專利名稱：促進蘭科石斛屬植物種子萌發的一株真菌的制作方法
技術領域：
本發明涉及生物工程技術領域，具體地說涉及兩株能夠促進蘭科石斛屬植物種子萌發，用于石斛屬植物的繁殖、生產，保護該屬植物資源的真菌。
背景技術：
蘭科(Orchidaceae)是被子植物的大科之一，全世界約有700屬近20000種，其中很多為珍稀瀕危植物。所有野生蘭科植物均被列入《野生動植物瀕危物種國際貿易公約》的保護范圍，占該公約應保護植物的90%以上，是植物保護中的“旗艦”類群。石斛屬是蘭科第二大屬，其中很多品種具有很高的藥用及觀賞價值。據2005年版《中華人民共和國藥 典》一部載以金欽石斛(Dendrobium nobile LindL.)、鐵皮石斛(D. candidum Wall, exLindl.)或馬鞭石斛(D. fimbriatum Hook, var. oculatum Hook.)及其近似種的新鮮或干燥莖做石斛藥用，具有益胃生津、滋陰清熱、明目利嗓等作用。20世紀70年代以來，石斛的需求量大增，特別是石斛夜光丸、脈絡寧注射液等中成藥的問世，野生石斛資源已不能滿足需求。由于生態環境日益惡化和過度開采，鐵皮石斛等名貴品種已瀕臨滅絕，市場上的混淆品、假冒偽劣產品屢禁不止，因此加強石斛種質資源的研究迫在眉睫。對蘭科植物繁殖方法的研究，主要有有性繁殖和無性繁殖兩種。在無性繁殖方面，利用組織培養的方法進行大規模克隆繁殖，無疑可以減輕對野生石斛的采集壓力，但是，組培苗經過多次繼代會出現減產降質的退化現象，容易產生病害，降低產量和質量。在有性繁殖方面，研究者通過控制營養、生態等條件，促進蘭科植物種子萌發與生長，已取得了較理想的結果，目前已經有ー些石斛屬植物可以通過種子的無菌萌發大量獲得幼苗。但這種繁殖方式存在的主要問題是種子萌發后形成的幼苗比較脆弱，從組織培養的條件移栽到大田環境繼續生長時，有許多難以克服的困難。蘭科植物的種子微小，本身無法貯存養分，其萌發階段完全依靠菌根真菌為其提供營養。基于蘭科植物種子萌發階段依賴于真菌的特點，研究促進蘭科植物種子萌發的優良真菌菌株(俗稱萌發菌)的工作就顯得尤為重要。
發明內容
本發明的目的在于提供兩株能促進蘭科石斛屬植物種子萌發的真菌。它們能用于多種珍稀瀕危的藥用石斛屬植物的人工繁殖和生產中，提高石斛的產量，解決石斛藥用資源緊缺的問題，也能用于石斛屬植物中名貴的觀賞花卉的種質資源保育，保護石斛屬植物的自然資源，具有巨大的應用價值。本發明提供的2株真菌經鑒定分別為膠膜菌屬真菌pw-3 (Tulasnella sp.),保藏編號 CGMCC No. 3397 ;蠟殼菌屬真菌 shh_53 (Sebacina sp.)，保藏編號為 CGMCC No. 3398。這2株真菌于2009年11月4日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏單位地址北京市朝陽區大屯路甲3號，中國科學院微生物研究所。兩株真菌的培養特性分別為pw-3 :在PDA培養基上菌落為白色，圓形,氣生菌絲不發達,25°C生長10天的菌落直徑為I. 9厘米，常規培養基上不產生孢子。shh-53 :在PDA培養基上菌落為黃色，圓形，氣生菌絲不發達，25°C生長10天的菌落直徑為3. 8厘米，常規培養基上不產生孢子。
具體實施例方式實施例Ipw-3對鐵皮石斛種子的萌發效果把鐵皮石斛種子播種到已經長滿pw-3真菌菌絲的燕麥培養基上，以播種于無菌燕麥培養基上的種子為對照，在培養室中培養，培養溫度為23-27°C，三個月時調查種子萌發情況。蘭科植物種子發育級別劃分標準如表I。結果為接種pw-3真菌的鐵皮石斛種子萌發率為69. 3%，不接真菌的鐵皮石斛種子萌發率為24. 6%;并且接種pw-3真菌的鐵皮石斛萌發到第4級，即分化出葉，對照組僅發育到第2級，即種子膨大破皮，未見進ー步發育。表I蘭科種子發育級別分級標準
權利要求
1.促進蘭科石斛屬植物種子萌發的I株真菌，它是保藏編號為CGMCCNo. 3398的蠟殼菌屬真菌 shh-53 (Sebacina sp.)。
2.權利要求I所述的I株真菌，其特征在于它能應用于蘭科石斛屬植物的有性繁殖和種苗的規模化生產。
全文摘要
本發明公開了一株促進蘭科石斛屬植物種子萌發的蠟殼菌屬真菌shh-53(Sebacina sp.)。該菌株對于蘭科石斛屬植物的有性繁殖和種苗的規模化生產和資源可持續利用具有重大應用價值。
文檔編號C12R1/645GK102676401SQ20121016489
公開日2012年9月19日 申請日期2010年1月18日 優先權日2010年1月18日
發明者孟志霞, 王卉, 郭順星, 陳娟, 陳曉梅 申請人:中國醫學科學院藥用植物研究所