一種鹿角膠的制備方法及其應用的制作方法
【專利摘要】本發明提供了以鹿托盤熬制鹿角膠方法和鹿角膠對肥胖的作用。其特征是以鮮該鹿角膠充分保留了鹿托盤中的營養物質，該鹿角膠加入到藥品食品中能起到抑制胰脂肪酶活性的作用，可用于抗肥胖的藥品中應用。該鹿角膠能夠有效的抑制胰脂肪酶的活性，從而使食物脂肪的吸收受到抑制而達到抗肥胖的作用，適合藥品食品應用。該物質可應用于預防及治療肥胖類疾病。
【專利說明】一種鹿角膠的制備方法及其應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種鹿角膠的制備方法及其在抗肥胖方面的應用。
[0002]肥胖是一種確定為體內脂肪過量的慢性病。對于全世界肥胖癥人口的快速增長，世界衛生組織(WHO)已將肥胖病確定為全球的流行病。在全世界，5億多人的體重超重，SP體重指數(BMI)為30及以上者。目前肥胖病人口的增長在人類歷史上首次超過了患營養不良和傳染病的人數。在我國的發病率為10% — 20%，在經濟發達國家發病率高達20% —30%或更高。在歐洲某些地區，年齡在55 — 64歲的人群中，約70%的女性和超過70%的男性為肥胖病人或體重過重者。
[0003]隨著社會生產力的進步和發展，物質越來越豐富，人們日常生活水平得到改善，尤其是在飲食方面[I]。居民膳食結構和生活習慣發生了很大的變化，隨之而來的是糖尿病、高血壓、血脂異常等慢性疾病的發病率急劇增加[2]。肥胖作為一種疾病，同時也是許多慢性疾病的重要危險因素，比如，II型糖尿病、心血管病、骨關節病、高血壓、免疫功能受損等[3-5]。隨著體重的增加，患病的概率也在上升。世界衛生組織已宣布肥胖是最大的全球成年人慢性疾病。肥胖的發生率在發達國家中明顯地增長。而在不發達國家中目前增長的比率也很高，美國肥胖的流行比例最高，有35%的人口確定為肥胖。至少有9700萬美國人，為超重或肥胖，從I960年以來這個數字在持續增長，趨勢不會減慢。在歐洲，英國是肥胖增長率最高的國家之一，為18%。緊接著是法國和德國，在全世界總共有2.5億以上的人口遭受肥胖。而且，肥胖與死亡率和發病率有關，僅在美國每年它就能夠引起300，000多人死亡。超重的人不僅在生理上而且在心理上都會受到不利影響，所以隨著肥胖患者的增加，肥胖已日益受到人們的重視[6]。
[0004]市場上銷售的減肥藥種類繁多，最著名的是Servier公司的左旋酚氟拉明，1996年上市后引起媒體的關組并帶來巨大銷售額，后因報告有嚴重的副作用(心臟閥門問題和初期的肺部高血壓)，該藥在1997年9月被撤銷。1997年，美國食品藥品監督管理局批準鹽酸西布曲明上市，該藥可通過其次級(Ml)和初級(M2)胺類代謝產物抑制去甲腎上腺素、多巴胺和5-羥色胺的再攝取，增加飽食感。2001年在我國進行的西步曲明上市前臨床驗證結果顯示:經過24周的治療，患者體重可降低(6.52±3.95 ) kg,并能夠顯著降低空腹和餐后Ih血糖。但大量臨床研究發現，服用此類藥物較易出現頭痛、頭暈、口干、口苦、便秘和失眠等不良反應，特別是關于西布曲明對心血管事件的影響一直存有爭議。