含白皮杉醇組合物及含有該含白皮杉醇組合物的飲食品和化妝品的制作方法
【專利摘要】本發明的目的在于，提供一種來自天然物的、以較高的含有量含有白皮杉醇的含白皮杉醇組合物及該含白皮杉醇組合物的制備方法。從西番蓮果種子中提取以0.0001～99.9質量％的含有量含有白皮杉醇的含白皮杉醇組合物。另外，在提取所述白皮杉醇時，將西番蓮果種子粉碎后，添加從含水醇系溶媒及含水酮系溶媒中選擇的至少一種溶媒進行攪拌，從所述溶媒含有的西番蓮果種子中提取白皮杉醇。這時，最好使用含水醇系溶媒及含水酮系溶媒兩種溶媒進行階段性提取。
【專利說明】含白皮杉醇組合物及含有該含白皮杉醇組合物的飲食品和化妝品
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種來自西番蓮果(passion fruit)種子的含有白皮杉醇的含白皮杉醇組合物以及含有該含白皮杉醇組合物的飲食品和化妝品。
【背景技術】
[0002]下述非專利文獻I中，記載了來自葡萄的多酚類化合物白藜蘆醇(Resveratrol)及白皮杉醇(Piceatannol)具有抑制黑色素生成細胞生成黑色素的作用。但是，其作用效果的確認試驗使用的是市售的試劑，且對于從葡萄等天然物中獲取含有白皮杉醇等的組合物沒有記載。
[0003]另外，下述專利文獻I中記載了從虎杖(Reynoutria japonica Houtt.var.japnica)根的提取物中廉價地進行有選擇性且有效的白藜蘆醇的濃縮回收；下述專利文獻2中記載了含有白藜蘆醇的越橘提取物；下述專利文獻3、4中記載了西番蓮果(西番蓮科，passiflora sp.)的提取物，特別是西番蓮果的果皮的提取物，并記載了其提取物在食品、營養輔助食品、以及醫學上的使用。
[0004]但是，上述文獻的技術都是從天然物中獲得的組合物，不能提供含有較高的白皮杉醇的物質。
[0005]先行技術文獻
[0006]專利文獻
[0007]專利文獻1:日本特許公開2005 - 281179號公報
[0008]專利文獻2:日本特許公開2009 - 13159號公報
[0009]專利文獻3:日本特許公開2007 - 302659號公報
[0010]專利文獻4:日本特許公布2007 - 531734號公報
[0011]非專利文獻
[0012]非專利文獻1:Takako Yokozawa and You Jung Kim, Piceatannol InhibitsMelanogenesis by Its Antioxidative Actions,Bio1gical&Pharmaceutical BulletinVol.30 (2007)N0.1lp2007 - 2011
[0013]從有關食品安全的一般觀念出發，添加在功能性食品及健康食品等飲食品中的白皮杉醇，最好是來自天然物。但是，以住我們沒有發現含有豐富的白皮杉醇的天然物，另外，從葡萄等天然物中僅能獲取含有量非常低的組合物。
[0014]因此，本發明的目的在于，提供一種來自天然物的、含有較高的白皮杉醇的含白皮杉醇組合物及含有該含白皮杉醇組合物的飲食品和化妝品。
【發明內容】
[0015]本發明的發明人為達到上述目的，經過銳意研究，發現以往因毫無用途而被廢棄的西番蓮果種子中含有豐富的白皮杉醇，從而完成了本發明。[0016]即，本發明的含白皮杉醇組合物是從西番蓮果種子中獲得，其特征在于以大于10至99.9質量％的含有量含有白皮杉醇。
