用于收集、洗滌、冷凍保存、回收并且將脂肪抽出物返回給醫師進行自體脂肪轉移手術的 ...的制作方法
【專利摘要】本發明詳述了一種冷凍保護劑和用于制備生物組織的方法以及相關商業方法和系統。本發明是針對用于收集、洗滌、冷凍保存、回收并且將脂肪抽出物返回給醫師以在患者體內進行自體脂肪組織轉移手術的方法。在一個實施例中，本發明是針對一種用于冷凍保存生物組織的冷凍保護劑溶液，該冷凍保護劑溶液基本為多元醇和類晶體。
【專利說明】用于收集、洗滌、冷凍保存、回收并且將脂肪抽出物返回給 醫師進行自體脂肪轉移手術的組合物及方法 發明領域
[0001] 本發明是針對用于收集、洗滌、冷凍保存、回收并且將脂肪抽出物返回給醫師以在 患者體內進行自體脂肪組織轉移手術的方法。 發明背景
[0002] 現今，對一種用于將抽出的脂肪組織以一種在解凍后適于重新注射進患者體內 的形式進行冷凍保存的方法仍存在需要。雖然醫師已經進行自體脂肪組織轉移手術數十 年，但是這些手術未被標準化，并且結果通常是次優的。這導致對重復手術的需要，并且醫 師有時冷凍過量的脂肪抽出物用于后續使用。然而，在沒有冷凍保護劑和適當的儲存過 程和溫度的情況下，此類組織的活力喪失（里戴勞斯特（Lidagoster)等人，2000;烏爾曼 (Ullman)等人，2004 ;摩斯卡特羅（Moscatello)等人，2005 ;沃爾特（Wolter)等人，2005)。 雖然已經針對冷凍的脂肪組織測試了多種冷凍保存液和方法（例如二甲亞砜（DMSO)和胎 牛血清（FBS))，但是沒有一種已經使用了適于在人類中用于直接臨床使用的試劑（Pu(卜） 等人，2007 ;Cui (崔）等人，2007 ;卜等人，2010)。 發明概述
[0003] 在第一個實施例中，本發明是針對一種用于冷凍保存基本為多元醇和類晶體的生 物組織的冷凍保護劑溶液。
[0004] 在另一個實施例中，本發明是針對一種用于冷凍保存生物組織的系統，該系統包 括一種冷凍保護劑溶液和一種塑料基容器，該冷凍保護劑溶液不會導致從塑料基容器中浸 出。
[0005] 在另一個實施例中，本發明是針對一種用于收集、洗滌、冷凍保存、回收并且將脂 肪抽出物返回給醫師進行自體脂肪組織轉移手術的方法。根據美國藥典（United States Pharmacopea) (USP)，所有試劑都適于臨床使用，并且使用的配件都具有美國食品與藥品管 理局（U.S. Food and Drug Administration) (FDA)用于臨床使用的批準。該方法被設計成 在冷凍保存并解凍脂肪組織后獲得高百分比活力的脂肪細胞，包括獲得脂肪組織樣本和用 洗滌液（包括乳酸林格氏溶液）洗滌該脂肪組織的步驟。
[0006] 在一個另外的實施例中，本發明是針對一種冷凍保存脂肪組織的方法，包括獲得 脂肪組織樣本和用類晶體溶液的洗滌液洗滌該脂肪組織的步驟。移除該洗滌，其中添加一 種冷凍保護劑溶液，該冷凍保護劑溶液包括等于有待保存的脂肪組織的體積的多元醇和類 晶體。分離并移除下層溶液。測試下層溶液的微生物污染。將冷凍保護的脂肪組織放置于 多個容器中；并且將冷凍保護的脂肪組織以定義的速率冷凍保存。將冷凍保存的脂肪組織 儲存在低于-150攝氏度的溫度下。
[0007] 在又另一個實施例中，本發明是針對一種用于收集、深冷儲存并分配自體生物樣 品材料的商業方法。 附圖簡要說明
