一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法

一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法
【專利摘要】本發明屬于污染地表水修復領域，目的在于針對脫氮酶修復氨氮污染地表水過程中酶的有效作用周期短、對氨氮目標專性差的問題，提供了一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法。該方法為：向海藻酸鈉水溶液中加入脫氮酶，保持混合液溫度為38-42℃，攪拌均勻后，穩定20-25min；將上述混合溶液滴加到殼聚糖水溶液中，攪拌溶液反應1.2-1.5h，制得固定化脫氮酶膠囊；將上述膠囊投入到聚乙烯吡咯烷酮水溶液中，不間斷攪拌，攪拌強度為120-140rpm，反應0.3-0.4h，即得到靶向脫除水中氨氮的可控釋放酶膠囊。該膠囊的膜壁收縮或膨脹，使膠囊中固定的脫氮酶發生靶向性控制釋放，有效去除地表水中的氨氮。
【專利說明】一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于污染地表水修復領域，特別涉及一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法。
【背景技術】
[0002]地表水污染物種類繁多，其中氨氮是導致地表水富營養化的主要因素。農業面源污染物(化肥)輸出是地表水氨氮超標的主要原因之一，經處理排放的市政和工業污廢水也會導致地表水氨氮積累。氨氮在地表水體中的環境化學行為復雜，可以存在多種化學形態，而各種形態之間還會因生物或化學作用發生轉化。將地表水體中的氨氮濃度控制在較低水平，避免水體富營養化現象爆發，具有重要的意義。
[0003]氨氮污染地表水修復中常采取的方法包括:物理稀釋法、物理吸附法、化學氧化法、植物吸收法、微生物/酶降解法等。其中，微生物/酶降解法的機理是:在脫氮酶作用下，氮化合物發生氧化還原反應，轉化為氮氣釋放，或進一步轉化為二氧化氮氣體釋放。由于該過程無二次污染、高效迅速、凈化徹底、成本較低，而受到廣泛關注。
[0004]地表水體一般處于開放域中，受流速、流態、溫度、水生境、底泥組分等多因素耦合影響，氨氮在局部水域中的濃度經常呈現不均勻的現象；同時，由于生物脫氮是微生物硝化反硝化的聯合作用，硝化過程作為限速步驟，將氨氮轉化為硝態氮，而在氨氮濃度不均勻的地表水體中，這一過程需要持續較長時間才能完成。因此，氨氮污染地表水的原位微生物/酶修復難度較大。利用常規微生物/酶技術修復氨氮污染地表水存在以下缺陷:(I)游離微生物/酶在開放水域容易流失，且在土著環境中容易失去活性，因此微生物/酶的有效作用周期短；(2)游離微生物/酶對氨氮的目標專性差，在氨氮濃度不超標的水域，即便是固定化的微生物/酶，也會無效釋放，導致修復效率低。
[0005]為此，設計一種在開放水域中對目標污染物氨氮具有靶向針對性、且具備可控釋放功能的固定化酶體系，能夠解決脫氮酶有效作用周期短、對氨氮目標專性差的問題。

【發明內容】

[0006]本發明的目的在于針對脫氮酶修復氨氮污染地表水過程中酶的有效作用周期短、對氨氮目標專屬性差的問題，設計一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法，由該方法制備的膠囊的膜壁上，組裝有一種對水體中PH微小變化具有快速收縮-膨脹效應的功能材料，當水體中氨氮向硝態氮轉化時，水體局部微環境的PH將發生微小改變，此時膠囊壁膜孔將在上述功能材料響應下產生收縮或膨脹，從而使膠囊中固定的脫氮酶發生靶向性控制釋放，有效去除地表水中的氨氮。
[0007]為實現上述目的，本發明采用的技術方案為:
[0008]一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法，包括如下步驟:
[0009]1、制備海藻酸鈉水溶液:配制質量百分比為2.05~2.10%的海藻酸鈉水溶液；
[0010] 2、制備海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液:向步驟I得到的海藻酸鈉水溶液中加入脫氮酶，脫氮酶質量占混合溶液總質量的5-10%，較好為6-8%，保持混合液溫度為38-42°C，較好為39-41 °C，攪拌均勻，穩定20-25min，較好為22_24min ；