[0017]通過本發明的含白皮杉醇組合物，可以提供來自天然物的、以較高的含有量含有白皮杉醇的組合物。而且，由于是來自天然物的組合物，因而可以將其用于化妝品、醫藥品、以及功能性食品、健康食品等的飲食品中。
[0018]另外，本發明的含白皮杉醇組合物的制備方法的特征在于，將西番蓮果種子粉碎后，添加從含水醇系溶媒及含水酮系溶媒中選擇的至少I種溶媒進行攪拌，從該溶媒含有的西番蓮果種子中提取白皮杉醇。
[0019]通過本發明的含白皮杉醇組合物的制備方法，在從西番蓮果種子中提取白皮杉醇時，由于使用含水醇系溶媒或含水酮系溶媒，因而可以以較高的生成率制備來自天然物的、以較高的含有量含有白皮杉醇的組合物。
[0020]在本發明的含白皮杉醇組合物的制備方法中，將西番蓮果種子粉碎后，添加含水醇系溶媒及含水酮系溶媒中的任一種溶媒進行攪拌，從該溶媒含有的西番蓮果種子中提取白皮杉醇獲得第I提取物，再在未作為所述提取物回收的殘渣中，添加含水醇系溶媒及含水酮系溶媒中的上述未選擇的溶媒進行攪拌，從該溶媒含有的西番蓮果種子中提取白皮杉醇獲得第2提取物，隨后將所述第I提取物和第2提取物混合。通過這種方式，使用多種溶媒進行階段性的提取，因而可以以更高的生成率制備含有大量白皮杉醇的含白皮杉醇組合物。
[0021]在本發明的含白皮杉醇組合物的制備方法中，所述西番蓮果種子最好是西番蓮果的生的種子、或是將西番蓮果的生的種子干燥后的種子。
[0022]另外，在本發明的含白皮杉醇組合物的制備方法中，所述含水醇系溶媒最好為含水乙醇，或，所述含水酮`系溶媒最好為含水丙酮。關于其含水率，含水乙醇最好為含有20~99.9體積％的乙醇；含水丙酮最好為含有20~99.9體積％的丙酮。通過這樣的形態，可以提聞白皮杉醇的提取效率。
[0023]在本發明的含白皮杉醇組合物的制備方法中，所述在各溶媒中的攪拌，最好以超聲波振動或振蕩進行。通過這種形態，可以提高白皮杉醇的提取效率。
[0024]另外，在本發明的含白皮杉醇組合物的制備方法中，在提取后，最好通過減壓蒸餾將溶媒去除。
[0025]另外，本發明還涉及一種飲食品，其中添加了從西番蓮果種子中獲得的、以
0.0001~99.9質量％的含有量含有白皮杉醇的含白皮杉醇組合物。
[0026]另外，本發明還涉及一種化妝品，其中添加了從西番蓮果種子中獲得的、以大于10至99.9質量％的含有量含有白皮杉醇的含白皮杉醇組合物。
[0027]通過本發明的含白皮杉醇組合物，可以提供來自天然物的、以較高的含有量含有白皮杉醇的組合物。而且，由于是來自天然物的組合物，因而可以應用于化妝品、醫藥品、以及功能性食品、健康食品等飲食品中。另外，通過本發明的含白皮杉醇組合物的制備方法，作為從西番蓮果種子中提取白皮杉醇的溶媒，使用的是含水醇系溶媒或含水酮系溶媒，從而可以以較高的生成率制備來自天然物的、含有大量白皮杉醇的組合物。另外，可以通過屬于含水醇系溶媒或含水酮系溶媒的多種溶媒進行階段性的提取，從而以更高的生成率進行制備。【專利附圖】
【附圖說明】
[0028]圖1是表示從種子(A)果皮(B)及果肉(C)中提取的提取物的HPLC色譜的圖表；
[0029]圖2是表示在圖1的HPLC分析中在41分附近溶出的成分的MS光譜圖(A)及UV光譜圖(B)的圖表；
[0030]圖3是表示白藜蘆醇(Resveratrol，分子量228)的MS光譜圖(A)及UV光譜圖(B)的圖表；
[0031]圖4是表示白皮杉醇(Piceatannol，分子量244)的MS光譜圖(A)及UV光譜圖(B)的圖表；
[0032]圖5是表示乙醇(A)或丙酮(B)的含水率對白皮杉醇的提取效率的影響的圖表。【具體實施方式】