2010 年，SCOUTs ( Sibutramine Cardiovascular Outcomes Trial)公布了其研究結果，這是納入患者最多、研究時間最長的有關西步曲明心血管安全性的隨機雙盲安慰劑對照研究，近10000例患者納入本研究，平均隨訪3-4年，它評價了已經存在心血管高危因素的肥胖癥患者使用西步曲明減重對心血管問題的影響。結果發現，與安慰劑組相比，西步曲明組患者主要終點事件停復蘇等)的風險增加了 16%，并由此推斷體重下降并未降低心血管疾病的風險。鑒于此結果，西步曲明被宣布撤市，我國食品藥品監督管理局也在2010年底宣布停止西步曲明的生產和臨床使用[7]。
[0005]立莫納班是第1個選擇性大麻素受體I阻斷劑，能夠通過抑制食欲并增加外周脂肪組織脂聯素mRNA的表達來改善肥胖相關的胰島素抵抗等，被認為是具有良好臨床應用前景的減重藥物，但由于其中樞神經系統的不良反應，如抑郁和自殺傾向等，始終未能在美國和中國獲準入市，僅從2006年起在56個歐洲等國家上市，并于2009年撤市。
[0006]由于這些藥品有著的嚴重副作用，包括涉及到主動脈閥門泄漏和二尖瓣閥門泄漏的心臟閥門損壞。其它更嚴重的副作用包括呼吸短促，頭暈眼花和死亡，這些副作用的嚴重性，已促使在2000年歐洲委員會決定從2001年4月開始在歐盟禁止銷售食欲抑制劑藥物。這已明顯地減少了世界范圍對抗肥胖藥物的接受。
[0007]新的觀點認為，肥胖是一種有著復雜病理生理原因并需要長期用藥才能適當控制的慢性疾病，這樣就為新藥帶來安全性問題。關于目前減肥藥不對癥的問題，有關專家認為主要是這些藥無助于多數病人長期減肥，而且僅有少數病人從其原來的體重減了 5% —10%。毫不奇怪，肥胖藥的研究與開發愈來愈強大，目前在開發中的抗肥胖制劑就有200多種，但多數都處在早期階段。所以，開發出一種安全和真正有效的減肥藥將會得到巨大的回報。根據抗肥胖藥研究專家的觀點，從減肥藥市場的發展來看，減肥藥有著較大的發展空間，并且需要多種減肥藥。
[0008]由于減肥藥物越來越多的出現毒副作用的問題，人們也在尋找能代替藥物的天然健康的產品，所以市面出現的一些減肥茶等產品，但此類產品減肥的效果不是很理想。人們對減肥產品的需求迫切，本研究旨在應用天然藥物生產無毒副作用的減肥產品，達到讓人們輕松減肥，健康瘦身的目的。
[0009]鹿角為鹿科動物馬鹿或梅花鹿已骨化的角或鋸茸后翌年春季脫落的角基，分別習稱馬鹿角、梅花鹿角、鹿角脫盤。歸肝腎經；溫腎陽，強筋骨，行血消腫；用于陽痿遺精，腰脊冷痛，陰疽瘡瘍，乳癰初起，淤血腫痛[8]。現代研究證明，鹿角中膠質25%，磷酸鈣50%-60%，碳酸鈣及氮化物。另含氨基酸等營養成分。鹿角膠始載于《神農本草經》，名為“白膠”，列為上品[8]。鹿角膠的應用有2000多年的歷史，其主要氨基酸應為L -羥脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸和L -脯氨酸，其中羥脯氨酸為膠原蛋白主要組成成分[9、10]。中醫用之補益氣血、滋腎生精；主治腎氣不足、陽痿羸瘦、精血虛虧、神倦目昏、腰膝無力、婦女血閉不妊、子宮虛冷、崩漏帶下等癥[11]。
