一種奴卡氏菌培養基的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種奴卡氏菌培養基。其特征在于，配制1000ml培養基的配方中含有：可溶性淀粉2～4g；牛肝粉10～20g；苯唑青霉素0.005～0.02g；多枯菌素3～5萬單位；蒜硫胺素0.1～0.4g；肌醇0.01～0.2g；硫酸鎂0.8～1.1g；瓊脂15～20g；蒸餾水加至1000ml。本發明與現有技術相比較，具有檢出可靠、奴卡氏菌分離率高的特點。
【專利說明】一種奴卡氏菌培養基
【技術領域】
[0001]本發明涉及檢驗微生物培養領域，具體涉及一種適用于奴卡氏菌的培養基。
【背景技術】
[0002]奴卡氏菌屬已有的種近30個，與醫學有關的種也近10個，屬于放線菌屬，為需氧菌，存在于土壤，可引起人的奴卡菌病。帶菌的灰塵、土壤或食物通過呼吸道、皮膚創口或消化道進入人體，然后局限于某一器官或組織，或經血循環散播至腦、腎或其他器官。由于該菌不很常見，而且生長較慢，使用傳統方法需要幾周方能較準確地做出鑒定，因而臨床上又很容易誤診。常用一般抗生素進行治療，結果延誤時間，造成多處病灶轉移，如轉移至腦部極易造成死亡。故臨床細菌檢查的正確與快速鑒定極為重要。目前臨床培養多使用血瓊脂平板，在37°C需氧培養下多數于3~7d才能生長為肉眼可見的針尖大的菌落，做生化反應進行鑒定則需培養4~6周。而且如果是痰標本，則很有可能會被痰標本中的正常菌群所掩蓋而產生誤診。
【發明內容】
[0003]本發明的技術任務是針對以上現有技術的不足，提供一種加速奴卡氏菌生長且分
離率高的培養基。
[0004]本發明解決其技術問題的技術方案是:一種奴卡氏菌培養基，其特征在，配制1000ml培養基 的配方中含有:
[0005]可溶性淀粉2~4g ;
[0006]牛肝粉10~20g ；
[0007]苯唑青霉素0.005~0.02g ；
[0008]多枯菌素3~5萬單位；
[0009]蒜硫胺素0.1~0.4g ;
[0010]肌醇0.01 ~0.2g;
[0011]硫酸鎂0.8 ~1.1g;
[0012]瓊脂15 ~20g;
[0013]蒸餾水加至1000ml。
[0014]優化方案中，每1000ml培養基還含有胸腺嘧啶核苷0.05~0.5g。
[0015]優化方案中，每1000ml培養基還含有丙酮酸鈣0.01~0.lg。
[0016]優化方案中，每1000ml培養基還含有檸檬酸鋅0.01~0.lg。
[0017]優化方案中，上述的可溶性淀粉為薯蕷淀粉。
[0018]其中所述的可溶性淀粉、牛肝粉提供碳氮源和能量；苯唑青霉素、多枯菌素抑制雜菌生長，提高了奴卡氏菌的分離率；肌醇為營養增強劑，蒜硫胺素為激活劑，可以促進肌醇攝取；硫酸鎂為緩沖劑，且可以破壞標本中殘留的抗真菌菌素；瓊脂是培養基的凝固劑；胸腺嘧啶核苷為營養增強劑，丙酮酸鈣和檸檬酸鋅除有營養增強作用外，還可以抑制革蘭氏陽性菌生長。
[0019]本發明與現有技術相比較，具有檢出可靠、奴卡氏菌分離率高的特點。
【具體實施方式】
[0020]以下結合實際情況，對本發明的【具體實施方式】作詳細說明。
[0021]實施例1，配制1000ml培養基的配方中含有:玉米淀粉2g ;牛肝粉20g ;硫酸鎂
0.8g ;瓊脂15g ;苯唑青霉素0.02g ;多枯菌素5萬單位；蒜硫胺素0.1g,肌醇0.2g ;蒸懼水加至 1000mlo
[0022]實施例2，配制1000ml培養基的配方中含有:豌豆淀粉4g ;牛肝粉IOg ;硫酸鎂
1.1g ;瓊脂20g ;苯唑青霉素0.005g ;多枯菌素3萬單位；蒜硫胺素0.4g，肌醇0.01g ;蒸餾水加至1000ml0
