專利名稱：一種紅霉素發酵補料用混合糖及應用方法
技術領域：
本發明屬于生物發酵技術領域，特別是涉及一種紅霉素發酵補料用混合糖及其應用方法。
背景技術：
紅霉素發酵是采用一種放線菌(紅色鏈霉菌)作為產生菌，經過復壯、分離、孢子培養制備成斜面孢子備用，然后將斜面孢子接入種子罐進行種子擴大培養，最后接入發酵復 合培養基，通過對培養溫度、PH、基質濃度等參數的控制，使其最大限度的產生紅霉素的過程。紅霉素發酵現行的發酵工藝，發酵過程中補料主要以補加單糖即葡萄糖為主。以葡萄糖為基礎補料存在主要缺陷為(I)葡萄糖液本身的PH (4. 6 5. 2)較低，紅霉素發酵代謝過程中PH更低，容易偏離紅霉素合成的最佳PH值(6. 5 7. 5)。(2)葡萄糖在紅霉素發酵過程中補入，葡萄糖的代謝速度較快，與紅霉素產生菌的生長速率及產物合成速率不匹配，其結果導致葡萄糖中間代謝產物累積過多，從而抑制紅霉素前體物質的合成，減慢了紅霉素產物的合成速率，即降低了紅霉素放罐的發酵單位。
發明內容
本發明的目的就在于克服上述現有技術的缺陷，提供確保一種PH、代謝PH及代謝速率均適合紅霉素產生菌生長及產素能力，促進紅霉素前體物質的合成，加快紅霉素產物的合成速率，提高紅霉素發酵單位的紅霉素發酵補料用的混合糖。本發明的另一目的是提供上述混合糖的應用方法。為實現上述發明目的所采取的技術方案為
一種紅霉素發酵補料用混合糖，其特征是將質量濃度為25 35%淀粉乳用中溫淀粉酶在PH6. O 8. 0，溫度75 80°C條件下水解至葡萄糖值為10 30%，繼續升溫至IOO0C,將中溫淀粉酶滅活，然后降至室溫，后按質量濃度20 30%投入滅菌罐進行滅菌處理，得到PH6. O 8. 0，濃度20 30%的混合糖。上述滅菌溫度控制在118 121°C，壓力O. IMPa，滅菌20 30分鐘。上述混合糖的應用方法，其特征是在紅霉素發酵補料過程中將混合糖以流加方式補入，根據發酵液中的還原糖參數控制補入量。在紅霉素發酵至8 22h補入滅菌后的混合糖。發酵過程還原糖控制在O. 2 3. O %。紅霉素發酵30h至放罐，效價增長速率無明顯減慢。本發明通過將淀粉乳采用淀粉酶處理后變成含有單糖、雙糖和多糖的混合糖，這種混合糖因含有部分淀粉乳，對高溫高壓滅菌的耐受性較單糖好，滅菌過程中不易產生其它副產物。此混合糖的PH為6. O 8. 0，應用到紅霉素發酵補料中，代謝PH為6. 5 7. 5，與紅霉素最佳產素PH相一致。包含單糖、雙糖和多糖的混合糖，在紅霉素發酵過程中代謝的速度與菌絲的生長速度、產素速率一致性較好，因此可促進紅霉素前體物質的合成，加快紅霉素產物的合成速率，提高紅霉素發酵單位，自8 22h補入時有利于菌體的生長產素，發酵單位較正常對比罐平均高出15 20%。
具體實施例方式實施例對比案例
將按20 30%濃度配制好的葡萄糖進行滅菌，滅菌結束后葡萄糖液PH為4. 6 5. 2，質量濃度20 30%。將葡萄糖應用在紅霉素發酵，流加補入，根據還原糖參數控制補入量。在紅霉素發酵至8 22h補入滅菌后的葡萄糖液。發酵過程還原糖控制在O. 2 3. 0%。在30 40h出現粘度高峰，120h后粘度下降，效價增長速率明顯減慢。發酵實驗罐162h放罐，放罐效價6950u/ml。實施例I
將質量濃度為35%的淀粉乳，加入O. 2%的中溫淀粉酶，PH在6. O 8. 0，升溫溫度在75 80°C之間，水解到DE值為20%，升溫至100°C，再降至室溫，PH在6. O 8. O。根據發酵要求配制濃度為30 %的補料糖，并進行滅菌，滅菌溫度控制在118 121 °C，壓力O. IMPa,滅菌20 30分鐘。在紅霉素發酵至22 h采用流加方式補入滅菌后的混合糖，代謝后其過程PH為6. 5 7. 5，過程還原糖控制在O. 2 3. 0%。166h放罐，放罐單位為8100u/ml，比對比實驗提高16. 55%。實施例2