[0011]3、制備殼聚糖水溶液:配制質量百分比為0.4-0.8%，較好為0.5-0.7%的殼聚糖水溶液，調節PH為3.5-4.5，較好pH為3.8-4.2 ；
[0012]4、制備聚乙烯吡咯烷酮水溶液:配制質量百分比為0.5-1.0%，較好為0.6-0.8%的聚乙烯吡咯烷酮水溶液，調節pH為7.0-7.2，較好的pH為7.05-7.15 ；
[0013]5、制備固定化脫氮酶膠囊:將步驟2得到的海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液以每分鐘10-12滴的速度滴加到步驟3得到的殼聚糖水溶液中，其中殼聚糖水溶液與海藻酸鈉和脫氮酶混合溶液的體積比> 1:1，攪拌溶液，攪拌強度為160-180rpm,較好為165_175rpm,反應時間保持1.2-1.5h，較好為1.3-1.4h，制得固定化脫氮酶膠囊；
[0014]6、制備靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊:將步驟5得到的固定化脫氮酶膠囊投入到步驟4得到的聚乙烯吡咯烷酮水溶液中，膠囊在聚乙烯吡咯烷酮水溶液中能夠被浸潤即可，保持溶液溫度35-38°C，較好為36-37°C，不間斷攪拌，攪拌強度為120-140rpm，較好為125_135rpm，反應0.3-0.4h，較好為0.32-0.38h，即得到靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊。
[0015]上述可控釋放酶膠囊制備方法中，所述步驟5中，在向殼聚糖水溶液滴加海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液的同時，在反應容器底部通過微孔曝氣頭向混合液中均勻注入尺寸為50-70 μ m，較好為55-65 μ m的空氣氣泡。
[0016]上述可控釋放酶膠囊制備方法中，所述殼聚糖規格為:分子量80-100萬。
[0017]上述可控釋放酶膠囊制備方法中，所述海藻酸鈉水溶液，殼聚糖水溶液和聚乙烯吡咯烷酮水溶液經滅菌后使用；較好的滅菌方式為:lll°c下濕熱滅菌30min。
[0018]一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊，由上述的一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法制得。
[0019]本發明具有如下優點:
[0020]1、采用膠囊固定化的方式固定脫氮酶，在開放水域中脫氮酶不易流失，且脫氮酶一直處在膠囊固定化微環境的保護中，抗環境干擾能力強，特別是避免了土著環境的干擾。
[0021]2、選取聚乙烯吡咯烷酮作為膠囊膜孔開關，在溫和反應條件下，通過接枝共聚反應，將其組裝到殼聚糖-海藻酸鈉體系中。聚乙烯吡咯烷酮對因水體PH微小改變造成的電荷轉移具有快速空間收縮-膨脹響應，因此，聚乙烯吡咯烷酮能夠控制膠囊壁膜孔收縮與膨脹，即控制脫氮酶從膠囊中向外界釋放，有效延長了脫氮酶的作用周期。在開放水域中，本膠囊在第40天時，對水體中氨氮的轉化率仍保持81.6%以上。而在開放水域中，常規投放脫氮酶，通常作用效果不會超過2天。
[0022]3、地表水體中氨氮向硝態氮轉化過程中會發生pH改變，而制備得到的脫氮酶膠囊壁上的功能接枝體聚乙烯吡咯烷酮能夠感知這一變化，并作出快速響應，從而實現了對氨氮降解的靶向性，極大地提高了修復效率。
[0023]4、在向殼聚糖水溶液滴加海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液的同時，在反應容器底部通過微孔曝 氣頭向混合液中均勻注入，有助于膠囊的快速成型。
【具體實施方式】[0024]下面通過實施例對本發明做具體進一步詳細說明，而不是對本發明的保護范圍做限制。
[0025]聚乙烯吡咯烷酮、殼聚糖和海藻酸鈉均為市購；
[0026]脫氮酶購自中國科學院沈陽應用生態研究所；
[0027]微孔曝氣頭的型號33138416，生產廠家宜興市曄源水處理填料有限公司；
[0028]海藻酸鈉為化學純；殼聚糖規格:分子量80-100萬；聚乙烯吡咯烷酮純度為98%。
