一種以氫氧化鈉作為中和劑生產(chǎn)d-乳酸的方法

專利名稱：一種以氫氧化鈉作為中和劑生產(chǎn)d-乳酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法，特別涉及一種以氫氧化鈉作為中和劑培養(yǎng)菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)生產(chǎn)高光學(xué)純D-乳酸的方法。
背景技術(shù)：
乳酸又稱丙醇酸，分子式C3H6O3 (CH3CHOHCOOH)t5由于乳酸分子中存在一個(gè)不對(duì)稱的碳原子，因此具有光學(xué)異構(gòu)現(xiàn)象，從而分為D-型和L-型兩種。其生產(chǎn)方法主要有化學(xué)合成法和微生物發(fā)酵法，化學(xué)法只能合成DL-乳酸，而發(fā)酵法根據(jù)所采用的菌株的不同，可以合成單一的L-乳酸、D-乳酸或者DL-乳酸。目前，約90%的乳酸是通過微生物發(fā)酵法生產(chǎn)的。用乳酸生產(chǎn)生物降解塑料，在我國具有極大的市場發(fā)展?jié)摿Γ壳耙殉蔀殚_發(fā)的熱點(diǎn)項(xiàng)目。但是，由光學(xué)純L-乳酸制得的聚乳酸在強(qiáng)度、熱穩(wěn)定性等方面尚需進(jìn)一步的改進(jìn)才能適應(yīng)更為廣泛的應(yīng)用的需要。有報(bào)道稱，由聚L-乳酸和聚D-乳酸混合而成的聚乳酸與聚L-乳酸相比具有更佳的結(jié)構(gòu)和性能。D-乳酸作為一種基本有機(jī)化工原料，在醫(yī)藥、農(nóng)藥、化工等方面均有十分廣泛的應(yīng)用。尤其是作為下一代生物可降解塑料聚乳酸的單體，正在引起全球大公司和科學(xué)家的高度關(guān)注。 全球D-乳酸的需求量每年都以6% 8%的速度增長，目前全世界D-乳酸的產(chǎn)量為1.6萬噸，而D-乳酸的需求量約2.6萬噸，由此可見，D-乳酸的市場前景廣泛。隨著全球性的能源和資源供求關(guān)系的日益緊張，以可再生生物質(zhì)原料的高濃度、高光學(xué)純D-乳酸生物制造勢在必行。發(fā)展光學(xué)純D-乳酸生物制造技術(shù)，將會(huì)促進(jìn)可降解材料——聚乳酸的發(fā)展，對(duì)實(shí)施石油替代戰(zhàn)略，確保國家能源與資源安全具有極為重要的作用。目前，從發(fā)酵液中提取乳酸的傳統(tǒng)的方法是采用乳酸鈣的結(jié)晶和硫酸酸化的工藝。但該工藝的主要缺點(diǎn)是工藝流程長、化工原料消耗多、產(chǎn)品回收率低，而且產(chǎn)生的硫酸鈣對(duì)環(huán)境產(chǎn)生不利的影響。多年來，人們?cè)噲D尋找其他的可行的提取工藝，主要有酯化法、溶劑萃取法、吸附法、離子交換法和電滲析法等，其中電滲析法技術(shù)比較成熟。但是在乳酸的發(fā)酵過程中，由于乳酸的積累PH值不斷的下降，為了提高產(chǎn)率，需要在發(fā)酵液中添加中和劑，如CaCO3、NaOH和NH4OH等，其中CaCO3是最常用的，因?yàn)槿樗徕}對(duì)菌體的脅迫要遠(yuǎn)遠(yuǎn)的低于乳酸鈉，但在后續(xù)的提取過程中利用傳統(tǒng)的中和劑(碳酸鈣)來進(jìn)行乳酸發(fā)酵時(shí)，膜分離技術(shù)就會(huì)存在很大的弊端一形成的氫氧化鈣會(huì)吸附在膜上，增加膜的阻力，降低了電流效率，從而造成堵塞和污染膜。所以國內(nèi)外對(duì)于乳酸鈣的電滲析轉(zhuǎn)化并不多見，最常見的是乳酸鈉的轉(zhuǎn)化。在實(shí)驗(yàn)條件下，電滲析器的電流效率接近1，乳酸鈉的轉(zhuǎn)化率可以達(dá)到95%。在工業(yè)條件下，應(yīng)用雙極膜電滲析法轉(zhuǎn)化乳酸鈉生產(chǎn)乳酸的方法對(duì)環(huán)境影響小，能降低乳酸的生產(chǎn)成本。但目前利用NaOH為中和劑來生產(chǎn)乳酸的菌種并不多，且還沒有生產(chǎn)D-乳酸的報(bào)道
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是目的是提供一種氫氧化鈉的新用途，以及發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法。本發(fā)明所提供的氫氧化鈉的新用途，具體為氫氧化鈉在作為中和劑發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸中的應(yīng)用。本發(fā)明所提供的發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法，具體可包括如下步驟:將芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus sp.)接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),并在所述發(fā)酵培養(yǎng)過程中以氫氧化鈉作為中和劑控制發(fā)酵液(發(fā)酵體系，即發(fā)酵容器中的所有物質(zhì))的PH，得到D-乳酸。在所述方法中，在所述發(fā)酵培養(yǎng)過程中，用所述氫氧化鈉控制所述發(fā)酵液的pH恒定為5.0-7.0，如6.0-7.0，再如6.5。具體是通過流加15M的氫氧化鈉水溶液來進(jìn)行恒定控制的(氫氧化鈉是通過PH探頭檢測自動(dòng)流加到發(fā)酵液中的)。