一種無花果乳清多肽及其制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種無花果乳清多肽及其制備方法，屬于生物【技術領域】，其制備方法主要包括以下步驟：1）無花果多肽水解液的制備；2）乳清蛋白的水解；3）乳清多肽的分離純化；4）乳清多肽分子量的測定。本發明利用無花果果汁中含有的蛋白酶水解乳清蛋白，使得乳清蛋白轉化為小分子的乳清多肽，采用酶工程技術和微生物發酵技術研制出有利于人體消化吸收，滿足人體健康營養需求的無花果乳清多肽發酵乳。既增強人體對乳清蛋白的吸收，又提高了乳品的附加值，同時本發明的實施也為乳清資源的利用提供了有效的方法。
【專利說明】一種無花果乳清多肽及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于生物【技術領域】，具體涉及一種無花果乳清多肽及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 乳清蛋白是生產工業干酪的副產物，乳清的主要成分是乳清蛋白，乳清蛋白的主 要成分包括a-乳白蛋白、乳球蛋白、乳鐵蛋白、免疫球蛋白、血清蛋白、脂肪球膜蛋白 等，同時乳清蛋白中含有可被機體直接吸收的生物活性肽。在牛乳中酪蛋白的蛋白質效率 (protein efficiency ratio,PER)值只有2. 5,而乳清蛋白卻為3. 0,僅次于雞蛋蛋清，乳清 蛋白被稱為蛋白之王，是公認的一種高營養價值的蛋白質。目前，大量乳清作為廢水排放， 不僅浪費了營養資源污染了生態環境，而且降低了乳品的附加值。乳清資源的開發利用很 早就受到了人們的重視。
[0003] 無花果carica Zi/w)是一種開花植物，隸屬于桑科格屬，主要生長于一些 熱帶和溫帶地區，科學研究表明，無花果含有大量的無花果蛋白酶(類巰基蛋白酶)，對蛋白 質水解有著很好的作用。在乳清中添加無花果果汁，利用無花果中所含有的類巰基蛋白酶 水解乳清，這樣既可以水解得到乳清多肽，另外也可以使得乳清水解液帶有無花果的果香 味道。
[0004] 乳清蛋白在酸性條件下的溶解性遠遠優于其他蛋白，能防止飲料沉淀、分層現象， 這種特點使乳清成為酸性飲料理想的蛋白質資源，在蛋白飲料、果汁牛奶、固體飲料、酸性 乳飲料中得到廣泛應用。科學研究表明乳清多肽對人體吸收代謝方面有著重要的作用且人 體對其吸收利用要優于某些氨基酸，同時無花果水解過的乳清多肽具有一定的生物活性， 乳清多肽在體內和體外顯示出不同的生理功能，如：抗血壓、抗菌、抗氧化、免疫調節、促進 消化吸收等。
[0005] 同時乳清蛋白質是熱敏性的蛋白質，在制作飲料熱處理過程中容易發生熱變性而 降低在水中的溶解度，也使乳清的利用范圍受到很大的限制同時產生的沉淀也影響了飲料 產品的感官特性；若棄去沉淀，則其營養價值會大大降低，本項目旨在研究利用無花果果汁 中含有無花果蛋白酶的特點，對酶水解乳清蛋白的工藝進行優化，從而制備應用價值優于 乳清蛋白的乳清多肽，提高了乳清蛋白的利用率，同時本發明也為提高乳清資源的利用率 和工業生產提供技術參數和理論指導。
【發明內容】
[0006]本發明的目是利用無花果果汁中含有的蛋白酶水解乳清蛋白，使得乳清蛋白轉化 為小分子的乳清多肽，采用酶工程技術和微生物發酵技術研制出有利于人體消化吸收，滿 足人體健康營養需求的無花果乳清多肽發酵乳。這樣既可以增強人體對乳清蛋白的吸收， 同時也提高了乳品的附加值，同時本發明的實施也為乳清資源的利用提供了有效的方法， 避免了由于大量干酪副產物的浪費造成的資源流失和環境污染。
[0007]本發明一種無花果乳清多肽，由如下制備方法制得： 1)無花果多肽水解液的制備 選取成熟的無花果，清洗干凈后切成丁，利用榨汁機榨汁，無花果果汁用濾布粗濾，再 用離心機離心分離，離心機轉速2000r/min、分離時間15min，取上清液為酶原； 2 )乳清蛋白的水解 在乳清蛋白中添加無花果果汁，進行乳清蛋白水解，水解條件為45-55°C條件下水解 90-120min，無花果果汁添加量為質量百分比10-20%、用pH3. 5的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液 調節乳清pH至6 ; 3) 乳清多肽的分離純化 將乳清多肽水解液置于截留分子量lOOOODa的透析袋中對純水透析24h，采用納濾過 濾裝置濃縮乳清多肽，采用Sephadex G50對乳清多肽進行分離純化，得到乳清多肽； 4) 乳清多肽分子量的測定 測得乳清多肽分子量范圍為1290-8492Da，即得無花果乳清多肽。