[0029]實施例1
[0030]1、制備海藻酸鈉水溶液(質量百分比)
[0031]用自來水浸泡海藻酸鈉粉末24h，然后配制濃度為2.05%的海藻酸鈉水溶液，再將海藻酸鈉水溶液在lire下濕熱滅菌30min，冷卻至39_40°C ；
[0032]2、制備海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液(質量百分比)
[0033]向上述制得的海藻酸鈉水溶液中加入脫氮酶，使脫氮酶占海藻酸鈉和脫氮酶混合溶液總質量的6%，保持混合溶液溫度為39-40°C，攪拌均勻，穩定22min ；
[0034]3、制備殼聚糖水溶液(質量百分比)
[0035]配制濃度為0.5%的殼聚糖水溶液，調節溶液pH = 3.8，然后在111°C下濕熱滅菌30min，冷卻到室溫；
[0036]4、制備聚乙烯吡咯烷酮水溶液(質量百分比)
[0037]配制濃度為0.6 %的聚乙烯吡咯烷酮水溶液，調節溶液pH =7.05，然后在111 °C下濕熱滅菌30min，冷卻至36-37°C ；
[0038]5、制備固定化脫氮酶膠囊
[0039]邊攪拌邊將制備得到海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液以每分鐘10滴的速度滴加到上述殼聚糖水溶液中，海藻酸鈉和脫氮酶混合溶液與殼聚糖水溶液二者的體積比為1:1，攪拌強度為165rpm,同時在反應容器底部通過微孔曝氣頭向混合液中均勻注入尺寸為55-μ m的空氣氣泡，反應時間保持1.3h，制得固定化脫氮酶膠囊；
[0040]6、制備靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊
[0041]將制備得到的固定化脫氮酶膠囊投入到上述配制好的聚乙烯吡咯烷酮水溶液中，膠囊在聚乙烯吡咯烷酮水溶液中能夠被浸潤即可，保持溶液溫度36-37°C，不間斷攪拌，攪拌強度為125rpm，反應0.32h后，濾掉液體，即得到靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊。
[0042]對該靶向脫除水中氨氮的可控釋放酶膠囊性能測試，使用40d后，該膠囊對水體中氨氮的轉化率保持在84.3%。
[0043]實施例2
[0044]1、制備海藻酸鈉水溶液(質量百分比)
[0045]用自來水浸泡海藻酸鈉粉末30h后，配制濃度為2.05%的海藻酸鈉水溶液；
[0046]2、制備海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液(質量百分比)
[0047]向上述制得的海藻酸鈉水溶液中加入脫氮酶，使脫氮酶占混合溶液總質量的8.0%,保持混合溶液溫度為40-41 °C，攪拌均勻，穩定24min ；
[0048]3、制備殼聚糖水溶液(質量百分比)[0049]配制濃度為0.7%的殼聚糖水溶液，調節溶液pH = 4.2 ;
[0050]4、制備聚乙烯吡咯烷酮水溶液(質量百分比)
[0051]配制濃度為0.8%的聚乙烯吡咯烷酮水溶液，調節溶液pH = 7.15 ；
[0052]5、制備固定化脫氮酶膠囊
[0053]邊攪拌邊將制備得到的海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液以每分鐘12滴的速度滴加到上述殼聚糖水溶液中，二者的體積為1:2，攪拌強度為175rpm，同時在反應容器底部通過微孔曝氣頭向混合液中均勻注入尺寸為65 μ m的空氣氣泡，反應時間保持1.4h，制得固定化脫氮酶膠囊；
[0054]6、制備靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊
[0055]將制備得到的固定化脫氮酶膠囊投入到上述配制好的聚乙烯吡咯烷酮水溶液中，膠囊在聚乙烯吡咯烷酮水溶液中能夠被浸潤即可，保持溶液溫度36-37°C，不間斷攪拌，攪拌強度為135rpm，反應0.38h，濾掉液體，用生理鹽水浸泡3.0h,即得到靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊。
[0056]對該靶向脫除水中氨氮的可控釋放酶膠囊性能測試，使用40d后，該膠囊對水體中氨氮的轉化率保持在84.6%。
