一種從鮮檳榔中提取檳榔生物素的方法
【專利摘要】本發明公開一種從鮮檳榔中提取檳榔生物素的方法。方法是將鮮檳榔分揀，清洗干凈，破碎，加水，加入0.1%～1%的纖維素酶進行生物裂解，調節ｐＨ2～7，靜置0.5～4h，板框過濾，得提取液；將提取液高速離心分離(3000～30000rmin)，去除雜質和大分子物質，得溶液；上述溶液在60℃以下真空連續脫水，得固體物，粉碎，過30～120目，檢驗，得檳榔生物素。本方法操作簡單，工藝溫度在60℃以下，以生物堿和總黃酮為質量控制指標，檳榔有益成分提取完全，檳榔生物素獲得率高，適合工業化生產。不需鍋爐，不涉及有機溶劑，無廢液、廢氣排放。生產廢渣為檳榔纖維，是高級纖維板、活性炭的珍貴原料。
【專利說明】一種從鮮檳榔中提取檳榔生物素的方法【技術領域】
[0001 ] 本發明涉及一種從鮮檳榔中提取檳榔生物素的方法。
【背景技術】
[0002]鮮檳榔(Areca catechu L)是棕櫚科檳榔屬植物檳榔的成熟果實。我國是世界檳榔的主產地之一,其中海南省的檳榔種植面積和產量都占全國(不包括臺灣)總量的90%以上。檳榔是海南東部、中部和南部山區農民主要的經濟來源之一，被當地農民譽為“綠寶石”。在非洲、東南亞一些國家及我國湖南、海南、廣東、臺灣等地，人們有喜歡嚼食檳榔的習慣。嚼食檳榔能醒腦提神，產生舒服、欣快感，并能提高人的耐力。目前，檳榔已成為僅次于尼古丁、乙醇和咖啡因的世界第四大嗜好物品。然而長期咀嚼檳榔，其粗纖維會造成口腔黏膜下纖維化，可致口腔黏膜細胞變異，可能有致癌風險(WHO警告，2003年)。目前我國的檳榔產業多數停留在食用初加工階段，主要采用熏烘法加工成檳榔干，其表面煙垢的苯并芘含量大大超過食品衛生的安全要求，長期食用也有致癌風險。且大多為作坊式生產，產品質量與安全性也難以保障。目前檳榔的食用安全及資源的深加工開發利用，還有許多問題尚待解決。
[0003]“海南檳榔半萬寧”，在“中國檳榔之鄉”萬寧，人們習慣性將鮮檳榔的有益成分稱為檳榔生物素，本發明也將鮮檳榔的有益成分統稱為檳榔生物素。
`[0004]鮮檳榔的成份極為復雜，研究表明，在其中檢測到的組分中至少有68種，有益成分近62種。其中檳榔堿含量0.3-0.6%，檳榔的傳統功效殺蟲、消積、利水主要與檳榔堿有關，檳榔堿提取工藝研究比較成熟。而對鮮檳榔中含有近30種具有多種生物活性的多酚等黃酮類化合物的提取，則少有報道。其實，近期研究發現了許多檳榔新的功效，例如抗細菌、真菌和病毒作用，抗老化作用，降低膽固醇作用，抗氧化作用，抗抑郁作用，抗凝血酶作用，抗老年癡呆作用等，均與檳榔所含黃酮類物質有關。大部分黃酮類化合物為熱敏性組分，在60°C以上會受熱易分解或失去活性。現有檳榔相關的提取工藝和工業化生產，大多以檳榔干來提取，加工檳榔干溫度都遠遠超過了 60°C，導致有益成分提取不完全。
[0005]檳榔黃酮類等有益成分主要分布在果皮、纖維層、果肉和種子中。檳榔堅果纖維細胞結構緊密，現有公開的檳榔提取方法，都無法將被細胞壁包圍的黃酮類等多種有益成分完全提取出來。同時，其他利用有機溶劑提取，試劑消耗大，周期長，提取率低。酶法作為提取生物活性成分的新興技術得到了廣泛的應用，然而酶法技術在檳榔黃酮類物質提取中的應用鮮見報道。
【發明內容】
[0006]本發明的目的是提供了一種從鮮檳榔中提取檳榔生物素的方法，該方法低溫、快速、高效、節能，是一種以總生物堿和總黃酮為質量控制指標，鮮檳榔有益成分保留完全的工業化提取工藝。
[0007]本發明采用的技術原理:采用纖維素酶可以選擇性地破壞檳榔植物細胞壁，充分破壞以纖維素為主的檳榔細胞壁結構及其細胞間相連的果膠，使檳榔中的果膠完全分解成小分子物質，減少提取的傳質阻力，從而使植物細胞內的成分更容易溶解、擴散釋放，有效成分浸出率高、減少熱敏成分降解。
[0008]為了實現上述目的，本發明的技術方案為:提供一種從鮮檳榔中提取檳榔生物素的方法，包括如下步驟:
(1)生物提取:將鮮檳榔分揀，清洗干凈，破碎，加入2?6倍的水，加入重量百分比為
0.1%?1%的纖維素酶進行生物裂解，稀鹽酸調節PH 2?7，靜置0.5?4h，板框過濾，得提取液；
(2)離心分離:將上述提取液在3000?30000rmin條件下高速離心分離，去除雜質和大分子物質，得溶液；
(3)脫水:上述溶液在60°C以下真空連續脫水，得固體物，過30?120目粉碎，檢驗，得檳榔生物素。
[0009]本發明采用常溫條件下加入纖維素酶進行生物裂解的方法進行輔助提取，板框過濾得提取液；提取液在60°C以下高速離心分離，去除雜質和大分子物質，得溶液；溶液在60°C以下真空連續脫水，得固體物，整個工藝流程完整地保留了鮮檳榔的有效活性成分。