在所述方法中，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的碳源可為葡萄糖；所述葡萄糖在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度可為50-60g/L (如50g/L)。在所述方法中，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的氮源可為花生柏；所述花生柏在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度可為30-50g/L (如40g/L)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述花生柏為北京康明威培養(yǎng)基技術(shù)有限責(zé)任公司產(chǎn)品，其產(chǎn)品目錄號(hào)為38210000。在所述方法中，所述發(fā)酵培養(yǎng)基還含有中性蛋白酶；其中，中性蛋白酶的酶活定義為:在測定條件(30±0.2°C ; !1值7.5)下，每分鐘水解酪蛋白釋出的三氯乙酸可溶物在275nm波長的吸光度與I微克酪氨酸的吸光度相當(dāng)時(shí)，所需的酶量即為一個(gè)活力單位(即1U)，用U/g表示。所述中性蛋白酶用于處理所述花生柏，釋放氮元素。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述中性蛋白酶具體為諾維信(中國)生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，CAS號(hào)為9068-59-1。所述中性蛋白酶在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度為1.5X104U/L。具體的，在所述方法中，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的溶劑為水，溶質(zhì)及濃度如下:葡萄糖50-60g/L ;花生柏 30-50g/L ;中性蛋白酶 1.5X 104U/L。更加具體的，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的溶劑為水，溶質(zhì)及濃度如下:葡萄糖50g/L ;花生柏40g/L ;中性蛋白酶1.5X 104U/L。在本發(fā)明中，所述發(fā)酵培養(yǎng)基需經(jīng)高壓滅菌，具體為115°C高壓滅菌lOmin。在所述方法中，所述發(fā)酵培養(yǎng)的溫度具體可為40_45°C (如42°C);所述發(fā)酵培養(yǎng)的時(shí)間可為15-50h，如15-17h或24-50，再如15h，17h或50h。所述發(fā)酵培養(yǎng)的培養(yǎng)方式可為震蕩培養(yǎng)；所述震蕩培養(yǎng)的轉(zhuǎn)速具體可為50rpm(旋轉(zhuǎn)半徑為6cm)。在所述方法中，為了有效的提高發(fā)酵產(chǎn)物D-乳酸的產(chǎn)量，所述發(fā)酵培養(yǎng)過程中，可隨著發(fā)酵反應(yīng)的進(jìn)行向所述發(fā)酵液中補(bǔ)加葡萄糖；具體的，所述補(bǔ)加葡萄糖的時(shí)間為所述發(fā)酵液中葡萄糖的含量開始低于20g/L時(shí)；所述補(bǔ)加葡萄糖的量為補(bǔ)加至所述發(fā)酵液中葡萄糖的含量達(dá)到50g/L。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述發(fā)酵培養(yǎng)的時(shí)間為50h，共進(jìn)行了 3次補(bǔ)料，分別為第 12h、18h 和 26h。
在所述方法中，所述發(fā)酵培養(yǎng)的前12h (菌體的快速生長期)可進(jìn)行通氣，通氣量為0.5(V / V.min)。所述通氣量以每分鐘內(nèi)通過單位體積培養(yǎng)液的空氣體積比來表示，如0.5 (V / V *min)表示每分鐘內(nèi)通入氣體的體積為培養(yǎng)液體積的一半。12h后(生產(chǎn)積累D-乳酸期)可切斷通氣。本發(fā)明所提供的發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法中，接種到所述發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)的所述芽孢乳桿菌(SporolactobaciIIus sp.)是經(jīng)過活化的芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus sp.)。 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，其活化方法(適于不補(bǔ)料的單次發(fā)酵培養(yǎng))具體包括如下步驟:將所述芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus sp.)接入種子培養(yǎng)基,在42°C靜止培養(yǎng)48h，得到培養(yǎng)物，將所述培養(yǎng)物按照1:10的體積比轉(zhuǎn)接到新的種子培養(yǎng)基中，繼續(xù)42°C靜止培養(yǎng)24h,得到所述活化的芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus sp.)