[0057]實施例3
[0058]1、制備海藻酸鈉水溶液(質量百分比)
[0059]用自來水浸泡海藻酸鈉粉末36h后，配制濃度為2.1 %的海藻酸鈉水溶液；
[0060]2、制備海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液(質量百分比)
[0061]向上述制備得到的海藻酸鈉水溶液中加入脫氮酶，使脫氮酶占混合溶液總質量的5.0%,保持混合溶液溫度為38-39°C，攪拌均勻，穩定20min ；
[0062]3、制備殼聚糖水溶液(質量百分比)
[0063]配制0.4%的殼聚糖水溶液，調節溶液pH = 3.5 ;
[0064]4、制備聚乙烯吡咯烷酮水溶液(質量百分比)
[0065]配制0.5%的聚乙烯吡咯烷酮水溶液，調節溶液pH = 7.0 ;
[0066]5、制備固定化脫氮酶膠囊
[0067]邊攪拌邊將制得的海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液以每分鐘11滴的速度滴加到上述殼聚糖水溶液中，海藻酸鈉和脫氮酶混合溶液與殼聚糖水溶液的體積比為1: 5，攪拌強度為160rpm,同時在反應容器底部通過微孔曝氣頭向混合液中均勻注入尺寸為50 μ m的空氣氣泡，反應時間保持1.2h，制得固定化脫氮酶膠囊；
[0068]6、制備靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊
[0069]將制備得到的固定化脫氮酶膠囊投入到上述配制好的聚乙烯吡咯烷酮水溶液中，膠囊在聚乙烯吡咯烷酮水溶液中能夠被浸潤即可，保持溶液溫度為35-36°C，不間斷攪拌，攪拌強度為120rpm，反應0.3h，濾掉液體，即得到靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊。
[0070]對該靶向脫除水中氨氮的可控釋放酶膠囊性能測試，使用40d后，該膠囊對水體中氨氮的轉化率保持在81.9%。
[0071]實施例4
[0072]1、制備海藻酸鈉水溶液(質量百分比)[0073]用自來水浸泡海藻酸鈉粉末24h后，配制濃度為2.07%的海藻酸鈉水溶液，再將海藻酸鈉水溶液在lire下濕熱滅菌30min，冷卻至41-42°c ；
[0074]2、制備海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液(質量百分比)
[0075]向上述制備得到的海藻酸鈉水溶液中加入脫氮酶，使脫氮酶占混合溶液總質量的
10%，保持混合溶液溫度為41-42°c，攪拌均勻，穩定25min ；
[0076]3、制備殼聚糖水溶液(質量百分比)
[0077]配制0.8%的殼聚糖水溶液，調節溶液pH = 4.5，然后在111°C下濕熱滅菌30min，
冷卻至室溫；
[0078]4、制備聚乙烯吡咯烷酮水溶液(質量百分比)
[0079]配制1.0 %的聚乙烯吡咯烷酮水溶液，調節溶液pH = 7.2，然后在111°C下濕熱滅菌 30min，冷卻至 37-380C ；
[0080]5、制備固定化脫氮酶膠囊
[0081]邊攪拌邊將制得的海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液以每分鐘10滴的速度滴加到上述殼聚糖水溶液中，海藻酸鈉和脫氮酶混合溶與殼聚糖水溶液的體積比為1:4，攪拌強度為180rpm,同時在反應容器底部通過微孔曝氣頭向混合液中均勻注入尺寸為70 μ m的空氣氣泡，反應時間保持1.5h，制得固定化脫氮酶膠囊；
[0082]6、制備靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊
[0083]將制備得到的固定化脫氮酶膠囊投入到上述配制好的聚乙烯吡咯烷酮水溶液中，膠囊在聚乙烯吡咯烷酮水溶液中能夠被浸潤即可，保持溶液溫度為37-38°C，不間斷攪拌，攪拌強度為140rpm，反應0.4h，濾掉液體，用生理鹽水浸泡2.0h,即得到靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊。
[0084]對該靶向脫除水中氨氮的可控釋放酶膠囊性能測試，使用40d后，該膠囊對水體中氨氮的轉化率保持在81.6%。