將質量濃度為25%的淀粉乳，加入O. 4%的中溫淀粉酶，PH在6. O 8. O,升溫溫度在75 80°C之間，水解到DE值為20%，升溫至100°C，再降至室溫，PH在6. O 8. O。根據發酵要求配制濃度為20 %的補料糖，并進行滅菌，滅菌溫度控制在118 121 °C，壓力O. IMPa,滅菌20 30分鐘。在紅霉素發酵至19 h采用流加方式補入滅菌后的混合糖，代謝后其過程PH為6. 5 7. 5，過程還原糖控制在O. 2 3. 0%。162h放罐，放罐單位為7850u/ml，比對比實驗提高12. 95%。實施例3
將質量濃度為30%的淀粉乳，加入O. 5%的中溫淀粉酶，PH在6. O 8. 0，升溫溫度在75 80°C之間，水解到DE值為20%，升溫至100°C，再降至室溫，PH在6. O 8. O。根據發酵要求配制濃度為25 %的補料糖，并進行滅菌，滅菌溫度控制在118 121 °C，壓力O. IMPa,滅菌20 30分鐘。在紅霉素發酵至20 h補入滅菌后的混合糖，代謝后其過程PH為6. 5 7. 5，過程還原糖控制在O. 2 3. 0%。172h放罐，放罐單位為8450u/ml，比對比實驗提高21. 58%。
權利要求
1.一種紅霉素發酵補料用混合糖，其特征是將質量濃度為25 35%淀乳粉用中溫淀粉酶在PH6. O 8. O，溫度75 80°C條件下水解至葡萄糖值為10 30%，繼續升溫至100°C，將中溫淀粉酶滅活，然后降至室溫，按質量濃度20 30%投入滅菌罐進行滅菌處理，得到PH6. O 8. 0，濃度20 30%的混合糖。
2.按照權利要求I所述的紅霉素發酵補料用混合糖，其特征是上述滅菌溫度控制在118 121°C，壓力O. IMPa，滅菌2O 3O分鐘。
3.—種如權利要求I所述的混合糖的應用方法，其特征是在紅霉素發酵補料過程中將混合糖以流加方式補入，根據發酵液中的還原糖參數控制補入量。
4.按照權利要求3所述的混合糖的應用方法，其特征是在紅霉素發酵至8 22h補入滅菌后的混合糖。
5.按照權利要求3所述的混合糖的應用方法，其特征是發酵過程還原糖控制在O. 2 3. 0%。
6.按照權利要求3所述的混合糖的應用方法，其特征是紅霉素發酵30h至放罐，效價增長速率無明顯減慢。
全文摘要
本發明涉及一種紅霉素發酵補料用混合糖及其應用方法，是將質量濃度為25～35%淀粉乳用中溫淀粉酶在pH6.0～8.0,溫度75～80℃條件下水解至葡萄糖值為10～30％，繼續升溫至100℃，將中溫淀粉酶滅活，然后降至室溫,后按質量濃度20～30％投入滅菌罐進行滅菌處理，得到pH6.0～8.0，濃度20～30％的混合糖。本發明通過將淀粉乳采用淀粉酶處理后變成含有單糖、雙糖和多糖的混合糖，由于含淀粉乳，對高溫高壓滅菌的耐受性好，滅菌過程中不易產生其它副產物，且其pH、代謝pH及代謝速率均適合紅霉素產生菌生長及產素能力,因此能夠促進紅霉素前體物質的合成,加快紅霉素產物的合成速率,提高紅霉素發酵單位。
文檔編號C12P19/62GK102839204SQ20121036026
公開日2012年12月26日 申請日期2012年9月25日 優先權日2012年9月25日
發明者李學兵, 孫瑞君, 朱娜, 張志 申請人:寧夏啟元藥業有限公司