專利名稱：一株綠膿桿菌及其應用的制作方法
技術領域：
本發明屬于微生物應用技術領域，具體涉及一株綠膿桿菌及其應用。
背景技術：
近幾十年來，我國水產養殖業迅猛發展，集約化、高密度養殖規模日益擴大，但由于種投餌造成養殖水體中積累大量的殘餌，以及養殖動物的糞便及動植物尸體等原因導致水體氮元素含量嚴重超標，富營養化加劇，使得養殖生態環境遭到破壞，魚蝦病害頻發，最終造成巨大的經濟損失。研究表明，氨氮是水相環境中氮的主要形態，也是造成水體富營養化的主要污染物，其中以銨態氮最多，銨態氮中的非離子形態對水產動物具有較強的毒性，且隨著PH和溫度而變化，氨氮過高極易容易造成水產養殖動物死亡。目前，水產養殖生產過程中，人們控制氨氮污染的辦法通常是通過換注新水降低氨氮濃度，采用曝氣方式使部分氨氮逸出水面，例如采用氯消毒去除氨氮，或使用氧合器等來調節水質。由于上述方法不能使氨氮完全能降低到水質要求標準，例如受水源限制，或是魚類發生氣泡病、細菌性鰓病等，因此對氨氮污染的控制效果并不理想。而近年來，微生物脫氮技術去除的微生物技術開始迅速發展，微生物降解氨氮的效率穩定，二次污染小的優點受到水產養殖及環保產業的高度關注，這就要求能夠篩選到具有高效氨氮降解功能的微生物。
發明內容
本發明的目的是提供一株綠膿桿菌及其應用，所述綠膿桿菌篩選自南美白對蝦養殖塘的底泥，能高效降解水體中的氨態氮，可廣泛應用于對水產養殖及生活廢水的處理。
本發明一方面提供了一株綠胺桿菌AN5 (Pseudomonas aeruginosa AN5),已于2013年3月6日保藏于位于中國武漢武漢大學的中國典型培養物保藏中心，其保藏編號為CCTCC N0:M2013068o本發明的微生物可應用于水體凈化領域。本發明的另一方面提供了含有上述綠膿桿菌的微生物制劑及其應用。上述綠膿桿菌可以菌粉的形式制成微生物添加劑，制備過程為:將綠膿桿菌AN5活化、擴大培養，經液態發酵，離心收集菌泥，加入淀粉載體，烘干制成菌量為100 1000億/g的菌粉。上述綠膿桿菌AN5菌粉用于養殖廢水或生活污水的凈化處理。本發明從南美白對蝦養殖塘底泥中篩選到一株綠膿桿菌AN5。該菌株能高效降解水體中的銨態氮，且該菌株營養需要簡單，繁殖力強，可開發為水產微生物制劑及廢水處理齊U，應用前景廣闊。
具體實施方式
實施例1:綠膿桿菌AN5分離篩選及鑒定1、篩選的污泥取自江蘇射陽南美白對蝦養殖塘。2、培養基:I)富集培養基:葡萄糖5g、硫酸銨2g、氯化鈉2g、硫酸亞鐵0.4g、磷酸氫二鉀lg、ρΗ7.2，硫酸鎂 0.5g、水 IOOOmL ；2)分離培養基:富集培養基基礎上加20g的瓊脂粉；3)篩選培養基:葡萄糖5g、硫酸銨0.225g、氯化鈉lg、磷酸氫二鉀0.5g、pH7.2、硫酸鎂0.25g、去離子水定容至IOOOmL,其中氨氮含量為45mg/L，分裝于250mL小三角瓶，每瓶IOOmL, 121°C 滅菌 30min。
4)葡萄糖蛋白胨液體培養基:蛋白胨5g、葡萄糖5g、磷酸氫二鉀2g、氯化鈉5g，水IOOOmL, pH7.0，過濾分裝，121°C滅菌 30min。3、篩選:取南美白對蝦養殖塘污泥，加一半水攪勻，經1000r/min離心5min后，取上清接種于富集培養基，于30°C培養，富集7d，且每隔Id向其中加入硫酸銨溶液1ml，以淘汰不能利用NH4+的微生物。發酵液經梯度稀釋后涂布在倒置的分離培養基平板上，于30°C培養，挑取平板上長出的單菌落進行重復分離純化，直到得到單菌株的純培養，本次實驗共獲得10株單菌落，并分別依次命名為AN1、AN2、AN3至AN10。將純化得到的菌株接種到篩選培養基中，測試各菌株在30°C、150r/min培養24h時上述10株菌對氨氮的降解情況，其中菌株AN5對氨氮的降解率最高，達71.93% (表I)。表1:10株菌在24h降解氨氮的實驗結果
權利要求
1.一種綠膿桿菌，其特征在于，所述的綠膿桿菌的保藏編號為CCTCC N0:M2013068o
2.權利要求1所述的綠膿桿菌在水體凈化領域中的應用。
3.—種微生物制劑，所述的微生物制劑包含有權利要求1所述的綠膿桿菌。
4.權利要求3所述的微生物制劑，所述的微生物制劑為微生物菌粉，是將權利要求1所述的綠膿桿菌活化、擴大培養，經液態發酵，離心收集菌泥，加入淀粉載體，烘干制成菌量為100 1000億/g的菌粉。
5.權利要求3或4所述的微生物制劑在養殖廢水或生活污水凈化處理中的應用。
全文摘要
本發明的目的是提供一株綠膿桿菌及其應用，所述綠膿桿菌綠膿桿菌AN5(Pseudomonas aeruginosa AN5)，其保藏編號為CCTCC NO:M2013068。本發明的綠膿桿菌可應用于水體凈化領域。本發明從南美白對蝦養殖塘底泥中篩選到一株綠膿桿菌AN5。該菌株能高效降解水體中的銨態氮，且該菌株繁殖力強，可開發為水產微生物制劑及廢水處理劑，應用前景廣闊。
文檔編號C12N11/10GK103146621SQ20131009523
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月21日 優先權日2013年3月21日
發明者武玉強, 李自英 申請人:青島蔚藍生物集團有限公司