[0010]鹿角膠的現代研究應用
現代研究證明，鹿角膠為鹿角加水煎熬濃縮而成的固體膠，呈黃棕色，上部有黃白色泡沫層，質脆，易碎，斷面光亮。其性溫，味微甜，有補腎陽、生精血、托瘡生肌的作用，適合腎陽不足、畏寒肢冷、陽痿早泄、腰酸腿軟者服用，也可用于咯血、尿血、月經過多、偏于虛寒，以及陰疽內陷等病證[15]。
[0011]近年來，鹿角膠由于具有溫補肝腎、益精養血的功效，被廣泛應用于各類藥品中，有文獻報道，鹿角膠鈣顆粒劑，以鹿角粉制成顆粒劑，具有補鈣，溫腎陽，強筋骨等功效[16]。采用白茅根、鹿角膠為基本方加味治療，在臨床上觀察研究，證明取得了一定的療效[17]，鹿角膠在婦科臨床上也有一定的應用，。適用于腎陽不足，精血虧虛，虛勞羸瘦，吐血尿血之偏于虛寒者，以及陰疽內陷等癥，婦人血閉無子，胎動不安，崩中不止。陰虛火旺忌用。[18]鹿角膠是一味兼具滋陰補陽功效的中藥，滋而不膩，溫而不燥，故亦常在調補氣血陰陽，止血熄風中配伍應用，優于在滋陰中加入附、桂等溫燥藥。[19]臨床應用鹿角膠治療血小板減少癥、白細胞減少癥、再生障礙性貧血等，能使血象及臨床癥狀獲得不同程度的好轉，治療體質虛弱、畏寒肢冷及慢性循環障礙，可使血壓上升，體力恢復。
[0012]近年來，鹿角膠配伍小柴胡湯，辨證治療艾滋病以低熱不退、畏寒肢冷為主證者，可明顯改善臨床癥狀，對控制艾滋病發展有一定的療效。
[0013]鹿角膠為助陽之品，雖有甘溫之潤之特點，但久用或應用不應當常會導致陽升風動，易傷陰動血，故陰虛陽亢、血分有熱及胃火熾盛、外感熱病均應忌用，且多以開火或黃酒溶代或入丸散、膏劑[20]。
[0014]鹿角膠的藥理研究:性激素樣作用:鹿角膠給大鼠灌胃，可顯著縮短電刺激誘發陰莖勃起的潛伏期限，對雄性大鼠精液囊和前列腺有明顯的增重作用，并對雄鼠交配能力有增強趨勢。[21]
鹿角膠的補血功效:鹿角膠給貧血小鼠灌胃，可明顯增加血紅蛋白含量，對紅細胞、白細胞、血球壓積有不同程度的提高趨勢。[22]
鹿角膠的抗疲勞，增強機體免疫能力:鹿角膠可顯著提高鼠持續游時間，有明顯抗疲勞作用。
[0015]有實驗證實鹿角膠溶液能夠降低胃黏膜損傷程度，減少潰瘍，實驗通過肉眼觀察，并測量損傷指 數，可見鹿角膠組大鼠胃黏膜充血、水腫、壞死、糜爛程度明顯減輕，與無水乙醇組差異有顯著性(P〈0.01)，與氫氧化鋁組無明顯差異(P>0.05)。實驗提示鹿角
膠溶液對強烈的胃黏膜損傷劑-無水乙醇造成的大白鼠胃黏膜損傷，能夠降低胃黏膜
損傷指數，增強胃黏膜屏障，具有顯著的保護作用[23]。
[0016]鹿角膠是臨床常用的補益之品，具有補腎陽、益精血之功效，廣泛用于腎虛及氣血虛寒證。臨床配伍得當，可起沉疴于指間。現代實驗研究為臨床應用提供了新的依據。
[0017]近年來治療肥胖的各種新方法中有許多是通過抑制胰脂肪酶的活性從而抑制膳食中甘油三酯的吸收。主要原因在于膳食中的甘油三酯大多只有經過食道中脂肪酶作用，降解為甘油二酯、單甘油酯、甘油和脂肪酸后才被人體吸收，而在這些脂肪酶中，胰脂肪酶負責50 %~70 %膳食脂肪類物質的分解和消化。因此有效抑制胰脂肪酶活性，就可達到減少脂肪吸收、控制和治療肥胖之目的[24]。