[0033]本發明的含白皮杉醇組合物是從西番蓮果種子中獲得的組合物，以0.0001~99.9質量％的含有量含有白皮杉醇。其形狀可以為液狀、固狀、半固狀、凝膠狀等，另外，西番蓮果種子可以是該種子本身及將種子粉碎后的糊狀物、或是將種子凍干粉碎后的粉末等的種子加工物。白皮杉醇的固態換算含有量，可以為0.0001~99.9質量％、更理想的是
0.01~50質量％、最理 想的是0.1~10質量％。
[0034]白皮杉醇(Piceatannol)以下述化學式(I)表達。
[0035][化I]
[0036]
[0037]上術化學式表達的白皮杉醇，是2個苯基以反式的烯基連接的結構，是反式的白皮杉醇，但在本發明中，白皮杉醇(Piceatannol)的概念，是在上述化學式中還包含2個苯基以順式的烯基連接的結構的順式白皮杉醇。
[0038]西番蓮果是西番蓮科西番蓮屬的植物,別名:雞蛋果,果實酸甜可口，可作為水果直接食用，也可將其榨取果汁飲用，或添加至果凍、糕點等飲食品中增加味道。西番蓮果的種子較硬，在榨取果汁等時需要將其從果實中去除，即使將果實的種子一同加入飲食中，也會因其外皮過硬難以消化而被直接排泄。本發明是在發現以往因毫無用途而被廢棄的西番蓮果種子中含有豐富的白皮杉醇的基礎上的發明。另外，本發明中使用的西番蓮果種子，由以往的食用西番蓮果的經驗可以證明，即使將其添加在功能性食品及健康食品等飲食品中，也不會存在安全性的問題。
[0039]本發明的含白皮杉醇組合物，最好是將例如生的、或是干燥后的西番蓮果種子粉碎后，使用不同溶媒進行提取的方法獲得。為了提高提取效率，也可適當對西番蓮果種子實施酸或堿分解、酶分解等化學處理后再進行提取。另外，通過下述說明的本發明的含白皮杉醇組合物的制備方法，可以以較高的生成率獲得含有大量白皮杉醇的組合物，因此最好使用該方法獲取。
[0040]下面對本發明的含白皮杉醇組合物的制備方法進行說明。
[0041]在本發明的含白皮杉醇組合物的制備方法中，首先將西番蓮果種子粉碎。西番蓮果種子可以使用生的、或是干燥后的西番蓮果種子，為了提高提取效率，也可適當對西番蓮果種子實施酸或堿分解、酶分解等化學處理后再進行提取。粉碎處理可以使用通用的粉碎機進行。另外，由于西番蓮果種子中油分較多，粉碎后可能會呈糊狀。
[0042]隨后，在粉碎后的西番蓮果種子中添加從含水醇系溶媒及含水酮系溶媒中選擇的至少一種溶媒進行攪拌，從該溶媒中提取白皮杉醇。
[0043]含水醇系溶媒可以使用乙醇、甲醇、丙醇等含水溶媒，其中最好使用含水乙醇。另外，含水酮系溶媒可以使用丙酮、丁酮、二乙基甲酮、氯丙酮等含水溶媒，其中最好使用含水丙酮。
[0044]關于其含水率，含水乙醇可以為包含20~99.9體積％的乙醇，更理想的是包含40~99.9體積％的乙醇，最理想的是包含60~80體積％的乙醇；含水丙酮可以為包含20~99.9體積％的丙酮，更理想的是包含40~99.9體積％的丙酮，最理想的是包含60~80體積％的丙酮。如果超出上述 范圍，可能會導致提取效率下降。另外，為了將含水溶媒的含水率表述簡單化，以下將例如含水20體積％的80體積％乙醇表述為“80%含水乙醇”，將例如含水30體積％的70體積％乙醇表述為“70%含水乙醇”，再例如將含水30體積％的70體積％丙酮表述為“70%含水丙酮”。
[0045]在本發明的含白皮杉醇組合物的制備方法中，在上述各溶媒中的攪拌，最好使用超聲波振動或振蕩進行。這樣可以讓已粉碎并與上述各溶媒接觸的西番蓮果種子有效振動，從而可以提高從西番蓮果種子向上述各溶媒中提取白皮杉醇的提取效率。超聲波振動可以使用通用的超聲波裝置進行。另外，振蕩也可以使用通用的振蕩裝置進行。