。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施例中，其活化方法(適于多次補(bǔ)料發(fā)酵培養(yǎng))具體包括如下步驟:1)將所述芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus sp.)接入種子培養(yǎng)基,在42°C靜止培養(yǎng)48h，得到培養(yǎng)物1，將所述培養(yǎng)物I按照1:10的體積比轉(zhuǎn)接到新的種子培養(yǎng)基中，繼續(xù)42°C靜止培養(yǎng)24h，得到培養(yǎng)物2 ；2)將步驟I)所述 培養(yǎng)物2按照1:10的體積比轉(zhuǎn)接到新的種子培養(yǎng)基中，繼續(xù)42°C靜止培養(yǎng)24h,得到所述活化的芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus sp.)。上述所有的所述種子培養(yǎng)基的溶劑為水，溶質(zhì)及其濃度如下:葡萄糖50g/L，酵母粉1(^/1，碳酸鈣3(^/1巾11為6.5。各濃度為相應(yīng)組分在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度。所述酵母粉為商業(yè)化產(chǎn)品，可以從國內(nèi)生產(chǎn)商購買，比如安琪酵母股份有限公司。在所述方法中，所述芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus sp.)可為菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述菊糖芽孢乳桿菌(SporolactobaciIIusinulinus)具體為菊糖芽抱乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)CASD CGMCC N0.2185。本發(fā)明所提供的發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法中，菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus) CASD CGMCC N0.2185 以氫氧化鈉作為中和劑，大大的降低了原料成本，降低環(huán)境污染，并高效發(fā)酵產(chǎn)生旋光性99.3%聚合級(jí)的D-乳酸，具有很好的工業(yè)應(yīng)用型前景。


圖1為分批補(bǔ)料發(fā)酵模式高效生產(chǎn)D-乳酸，發(fā)酵液中相應(yīng)葡萄糖和D-乳酸濃度的變化。
具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。下述實(shí)施例中所涉及的各參數(shù)測定方法均如下:(I)L-乳酸和葡萄糖的測定方法:采用SBA-40C分析儀，雙電機(jī)系統(tǒng)測定L-乳酸和葡萄糖的原理是根據(jù)酶反應(yīng):L-乳酸(葡萄糖)+02+H20 —丙酮酸(葡萄糖酸)+H202。此反應(yīng)時(shí)在固定化的L-乳酸氧化酶(葡萄糖氧化酶)的作用下完成的，反應(yīng)產(chǎn)生的H2O2與L-乳酸(葡萄糖)的含量呈正比，通過過氧化氫電極來檢測H2O2的生成量，從而知道L-乳酸(葡萄糖)的含量。
測定方法:樣品離心后收集上清，經(jīng)適當(dāng)稀釋后由進(jìn)樣針吸取25 yl，并注入反應(yīng)池，底物透過酶膜圈與固定化酶層接觸并反應(yīng)，并產(chǎn)生電流信號(hào)，該電流信號(hào)與底物的濃度成線性比例關(guān)系，經(jīng)微機(jī)控制的信號(hào)，可直接顯示并打印結(jié)果。(2) D-乳酸濃度的測定方法:采用Agilentl260液相色譜儀，配備手性分離柱(日本三菱化學(xué)公司，MCI GEL-CRS10ff,4.6mm IDX50mm)。具體操作條件為:2mM的硫酸銅作為流動(dòng)相，流量0.5mL/min,進(jìn)樣量5 u L，紫外檢測器，檢測波長254nm，操作溫度25 V。利用D-乳酸標(biāo)準(zhǔn)品做出標(biāo)準(zhǔn)曲線，再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出發(fā)酵液(發(fā)酵體系)中D-乳酸的含量。(3)糖酸轉(zhuǎn)化率均定義為:D_乳酸產(chǎn)量(克/升)-葡萄糖的消耗量(克/升)X 100%O(4)光學(xué)純度(optical purity):是衡量旋光性樣品中一個(gè)對(duì)映體超過另一個(gè)對(duì)映體的量的量度，它可用對(duì)映體過量值(enantiomeric excess)表示。本發(fā)明中D-乳酸的光學(xué)純度按以下公式計(jì)算:D-乳酸含量+ (D-乳酸含量+L-乳酸含量)X 100%。

菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)為菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus) CASD,該菌株已于2007年9月24日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，其保藏編號(hào)為CGMCC N0.2185 (專利授權(quán)公告號(hào)CN100485027C)?；ㄉ?為北京康明威培養(yǎng)基技術(shù)有限責(zé)任公司產(chǎn)品，其產(chǎn)品目錄號(hào)為38210000。中性蛋白酶:為諾維信(中國)生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，CAS號(hào)為9068-59-1，其酶活為5X104U/g。其中，中性蛋白酶的酶活定義為:在測定條件(30±0.2°C ;pH值7.5)下，每分鐘水解酪蛋白釋出的三氯乙酸可溶物在275nm波長的吸光度與I微克酪氨酸的吸光度相當(dāng)時(shí)，所需的酶量即為一個(gè)活力單位(即W。種子培養(yǎng)基:溶劑為水，溶質(zhì)及其濃度如下:葡萄糖50g/L，酵母粉(安琪酵母股份有限公司)10g/L，碳酸鈣30g/L ；pH為6.5。各濃度為相應(yīng)組分在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度。所述發(fā)酵培養(yǎng)基需經(jīng)高壓滅菌，具體為115°C高壓滅菌lOmin。實(shí)施例1、高效生產(chǎn)D-乳酸的最適pH值的確定本實(shí)施例所用發(fā)酵培養(yǎng)基的溶劑為水，溶質(zhì)及其濃度如下:50g/L葡糖糖，40g/L花生柏，0.3g/L (相當(dāng)于1.5X104U/L)中性蛋白酶。各濃度為相應(yīng)組分在發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度。所述發(fā)酵培養(yǎng)基需經(jīng)高壓滅菌，具體為115°C高壓滅菌lOmin。本實(shí)施在整個(gè)發(fā)酵培養(yǎng)過程中，自始自終通過流加濃度為15M的氫氧化鈉水溶液來恒定控制發(fā)酵液的pH值為5.0 (或5.5，或6.0，或6.5或7.0)(氫氧化鈉是通過pH探頭檢測自動(dòng)流加到所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的)，分析不同PH值下D-乳酸產(chǎn)量、糖酸轉(zhuǎn)化率、D-乳酸產(chǎn)量光學(xué)純度以及發(fā)酵時(shí)間等，確定高效生產(chǎn)D-乳酸的最適pH值。確定用于生產(chǎn)D-乳酸的最適pH值濃度的具體步驟如下:I)種子菌培養(yǎng):將保存在MRS固體培養(yǎng)基上的菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus) CASD CGMCC N0.2185 用接種環(huán)接一環(huán)到含有 6mL 種子培養(yǎng)基的試管中，42°C靜止培養(yǎng)48h，然后從中取3mL轉(zhuǎn)接到含有30mL新鮮種子培養(yǎng)基的三角瓶中，42°C靜止培養(yǎng)24h，得到種子液(活化的菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillusinulinus) CASD CGMCC N0.2185)。
2)將步驟I)的種子液按體積比1:10的接種量接到五份上述發(fā)酵培養(yǎng)基(2L/份)中。于42°C條件下50rpm (旋轉(zhuǎn)半徑為6cm)震蕩發(fā)酵培養(yǎng)，期間通過流加濃度為15M的氫氧化鈉水溶液來恒定控制五份發(fā)酵液的PH值分別為5.0,5.5,6.0,6.5和7.0)(氫氧化鈉是通過PH探頭檢測自動(dòng)流加到所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的)。從Oh (將種子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中的一刻)開始，每隔適當(dāng)?shù)臅r(shí)間，取發(fā)酵液，12000rpm離心IOmin后,取上清液稀釋合適的倍數(shù)測定如下參數(shù):葡萄糖濃度、L-乳酸濃度和D-乳酸濃度；計(jì)算糖酸轉(zhuǎn)化率和D-乳酸的光學(xué)純度。實(shí)驗(yàn)設(shè)3個(gè)重復(fù)，結(jié)果取平均值。結(jié)果顯示，當(dāng)發(fā)酵液pH值為6.5時(shí)，發(fā)酵15h時(shí)葡萄糖基本消耗完畢；當(dāng)發(fā)酵液的PH值為6.0和7.0時(shí)，發(fā)酵17h時(shí)葡萄糖基本消耗完畢；發(fā)酵液的pH值為5.0和5.5時(shí)，在20h發(fā)酵結(jié)束時(shí)殘?zhí)菨舛纫琅f很高。在20h發(fā)酵結(jié)束時(shí)，五種不同pH值條件下(5.0, 5.5，6.0,6.5,7.0),發(fā)酵液中 D-乳酸的產(chǎn)量分別為:15.27g/L、22.54g/L、39.97g/L、48.21g/L和46.68g/L。依據(jù)發(fā)酵時(shí)間短，糖酸轉(zhuǎn)化率高和D-乳酸產(chǎn)量高，確定發(fā)酵培養(yǎng)過程中的最適pH值為6.5。表I生產(chǎn)D-乳酸的最適pH的確定結(jié)果(42°C發(fā)酵20h)
權(quán)利要求
1.氫氧化鈉在作為中和劑發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸中的應(yīng)用。