[0008] 圖1是本發明的基本冷凍保存方法的流程圖。 發明詳細說明
[0009] 在此使用某些術語僅為方便并且不應被當作對本發明的限制。術語包括具體提及 的詞語，其衍生物以及具有類似含義的詞語。在此討論的實施例并不旨在是窮盡性的或旨 在將本發明局限于披露的精確形式。選擇并描述這些實施例以最好地解釋本發明的原理及 其應用和實踐用途，并且以使得本領域的其他技術人員可以最好地利用本發明。
[0010] 在第一個實施例中，本發明是針對一種用于冷凍保存生物組織的冷凍保護劑溶 液，該冷凍保護劑溶液基本為多元醇和類晶體。在一個優選實施例中，該多元醇是甘油并且 該類晶體是乳酸林格氏溶液。不限制本發明的概念，在此實施例中選擇該多元醇和該類晶 體是用于其與一種生物組織（例如脂肪組織）的相互作用。
[0011] 該甘油和乳酸林格氏溶液對應地處于約1比10的比例。此溶液在與脂肪組織合并 后20分鐘內建立平衡。平衡意指在細胞內和細胞外獲得穩態濃度的時間相等。本實施例中 的對應地處于約1比10的比例的甘油和乳酸林格氏溶液的組合提供了一種高度有效的冷 凍保護劑，該冷凍保護劑可以直接注射進患者體內用于在美容或手術程序中使用。本領域 的普通技術人員將意識到，處于1比20與1比10之間的比例的甘油和乳酸林格氏溶液的組 合在脂肪組織的冷凍保存中未被認為顯著不同，但是可接受的最低比例為1比40(2. 5% )。 另外，本發明的冷凍保護劑溶液不需要本實施例的脂肪組織進行任何類型的消化。因此，本 發明的冷凍保護劑的使用為目前可用的冷凍保護劑提供了一種安全、有效且具有成本效益 的替代方案。
[0012] 在另一個實施例中，本發明是針對一種用于冷凍保存生物組織的系統，該系統包 括一種冷凍保護劑溶液，該冷凍保護劑溶液不會導致從塑料基容器中浸出。如在本領域中 所已知，DMSO是一種常用冷凍保護劑；還意識到，它具有兩種顯著不利性。首先，DMSO導致 從大多數"塑料"類型袋中"浸出"并且因此，需要具有特殊配方并且昂貴的袋或容器。其 次，并且更重要地，DMSO對身體有毒并且不能大量地注射進體內（如在此所討論）。
[0013] 本實施例的系統的冷凍保護劑溶液集中于（i) 一種多元醇和（ii) 一種類晶體。如 在先前實施例中所討論，在本實施例中，該多元醇是甘油并且該類晶體是乳酸林格氏溶液。 因此，與包含DMSO的任何溶液形成對照，本實施例的系統提供用于將冷凍保存的脂肪組織 直接注射進體內并且也是具有成本效益的。這歸因于以下認識，本發明的冷凍保護劑的所 有組分都是無毒的并且被食品與藥品管理局（FDA)批準用于在患者體內使用；更確切地， 乳酸林格氏注射液（Lactated Ringer's Injection)是一種美國藥典（USP)無菌的、無熱 原溶液，用于在靜脈給藥中在單次劑量容器中補充體液和電解質，并且甘油被美國食品與 藥品管理局（FDA)分類為"公認安全"（GRAS)。柔性容器由具體地設計用于寬范圍的腸胃 外藥物的非乳膠塑料材料制成，這些藥物包括需要在由聚烯烴或聚丙烯制成的容器中遞送 的那些。溶液接觸材料不包含PVC、DEHP或其他增塑劑。容器材料的適合性已經通過生物 學評價確立，這些生物學評價已經顯示該容器通過了用于塑料容器的VI級USP測試。這些 測試證實了該容器系統的生物學安全性。具有將"解凍的"冷凍保存的脂肪組織運至可以 直接將其注射進患者體內的醫師的能力減少了成本，增加手術的有效性并且減少（并且潛 在地）消除污染。
