專利名稱：一種改良厭氧雙相血培養瓶的制作方法
技術領域：
本發明屬于體外診斷試劑領域，特別涉及一種改良厭氧雙相血培養瓶。背景技術：
血培養是臨床維生素檢查中最重要的項目之一。臨床幾乎所有的發熱性疾病，如多種細菌性傳染病、肺炎、腦膜炎、泌尿系統感染、以及發熱待查等，均可能因細菌進入血液而引起菌血癥、敗血癥。厭氧雙相血培養瓶主要用于血液中厭氧菌的體外培養。所謂雙相血培養，是指培養瓶中存在雙相培養基，即固相和液相。培養時，先將血液以無菌操作方式注入液相培養基輕輕搖勻并浸潤固相培養基表面，再進行常規培養。此雙相系統形成不同的氧濃度梯度，利于對氧濃度要求不同的厭氧菌的生長。并且固相的存在使分離培養變得簡單，無污染，便于菌落的觀察，以及后續的藥敏試驗及菌種鑒定。為了盡快對病人作針對性抗菌治療，準確、及時的血培養結果就尤為重要。而厭氧雙相血培養基的質量好壞則對血培養的厭氧菌的陽性檢出率的高低和檢出時間起著決定性的作用。然而目前市場上常用的厭氧雙相血培養瓶的質量卻參差不齊，不容樂觀。由于厭氧菌對環境條件的要求非常苛刻，只能在低氧分壓的條件下生長，而不能在空氣(18%氧氣)和(或)10%二氧化碳濃度下的培養基上生長。故現有的厭氧雙相血培養瓶大都不能很好地培養厭氧菌。質量低劣的培養基不僅容易漏檢，降低厭氧菌的陽性檢出率，而且有可能因為呈“假陰性”而造成誤診，這樣不僅會延長患者的治療時間、增加醫療費用，有時甚至會失去寶貴的治愈機會。
發明內容
本發明為了彌補現有技術的不足，提供了一種配方齊全、適合厭氧菌生長的改良厭氧雙相血培養瓶。本發明是通過如下技術方案實現的
一種改良厭氧雙相血培養瓶，包括由CDC厭氧瓊脂構成的固相和由含抗凝劑的厭氧肉湯組成的液相，所述固相和液相分別由以下重量份數的原料配制而成
(1)固相中，⑶C厭氧肉湯350 400份、瓊脂粉200 300份、酵母浸粉45 55份、核酸15 25份、谷氨酸鈉5 15份、維生素CO. 003^0. 005份，其余為去離子水，共計10000份；
(2)液相中，⑶C厭氧肉湯35(Γ400份、酵母浸粉45 55份、聚茴香腦磺酸鈉2 3份、輔酶10. 05 O. 15份、維生素仏0. 5 I. 5份、維生素K3O. 001 O. 003份、維生素B12O. 0005 O. 0007份、L-谷氨酰胺f 3份、L-胱氨酸O. 2^0. 3份、L-半胱氨酸鹽酸鹽5飛份、精氨酸5飛份、腺嘌呤硫酸鹽O. Γ0. 3份、鳥嘌呤鹽酸鹽O. 005^0. 007份、維生素CO. 003^0. 005份、異維生素CO. ΟΟΓΟ. 005份，其余為去離子水，共計10000份。其優選的固相和液相中，各原料的重量配比為
(1)固相中，CDC厭氧肉湯385份、瓊脂粉230份、酵母浸粉50份、核酸20份、谷氨酸鈉10份、維生素CO. 004份，其余為去離子水，共計10000份；
(2)液相中，⑶C厭氧肉湯385份、酵母浸粉50份、聚茴香腦磺酸鈉2.5份、輔酶10. 10份、維生素B6L O份、維生素K3O. 002份、維生素B12O. 0006份、L-谷氨酰胺2份、L-胱氨酸O. 22份、L-半胱氨酸鹽酸鹽5. 18份、精氨酸5. 5份、腺嘌呤硫酸鹽O. 2份、鳥嘌呤鹽酸鹽