[0046]另外，在本發明的含白皮杉醇組合物的制備方法中，提取后，最好使用減壓蒸餾法去除上述溶媒。這樣組合物中就不會包含有機溶媒，作為向功能性食品及健康食品等飲食品中添加的食品材料，可以符合其安全性的標準等。
[0047]在本發明的含白皮杉醇組合物的制備方法中，可以通過多種溶媒進行階段性的提取。這樣可以以更高的生成率制備含有大量白皮杉醇的含白皮杉醇組合物。
[0048]具體是，例如將西番蓮果種子粉碎后，添加所述含水醇系溶媒及所述含水酮系溶媒中的任一種溶媒進行攪拌，從該溶媒中提取白皮杉醇獲得第I提取物。通過離心等方式將提取物和未被作為提取物回收的殘渣分離，在殘渣中添加所述溶媒中未被選擇的另一種溶媒進行攪拌，從該溶媒中提取白皮杉醇獲得第2提取物。隨后將所述第I提取物和第2提取物混合。當然，該第2提取物也可單獨作為西番蓮果種子的提取物進行利用。
[0049]另外，西番蓮果種子由于接受了通過所述含水醇系溶媒或所述含水酮系溶媒的第I提取處理，其結構等的特性因提取而變得更加適宜，所以在接下來的第2提取處理時，無論使用所述含水醇系溶媒或所述含水酮系溶媒、還是使用此外的其它溶媒，均可期待其提取效率得到改善。而且，如后述的實施方式所述，所述含水醇系溶媒或所述含水酮系溶媒的提取效率是基于其含水，所以在用水或水溶性溶媒對西番蓮果種子進行第I提取處理后，在接下來的第2提取處理時，無論使用所述含水醇系溶媒或所述含水酮系溶媒、還是使用此外的其它溶媒，均可期待其提取效率得到改善。
[0050]通過上述方法獲得的西番蓮果種子的提取物，可直接或將其濃縮的液體狀的物質作為含白皮杉醇組合物。也可通過冷凍干燥或噴霧干燥將其粉末化，將粉末狀的物質作為含白皮杉醇組合物。另外，本發明不限于這些形態。可將提取物中所含的不溶物適當通過過濾等方式去除，也可將不溶物再粉碎，形成微細粒子狀。
[0051]另外，對于按上述方法獲得的西番蓮果種子的初次提取物，可以通過離子交換、尺寸排阻色譜法、HPLC法、凝膠過濾、膜分離等方法，將白皮杉醇按指標進行分級、精制后，將其作為含白皮杉醇組合物。 [0052]具體是，例如后述的實施所示，將從西番蓮果種子中提取的組合物在下述條件下使用HPLC法，白皮杉醇在41分附近被溶出。另外，對該溶出部分通過質量分析裝置進行質譜(mass spectrum)測定，負離子模式的信號呈m/z243。
[0053][HPLC 條件]
[0054].柱:Mightysil RP - 18GP150 - 4.6 徑 4.6mm、長 150mm (關東化學株式會社)
[0055].柱溫度:40°C
[0056].溶出條件:流速lml/min,0%甲醇一30%甲醇(60min)
[0057].UV 檢測:280nm
[0058]這樣，在本發明中，以上述示例的白皮杉醇的物性為指標進行適當分級、精制，從而可以制備提高了白皮杉醇的含有量的、來自西番蓮果種子的含白皮杉醇組合物。
[0059]本發明的含白皮杉醇組合物，根據需要可添加藥物學容許的基質或載體，形成片劑、顆粒劑、散劑、液劑、粉末、顆粒、膠囊劑、膠狀劑等的形態用于醫藥，此外，還可形成軟膏劑、乳霜劑、凝膠、面膜、化妝水、保濕品等形態用于化妝品。
[0060]另外，本發明的含白皮杉醇組合物，還可添加至特定保健用食品、營養輔助食品、功能性食品等以供攝取。這樣的食品例如有巧克力、餅干、□香糖、糖果、曲奇餅、果凍、壓縮餅干等的糕點類食品；谷類食品；粉末飲料、清涼飲料、乳飲料、營養飲料、碳酸飲料、凝膠飲料等的飲料；冰淇淋、冰糕等的冰點。另外，蕎麥面、面食、面條、掛面等的面類也是很好的例子。另外，特定保健用食品及營養輔助食品等可以是粉末、顆粒、膠囊、糖漿、片劑、糖衣劑等的形態。