[0014] 該塑料基容器具有至少一個帶魯爾接頭（Luer fitting)的管口以及至少一個針 孔（spike port)。需要它來完成冷凍保存的脂肪組織（現在解凍的）的直接轉移，如在此 所討論。確切地，在收到冷凍保存的脂肪組織（現在解凍的）后，醫師簡單地經由注射器抽 取此組織并且將此組織直接注射進患者的所希望的部位。
[0015] 在另一個實施例中，本發明是針對一種用于在冷凍保存并解凍脂肪組織后獲得高 百分比活力的脂肪細胞的方法。該方法包括獲得脂肪組織樣本和用洗滌液（包括乳酸林格 氏溶液）洗滌該脂肪組織的步驟。向洗滌的脂肪組織中添加甘油于乳酸林格氏溶液中的溶 液，以在最初的容器和至少一個第二容器中獲得甘油冷凍保護的脂肪組織。將甘油冷凍保 護的脂肪組織通過以控制速率冷卻進行冷凍保存，并且儲存在低于-80攝氏度（C)的溫度 下。在一種優選方法中，在包含液氮的罐的蒸汽相中，將儲存溫度維持在低于-150攝氏度。
[0016] 將冷凍保存的甘油冷凍保護的脂肪組織在溫度約為35至40攝氏度的液浴中解 凍；（在一種優選方法中，為37攝氏度）以形成回收的甘油保護的脂肪組織。將乳酸林格 氏溶液以約等于甘油保護的脂肪組織的體積的量添加進該容器中，以形成一種懸浮液。分 離該懸浮液，以形成（i)下層物（infranatant)和（ii)脂肪組織；將下層溶液從該容器中 移除。將回收的脂肪組織返回該醫師，用于在預定的自體脂肪組織轉移手術中使用。
[0017] 如所討論，本發明的核心是解凍時將一種安全且無毒的冷凍保護劑中的脂肪組織 直接注射進患者體內的能力。本實施例的方法的質量控制步驟是通過獲得回收的同一冷凍 保存的脂肪組織的質量控制等分部分開始，其中將大幅大于脂肪組織的體積的量的乳酸林 格氏溶液添加進該質量控制等分部分中。將重新懸浮的回收的脂肪組織離心，以形成（i) 下層物洗滌物和（ii)經洗滌的回收的脂肪組織。將經洗滌的回收的脂肪組織的等分部分 轉移至一個包含膠原酶溶液的試管中。將脂肪組織-膠原酶懸浮液在約37攝氏度下孵育， 以將脂肪組織部分地解離為脂肪細胞和基質血管部分細胞。將膠原酶通過向脂肪組織-膠 原酶懸浮液中添加生長培養基而中和，并且通過對經消化回收的脂肪組織進行離心來回收 脂肪組織，以將漂浮的脂肪細胞與游離的基質血管部分細胞分離。將解離的脂肪細胞的一 個樣品從回收的脂肪組織轉移至一個包含活體染料的試管中，從而基于使用的活體染料， 使用能夠區分活的脂肪細胞和死的脂肪細胞的儀器確定該樣品中的有活力的脂肪細胞的 百分比。將活力分析的結果分發給收集醫師，該醫師最常見地進行將解凍的脂肪組織注射 進患者體內的手術。使用此方法，有活力的脂肪組織細胞的百分比典型地大于70. 0%。
[0018] 參考圖1，在一個另外的實施例中，本發明是針對一種冷凍保存脂肪組織的方法 10,包括獲得脂肪組織樣本12和用類晶體溶液的洗滌液洗滌該脂肪組織14的步驟。移除 該洗滌16,其中添加一種冷凍保護劑溶液18,該冷凍保護劑溶液包括等于有待保存的脂肪 組織的體積的多元醇和類晶體。分離并移除下層溶液20。測試下層溶液的微生物污染22。
[0019] 將冷凍保護的脂肪組織放置于多個容器中24并且將冷凍保護的脂肪組織以定義 的速率冷凍保存。26將冷凍保存的脂肪組織儲存在低于-150攝氏度的溫度下。28
