一種酶的提取方法
【專利摘要】本發明涉及一種酶的提取方法，具體涉及一種超氧化物歧化酶的提取方法。
【專利說明】一種酶的提取方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種酶的提取方法，具體涉及一種超氧化物歧化酶的提取方法。
【背景技術】
[0002]超氧化物歧化酶屬于氧化還原類酶，是一種能夠清除機體中過多自由基的活性物質，該物質與機體的衰老、腫瘤發生、自身免疫性疾病和輻射防護等密切有關，對治療類風濕性關節炎、膀胱炎、紅斑狼瘡等疾病療效較好。此酶無抗原性，不良反應小，副作用小，是一種醫療價值很高、具有廣闊前途的藥用酶。超氧化物歧化酶按金屬輔基成分的不同分為三種，第一種是含有銅鋅金屬輔基的酶，呈綠色，存在于機體細胞漿中；第二種是是含有錳金屬輔基的酶，呈紫色，存在于真核細胞的線粒體和原核細胞內；第三種是含有鐵金屬輔基的酶，呈黃褐色，存在于原核細胞中。超氧化物歧化酶的分布極為廣泛，迄今為止已從細菌、藻類、昆蟲和哺乳類動物等各種生物體分離得到。但是，從最早發現超氧化物歧化酶到今天對超氧化物歧化酶的開發應用，超氧化物歧化酶大都是從動物的血液中分離提取。由于分離提取超氧化物歧化酶的動物血液的資源有限，代價也非常昂貴，進而造成原料緊張，成本增加。在分離提取超氧化物歧化酶時，需要多次加入動物血液再多次分離該物質，使得分離提取工藝繁瑣復雜，容易造成化學污染。另外，由于使用的是動物血液，提取超氧化物歧化酶時還存在艾滋病等血液中病毒的交叉感染及其它潛在危險。國際衛生組織曾經呼吁:立刻停止從動物血液中提取的超氧化物歧化酶的使用。
【發明內容】
[0003]發明目的:提供一種超氧化物歧化酶的提取方法，該方法可從植物中提取超氧化物岐化酶。
[0004]技術方案:所述超氧化物歧化酶的提取方法包括以下步驟: 將蘋果粉碎，浸提，離心，超濾，濃縮，離心噴霧干燥得到超氧化物歧化酶。將蘋果粉碎，在55~75°C的純凈水中對蘋果塊進行恒溫浸提7~13h。然后將超氧化物歧化酶粗酶液通過一級濾膜，二級濾膜，三級濾膜，收集三級截留液；對超氧化物歧化酶溶液進行PH調節，使其范圍在3.9^5.1之間；最后將超氧化物歧化酶溶液減壓真空濃縮18~30min，得到超氧化物歧化酶濃縮液。
【具體實施方式】
[0005]其步驟是將蘋果粉碎，浸提，離心，超濾，濃縮，離心噴霧干燥得到超氧化物歧化酶。
[0006]將蘋果粉碎，浸提，離心，超濾，濃縮，離心噴霧干燥得到超氧化物歧化酶。
[0007]將蘋果粉碎，在55~75°C的純凈水中對蘋果塊進行恒溫浸提7~13h。
[0008]將超氧化物歧化酶粗酶液通過一級濾膜，二級濾膜，三級濾膜，收集三級截留液； 對超氧化物歧化酶溶液進行PH 調節，使其范圍在3.9^5.1之間；將超氧化物歧化酶溶液減壓真空濃縮18~30min，得到超氧化物歧化酶濃縮液。
[0009]實施例1
將蘋果粉碎，得到的蘋果塊在水中浸提，得到浸提液，浸提液進行離心分離，取上清液得到粗酶液，粗酶液進行超濾，過濾掉雜質得到超氧化物歧化酶溶液。將超氧化物歧化酶溶液進行濃縮，得到超氧化物歧化酶濃縮液。[0010]將超氧化物歧化酶濃縮液離心噴霧干燥得到超氧化物歧化酶。
【權利要求】
1.一種超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于，包括以下步驟: 將蘋果粉碎，浸提，離心，超濾，濃縮，離心噴霧干燥得到超氧化物歧化酶。
2.如權利要求1所述的超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于，將超氧化物歧化酶濃縮液離心噴霧干燥得到粉末狀固體超氧化物歧化酶。
3.如權利要求1所述的超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于，將蘋果粉碎，在55~75°C的純凈水中對蘋果塊進行恒溫浸提7~13h。
4.如權利要求1所述的超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于，將超氧化物歧化酶粗酶液進行超濾:將超氧化物歧化酶粗酶液通過一級濾膜，二級濾膜，三級濾膜，收集三級截留液； 如權利要求1至4任一項所述的超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于，對超氧化物歧化酶溶液進行PH調節，使其范圍在3.9^5.1之間。
5.如權利要求1至4任一項所述的超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于，在將蘋果粉碎之前，還包括清洗蘋果，且在烘干過程中向蘋果加硫磺。
6.如權利要求1至4任一項所述的超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于，將超氧化物歧化酶 溶液減壓真空濃縮18~30min，得到超氧化物歧化酶濃縮液。
【文檔編號】C12N9/02GK103881987SQ201210565711
【公開日】2014年6月25日 申請日期:2012年12月24日 優先權日:2012年12月24日
【發明者】王英俊, 郝智慧, 劉明強 申請人:青島康地恩藥業股份有限公司