食物中毒致病性厭氧菌增菌培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種食物中毒致病性厭氧菌增菌培養(yǎng)基，主要用于食物中毒致病性厭氧菌的增菌培養(yǎng)。克服了以往培養(yǎng)基的不足，能快速準(zhǔn)確檢測食物中毒致病性厭氧菌。食物中毒致病性厭氧菌的毒素，經(jīng)酶激化后顯示毒力，便于進行測毒動物試驗，可彌補皰肉培養(yǎng)基的不足。培養(yǎng)基清澈，方法簡單，使用方便，結(jié)果可靠。
【專利說明】食物中毒致病性厭氧菌增菌培養(yǎng)基
[0001]【技術(shù)領(lǐng)域】本發(fā)明涉及一種食物中毒致病性厭氧菌增菌培養(yǎng)基，其主要成分是胰酪蛋白胨、蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、硫乙醇酸鈉、蒸餾水、1.5%胰蛋白酶(1:250)溶液按比例混合經(jīng)加溫、溶解、混合、冷卻、分裝、高溫滅菌等工藝而成。主要用于食物中毒致病性厭氧菌的增菌培養(yǎng)。
[0002]【背景技術(shù)】隨著食物中毒致病微生物研究的進展，國內(nèi)外對培養(yǎng)基的研究也在不斷的發(fā)展中。生物實驗工作者發(fā)明一種能克服上述培養(yǎng)基不足的，專用于食物中毒致病性厭氧菌增菌培養(yǎng)。已有培養(yǎng)基劑品種很多，不具有切實可靠的方法；對培養(yǎng)成分有破壞作用，亦影響其物理性狀。本發(fā)明的目的在于提供一種能克服上述培養(yǎng)基不足的新型產(chǎn)品，用于食物中毒致病性厭氧菌的中和增菌培養(yǎng)。本發(fā)明的食物中毒致病性厭氧菌增菌培養(yǎng)基克服了上述的不足，快速檢測食物中毒致病性厭氧菌的毒素，經(jīng)酶激化后顯示毒力，便于進行測毒動物試驗，可彌補其他培養(yǎng)基的不足。方法簡單，使用方便，結(jié)果可靠。
[0003]
【發(fā)明內(nèi)容】
本發(fā)明的要點在于選擇合適的組分，并進行合理混配，經(jīng)加溫、溶解、混合、冷卻、高溫滅菌、分裝、等工藝而成一種食物中毒致病性厭氧菌增菌培養(yǎng)基。
[0004]本發(fā)明選擇的配方如下(克、ml /每升蒸餾水):胰酪蛋白胨30-40 ;蛋白胨4.0-5.0 ;酵母浸粉10-15 ;葡萄糖6.0-7.0 ;硫乙醇酸鈉1.6-1.8 ； 2.0%胰蛋白酶(1:250)溶液65 mL。蒸懼水1000mLo
[0005]釀成的培養(yǎng)基呈黃色透明液體。將食物中毒致病性厭氧菌48 h培養(yǎng)物，稀釋成1:1000菌懸液，接種0.01 mL，應(yīng)能生長。食物中毒致病性厭氧菌的毒素，經(jīng)酶激化后顯示毒力，便于進行測毒動物試驗，可彌補皰肉培養(yǎng)基的不足。
[0006]本發(fā)明產(chǎn)品的制備方法是:
(0.將胰酶消化液加溫到80`°C，用200 g/L氫氧化鈉溶液調(diào)至PH7.0—7.2 ；
(2)將蛋白胨、酵母浸粉、、硫乙醇酸鈉、蒸懼水1000mL加入內(nèi)浸液、煮沸IOmin后,用磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀，調(diào)pH為8.0 — 8.2，過濾透明，113°C 30 min高壓滅菌備用；
(3).配制250g/L葡萄糖，IlO0C 20 min滅菌；分裝于無菌瓶內(nèi)；
(4)2.0%胰蛋白酶(1:250)溶液65 mL。種菌前按1% (V/V)無菌操作加入。
[0007]本發(fā)明具有以下優(yōu)點:食物中毒致病性厭氧菌增菌培養(yǎng)基克服了以往培養(yǎng)基的不足，能快速準(zhǔn)確檢測食物中毒致病性厭氧菌。食物中毒致病性厭氧菌的毒素，經(jīng)酶激化后顯示毒力，便于進行測毒動物試驗，可彌補皰肉培養(yǎng)基的不足。培養(yǎng)基清澈，方法簡單，使用方便，結(jié)果可靠。
[0008]【具體實施方式】下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的詳細(xì)說明:
按照下表所列數(shù)據(jù)(克、ml /每升蒸餾水)及其所述步驟進行配置:
配方一:
胰酪蛋白胨30-40 ;蛋白胨4.0-5.0 ;酵母浸粉10-15 ;葡萄糖6.0-7.0 ;硫乙醇酸鈉
1.6-1.8; 2.0%胰蛋白酶(1:250)溶液 65 mL。蒸餾水 1000mL
配方二:胰酪蛋白胨30-38 ;蛋白胨4.5-5.0 ;酵母浸粉12-15 ;葡萄糖6.5-7.0 ;硫乙醇酸鈉1.7-1.8; 2.0%胰蛋白酶(1:250)溶液 65 mL。蒸餾水 1000mL
配方三:
胰酪蛋白胨32-40 ;蛋白胨4.0-4.5 ;酵母浸粉10-13 ;葡萄糖6.0-6.5 ;硫乙醇酸鈉
1.6-1.7; 2.0%胰蛋白酶(1:250)溶液 65 mL。蒸餾水 lOOOmL。
【權(quán)利要求】
1.本發(fā)明涉及一種食物中毒致病性厭氧菌增菌培養(yǎng)基，其特征在于具有如下配方(克、ml /每升蒸餾水):胰酪蛋白胨30-40 ;蛋白胨4.0-5.0 ;酵母浸粉10-15 ;葡萄糖6.0-7.0 ；硫乙醇酸鈉1.6-1.8 ； 2.0%胰蛋白酶(1:250)溶液65 mL ;蒸餾水1000mL。
2.—種權(quán)利要求1所述食物中毒致病性厭氧菌增菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于具有如下的步驟: (1)將胰酶消化液加溫到80°C，用200g/L氫氧化鈉溶液調(diào)至ρΗ7.0—7.2 ； (2)將蛋白胨、酵母浸粉、、硫乙醇酸鈉、蒸懼水1000mL加入內(nèi)浸液、煮沸IOmin后,用磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀，調(diào)pH為8.0 — 8.2，過濾透明，113°C 30 min高壓滅菌備用； (3)配制250g/L葡萄糖，IlO0C 20 min滅菌；分裝于無菌瓶內(nèi)； (4)2.0%胰蛋白酶(1:250)溶液65 mL，種菌前按1% (V/V)無菌操作加入。
【文檔編號】C12Q1/04GK103667413SQ201210354266
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2012年9月21日 優(yōu)先權(quán)日:2012年9月21日
【發(fā)明者】于麗霞 申請人:青島道合生物科技有限公司