專利名稱：一種胃蛋白酶酶解提取制備林蛙皮膠原肽鰲合鋅的工藝方法
技術領域：
本發明涉及ー種胃蛋白酶酶解提取制備林蛙皮膠原肽鰲合鋅的エ藝方法。
背景技術：
當今市場，林蛙油的開發提取已經成熟，因而林蛙的其他副產物的研究已經成為新的熱點，而從林蛙皮中提取膠原蛋白的研究較少，林蛙皮膠原蛋白是ー種優質蛋白，酶解法對蛋白質的傷害性相對于酸法、堿法、熱水法提取來講比較安全緑色。
發明內容
本發明g在公開ー種胃蛋白酶酶解提取制備林蛙皮膠原肽鰲合鋅的エ藝方法。此 下藝參數是經過單因素結合三元二次回歸正交多項式結合的方法優化而來。取長白山林蛙，活剝皮后_80°C冷凍備用。取出冷凍蛙皮進行低溫高壓冷凍干燥溫度為-40°C至-50°C，干燥時間為20-24h，將稱量后蛙皮浸入0. 15mol/L NaOH(l% H2O2)脫色24_28h，蒸餾水清洗3遍直至沒有顔色在清洗液中，將清洗蛙皮浸入30°C丙酮中脫脂，蒸餾水清洗3遍直至沒有油脂在清洗液中，將清洗干凈的蛙皮浸入0. 05mol/L-0. lmol/L的HCl在4°C條件下浸提脫鈣6-10h，用蒸餾水清洗3遍蛙皮。采用胃蛋白酶，pH值I. 5-2. 5，酶濃度5% _7%，酶解時間3-4h，料水比I : 130-1 150，滅酶，在此條件下膠原蛋白得率可以達到20%-35%。將提取的膠原肽與硫酸鋅進行鰲合反應，測得鰲合率達到88% -95%。具體實施將林蛙活剝皮后-80°C冷凍備用。取出冷凍蛙皮進行低溫高壓冷凍干燥溫度為_40°C至-50°C，將干燥蛙皮浸入0. 15mol/L NaOH (I % H2O2)脫色24_28h，蒸餾水清洗3遍直至沒有顔色在清洗液中，將清洗蛙皮浸入30°C丙酮中脫脂，蒸餾水清洗3遍直至沒有油脂在清洗液中，將清洗干凈的蛙皮浸入0. 05mol/L-0. lmol/L的HCl在4°C條件下浸提脫鈣6-10h。用胃蛋白酶，pH值I. 5-2. 5，酶濃度5% -7%，酶解時間3h_4h，料水比I 130-1 150，滅酶，在此條件下膠原蛋白得率可以達到20%-35%。采用胃蛋白酶，pH值I. 5-2. 5，酶濃度5 % -7 %，酶解時間3_4h，料水比I 130-1 150，其中酶濃度為酶的質量與蛙皮質量之比，滅酶，在此條件下膠原蛋白得率可以達到20% -35%。將提取的膠原肽與硫酸鋅進行鰲合反應，測得鰲合率達到88% -95%。
權利要求
1.ー種胃蛋白酶酶解提取制備林蛙皮膠原肽鰲合鋅的エ藝方法是經過單因素結合三元二次回歸正交多項式結合的方法優化出高效制備林蛙皮膠原肽的エ藝路線，將膠原肽液與鋅鹽鰲合，測定提取的膠原液中膠原蛋白得率可以達到20% _35%，膠原肽鰲合鋅的鰲合率可以達到88% -95%。
2.根據權利要求I所述的胃蛋白酶酶解提取制備林蛙皮膠原肽鰲合鋅的エ藝方法中的林蛙皮膠原蛋白提取方法的具體參數如下采用胃蛋白酶，酶活為3000U/g，pH值I.5-2. 5，酶濃度5%-7%，酶解時間3-4h，料水比I : 130-1 150，滅酶，在此條件下膠原蛋白得率可以達到20% -35%。
3.根據權利要求I所述的胃蛋白酶酶解提取制備林蛙皮膠原肽鰲合鋅的エ藝方法中的蛙皮，其特征在于長白山林蛙，活剝皮后-80°C冷凍備用。取出冷凍蛙皮進行低溫高壓冷凍干燥溫度為_40°C至-50°C，干燥時間為20-24h，進行稱量后將干燥蛙皮浸入O. 15mol/LNaOH(l % H2O2)脫色24_28h，蒸餾水清洗3遍直至沒有顏色在清洗液中，將清洗蛙皮浸入30°C丙酮中脫脂，蒸餾水清洗3遍直至沒有油脂在清洗液中，將清洗干凈的蛙皮浸入O.05mol/L-0. lmol/L的HCl在4°C條件下浸提脫鈣6_10h，用蒸餾水清洗3遍蛙皮。
全文摘要
一種胃蛋白酶酶解提取制備林蛙皮膠原肽鰲合鋅的工藝方法，取長白山林蛙，活剝皮后-80℃冷凍備用。取出冷凍蛙皮進行低溫高壓冷凍干燥溫度為-40℃至-50℃，干燥時間為20-24h，進行稱量后將干燥蛙皮浸入0.15mol/L NaOH(1％H2O2)脫色24h-28h，將清洗蛙皮浸入30℃丙酮中脫脂，將清洗干凈的蛙皮浸入0.05mol/L-0.1mol/L的HCl在4℃條件下浸提脫鈣6-10h。用胃蛋白酶，pH值1.5-2.5，酶濃度5％-7％，酶解時間3-4h，料水比1∶130-1∶150，滅酶后在此條件下膠原蛋白得率可以達到20％-35％。將提取的膠原肽與硫酸鋅進行鰲合反應，測得鰲合率達到88％-95％。
文檔編號C12P21/06GK102816818SQ201210286920
公開日2012年12月12日 申請日期2012年8月14日 優先權日2012年8月14日
發明者劉靜波, 趙頌寧, 孫研博 申請人:吉林大學