[0085]實施例5
[0086]1、制備海藻酸鈉水溶液(質量百分比)
[0087]用自來水浸泡海藻酸鈉粉末24h后，配制濃度為2.05%的海藻酸鈉水溶液，然后在111°C下濕熱滅菌30min，冷卻至40±0.5°C ；
[0088]2、制備海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液(質量百分比)
[0089]向上述制備得到的海藻酸鈉水溶液中加入脫氮酶，使脫氮酶占混合溶液總質量的
7.4%，保持混合溶液溫度為40±0.5°C，攪拌均勻，穩定23min ；
[0090]3、制備殼聚糖水溶液(質量百分比)
[0091 ] 配制0.6%的殼聚糖水溶液，調節溶液pH = 4.0，然后在111 °C下濕熱滅菌30min，
冷卻至室溫；
[0092]4、制備聚乙烯吡咯烷酮水溶液(質量百分比)
[0093]配制0.7%的聚乙烯吡咯烷酮水溶液，調節溶液pH = 7.1，然后在111°C下濕熱滅菌 30min，冷卻至 36.5±0.5°C ；
[0094]5、制備固定化脫氮酶膠囊
[0095] 邊攪拌邊將制得的海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液以每分鐘12滴的速度滴加到上述殼聚糖水溶液中，海藻酸鈉和脫氮酶混合溶與殼聚糖水溶液的體積比為1:3，攪拌強度為170rpm，同時在反應容器底部通過微孔曝氣頭向混合液中均勻注入尺寸為60 μ m的空氣氣泡，反應時間保持1.35h，制得固定化脫氮酶膠囊；
[0096]6、制備靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊
[0097]將制備得到的固定化脫氮酶膠囊投入到上述配制好的聚乙烯吡咯烷酮水溶液中，膠囊在聚乙烯吡咯烷酮水溶液中能夠被浸潤即可，保持溶液溫度為36.5±0.5°C，不間斷攪拌，攪拌強度為130rpm，反應0.35h，濾掉液體，用生理鹽水浸泡2.0h,即得到靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊。
[0098]對該靶向脫除水中氨氮的可控釋放酶膠囊性能測試，使用40d后，該膠囊對水體中氨氮的轉化率保持在87.5%。
【權利要求】
1.一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)制備海藻酸鈉水溶液:配制海藻酸鈉水溶液； (2)制備海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液:向海藻酸鈉水溶液中加入脫氮酶，保持混合液溫度為38-42°C，攪拌均勻后，穩定20-25min ； (3)制備殼聚糖水溶液:配制殼聚糖水溶液； (4)制備聚乙烯吡咯烷酮水溶液:配制聚乙烯吡咯烷酮水溶液； (5)制備固定化脫氮酶膠囊:將上述海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液滴加到殼聚糖水溶液中，攪拌溶液，攪拌強度為160-180rpm，反應1.2-1.5h后，制得固定化脫氮酶膠囊； (6)制備靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊:將上述制得的固定化脫氮酶膠囊投入到聚乙烯吡咯烷酮水溶液中，不間斷攪拌，攪拌強度為120-140rpm，反應0.3-0.4h，制得靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊。
2.根據權利要求1所述的一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法，其特征在于，步驟(1)所述的海藻酸鈉水溶液的質量濃度為2.05-2.10% ;步驟(3)所述的殼聚糖水溶液為:殼聚糖分子量80-100萬、質量濃度0.4-0.8%、溶液pH為3.5-4.5的殼聚糖水溶液；步驟(4)所述的聚乙烯吡咯烷酮水溶液為:質量濃度0.5-1.0 %、溶液pH為7.0-7.2。