[0023]實施例3，配制1000ml培養基的配方中含有:土豆淀粉2g ;牛肝粉20g ;硫酸鎂
0.Sg ;瓊脂15g ;苯唑青霉素0.02g ;多枯菌素5萬單位；蒜硫胺素0.lg，肌醇0.2g，胸腺嘧啶核苷0.05g ;蒸餾水加至1000ml。
[0024]實施例4，配制1000ml培養基的配方中含有:薯蕷淀粉4g ;牛肝粉IOg ;硫酸鎂
1.1g ;瓊脂20g ;苯唑青 霉素0.005g ;多枯菌素3萬單位；蒜硫胺素0.4g,肌醇0.01g,胸腺嘧啶核苷0.5g ;蒸餾水加至1000ml。
[0025]實施例5，配制1000ml培養基的配方中含有:土豆淀粉3g ;牛肝粉15g ;硫酸鎂Ig ；瓊脂18g ;苯唑青霉素0.01g ;多枯菌素4萬單位；蒜硫胺素0.2g，肌醇0.1g,胸腺嘧啶核苷
0.1g ;蒸餾水加至1000ml。
[0026]實施例6，配制1000ml培養基的配方中含有:土豆淀粉2g ;牛肝粉20g ;硫酸鎂
0.8g ;瓊脂15g ;苯唑青霉素0.02g ;多枯菌素5萬單位；蒜硫胺素0.1g,肌醇0.01g,胸腺嘧啶核苷0.05g，丙酮酸鈣0.lg，檸檬酸鋅0.1g;蒸餾水加至1000ml。
[0027]實施例7，配制1000ml培養基的配方中含有:薯蕷淀粉4g ;牛肝粉IOg ;硫酸鎂
1.1g ;瓊脂20g ;苯唑青霉素0.005g ;多枯菌素3萬單位；蒜硫胺素0.4g，肌醇0.2g，胸腺嘧啶核苷0.5g，丙酮酸鈣0.01g，檸檬酸鋅0.01g ;蒸餾水加至1000ml。
[0028]實施例8，配制1000ml培養基的配方中含有:薯蕷淀粉3g ;牛肝粉15g ;硫酸鎂Ig ；瓊脂18g ;苯唑青霉素0.01g ;多枯菌素4萬單位；蒜硫胺素0.3g，肌醇0.1g,胸腺嘧啶核苷0.2g,丙酮酸鈣0.05g,檸檬酸鋅0.05g ;蒸懼水加至1000ml。
[0029]實施例1~8培養基的制備方法可以為:取除多枯菌素、苯唑青霉素外的原料溶于蒸懼水中，混勻，蒸懼水定容至1000ml, 121°C, 15min滅菌后，降溫到50~60°C,無菌操作下加入多枯菌素、苯唑青霉素溶解混勻，分裝。
[0030]本發明所得奴卡氏菌培養基具有奴卡氏菌生長快，分離率高的特點，為臨床資料充分證明:20株奴卡氏菌菌株(其中:星形奴卡氏菌8株、巴西氏奴卡氏菌8株及豚鼠奴卡氏菌4株)制成生理鹽水菌懸液，以McFarland 0.5標準比濁管調整菌懸液濁度，用鹽水連續10倍稀釋，分別取0.1rnl接種于實施例8方案培養基、實施例5方案培養基、實施例2方案培養基、血瓊脂平板上。36~37°C保溫，48小時時各組檢出陽性菌株(中央內凹，表面有皺褶，顆粒狀橙黃色，菌落表面有白色菌絲生長)例數為:實施例8方案培養基15例、實施例5方案培養基12例、實施例2方案培養基8例、血瓊脂平板6例。96小時時各組檢出菌例數為:實施例8方案培養基20例、實施例5方案培養基20例、實施例2方案培養基18
例、血瓊脂平板14例。結果表明，本發明實施例奴卡氏菌分離率明顯高目前常用于的血瓊
脂平 板。
【權利要求】
1.一種奴卡氏菌培養基，其特征在于，配制1000ml培養基的配方中含有: 可溶性淀粉2~4g ; 牛肝粉10~20g ； 蒜硫胺素0.1~0.4g ; 肌醇0.01~0.2g ; 硫酸鎂0.8~1.1g ; 瓊脂15~20g ; 蒸餾水加至1000ml。
2.根據權利要求1所述的一種奴卡氏菌培養基，其特征在于每1000ml培養基還含有胸腺嘧啶核苷0.05~0.5g。`
【文檔編號】C12Q1/04GK103789394SQ201210595203
【公開日】2014年5月14日 申請日期:2012年12月24日 優先權日:2012年12月24日
【發明者】郭三保 申請人:郭三保