[0010]通過本發明方法制得檳榔生物素，同時建立以檳榔總堿和總黃酮為含量指標的質量實驗過程。與傳統提取方法相比，酶法提取具有無毒性、效率高、反應條件溫和及催化活力可被調節控制等優勢。檳榔生物素可以用在制備檳榔口香糖、檳榔硬糖、檳榔軟糖、檳榔飲料、檳榔化妝品、檳榔酒、檳榔牙膏以及藥物中間體等。能夠降低致癌風險，嚴格控制產品質量，方便深度的加工和延長檳榔產業鏈，引導安全、文明、健康地消費。
【具體實施方式】
[0011]實施例1:
取鮮檳榔5kg，分揀，清洗干凈，破碎，加水17.5kg，加入0.25%的纖維素酶，調節P H 5，靜置2h，板框過濾，得提取液；提取液高速離心分離(12000rmin)，得溶液；溶液在0.8Mpa真空條件下50°C真空連續脫水，得固體物，100目粉碎，得檳榔生物素167g。
[0012]實施例2:
取鮮檳榔5kg，分揀，清洗干凈，破碎，加水20kg，加入0.3%的纖維素酶，調節P H 4.5，靜置3h，板框過濾，得提取液；提取液高速離心分離(12000rmin)，得溶液；溶液在0.8Mpa真空條件下50°C真空連續脫水，得固體物，100目粉碎，得檳榔生物素170g。
[0013]實施例3:
取鮮檳榔5kg，分揀，清洗干凈，破碎，加水25kg，加入0.3%的纖維素酶，調節P H 5，靜置2h，板框過濾，得提取液；提取液高速離心分離(IOOOOrmin)，得溶液；溶液在0.8Mpa真空條件下50°C真空連續脫水，得固體物，120目粉碎，得檳榔生物素169g。
[0014]實施例4:
取鮮檳榔5kg，分揀，清洗干凈，破碎，加水20kg，加入0.4%的纖維素酶，調節P H 4.5，靜置3h，板框過濾，得提取液；;提取液高速離心分離(16000rmin)，得溶液；溶液在0.8Mpa真空條件下50°C真空連續脫水，得固體物，80目粉碎，得檳榔生物素171g。
[0015](I)采用分光光度法測定檳榔總黃酮。[0016]主要試劑及儀器:蘆丁 (生化試劑，中國醫藥(集團)上海化學試劑公司);纖維素酶(15 U/mg,上海東風生化技術有限公司)；60%的乙醇溶液；5%亞硝酸鈉溶液；10%硝酸鋁溶液。DUV- 2450型紫外一可見分光光度計(日本島津)；
I)線性試驗以不加蘆丁對照品溶液為空白，采用分光光度法在510nm波長處測定吸光度，以蘆丁濃度(mg/ml)為橫坐標，吸光度(A)為縱坐標，繪制標準曲線。
[0017]2)黃酮類物質含量的測定總黃酮含量=Α/Μ.100X稀釋倍數 A為標準曲線中的含量。式中A—樣液的吸光度；M—各組試驗樣品質量mg ;
檢查結果:
實施例1:總黃酮(以鮮果計)含量為18.02%;實施例2:總黃酮含量為18.58%;實施例3:總黃酮含量為18.31%;實施例4:總黃酮含量為18.76%。平均回收率為96.19%, RSD=L 75%, (n=6)。收率穩定，重現性好。
[0018](2)采用高效液相色譜(H PLC)法測定檳榔堿。
[0019]日本高效液相色譜系統(日本HITACHI系列);UV757紫外可見分光光度計(上海精密科學儀器有限公司)；以強陽離子交換鍵合硅膠為填充劑(SCX-強陽離子交換樹脂柱)；以乙腈-磷酸溶液(2 — 1000，濃氨試液調節pH值至3.8) (55:45)為流動相；檢測波長為215nm。
[0020]檢查結果:
實施例1:檳榔堿含量0.58%;實施例2:檳榔堿含量0.60%;實施例3:檳榔堿含量
0.61%;實施例4:檳榔堿含量0.59%.平均回收率為98.04%,RSD=L 32%, (n=6)。收率穩定，重現性好。
[0021]空白試驗顯示，纖維素酶輔助提取對檳榔生物素和總黃酮收率影響顯著，對生物堿影響不明顯。
[0022]以上所揭露的僅為本發明的較佳實施例而已，當然不能以此來限定本發明之權利范圍，因此依本發明權利要求所作的等同變化，仍屬于本發明所涵蓋的范圍。
【權利要求】
1.一種從鮮檳榔中提取檳榔生物素的方法，其特征在于包括如下步驟: (O生物提取:將鮮檳榔分揀，清洗干凈，破碎，加入2?6倍的水，加入重量百分比為0.1%?1%的纖維素酶進行生物裂解，稀鹽酸調節P H 2?7，靜置0.5?4h，過濾，得提取液； (2)離心分離:將上述提取液在3000?30000rmin條件下高速離心分離，去除雜質和大分子物質，得溶液； (3)脫水:上述溶液在60°C以下真空連續脫水，得固體物，過30?120目粉碎，檢驗，得檳榔生物素。
【文檔編號】A23L1/29GK103478719SQ201310453115
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月27日 優先權日:2013年9月27日
【發明者】許啟太 申請人:許啟太