[0008] 本發明無花果乳清多肽的制備方法，包括如下工藝步驟： 1)無花果多肽水解液的制備 選取成熟的無花果，清洗干凈后切成丁，利用榨汁機榨汁，無花果果汁用濾布粗濾，再 用離心機離心分離，離心機轉速2000r/min、分離時間15min，取上清液為酶原； 2 )乳清蛋白的水解 在乳清蛋白中添加無花果果汁，進行乳清蛋白水解，水解條件為45-55°C條件下水解 90-120min，無花果果汁添加量為質量百分比10-20%、用pH3. 5的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液 調節乳清pH至6 ; 3) 乳清多肽的分離純化 將乳清多肽水解液置于截留分子量lOOOODa的透析袋中對純水透析24h，采用納濾過 濾裝置濃縮乳清多肽，采用Sephadex G50對乳清多肽進行分離純化，得到乳清多肽； 4) 乳清多肽分子量的測定 測得乳清多肽分子量范圍為1290-8492Da，即得無花果乳清多肽。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0009] 圖1是本發明乳清活性多肽分離純化圖(所用的柱子65mm*15mm); 圖2是本發明乳清活性多肽純度鑒定圖(所用的柱子65mm*15mm); 圖3是本發明乳清多肽水解液液相色譜圖； 圖4是標準蛋白的液相色譜圖（1、胰島素，2、酵母核糖核酸，3、桿菌肽，4、還原性谷胱 甘肽)。
【具體實施方式】
[0010] 一、乳清多肽水解液的制備 選取成熟的無花果，清洗干凈后切成丁，利用榨汁機榨汁，無花果果汁用濾布粗濾，再 用離心機離心分離（2000r/min，15min)，取上清液為酶原。
[0011] 取l〇〇mL乳清，用pH3.5的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液調節乳清pH至6,添加10-20% 無花果果汁，最佳添加量為15%，在45-55°C條件下水解90-120min，最適溫度為50°C，最適 水解時間90min，90°C條件下滅酶lOmin。
[0012] 二、乳清多肽水解度檢測方法 吸取lmL樣品，加入80mL蒸餾水，開動磁力攪拌器，用0. 05molLNa0H標準液滴定至pH 為8. 2。加入10ml甲醛溶液，混勻，再用0. 05mol/LNa0H標準液繼續滴定至pH為9. 2,記下 氫氧化鈉標準液所消耗的毫升數。同時取蒸餾水80mL，做空白對照試驗。
【權利要求】
1. 一種無花果乳清多肽，其特征在于由如下制備方法制得： 1)無花果多肽水解液的制備 選取成熟的無花果，清洗干凈后切成丁，利用榨汁機榨汁，無花果果汁用濾布粗濾，再 用離心機離心分離，離心機轉速2000r/min、分離時間15min，取上清液為酶原； 2 )乳清蛋白的水解 在乳清蛋白中添加無花果果汁，進行乳清蛋白水解，水解條件為45-55°C條件下水解 90-120min，無花果果汁添加量為質量百分比10-20%、用pH3. 5的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液 調節乳清pH至6 ; 3) 乳清多肽的分離純化 將乳清多肽水解液置于截留分子量lOOOODa的透析袋中對純水透析24h，采用納濾過 濾裝置濃縮乳清多肽，采用Sephadex G50對乳清多肽進行分離純化，得到乳清多肽； 4) 乳清多肽分子量的測定 測得乳清多肽分子量范圍為1290-8492Da，即得無花果乳清多肽。
2. -種如權利要求1所述無花果乳清多肽的制備方法，其特征在于包括如下工藝步 驟： 1)無花果多肽水解液的制備 選取成熟的無花果，清洗干凈后切成丁，利用榨汁機榨汁，無花果果汁用濾布粗濾，再 用離心機離心分離，離心機轉速2000r/min、分離時間15min，取上清液為酶原； 2 )乳清蛋白的水解 在乳清蛋白中添加無花果果汁，進行乳清蛋白水解，水解條件為45-55°C條件下水解 90-120min，無花果果汁添加量為質量百分比10-20%、用pH3. 5的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液 調節乳清pH至6 ; 3) 乳清多肽的分離純化 將乳清多肽水解液置于截留分子量lOOOODa的透析袋中對純水透析24h，采用納濾過 濾裝置濃縮乳清多肽，采用Sephadex G50對乳清多肽進行分離純化，得到乳清多肽； 4) 乳清多肽分子量的測定 測得乳清多肽分子量范圍為1290-8492Da，即得無花果乳清多肽。
【文檔編號】A23J3/34GK104431287SQ201410845273
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月31日 優先權日:2014年12月31日
【發明者】趙迎慶 申請人:臨沂格瑞食品有限公司