[0020] 冷凍保存的定義的速率是-1攝氏度/分鐘到至少-20攝氏度，并且以-1至-2攝 氏度/分鐘繼續冷卻至-80攝氏度。相變（由液體至固體）后的冷卻速率臨界小于初始冷 卻速率。如在本發明中所理解，該多元醇是甘油。并且該類晶體是乳酸林格氏溶液。
[0021] 在又另一個實施例中，本發明是針對一種用于收集、深冷儲存并分配自體生物樣 品材料的商業方法。該方法是通過以下方式起始：收集用于進行生物樣品材料的收集、深冷 儲存和分配的定義的服務費用，并且此后通過（i)支付預定的費用以支持用于收集該生物 樣品所進行的醫師服務并且（ii)提供一種收集系統（該收集系統包括多種用于收集并運 送該生物樣品的部件）來協調顧客的生物樣品的收集。該商業方法的此起始部分不僅對于 獲得樣品而言是重要的，對于開始顧客與商業實體的商業關系而言也是重要的。顧客、醫師 和商業實體將達成對"大局（big picture)"和此次合作的長期關系的理解，以便理解利益、 權利、義務以及成本（如在此所解釋）。
[0022] 醫師用于獲得生物樣品的預定費用將取決于有待處理和冷凍保存的脂肪組織的 總體積而變化，但是將最可能受限于與收集系統、至加工設施的運送和冷凍保存有關的成 本。然而，該成本將是一種一次性設定費用，該費用將在開始獲得該樣品的程序之前由客戶 同意。
[0023] 該收集系統是被設計用于協調該商業方法的所定義的部件組。該收集系統包括一 種用于獲得的生物樣品的鑒定材料。這最常見地是一個定義組的標準表格，這些標準表格 可以包括用于與編碼程序一起使用的編碼標簽（如在此所討論）。客戶樣品袋包括用于與 該編碼程序一起使用的同樣的編碼標簽。這些標簽將遵從國家和聯邦法規，例如21CFR 11。 該收集系統進一步包括一個運送箱，該運送箱可以商業地生產并且與運送承運人（例如聯 邦快遞（FedEx))配合。除關于裝運地點的信息之外，運送標記還將包括用于與同一編碼程 序一起使用的同樣的編碼標簽。協調后，該方法通過從客戶獲得生物樣品并且將該生物樣 品在收集系統中運至加工設施而繼續。
[0024] 在加工設施處，這些收集系統部件經由登錄端口被引入至數據庫的處理模塊；該 模塊具有該編碼程序。該數據庫將是專門設計用于使用專有程序或可商購的程序（例 如Microsoft's Access程序）來加工并儲存電子保護的健康信息（eProtected health information)。該數據庫將包括但不限于，獲得自收集系統用于使"客戶樣品與該客戶"配 合的信息；例如被包括在客戶特異性條形碼客戶樣品袋中的信息。此信息還將被包括在一 個標準化表格中。該數據庫將被組織在類似于該標準化表格中的組織的模塊中，將是可檢 索的，并且將被編程，以產生與此過程相關的所有不同表格。該數據庫包括用于組織并儲存 關于生物樣品的信息并記錄信息的編碼程序。
[0025] 該生物樣品是通過用一種洗滌液（包括乳酸林格氏溶液）洗滌該脂肪組織而進行 加工。向洗滌的脂肪組織中添加甘油于乳酸林格氏溶液中的溶液，以在最初的容器和至少 一個第二容器中獲得甘油冷凍保護的脂肪組織。將甘油冷凍保護的脂肪組織冷凍保存。