[0018]胰脂肪酶是人類消化脂肪的主要酶。胰脂肪酶由胰腺所分泌，至少有三種形式。①甘油一酯水解酶，在膽鹽和表面活化劑的作用下，能水解在水油界面上的多種不溶性的甘油酯；②膽固醇酯酶，能水解二級醇和膽固醇酯；③脂肪酶，可水解水溶性酯類。它是胃腸道內主要的脂肪分解酶。由胰腺腺泡細胞分泌。在有膽鹽存在時活性增加，分解脂肪為甘油和脂肪酸。最適pH為7~9。應用胰脂肪酶抑制劑可有效抑制胰脂肪酶對脂肪的分解催化作用，達到減少脂肪吸收、控制和治療肥胖的目的。同單一地調整飲食結構減肥相t匕，脂肪酶抑制劑除了可減輕體重，還對一些肥胖并發癥如高血壓、高膽固醇和糖尿病有明顯的改善作用[25]。
[0019]鹿角膠的抗肥胖作用尚未見有文獻報告，本專利為鹿角膠的抗肥胖作用提供了依據。
【發明內容】
[0020]本發明提供了一種具有抗肥胖作用的鹿角膠的制備方法。該種鹿角膠具有顯著的抑制胰脂肪酶的作用。它具有能夠抑制體重增加，起到預防和治療肥胖疾病的作用。
[0021 ] 本發明提供了一種鹿角膠的制備方法，適用于工業化生產。
[0022]本發明公開了鹿角膠在抗肥胖藥品食品中的應用。
[0023]本發明可以用在抗肥胖類藥品食品可接受的載體中。
[0024]本發明的鹿角膠具有抗肥胖作用，鹿角膠能夠有效的抑制胰脂肪酶的活性，從而使食物脂肪的吸收受到抑制而達到抗肥胖的作用。本發明所提供的鹿角膠可以在抗肥胖藥品食品中應用。
[0025]本發明提供了鹿角膠的制備方法，其特征在于:
選取1000g鹿托盤樣品(未粉碎)，加入3倍蒸餾水，放入高壓鍋中進行提取，每次30min，一天提取8次，提取3天，直至水變清為止。過濾，合并濾液。將濾液濃縮至30(T500ml，放涼，將膠切成Icm3的小塊，放入凍干機中凍干3天，即得鹿角膠。
[0026]本發明鹿角膠的抗肥胖作用，其特征在于:
該鹿角膠充分保留 了鹿托盤中的營養物質，該鹿角膠加入到藥品食品中能起到抑制胰脂肪酶活性的作用，可用于抗肥胖的藥品中應用。該鹿角膠能夠有效的抑制胰脂肪酶的活性，從而使食物脂肪的吸收受到抑制而達到抗肥胖的作用，適合藥品食品應用。
[0027]本發明的積極效果在于:
應用鹿托盤熬制成的鹿角膠，使得鹿角膠中含有鹿托盤的有效成分。該鹿角膠具有抗肥胖的作用，可以在藥品食品的制備中起到抗肥胖的作用。該鹿角膠有能夠有效的抑制胰脂肪酶的活性的作用，應用在藥品食品中具有使食物脂肪的吸收受到抑制而達到抗肥胖的作用。
[0028]實驗例一鹿角膠的制備方法
選取1000g鹿托盤樣品(未粉碎)，加入3倍蒸餾水，放入高壓鍋中進行提取，每次30min，一天提取8次，提取3天，直至水變清為止。過濾，合并濾液。將濾液濃縮至30(T500ml，放涼，將膠切成Icm3的小塊，放入凍干機中凍干3天，即得鹿角膠。
[0029]
實驗例二鹿角膠對胰脂肪酶的抑制實驗
1、實驗材料
N-三(羥甲基)甲基-2-氨基乙磺酸，氫氧化鈉，氯仿，正庚烷，甲醇，硝酸銅，三乙醇胺，氯化鈉，羥基苯甲醚，浴銅靈，三油酸甘油酯，磷脂酰膽堿，牛黃膽酸鈉，豬胰脂肪酶，
胰脂肪酶抑制率的測定
2、溶液的配制
2.1 TES緩沖鹽的配制
