一種冷榨茶餅制備活性蛋白肽的方法
【專利摘要】一種冷榨茶餅活性肽的制備方法，它利用DHPM、定向酶解冷榨餅粕蛋白，制備蛋白肽溶液，經過濾、濃縮、噴霧干燥得到產品。本發明的積極效果：1、DHPM技術有助于酶切位點的暴露并能加快茶餅蛋白的快速斷裂降解，縮短了茶餅蛋白活性肽的制備周期并提高了多肽的得率，增強了其活性。2、定向酶解技術提高酶解效率，直接酶解目標片段多肽大大縮短酶解時間定向酶解產出的多肽，去除了冷榨茶餅的苦味，改善了多肽的口感得到了有效提升，迎合了消費者對“色、香、味”的追求。3、將蛋白酶解和DHPM兩道工序合并縮短了加工工序，減少了加工時間、降低了生產成本。
【專利說明】一種冷榨茶餅制備活性蛋白肽的方法
[0001]【技術領域】:
本發明涉及蛋白多肽制備領域，尤其涉及一種動態高壓微射流(DHPM)、定向酶解冷榨茶餅制備蛋白多肽的方法。
【背景技術】
[0002]目前，油茶籽在我國的利用基本上局限于榨油，而對榨油后的冷榨茶餅利用不夠充分，大都直接被浪費，每年浪費的成百上千噸的冷榨茶餅，只有部分作為燃料、清洗劑等使用，附加值低，造成了嚴重的資源浪費。冷榨茶餅，由于采用低溫壓榨技術，蛋白質變性小，活性未被破壞，加工價值較高，經檢測茶餅組分，茶餅中含有蛋白質12%-16%，據氨基酸組分分析，茶餅中富含7種是人體必需的氨基酸，僅硫氨基酸含量較少。這7種必需氨基酸的種類和含量在一定意義上可以反映冷榨茶餅蛋白具有極高的營養和經濟價值，研究顯示蛋白分解后的多肽因具有良好抗氧化、降血壓、增強機體免疫力、降血脂和抗菌活性，受到廣大消費者所喜愛，多肽活性成就了其在市場上的地位。
[0003]目前，植物性活性肽大部分采用傳統酶法制備得到，酶法存在未經任何前處理、生產周期長、反應條件劇烈、易產生苦味肽、酶解效率低等特性。
[0004]
【發明內容】
:
一種冷榨茶餅制備活性蛋白肽的方法，它提高了蛋白的酶解效率，產生出活性和口感更好的多肽，酶解后的冷榨茶餅活性肽去除了原有的苦味。
[0005]本發明是這樣來實現的，它采用DHPM聯合定向酶解既充分的利用了 DHPM可以激活更多的酶切位點，改變傳統酶解的位點，繼而產生多肽的分子更小活性更強，酶解后的油茶活性肽去除了原有的苦味，又利用定向酶解技術提高酶解效率，縮短酶解時間，而且將過DHPM和定向酶解同時進行，DHPM輔助酶解大大縮短酶解時間；
本發明通過以下技術方案得以解決:
(1)冷榨茶餅粉碎過目篩；50kg脫脂茶餅按料液重量比1:25-1:40加入蒸餾水、用Imo I/LNaOH 調 pH 值至 10-12、控制溫度為 40-60 °C，浸提 2_4h。4000r/min 離心 IOmin,收
集上清液；
(2)在上清液中加入l.0Omol/LHcl,調pH值至4.6使蛋白沉淀。4000r/min離心IOmin,收集蛋白沉淀并噴霧干燥，得到粗冷榨茶餅蛋白；
(3)將干燥后的蛋白配成質量百分比為10%-30%蛋白液然后，加入重量比為2:3的風味蛋白酶和堿性蛋白酶復合酶，DHPM(60-1OOMPa)處理酶解20_40min ；
(4)水解完成后，滅活蛋白酶，將pH調至中性，離心取上清液。
[0006](5)采用膜超濾法分離水解液，收集分子量(MW)在IOkDa以內的多肽，采用噴霧干燥技術，將多肽溶液制備成粉末，進風溫度和出風溫度分別為180°C和90°C。
[0007]本發明聯合DHPM和定向酶解，提高了多肽的活性和口感，將蛋白酶解和DHPM兩道工序合并縮短了加工工序，減少了加工時間、降低了生產成本，具體有益效果為:1、DHPM技術有助于酶切位點的暴露并能加快冷榨茶餅蛋白的快速斷裂降解，縮短了冷榨茶餅蛋白活性肽的制備周期并提高了多肽的得率，增強了其活性。2、定向酶解技術提高酶解效率，直接酶解目標片段多肽大大縮短酶解時間定向酶解產出的多肽，去除了冷榨茶餅的苦味，改善了多肽的口感得到了有效提升，迎合了消費者對“色、香、味”的追求。3、將蛋白酶解和DHPM兩道工序合并縮短了加工工序，減少了加工時間、降低了生產成本。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0008]圖1為本發明的工藝流程圖。
[0009]【具體實施方式】:
下面結合附圖與【具體實施方式】對本發明作進一步詳細描述；
實施例一，如圖1所示步驟；