[0026] 根據要求，將冷凍保存的甘油冷凍保護的脂肪組織在溫度約為37攝氏度的液浴 中解凍，以形成回收的甘油保護的脂肪組織。將乳酸林格氏溶液以大約等于甘油保護的脂 肪組織的體積的量添加進該容器中，以形成一種懸浮液。分離該懸浮液，以形成（i)下層物 和（ii)脂肪組織；將下層溶液從該容器中移除。將回收的脂肪組織返回該醫師，用于在預 定的自體脂肪組織轉移手術中使用。
[0027] 回收同一冷凍保存的脂肪組織的一個質量控制等分部分，并且將大幅大于脂肪組 織的體積的量的乳酸林格氏溶液添加進該質量控制等分部分中。將重新懸浮的回收的脂肪 組織離心，以形成（i)下層物洗滌物和（ii)經洗滌的回收的脂肪組織。將經洗滌的回收的 脂肪組織的等分部分轉移至一個包含膠原酶溶液的試管中。將脂肪組織-膠原酶懸浮液在 大約37攝氏度下孵育，以將脂肪組織部分地解離為脂肪細胞和基質血管部分細胞。將膠 原酶通過向脂肪組織-膠原酶懸浮液中添加生長培養基而中和，并且然后將經消化回收的 脂肪組織離心，以將漂浮的脂肪細胞與游離的基質血管部分細胞分離。將解離的脂肪細胞 的一個樣品從回收的脂肪組織轉移至一個包含活體染料的試管中，從而基于使用的活體染 料，使用能夠區分活的脂肪細胞和死的脂肪細胞的儀器確定該樣品中的有活力的脂肪細胞 的百分比。活力分析的結果將被報告給收集醫師。使用此方法，有活力的脂肪組織細胞的 百分比典型地大于70.0%。
[0028] 將分離的材料分發給自其獲得生物樣品的顧客；并且基于預定的患者手術，按照 請求指示，將包含冷凍保護的脂肪組織的解凍容器在運送系統中進行運送。
[0029] 脂肪組織的直接冷凍保存的開發
[0030] 在四種不同冷凍保存條件下評價脂肪組織的冷凍，兩種用廣泛使用的二甲亞砜 (DMSO,在CryoStor CS-5和CS-10中，分別具有5 %和10% DMSO);并且兩種用10 %甘油 (一種較老但仍然有用的冷凍保護劑），使用和不使用〇. 2M海藻糖。海藻糖是一種非常穩 定的二糖（糖），它已經被發現可用于各種各樣的細胞類型（包括脂肪組織）的冷凍保存。 事實上，甘油和海藻糖兩者均由某些生物體作為冷凍保護劑而內源地產生。卜（Pu)等人 將脂肪抽出物的小樣品冰凍于3. 3% DMS0+0. 2M海藻糖中（2004)，并且隨后冰凍于單獨的 0.2M海藻糖中（2005)，并且發現就脂肪組織的解凍后活力而言，這些表現良好。我們先前 測試了 10% DMS0、7. 5% DMSO+聚乙烯吡咯烷酮（PVP)、10%甘油以及具有10% FBS的10% 甘油（2005)，并且發現用DMSO冷凍保存給出優于甘油的結果（摩斯卡特羅（Moscatello) 等人，2005)。然而，在那些實驗中，我們沒有像我們在當前實驗中那樣在冷凍保存之前，測 試脂肪組織與冷凍保護劑的平衡。平衡時間對于甘油而言比對于DMSO而言更可能是一種 重要變量，因為DMSO比甘油更加迅速地穿透細胞（江（Jiang)，2008)，但是DMSO在室溫或 體溫下對細胞有毒，而甘油是無毒的。
[0031] 在進行的實驗中，冷凍在甘油和DMSO中的脂肪組織都產生了類似的解凍后脂肪 細胞活力（表1)。這通過將冷凍保存的脂肪組織（AT)在37°C水浴中迅速解凍并且用乳 酸林格氏溶液洗滌，隨后用lmg/mL膠原酶消化而確立。將消化的脂肪組織再次洗滌，并且 將漂浮的解離脂肪細胞與等體積的吖啶橙（AO)或碘化丙啶（PI)儲備溶液混合。示于表 中的AO和PI兩個測定的數目是有活力的細胞百分比。在AO測定的情況下，這是％ AO陽 性（#A0+/#BR細胞X 100%)，并且在PI測定的情況下，這是（#BR+-#PI+V(#BR細胞）x 100%。換言之，在兩個測定中，使用亮場圖像確定計數的脂肪細胞的總數。在AO測定中， AO-陽性細胞被認為是有活力的，并且在PI測定中，PI-陽性細胞被認為是無活力的，但是 兩種情況的目的都是估計活力百分比。軟件進行計算，這些計算對正在使用的染料是特異 的。