2.一種發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法,包括如下步驟:將芽孢乳桿菌(Sporolactobacillussp.)接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，并在所述發(fā)酵培養(yǎng)過程中以氫氧化鈉作為中和劑控制發(fā)酵液的PH，得到D-乳酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于:在所述發(fā)酵培養(yǎng)過程中，用所述氫氧化鈉控制所述發(fā)酵液的PH恒定為5.0-7.0。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)基的碳源為葡萄糖；所述葡萄糖在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度為50-60g/L ;或 所述發(fā)酵培養(yǎng)基的氮源為花生柏；所述花生柏在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度為30-50g/L ;或 所述發(fā)酵培養(yǎng)基還含有中性蛋白酶；所述中性蛋白酶在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度為 1.5X104U/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求2-4中任一所述的方法，其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)的溫度為40-45 0C ;或 所述發(fā)酵培養(yǎng)的時(shí)間為15-50h。
6.根據(jù)權(quán)利要求2-5中任一所述的方法,其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)的培養(yǎng)方式為震蕩培養(yǎng)；所述震蕩培養(yǎng)的轉(zhuǎn)速為50rpm。
7.根據(jù)權(quán)利要求2-6中任一所述的方法，其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)過程中，向所述發(fā)酵液中補(bǔ)加葡萄糖； 所述補(bǔ)加葡萄糖的時(shí)間為所述發(fā)酵液中葡萄糖的含量開始低于20g/L時(shí)； 所述補(bǔ)加葡萄糖的量為補(bǔ)加至所述發(fā)酵液中葡萄糖的含量達(dá)到50g/L。
8.根據(jù)權(quán)利要求2-7中任一所述的方法，其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)的前12h進(jìn)行通氣，通氣量為0.5 (V / V.min)。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于:所述芽孢乳桿菌(Sporolactobacillussp.)為菊糖芽抱乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于:所述菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)為菊糖芽抱乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)CASDCGMCC N0.2185。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法。本發(fā)明所提供的發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法，包括如下步驟將芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus sp.)接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，并在所述發(fā)酵培養(yǎng)過程中以氫氧化鈉作為中和劑控制發(fā)酵液的pH，得到D-乳酸；所述芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus sp.)具體為為菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)。本發(fā)明所提供的發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法中，菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)CASD CGMCC No.2185以氫氧化鈉作為中和劑，大大的降低了原料成本，降低環(huán)境污染，并高效發(fā)酵產(chǎn)生旋光性99.3%聚合級(jí)的D-乳酸，具有很好的工業(yè)應(yīng)用型前景。
文檔編號(hào)C12R1/01GK103173501SQ20131008976
公開日2013年6月26日 申請(qǐng)日期2013年3月20日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月20日
發(fā)明者李媛, 王麗敏, 于波, 馬延和 申請(qǐng)人:中國科學(xué)院微生物研究所