O.006份、維生素CO. 004份、異維生素CO. 0045份，其余為去離子水，共計10000份。本發明的改良厭氧雙相血培養瓶中添加有除氧劑維生素C和異維生素C，適宜的環境條件更能促進血中厭氧細菌的快速繁殖。本發明的原料成分齊全，營養豐富，十分適宜厭氧菌的生長。固相中除了有⑶C厭氧肉湯、酵母浸粉等營養成分和瓊脂粉等凝固物質外，更是添加了核酸和谷氨酸鈉作為細菌生長刺激劑，以及維生素C這種除氧劑。實驗結果表明更能有效的加速厭氧菌的生長，這樣的一種配方組合，能夠大大縮短厭氧陽性菌的發現時間，特別是一些具有傳染性的厭氧病原菌，縮短檢出時間，更有利于醫院及時確定作消毒隔離或轉院處理，避免造成更嚴重的醫院感染。液相中除了加入了 CDC厭氧肉湯、酵母浸粉等基礎營養物質以外，更是添加了各種必需營養素如L-谷氨酰胺、精氨酸、L-胱氨酸、L-半胱氨酸鹽酸鹽等完整的氨基酸系列；維生素B6、維生素K3、維生素B12等復合維生素；最適濃度的抗凝劑SPS，可有效中和溶菌酶、抑制吞噬細胞以及使某些氨基糖苷類抗生素失活，使細菌更好地生長；更是比常規血培養基多加了很多獨特的生長因子輔酶I、腺嘌呤硫酸鹽、鳥嘌呤鹽酸鹽等，能為厭氧菌的生長提供豐富的營養。本發明中合理的配方比例和完善的營養成分以及更適宜厭氧菌生長的環境條件更有利于各種厭氧菌的生長。并能大大提高陽性檢出率和檢出時間，培養結果準確及時，對于臨床診斷和治療具有極其重要的意義。
具體實施方式
實施例I:
一種改良厭氧雙相血培養瓶，包括由CDC厭氧瓊脂構成的固相和由含抗凝劑的厭氧肉湯組成的液相，所述固相和液相分別由以下重量份數的原料配制而成
(1)固相中，CDC厭氧肉湯350g、瓊脂粉200g、酵母浸粉45g、核酸15g、谷氨酸鈉5g、維生素CO. 003g,其余為去離子水,共計IOkg ；
(2)液相中，⑶C厭氧肉湯350g、酵母浸粉45g、聚茴香腦磺酸鈉2g、輔酶10.05g、維生素B6O. 5g、維生素K3O. OOlg、維生素B12O. 0005g、L-谷氨酰胺lg、L_胱氨酸O. 2g、L_半胱氨酸鹽酸鹽5g、精氨酸5g、腺嘌呤硫酸鹽O. lg、鳥嘌呤鹽酸鹽O. 005g、維生素CO. 003g、異維生素CO. 004g,其余為去離子水,共計10kg。實施例2:
一種改良厭氧雙相血培養瓶，包括由CDC厭氧瓊脂構成的固相和由含抗凝劑的厭氧肉湯組成的液相，所述固相和液相分別由以下重量份數的原料配制而成
(1)固相中，CDC厭氧肉湯400g、瓊脂粉300g、酵母浸粉55g、核酸25g、谷氨酸鈉15g、維生素CO. 005g,其余為去離子水,共計IOkg ；
(2)液相中，⑶C厭氧肉湯400g、酵母浸粉55g、聚茴香腦磺酸鈉3g、輔酶10.15g、維生素B6L 5g、維生素K3O. 003g、維生素B12O. 0007g、L_谷氨酰胺3g、L_胱氨酸O. 3g、L_半胱氨酸鹽酸鹽6g、精氨酸6g、腺嘌呤硫酸鹽O. 3g、鳥嘌呤鹽酸鹽O. 007g、維生素CO. 005g、異維生素CO. 005g,其余為去離子水,共計10kg。
實施例3
一種改良厭氧雙相血培養瓶，包括由CDC厭氧瓊脂構成的固相和由含抗凝劑的厭氧肉湯組成的液相，所述固相和液相分別由以下重量份數的原料配制而成
(1)固相中，CDC厭氧肉湯385g、瓊脂粉230g、酵母浸粉50g、核酸20g、谷氨酸鈉10g、維生素CO. 004g，其余為去離子水，共計IOkg ；