[0061]實施例
[0062]下面通過實施例對本發明進行具體說明，但本發明的范圍并不以這些實施方式為限。
[0063]<試驗例1> [西番蓮果中的白皮杉醇的檢測及同定]
[0064]將西番蓮果分為果皮、果肉、種子3個部位，分別進行冷凍干燥，用粉碎機(商品名"sampIemiI型式SK - M”，協立理工株式會社)粉碎后，用80%含水乙醇對各部位進行提取。遠心后取上層清液，用蒸發器濃縮后，進行冷凍干燥形成粉末。將該粉末溶于水即為提取物。隨后，將各個固態的濃度進行稀釋，種子提取物稀釋至0.01g/ml，果皮提取物或果肉提取物稀釋至0.lg/ml，并各取5 μ I進行HPLC分析。
[0065]HPLC的分析條件如下:
[0066].柱:Mightysil RP - 18GP150 - 4.6 徑 4.6mm，長 150mm (關東化學株式會社制)
[0067].柱溫度:40°C[0068].溶出條件:流速lml/min，0%甲醇一30%甲醇(60min)
[0069].UV 檢測:280nm
[0070]圖1A~圖1C表示的是上述各提取物的HPLC色譜。其結果如圖1A所示，種子提取物在41分附近達到峰。與此相比，果皮及果肉的提取物，雖然注入的固態濃度是種子提取物的10倍，但在41分附近未確認峰。
[0071]接下來，對種子提取物在上述保持時間41分附近溶出的成分是什么物質進行下述的同定。
[0072]首先，使用HPLC/質量分析裝置(THERMO ELECTRON株式會社制，裝置名稱“Thermo -LCQ -MS/MS”)測定其質譜(圖2A)。通過陽極、陰極兩種離子模式進行確認，在陰極發現了良好的離子，所以使用其數據。其結果是，主要信號m/z243為(Μ - H)_，其它峰m/2279屬于(]?+2!120-!0_，111/^487屬于(]\^2-!0_。因此決定了分子量為244。另外，取UV光譜，作為入max,觀察到220nm、304nm、322nm (圖2B)。
[0073]這些質譜及UV光譜的結果，與花生皮所含的多酹-白藜蘆醇(Resveratrol,
分子量228)類似(參照圖3A、B)。另外，還另行確認了向吸附多酚的樹脂聚乙烯吡咯烷酮(PVPP:polyvinylpolypyrrolidone)的吸附。另外，上述41分附近的峰與相同HPLC條件下的白藜蘆醇的保持時間相比 ，向反相柱的保持時間較短。綜上所述，上述種子提取物在保持時間41分附近溶出的成分，是比白藜蘆醇大I個分子量的羥基的、下述式(I)所示的白皮杉醇(Piceatannol,分子量244)。
[0074][化2]
[0075]
【權利要求】
1.一種含白皮杉醇組合物，其特征在于: 從西番蓮果種子中獲得，以大于10至99.9質量％的含有量含有白皮杉醇。
2.一種飲食品，其特征在于: 添加了以0.0001~99.9質量％的含有量含有從西番蓮果種子中獲得的白皮杉醇的含白皮杉醇組合物。
3.一種化妝品，其特征在于: 添加了以大于10至99.9質量％的含有量含有從西番蓮果種子中獲得的白皮杉醇的含白皮 杉醇組合物。
【文檔編號】A23L1/29GK103751156SQ201310312550
【公開日】2014年4月30日 申請日期:2009年4月3日 優先權日:2009年4月3日
【發明者】松井悠子, 龜井優德, 杉山謙吉 申請人:森永制果株式會社