔安裝第一閥門。濾網支架上還開有兩組同心半圓環槽，開槽上設有濾網，該濾網下面設有排液腔，排液腔底部設有排液孔。其中一組半圓環槽上安裝有過濾微載體的濾網，該濾網細胞可以通過，微載體不能通過，濾網下面有排液腔讓透過濾網的液體流動，濾網下面槽底開有圓孔，用于安裝第二閥門；另一組半圓環槽上安裝有過濾細胞的濾網，該濾網細胞不能通過，濾網下面有排液腔讓透過濾網的液體流動，濾網下面槽底開有圓孔，用于安裝第三閥門。
[0029]兩組同心半圓環槽下部的排液腔，其截面呈矩形，排液孔設于矩形的底部。
[0030]濾網支架采用不銹鋼板制成，最外層鉆有若干小孔用于與罐體下部法蘭連接，亦可不鉆孔，直接與罐體下部法蘭焊死。
[0031]實施二:
[0032]如圖1-圖3所示，本實例的多功能細胞洗脫罐包括細胞培養罐10 (可采用攪拌式細胞培養罐)、濾網支架，以及各閥門。濾網支架中部開有閥門孔7，閥門孔7上安裝第一閥門3。
[0033]濾網支架6上還開有兩組同心環形槽，其中內圈環形槽上安裝有過濾微載體的濾網(第一濾網4)，該濾網下面設有排液腔9，排液腔9底部設有排液孔，并在該排液孔上安裝有第二閥門1，該濾網細胞可以通過，微載體不能通過，濾網下面有空間讓透過濾網的液體流動。
[0034]外圈的環形槽8上安裝有過濾細胞的濾網(第二濾網5)，濾網下面設有排液腔，該排液腔底部也設有排液孔，該排液孔上安裝有第三閥門2，該濾網細胞不能通過，濾網下面有空間讓透過濾網的液體流動。
[0035]兩組同心環形槽下部的排液腔9，形狀均為圓環形，其截面呈V字形，排液孔設于V字形的底部。
[0036]濾網支架6采用不銹鋼板制成。濾網與濾網支架采用焊接方式連接。在細胞培養罐底部焊接或連接一個法蘭，濾網支架與細胞培養罐底部法蘭通過緊固件連為一體。
[0037]本實用新型的整體結構如圖4所示。
[0038]本實用新型的使用過程如下:
[0039]細胞在培養前多功能細胞洗脫罐CIP (在位清洗)、SIP (在位滅菌)以后，第一閥門、第二閥門、第三閥門應該全部關閉，細胞貼附在微載體上培養，中途需要換液時，將細胞可以通過，微載體不能通過的第二閥門打開，培養液和懸浮在培養液中的死細胞及未貼壁細胞，經濾網及閥門排出罐外，若需要徹底更換老培養液可關閉第二閥門加PBS懸浮，然后再打開第二閥門排放PBS、最后關閉第二閥門，向罐內加新鮮培養液，重新培養。
[0040]培養完進行消化、收集細胞:
[0041 ] 培養完成以后打開第二閥門，將培養基排放干凈，關閉第二閥門，PBS重懸微載體，然后停止攪拌，再次打開第二閥門，排清洗液，并關閉第二閥門，加入胰酶攪拌，消化細胞，待細胞消化下來以后，打開細胞不能通過濾網下面的第三閥門，排清消化液，關閉第三閥門，加終止消化液(或洗液)重新懸浮，進行細胞洗滌，然后打開第三閥門，排凈洗液，并關閉第三閥門，加入懸浮細胞保護液或培養液，打開第二閥門進行細胞分裝保存，或直接轉移到下一個細胞罐繼續進行擴增培養。
[0042]微載體的收集和排放:
[0043]細胞轉移完成后，關閉第二閥門，加水懸浮載體，然后打開第一閥門，進行微載體的收集或排放。
[0044]最后進行多功能細胞洗脫罐的CIP和SIP，SIP完成后卸下濾網支架及閥門，用超聲波再次清洗濾網及閥門，最后，重新裝回細胞罐上，準備下一批的生產。
[0045]以上所述僅為本實用新型的一個【具體實施方式】，不構成對本實用新型的任何限制。凡在本實用新型的精神和原則之內所作的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本實用新型的保護范圍之內。
【權利要求】
1.多功能細胞洗脫罐，包括細胞培養罐、濾網支架和閥門，其特征是:所述濾網支架中部開有閥門孔，閥門孔上安裝第一閥門；濾網支架上至少還開有兩組開槽，其中一組開槽上安裝有過濾微載體的濾網，該濾網下面設有排液腔，排液腔底部設有排液孔，并在該排液孔上安裝有第二閥門；另一組開槽上安裝有過濾細胞的濾網，濾網下面設有排液腔，該排液腔底部也設有排液孔，該排液孔上安裝有第三閥門。
2.根據權利要求1所述多功能細胞洗脫罐，其特征是:濾網支架上的開槽為扇形槽、半圓環槽、同心圓環槽、矩形槽或多邊形槽，其上的濾網形狀與開槽結構相適配。
3.根據權利要求2所述多功能細胞洗脫罐，其特征是:所述濾網支架上的開槽為二組。
4.根據權利要求1、2或3所述多功能細胞洗脫罐，其特征是:所述排液腔截面呈矩形或V字形，排液孔設于矩形或V字形排液腔的底部。
5.根據權利要求1所述多功能細胞洗脫罐，其特征是:在攪拌式細胞培養罐底部焊接或連接一個法蘭，濾網支架與細胞培養罐底部法蘭通過緊固件連為一體。
6.根據權利要求1所述多功能細胞洗脫罐，其特征是:所述濾網支架采用不銹鋼板制成。
7.根據權利要求1所述多功能細胞洗脫罐，其特征是:所述濾網與濾網支架采用焊接或通過粘合劑連接。
【文檔編號】C12M3/00GK204224608SQ201420699089
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年11月20日 優先權日:2014年11月20日
【發明者】朱學仁, 朱羚 申請人:南京比瑞生物科技有限公司