(I)冷榨茶餅粉碎過目篩；50kg脫脂茶餅按料液重量比1:25加入蒸餾水、用I mol/LNaOH調pH值至10、控制溫度為40°C，浸提2h，4000r/min離心IOmin,收集上清液；
(2)在上清液中加入I mol/L Hcl,調pH值至4.6使蛋白沉淀。4000 r/min離心10min,收集蛋白沉淀并噴霧干燥，得到粗茶餅蛋白；
(3)將干燥后的蛋白配成質量百分比為10%蛋白液然后，按重量比2:3加入風味蛋白酶和堿性蛋白酶復合酶，DHPM(60MPa)處理酶解20mi ；
(4)水解完成后，滅活蛋白酶，將pH調至 中性，離心取上清液；
(5)采用膜超濾法分離水解液，收集分子量(MW)在IOkDa以內的多肽，采用噴霧干燥技術，將多肽溶液制備成粉末。進風溫度和出風溫度分別為180°C和90°C。
[0010]實施例二，如圖1所示步驟；
(1)冷榨茶餅粉碎過目篩；50kg脫脂茶餅按料液重量比1:30加入蒸餾水、用Imol/LNaOH調pH值至11，控制溫度為50°C，浸提3h,4000r/min離心IOmin,收集上清液；
(2)在上清液中加入ImoI/LHcl,調pH值至4.6使蛋白沉淀，4500r/min離心25 min,收集蛋白沉淀并噴霧干燥，得到粗茶餅蛋白；
(3)將干燥后的蛋白配成質量百分比20%蛋白液，然后加入重量比為2:3的風味蛋白酶、堿性蛋白酶復合酶，DHPM(80MPa)處理酶解30min ；
(4)水解完成后，滅活蛋白酶，將pH調至中性，離心取上清液；
(5)采用膜超濾法分離水解液，收集分子量(MW)在IOkDa以內的多肽，采用噴霧干燥技術，將多肽溶液制備成粉末。進風溫度和出風溫度分別為180°C和90°C。
[0011]實施例三，如圖1所示步驟；
(I)冷榨茶餅粉碎過目篩；50kg脫脂茶餅按料液重量比比1:40加入蒸餾水、用I mol/LNaOH調pH值至12、控制溫度為60°C，浸提4h，4000r/min離心IOmin,收集上清液；
(2)在上清液中加入lmol/L Hcl,調pH值至4.6使蛋白沉淀，4000r/min離心IOmin,收集蛋白沉淀并噴霧干燥，得到粗茶餅蛋白；
(3)將干燥后的蛋白配成質量百分比為30%蛋白液然后加入重量比2:3的風味蛋白酶、堿性蛋白酶復合酶，DHPM(IOOMPa)處理酶解40min ；
(4)水解完成后，滅活蛋白酶，將pH調至中性，離心取上清液；
(5)采用膜超濾法分離水解液，收集分子量(MW)在IOkDa以內的多肽，采用噴霧干燥技術，將多肽溶液制備成粉末。進風溫度和出風溫度分別為180°C和90°C。
【權利要求】
1.一種冷榨茶餅活性蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述的制備方法包括以下步驟:(1)冷榨茶餅粉碎過目篩；將50kg脫脂茶餅按料液重量比1:25-1:40加入蒸餾水，用I mol/L 的 NaOH 調 pH 值至 10-12，控制溫度為40-601:，浸提 2_4h，4000r/min 離心 IOmin,收集上清液； (2)在上清液中加入l.0Omol/L的鹽酸，調pH值至4.6，使蛋白沉淀；然后4000r/min離心lOmin，收集蛋白沉淀并噴霧干燥，得到粗冷榨茶餅蛋白； (3)將干燥后的蛋白配成質量百分比為10%-30%的蛋白液，然后加入重量比為2:3的風味蛋白酶和堿性蛋白酶，DHPM處理酶解20-40min ； (4)水解完成后，滅活蛋白酶，將pH調至中性，離心取上清液； (5)采用膜超濾法分離水解液，收集分子量在IOkDa以內的多肽，采用噴霧干燥技術，將多肽溶液制備成粉末，進風溫度和出風溫度分別為180°C和90°C。
2.如權利要求1所述的一種冷榨茶餅活性蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述的DHPM處理壓 強為60-100Mpa。
【文檔編號】C12P21/06GK103602712SQ201310512577
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年10月28日 優先權日:2013年10月28日
【發明者】涂宗財, 馬達, 王輝, 劉光憲, 沙小梅, 陳靜 申請人:南昌大學