【權利要求】
1. 一種用于冷凍保存生物組織的冷凍保護劑溶液，主要由以下項組成： a. -種多元醇；以及 b. -種類晶體。
2. 如權利要求1所述的冷凍保護劑溶液，其中該多元醇是甘油。
3. 如權利要求2所述的冷凍保護劑溶液，其中該類晶體是乳酸林格氏溶液。
4. 如權利要求3所述的冷凍保護劑溶液，其中該生物組織是脂肪組織。
5. 如權利要求4所述的冷凍保護劑溶液，其中該甘油和乳酸林格氏溶液對應地處于約 1比10的比例。
6. 如權利要求5所述的冷凍保護劑溶液，其中該溶液在與脂肪組織合并后在30分鐘內 建立平衡。
7. -種用于冷凍保存生物組織的系統，包括： a. -種冷凍保護劑溶液，該冷凍保護劑溶液不會導致從塑料基容器中浸出； b. -種塑料基容器。
8. 如權利要求7所述的系統，其中該冷凍保護劑溶液包括（i) 一種多元醇和（ii) 一種 類晶體。
9. 如權利要求8所述的系統，其中該多元醇是甘油。
10. 如權利要求9所述的系統，其中該類晶體是乳酸林格氏溶液。
11. 如權利要求10所述的系統，其中該塑料基容器包括至少一個魯爾管端口以及至少 一個針孔。
12. -種用于在冷凍保存并解凍脂肪組織后獲得高百分比活力的脂肪細胞的方法，包 括以下步驟： a. 獲得一個脂肪組織樣本； b. 用一種包括乳酸林格氏溶液的洗滌液洗滌該脂肪組織； c. 向該洗滌的脂肪組織中添加一種甘油于乳酸林格氏溶液中的溶液，以在最初的容器 和至少一個第二容器中獲得甘油冷凍保護的脂肪組織； d. 冷凍保存這種甘油冷凍保護的脂肪組織； e. 將這種冷凍保存的甘油冷凍保護的脂肪組織在約37攝氏度溫度的液浴中解凍，以 形成一種回收的甘油保護的脂肪組織； f. 將乳酸林格氏溶液以約等于甘油保護的脂肪組織的體積的量添加進該容器中，以形 成一種懸浮液； g. 分離該懸浮液，以形成⑴下層物和（ii)脂肪組織； h. 將這些下層物從該懸浮液中移除 i. 將這種回收的脂肪組織返回到醫師，以用于在預定的自體脂肪組織轉移手術中使 用； j. 回收同一冷凍保存的脂肪組織的一個質量控制等分部分； k. 將大幅大于脂肪組織的體積的量的乳酸林格氏溶液添加進該質量控制等分部分 中； l. 將該重新懸浮的回收的脂肪組織離心，以形成（i)下層物洗滌物和（ii)經洗滌的回 收的脂肪組織； m. 將這種經洗滌的回收的脂肪組織的一個等分部分轉移至一個包含膠原酶溶液的試 管中； n. 將該脂肪組織-膠原酶懸浮液在約37攝氏度下孵育，以將該脂肪組織部分地解離為 脂肪細胞和基質血管部分細胞； 〇.通過向該脂肪組織-膠原酶懸浮液中添加生長培養基而中和該膠原酶；將這種經消 化的回收的脂肪組織離心，以將這些漂浮的脂肪細胞與游離的基質血管部分細胞分離； P.將這些解離的脂肪細胞的一個樣品從這種回收的脂肪組織轉移至一個包含活體染 料的試管中； q. 基于使用的該活體染料，使用一種能夠區分活的脂肪細胞和死的脂肪細胞的儀器確 定該樣品中的有活力的脂肪細胞的百分比；并且 r. 將活力分析的結果報告給收集的醫師。