3.根據權利要求1所述的一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中，加入的脫氮酶質量占海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液總質量的5-10%。
4.根據權利要求1所述的一種靶向脫除水中氨氮的可控釋放酶膠囊制備方法，其特征在于，步驟(5)中，所述殼聚糖水溶液與海藻酸鈉和脫氮酶混合溶液的體積比> 1:1 ;所述海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液的滴加速度為每分鐘10-12滴。
5.根據權利要求1所述的一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法，其特征在于，所述步驟(5)中，在向殼聚糖水溶液滴加海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液的同時，在反應容器底部通過微孔曝氣頭向溶液中均勻注入尺寸為50-70 μ m的空氣氣泡。
6.根據權利要求1所述的一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法，其特征在于，所述步驟(6)中，聚乙烯吡咯烷酮水溶液的量為，在所述攪拌強度下，使所述固定化脫氮酶膠囊在聚乙烯吡咯烷酮水溶液中能夠被浸潤；并保持聚乙烯吡咯烷酮水溶液溫度為 35-38°C。
7.—種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)制備海藻酸鈉水溶液:配制質量濃度為2.05%的海藻酸鈉水溶液； (2)制備海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液:向海藻酸鈉水溶液中加入脫氮酶，脫氮酶質量占混合溶液總質量的6-8%，保持混合溶液溫度為39-41 °C，攪拌均勻，穩定22-24min ； (3)制備殼聚糖水溶液:用分子量80-100萬的殼聚糖配制質量濃度為0.5-0.7%的殼聚糖水溶液，調節溶液PH為3.8-4.2 ； (4)制備聚乙烯吡咯烷酮水溶液:配制質量濃度為0.6-0.8%的聚乙烯吡咯烷酮水溶液，調節溶液PH為7.05-7.15 ；(5)制備固定化脫氮酶膠囊:將上述海藻酸鈉與脫氮酶混合溶液以每分鐘10-12滴的速度滴加到殼聚糖水溶液中，殼聚糖水溶液與海藻酸鈉和脫氮酶混合溶液的體積比> 1:1，攪拌溶液，攪拌強度為165-175rpm,同時在反應容器底部通過微孔曝氣頭向混合液中均勻注入尺寸為55-65 μ m的空氣氣泡，反應1.3-1.4h后，制得固定化脫氮酶膠囊； (6)制備靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊:將上述制得的固定化脫氮酶膠囊投入到聚乙烯吡咯烷酮水溶液中，使所述固定化脫氮酶膠囊在聚乙烯吡咯烷酮水溶液中能夠被浸潤，保持溶液溫度36-37°C，不間斷攪拌，攪拌強度為125-135rpm，反應0.32-0.38h，制得靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊。
8.根據權利要求1或7所述的一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法，其特征在于，所述海藻酸鈉水溶液，殼聚糖水溶液和聚乙烯吡咯烷酮水溶液經滅菌后使用。
9.根據權利要求8所述的一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法，其特征在于，其中，所述海藻酸鈉水溶液，殼聚糖水溶液和聚乙烯吡咯烷酮水溶液經lire下濕熱滅菌30min后使用。
10.一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊，其特征在于，根據權利要求1或7所述的一種靶向脫除水中氨氮的可控釋固定化酶膠囊制備方法制得。
【文檔編號】C12N11/08GK103992999SQ201410240655
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2014年5月30日 優先權日:2014年5月30日
【發明者】李海波, 李英華, 徐新陽, 宮璇, 周詠春 申請人:東北大學