一種去氧膽酸鹽瓊脂培養基及其應用的制作方法
【專利摘要】本發明為微生物領域，特別涉及一種去氧膽酸鹽瓊脂培養基，所述培養基的組分包括EC肉湯、2.0g/L去氧膽酸鹽、1.0g/L檸檬酸鈉、0.065g/L中性紅、1.0g/L檸檬酸鐵、15.0g/L瓊脂，pH值為7.2-7.4；所述EC肉湯為每升EC肉湯中含有胰蛋白胨20.0g、乳糖10.0g、磷酸二氫鉀2.0g、氯化鈉5.0g、磷酸氫二鉀4.0g，其余為蒸餾水。本發明培養基組方簡單，制備操作方便，成本低，利于推廣應用；菌生長迅速，變異率低；便于觀察，分析。
【專利說明】一種去氧膽酸鹽瓊脂培養基及其應用
【技術領域】
[0001] 本發明為微生物領域，特別涉及一種去氧膽酸鹽瓊脂培養基及其應用。
【背景技術】
[0002] 世界上微生物間的多樣化和變異性及物種生境的生態復雜性，帶來了探討、了解 微生物的廣泛性、復雜性和長久性。微生物的一個物種就是一個獨特的基因庫，微生物的新 陳代謝是錯綜復雜的生命活動，在長期的生物進化中，形成了一套完整統一的靈敏調節系 統，依靠這種調節系統，嚴格控制各種代謝活動。有條不紊協調進行并靈活適應環境。不同 培養基，因培養基配方不同，影響其生長和變異情況。
[0003] 培養基（Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料， 一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。有的培養 基還含有抗菌素和色素，用于單種微生物培養和鑒定。培養基由于配制的原料不同，使用要 求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮后，易被細菌污染或分解變 質，因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基（如組織培 養基），較長時間的貯存，必須放在3?6°C的冰箱內。由于液體培養基不易長期保管，現在 均改制成粉末。
[0004] 培養基根據化學分類為天然培養基、組合培養基和半組合培養基；根據物理分類 為液體培養基、固定培養基和脫水培養基；根據微生物分類為選擇性培養基、鑒別培養基。
[0005] 目前還不能完全從生化反應的基本原理來推斷和計算出適合某一菌種的培養基 配方，只能用生物化學、細胞生物學、微生物學等的基本理論，參照前人所使用的較適合某 一類菌種的經驗配方，再結合所用菌種和產品的特性，采用搖瓶、玻璃罐等小型發酵設備， 按照一定的實驗設計和實驗方法選擇出較為適合的培養基。
[0006] 培養基設計的基本步驟是：
[0007] 根據前人的經驗和培養基成分確定時一些必須考慮的問題，初步確定可能的培養 基成分
[0008] 通過單因子實驗最終確定出最為適宜的培養基成分
[0009] 當培養基成分確定后，剩下的問題就是各成分最適的濃度，由于培養基成分很多， 為減少實驗次數常采用一些合理的實驗設計方法。這些實驗往往基于多因子實驗，包含均 勻設計、正交實驗設計、響應面分析等。
【發明內容】
[0010] 本發明克服現有技術中的不足，提供一種去氧膽酸鹽瓊脂培養基及其應用。
[0011] 本發明運用生物化學，微生物學及無機、有機、分析化學和熒光技術的原理，對不 同的碳源、氮源、無機鹽類、維生素、生長促進劑等諸類營養組分的組合進行篩選，對培養基 的PH值、離子強度、氧化-還原電勢、表面張力、氣體環境等物化因子進行了比較，研究出了 本發明的培養基。
[0012] 本發明所采用的技術方案為：
[0013] 一種去氧膽酸鹽瓊脂培養基，所述培養基的組分包括EC肉湯、2. Og/L去氧膽酸 鹽、I. Og/L檸檬酸鈉、0. 065g/L中性紅、I. Og/L檸檬酸鐵、15. Og/L瓊脂，pH值為7. 2-7. 4 ;
[0014] 在以上方案的基礎上，所述EC肉湯為每升EC肉湯中含有胰蛋白胨20. 0g、乳糖 10. 〇g、磷酸二氫鉀2. 0g、氯化鈉5. 0g、磷酸氫二鉀4. 0g，其余為蒸餾水。
[0015] 本發明還公開了去氧膽酸鹽瓊脂培養基的應用，用于大腸菌群固體平板測定。
[0016] 稱取本品43. 0g，加入1000ml蒸餾水，加熱溶解并不停攪拌，煮沸1分鐘。冷卻至 45-50°C左右時，傾入無菌平皿，無需高壓滅菌。
[0017] 本發明的有益效果：
[0018] 1、培養基組方簡單，制備操作方便，成本低，利于推廣應用；
[0019] 2、菌生長迅速，變異率低；
[0020] 3、便于觀察，分析。
【具體實施方式】
[0021] 實施例1 :
[0022] -種去氧膽酸鹽瓊脂培養基，所述培養基的組分包括EC肉湯、2. 0g/L去氧膽酸 鹽、I. 0g/L檸檬酸鈉、0. 065g/L中性紅、I. 0g/L檸檬酸鐵、15. 0g/L瓊脂，pH值為7. 2-7. 4 ;
[0023] 所述EC肉湯為每升EC肉湯中含有胰蛋白胨20. 0g、乳糖10. 0g、磷酸二氫鉀2. 0g、 氯化鈉5. 0g、磷酸氫二鉀4. 0g，其余為蒸餾水。
[0024] 稱取本品43. 0g，加入1000ml蒸餾水，加熱溶解并不停攪拌，煮沸1分鐘。冷卻至 45_50°C左右時，傾入無菌平皿，無需高壓滅菌。
[0025] 在 36 ±1°C 培養 18-24 小時
[0026]
【權利要求】
1. 一種去氧膽酸鹽瓊脂培養基，其特征在于所述培養基的組分包括EC肉湯、2. Og/L 去氧膽酸鹽、1. 〇g/L檸檬酸鈉、0. 065g/L中性紅、1. Og/L檸檬酸鐵、15. Og/L瓊脂，pH值為 7. 2-7. 4。
2. 根據權利要求1所述的去氧膽酸鹽瓊脂培養基，其特征在于所述EC肉湯為每升EC 肉湯中含有胰蛋白胨20. 0g、乳糖10. 0g、磷酸二氫鉀2. 0g、氯化鈉5. 0g、磷酸氫二鉀4. 0g， 其余為蒸餾水。
3. -種根據權利要求1所述的去氧膽酸鹽瓊脂培養基的應用，其特征在于用于大腸菌 群固體平板測定。
【文檔編號】C12Q1/10GK104278076SQ201410510450
【公開日】2015年1月14日 申請日期:2014年9月28日 優先權日:2014年9月28日
【發明者】劉振宇, 李鵬 申請人:青島康和食品有限公司