(2)液相中，⑶C厭氧肉湯385g、酵母浸粉50g、聚茴香腦磺酸鈉2.5g、輔酶10. 10g、維生素B6L 0g、維生素K3O. 002g、維生素B12O. 0006g、L_谷氨酰胺2g、L_胱氨酸O. 22g、L_半胱氨酸鹽酸鹽5. 18g、精氨酸5. 5g、腺嘌呤硫酸鹽O. 2g、鳥嘌呤鹽酸鹽O. 006g、維生素CO. 004g、異維生素CO. 0045g,其余為去離子水,共計10kg。
權利要求
1.一種改良厭氧雙相血培養瓶，包括由CDC厭氧瓊脂構成的固相和由含抗凝劑的厭氧肉湯組成的液相，其特征為，所述固相和液相分別由以下重量份數的原料配制而成(1)固相中，CDC厭氧肉湯350 400份、瓊脂粉200 300份、酵母浸粉45 55份、核酸15 25份、谷氨酸鈉5 15份、維生素CO. 003、. 005份，其余為去離子水，共計10000份；(2)液相中，⑶C厭氧肉湯35(Γ400份、酵母浸粉45 55份、聚茴香腦磺酸鈉2 3份、輔酶10. 05、. 15份、維生素B6O. 5 I. 5份、維生素K3O. 001 O. 003份、維生素B12O. 0005 O. 0007份、L-谷氨酰胺I 3份、L-胱氨酸O. 2、. 3份、L-半胱氨酸鹽酸鹽5飛份、精氨酸5飛份、腺嘌呤硫酸鹽O. Γθ. 3份、鳥嘌呤鹽酸鹽O. 005^0. 007份、維生素CO. 003^0. 005份、異維生素CO. ΟΟΓΟ. 005份，其余為去離子水，共計10000份。
2.根據權利要求I所述的改良厭氧雙相血培養瓶，其特征為，所述固相和液相分別由以下重量份數的原料配制而成(I)固相中，CDC厭氧肉湯385份、瓊脂粉230份、酵母浸粉50份、核酸20份、谷氨酸鈉10份、維生素CO. 004份，其余為去離子水，共計10000份；(2)液相中，⑶C厭氧肉湯385份、酵母浸粉50份、聚茴香腦磺酸鈉2. 5份、輔酶10. 10份、維生素B6L O份、維生素K3O. 002份、維生素B12O. 0006份、L-谷氨酰胺2份、L-胱氨酸O. 22份、L-半胱氨酸鹽酸鹽5. 18份、精氨酸5. 5份、腺嘌呤硫酸鹽O. 2份、鳥嘌呤鹽酸鹽O. 006份、維生素CO. 004份、異維生素CO. 0045份，其余為去離子水，共計10000份。
全文摘要
本發明屬于體外診斷試劑領域，特別公開了一種改良厭氧雙相血培養瓶。該改良厭氧雙相血培養瓶，固相由CDC厭氧肉湯、瓊脂粉、酵母浸粉、核酸、谷氨酸鈉、維生素C按一定重量配比，添加去離子水混合配制而成。液相由CDC厭氧肉湯、酵母浸粉、SPS、輔酶I，維生素B6、維生素K3、維生素B12、L-谷氨酰胺、L-胱氨酸、L-半胱氨酸鹽酸鹽、精氨酸、腺嘌呤硫酸鹽、鳥嘌呤鹽酸鹽、維生素C、異維生素C，按一定重量配比，添加去離子水混合配制而成。本發明中合理的配方比例和完善的營養成分以及更適宜厭氧菌生長的環境條件更有利于各種厭氧菌的生長。并能大大提高陽性檢出率和檢出時間，培養結果準確及時，對于臨床診斷和治療具有極其重要的意義。
文檔編號C12M1/24GK102925344SQ20121047610
公開日2013年2月13日 申請日期2012年11月22日 優先權日2012年11月22日
發明者寧春華, 聶暉, 孟俊華, 崔蘭蘭, 霍雨艷, 李福川, 陳玉芹, 譚坤 申請人:濟南百博生物技術有限責任公司