專利名稱：一種利用菊芋水解液生產(chǎn)d-乳酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及ー種發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法；特別涉及一種菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)利用菊芋水解液生產(chǎn)D-乳酸的方法。
背景技術(shù)：
乳酸又稱丙醇酸，分子式C3H6O3 (CH3CH0HC00H)，分子量90. 07884。由于乳酸分子中存在一個(gè)不對(duì)稱的碳原子，因此具有光學(xué)異構(gòu)現(xiàn)象，從而分為D-型和L-型兩種。其生產(chǎn)方法主要有化學(xué)合成法和微生物發(fā)酵法，化學(xué)法只能合成DL-乳酸，而發(fā)酵法根據(jù)所采用的菌株的不同，可以合成單ー的L-乳酸、D-乳酸或者DL-乳酸。目前，約90%的乳酸是通過微生物發(fā)酵法生產(chǎn)的。D-乳酸作為ー種主要的基本有機(jī)化工原料，在醫(yī)藥、農(nóng)藥、化工等方面均有十分廣泛的應(yīng)用。尤其是作為下一代高強(qiáng)度生物可降解塑料聚乳酸的単體，正在引起全球大公司和科學(xué)家的高度關(guān)注。全球D-乳酸的需求量每年都以6 % 8 %的速度增長(zhǎng)，目前全世界D-乳酸的產(chǎn)量為I. 6萬噸，而D-乳酸的需求量約2. 6萬噸，由此可見，D-乳酸的市場(chǎng)前景廣泛。隨著全球性的能源和資源供求關(guān)系的日益緊張，以可再生生物質(zhì)原料的高濃度、高光學(xué)純D-乳酸生物制造勢(shì)在必行。發(fā)展光學(xué)純D-乳酸生物制造技術(shù)，將會(huì)促進(jìn)可降解材料——聚乳酸的發(fā)展，對(duì)實(shí)施石油替代戰(zhàn)略，確保國(guó)家能源與資源安全具有極為重要的作用。聚乳酸是ー種由乳酸聚合而成的生物可降解性高分子聚合物，具有良好的生物相容性和生物可降解性。聚乳酸可用作藥物緩釋材料、手術(shù)縫合線、生物植片、組織修復(fù)材料等。聚乳酸制成的生物可降解纖維，耐熱性175°C，可與聚酯纖維ー樣，制成長(zhǎng)絲、短絲，用于服裝和非服裝織物，具有天然纖維的吸濕性，較好的手感，又有合成纖維的光滑和舒適挺括。聚乳酸制成的生物可降解塑料，能夠代替PVC、PP塑料，用于塑料食品器具、醫(yī)用服裝、個(gè)人衛(wèi)生用品、嬰兒尿布、垃圾袋、農(nóng)用地膜及各種包裝行業(yè)，從而減少“白色污染”，有利于環(huán)境保護(hù)。用乳酸生產(chǎn)生物降解塑料，在我國(guó)具有極大的市場(chǎng)發(fā)展?jié)摿Γ壳耙殉蔀殚_發(fā)的熱點(diǎn)項(xiàng)目。但是，由光學(xué)純L-乳酸制得的聚乳酸在強(qiáng)度、熱穩(wěn)定性等方面尚需進(jìn)ー步的改進(jìn)才能適應(yīng)更為廣泛的應(yīng)用的需要。有報(bào)道稱，由聚L-乳酸和聚D-乳酸混合而成的聚乳酸與聚L-乳酸相比具有更佳的結(jié)構(gòu)和性能。雖然高純度D-乳酸具有廣闊的市場(chǎng)前景，但目前商業(yè)化的高純度D-乳酸產(chǎn)品很少，高純度D-乳酸的價(jià)格也遠(yuǎn)高于L-乳酸的價(jià)格。因此，采用廉價(jià)的非糧原料生產(chǎn)高純度D-乳酸，具有良好的市場(chǎng)前景，一方面減輕對(duì)環(huán)境的壓カ，另ー方面也會(huì)大大提高其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供ー種發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法。
本發(fā)明所提供的發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法，包括如下步驟將菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)接種到以菊芋水解液作為卩隹ー碳源的發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，得到D-乳酸。所述菊芋水解液中果糖和葡萄糖的質(zhì)量比可為(3-5) 1，具體如4 I。所述菊芋水解液中總還原糖在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度可為46_55g/L，如49.25g/L。所述菊芋水解液中的所述總還原糖為果糖和葡萄糖；所述果糖在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度可為38-42g/L，如39. 4g/L，所述葡萄糖糖在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度可為8_12g/L,如 9.85g/L。
所述發(fā)酵培養(yǎng)基由碳源，氮源和控制發(fā)酵液pH的中和劑組成。在本發(fā)明的實(shí)施例中，所述碳源即為上述菊芋水解液，所述菊芋水解液含有在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中終濃度為49. 25g/L的總還原糖，所述總還原糖為果糖和葡萄糖，所述果糖和所述葡萄糖的質(zhì)量比可為(3-5) 1，具體如4 I;所述氮源為在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中終濃度為10g/L的酵母粉；所述中和劑為碳酸鈣；所述碳酸鈣在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的含量可為所述總還原糖質(zhì)量的60%，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述碳酸鈣的終濃度具體為30g/L ;所述發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為 6. 5。所述發(fā)酵培養(yǎng)的溫度可為42V ;所述發(fā)酵培養(yǎng)的培養(yǎng)方式可為靜止培養(yǎng)；所述發(fā)酵培養(yǎng)的時(shí)間可為40-96h，如96h。