專利名稱：與雞胚體及其小腸發育水平相關的三種基因的制作方法
技術領域：
本發明涉及生物技術領域，具體涉及與雞胚體及其小腸發育水平相關的三種基因。
背景技術：
雞在胚胎期的發育狀況影響其出殼后的生長發育，發育狀況好的雞胚在出殼后容易獲得更好的生產性能。一些生理指標由于與雞胚發育有一定的正相關關系，被用于評價雞胚發育的水平，但是隨著養禽業的發展以及科學知識水平的提高，對雞胚發育的認識越來越深入，在實踐中逐漸發現一些傳統的雞胚發育標志物存在諸多的局限性，科學的、新的標志物有待開發。在此背景條件下，本發明借助分子生物學、發育生物學、統計學等知識和相關研究技術，開發雞胚發育的標志基因，更加科學、有效地評價雞胚的發育狀況，為科學 研究和養禽生廣提供參考。
發明內容
本發明的目的在于根據現有技術中存在的上述不足，提供根據不同品種肉雞胚胎發育軌跡及其小腸氨基酸轉運載體和寡肽轉運載體基因表達的特點，從而開發出科學有效的雞胚發育標志基因。本發明上述目的通過以下技術方案以予實現
本發明通過孵化試驗發現了不同品種雞胚體的發育軌跡不同，不同器官的發育軌跡也不盡相同，小腸的發育軌跡與胚體最為接近。雞胚的發育與其對營養物質的吸收密切相關，氨基酸和寡肽是合成蛋白質的主要原料，它們的吸收效率在雞胚發育的過程中顯得尤為重要，小腸中氨基酸轉運載體和寡肽轉運載體的表達是影響氨基酸和寡肽吸收效率的主要因素。本發明通過real-time RT-PCR的方法，發現不同品種雞胚小腸中堿性氨基酸轉運載體b°，+AT、酸性氨基酸轉運載體EAAT3和寡肽轉運載體PepTl的基因表達與胚體以及小腸的重量高度相關，進而建立b°，+AT、EAAT3和P印Tl基因表達與雞胚重量和小腸重量的數學模型，通過檢測以上三種基因的表達結合已經建立的數學模型來評價雞胚發育。與現有技術相比，本發明具有如下有益效果
(I)更科學綜合運用分子生物學、發育生物學、生物信息學等知識及相關研究技術，根據研究對象的特點，逐層深入地研究其內在聯系，最終發現雞胚小腸中的b°，+AT、EAAT3和PepTl基因表達可作為雞胚發育的標志基因，開發思路和方法科學可信。(2)更準確傳統的一些用作雞胚發育標志物的生理指標使用的檢測方法較為簡單，在一定程度上引起了檢測結果與實際情況的偏差，real-time RT-PCR法檢測基因表達因具有較高的準確性而被普遍接受和廣泛使用。(3)更靈敏雞胚發育的過程也是功能基因發揮功能的過程，功能基因的表達在時空上與雞胚的發育密切相關，小腸中b°，+AT、EAAT3和PepTl基因的表達水平更靈敏地反映了雞胚及其小腸的發育水平。
具體實施例方式以下結合實施例來進一步解釋本發明，但實施例并不對本發明做任何形式的限定。實施例I三個雞胚發育的標志基因
1.雞胚孵化
選取產蛋日齡相同的溫氏土雞和白洛克雞所產種蛋各96枚，溫氏土雞種蛋重量為44.17 土 0.30 g，白洛克雞種蛋為58. 40 土 0.23 g，每個品種種蛋隨機分為6組，每組16枚。用科裕MFP微電腦自動孵化機進行孵化，孵化條件為溫度37. 9°C，濕度60% RH，翻蛋周期2 h，翻蛋時間180 S，換氣周期2 h，換氣時間30 S。
溫氏土雞和白洛克雞胚重量與胚齡的相關系數分別為O. 992和O. 989，回歸方程分別為 Y=-20. 11+2. 23Χ 和 Y=-25. 37+2. 75Χ。表I雞胚重量與胚齡的數學關系
權利要求
1.與雞胚體及其小腸發育水平相關的三種基因，其特征在于所述三種基因為雞胚小腸中堿性氨基酸轉運載體b°，+AT基因、酸性氨基酸轉運載體EAAT3基因和寡肽轉運載體PepTl基因。
全文摘要
本發明公開了三種基因，其表達與雞胚體及其小腸重量高度相關，這三種基因是雞胚小腸中堿性氨基酸轉運載體b0,+AT基因、酸性氨基酸轉運載體EAAT3基因和寡肽轉運載體PepT1基因。通過本發明三種基因可以準確靈敏地反映雞胚及其小腸的發育水平。
文檔編號C12N15/12GK102925446SQ20121025721
公開日2013年2月13日 申請日期2012年7月24日 優先權日2012年7月24日
發明者王修啟, 黎相廣 申請人:華南農業大學