13. 如權利要求12所述的方法，其中有活力的脂肪組織細胞的百分比大于70. 0%，如 通過吖啶橙（A0)染色所確定的。
14. 如權利要求13所述的方法，其中冷卻的定義的速率是-1攝氏度/分鐘至至少-20 攝氏度，并且以-1至-2攝氏度/分鐘繼續冷卻至-80攝氏度。
15. -種冷凍保存脂肪組織的方法，包括以下步驟： a. 獲得一個脂肪組織樣本； b. 用一種包括類晶體溶液的洗滌液洗滌該脂肪組織； c. 移除該洗滌； d. 添加一種冷凍保護劑溶液，該冷凍保護劑溶液包括等于有待保存的脂肪組織的體積 的一種多元醇和一種類晶體； e. 分離并移除下層溶液； f. 測試該下層溶液的微生物污染； g. 將這種冷凍保護的脂肪組織放置于多個容器中； h. 將這種冷凍保護的脂肪組織以定義的速率冷凍保存；并且 i. 將這種冷凍保存的脂肪組織儲存在低于-150攝氏度的溫度下。
16. 如權利要求15所述的方法，其中冷凍保存的該定義的速率是-1攝氏度/分鐘至至 少-20攝氏度，并且以-1至-2攝氏度/分鐘繼續冷卻至-80攝氏度。[解釋]相變（由液 體至固體）后的冷卻速率臨界小于初始冷卻速率。
17. 如權利要求16所述的方法，其中該多元醇是甘油。
18. 如權利要求17所述的方法，其中該類晶體是乳酸林格氏溶液。
19. 一種用于在冷凍保存并解凍脂肪組織后獲得高百分比活力的脂肪細胞以供運送并 在患者手術中使用的商業方法，包括以下步驟： a. 收集針對生物樣品材料的收集、運送、深冷儲存和分配而定義的服務的費用； b. 協調顧客的生物樣品的收集，包括（i)支付預定的費用以支持用于收集該生物樣品 所進行的醫師服務并且（ii)提供一種收集系統，該收集系統包括多種用于收集并運送該 生物樣品的部件； c. 從該客戶獲得該生物樣品； d. 將在該收集系統中的該生物樣品運送至加工設施； e. 將來自這些收集系統部件的信息引入至數據庫的處理模塊； f. 將該生物樣品冷凍保護在一種溶液中，該溶液包括用于冷凍保存的（i)甘油和（ii) 乳酸林格氏溶液； g. 針對用于冷凍保存的所分離的材料的質量控制進行測試； h. 冷凍保存這種分離的材料； i. 解凍這種冷凍保存的生物樣品； j. 將這種分離的材料分配給自其獲得生物樣品的顧客；并且 k. 按照基于預定的患者手術的要求所指示的，將包含這種冷凍保護的脂肪組織的解凍 容器在一個運送系統中進行運送。
20. 如權利要求18所述的商業方法，其中該收集系統包括： a. 用于所獲得的生物樣品的鑒定材料； b. 用于與編碼程序一起使用的編碼標簽； c. 客戶樣品袋； d. 運送箱；以及 e?運送標記。
21. 如權利要求2所述的商業方法，其中這些收集系統部件通過掃描完成的記錄信息 中的該客戶樣品袋上的條形碼經由登錄端口被引入至數據庫的處理模塊。
22. 如權利要求3所述的商業方法，其中這種獲得的生物樣品是一種脂肪組織樣品。
【文檔編號】C12N5/07GK104487567SQ201380039198
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2013年6月6日 優先權日:2012年6月7日
【發明者】大衛·摩斯卡特羅 申請人:大衛·摩斯卡特羅