取0.005ml的N-三(羥甲基)甲基-2-氨基乙磺酸(溶于50ml 0.lmol/L)的NaCl溶液中，制成0.lmol/L的TES緩沖鹽，用NaOH調PH值至7.0。
[0030]2.2氯仿正庚烷混合液(溶液二)
分別取氯仿(三氯甲烷)、正庚烷49ml混勻加入2ml甲醇。
[0031]2.3銅試劑的配制(溶劑三)
分別取硝酸銅2.42g,氫氧化鈉0.48g，三乙醇胺2.94ml，加三重水200ml，再加入66g的氯化鈉用磁力攪拌器振搖混勻而成。
[0032]2.4羥基苯甲醚溶液(溶劑四)
取0.05g羥基苯甲醚溶于100ml氯仿混勻，再加0.1g浴銅靈。
[0033]2.5脂肪乳液
取0.087ml三油酸甘油酯，IOmg磷脂酰膽堿，5mg牛黃膽酸鈉溶于9mlTES緩沖鹽，超聲使其溶解
2.6酶液的配制 用三重水配成lmg/ml
2.7樣品用TES緩沖液分別配成濃度為0.5mg/ml, lmg/ml, 2mg/ml.3.實驗過程 空白組
脂肪乳液(0.1ml) +三重水(0.05ml)+TES緩沖液(0.1ml) — 37°C水溶加熱30min —加入溶劑二 3ml —振搖IOmin —離心IOmin (2000*g)—移除上層液一加入溶劑三Iml —振搖IOmin —離心IOmin (2000*g)—吸取上層液一加入溶劑四1.5ml —在480nm處測定吸光度酶組
脂肪乳液(0.1ml) +酶(0.05ml)+TES緩沖液(0.1ml) — 37°C水溶加熱30min —加入溶劑二 3ml —振搖IOmin —離心IOmin (2000*g)—移除上層液一加入溶劑三Iml —振搖IOmin —離心IOmin (2000*g)—吸取上層液一加入溶劑四1.5ml —在480nm處測定吸光度
樣品組
脂肪乳液(0.1ml) +酶(0.05ml) +樣品溶液(0.1ml) — 37°C水溶加熱30min —加入溶劑二 3ml —振搖IOmin —離心IOmin (2000*g)—移除上層液一加入溶劑三Iml —振搖IOmin —離心IOmin (2000*g)—吸取上層液一加入溶劑四1.5ml —在480nm處測定吸光度
4.實驗結果
【權利要求】
1.一種具有抗肥胖作用的鹿角膠的制備方法 具體方法:選取1000g鹿托盤樣品(未粉碎)，加入3倍蒸餾水，放入高壓鍋中進行提取，每次30min，一天提取8次，提取3天，直至水變清為止，過濾，合并濾液，將濾液濃縮至30(T500ml，放涼，將膠切成lcm3的小塊，放入凍干機中凍干3天，即得鹿角膠。
2.根據權利要求1，所得的鹿角膠具有抗肥胖的作用。
3.根據權利要求1，所得的鹿角膠可用于制作預防或治療肥胖的藥物或健康食品。
4.根據權利要求1，所得的鹿角膠可以制成鹿角膏，鹿角膠軟糖，鹿角膠飲料，鹿角膠巧克力等具有抗肥胖作用的健康功能性`食品。
【文檔編號】A23L2/38GK103768098SQ201210408029
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2012年10月23日 優先權日:2012年10月23日
【發明者】鄭毅男, 高暢, 張傳奇, 王全凱 申請人:鄭毅男