本發(fā)明所提供的發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法中，接種到所述發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)的所述菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)是經(jīng)過活化的菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus);在本發(fā)明的具體實(shí)施例中，其活化方法為如下I)或2)I)將所述菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)接入種子培養(yǎng)基，在42°C靜止培養(yǎng)48h，得到培養(yǎng)物I，將所述培養(yǎng)物I按照I : 10的體積比轉(zhuǎn)接到新的種子培養(yǎng)基中，繼續(xù)42°C靜止培養(yǎng)24h，得到培養(yǎng)物2，所述培養(yǎng)物2即為所述活化的菊糖芽孢乳桿M (Sporolactobacillus inulinus)；2)將步驟I)所述培養(yǎng)物2按照I : 10的體積比轉(zhuǎn)接到新的種子培養(yǎng)基中，繼續(xù)42°C靜止培養(yǎng)24h,得到所述活化的菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)；所述種子培養(yǎng)基中含有終濃度為50g/L的果糖，終濃度為10g/L的酵母粉，以及終濃度為30g/L的碳酸鈣，余量為水；所述種子培養(yǎng)基的pH為6. 5。所述酵母粉為商業(yè)化產(chǎn)品，可以從國(guó)內(nèi)生產(chǎn)商購(gòu)買，比如安琪酵母股份有限公司。在本發(fā)明中，上述所有菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)均為菊糖芽抱乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)CASD CGMCC No. 2185。在本發(fā)明中，進(jìn)行所述發(fā)酵培養(yǎng)的所述發(fā)酵培養(yǎng)基需經(jīng)高壓滅菌，具體為115°C高壓滅菌lOmin。所述菊芋水解液在發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。所述應(yīng)用具體為菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)在以菊芋水解液作為唯一碳源，發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸中的應(yīng)用。所述菊芋水解液中果糖和葡萄糖的質(zhì)量比可為(3-5) 1，具體如4 I。本發(fā)明的另ー個(gè)目的是提供一種培養(yǎng)基，其特征在干所述培養(yǎng)基由菊芋水解液、酵母粉和碳酸鈣組成；所述菊芋水解液中含有果糖和葡萄糖，所述果糖在所述培養(yǎng)基中的終濃度為38-42g/L，所述葡萄糖在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度為8-12g/L ;所述酵母粉在所述培養(yǎng)基中的終濃度為10g/L ;所述碳酸鈣在所述培養(yǎng)基中的終濃度為30g/L ;所述培養(yǎng)基的pH為6. 5。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述發(fā)酵培養(yǎng)基中所述果糖的終濃度為39. 4g/L，所述葡萄糖的終濃度為9. 85g/L。所述培養(yǎng)基在發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。在本發(fā)明中，所述應(yīng)用中所用的發(fā)酵菌株為菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus) CASDCGMCC No. 2185。上述所有所述菊芋水解液均為將菊芋塊莖用菊粉酶水解得到的菊芋水解液。 在實(shí)際應(yīng)用中，可以新鮮的菊芋塊莖為原料，也可以以菊芋粉為原料進(jìn)行菊粉酶水解，從而獲得菊芋水解液。所述菊粉酶可從商業(yè)途徑獲得，如美國(guó)西格瑪(Sigma)公司，產(chǎn)品目錄號(hào)為16285，CAS 9025-67-6 ο所述菊粉酶的用量為20U/g菊芋(粉)。酶活單位(U)定義為毎分鐘產(chǎn)生I μ moL還原糖所需要的酶量。本發(fā)明所提供的發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法中，菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus iauliaus)CASD CGMCC No. 2185 以菊芋水解液為卩隹一碳源，其生產(chǎn)D-乳酸的能力強(qiáng)，D-乳酸產(chǎn)量45-49克/升(每升發(fā)酵液生產(chǎn)45-49克D-乳酸)；糖酸轉(zhuǎn)化率達(dá)到92-99% ;且光學(xué)純度達(dá)到99%。
圖I為隨著菊芋水解液濃度(總還原糖濃度)的提高，發(fā)酵液中相應(yīng)總還原糖濃度的變化。圖2為隨著菊芋水解液濃度(總還原糖濃度)的提高，發(fā)酵液中相應(yīng)D-乳酸濃度的變化。圖3為分批發(fā)酵模式放大實(shí)驗(yàn)高效生產(chǎn)D-乳酸，發(fā)酵液中相應(yīng)總還原糖和D-乳酸濃度的變化。
具體實(shí)施例方式
下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。下述實(shí)施例中所有的菊芋水解液，均按照如下方法制備得到先將新鮮的菊芋塊莖洗浄，切成薄片，過夜烘干后，用高速粉碎機(jī)打粉過60目篩子。然后用蒸餾水將菊芋粉配成一定濃度的浸液，加入菊粉酶(美國(guó)西格瑪(Sigma)公司，產(chǎn)品目錄號(hào)為16285，CAS 9025-67-6。酶活單位(U)定義為每分鐘產(chǎn)生I μ moL還原糖所需要的酶量)的量為20U/g菊芋粉，用2mol/L的HCl調(diào)pH至5. 2，置于42°C條件下水解過夜，所得溶液即為本發(fā)明所用的菊芋水解液。所得菊芋水解液含果糖66. 2g/L和葡萄糖16. 55g/L，其中果糖和葡萄糖的質(zhì)量比為4 I。下述實(shí)施例中所涉及的各參數(shù)測(cè)定方法均如下(I)總還原糖濃度采用DNS法(3，5-ニ硝基水楊酸比色法)測(cè)定，使用山東省科學(xué)院生物研究所的總還原糖測(cè)定儀測(cè)定，儀器型號(hào)為SGD-IV。其中DNS法的原理是在堿性條件下，還原糖與3，5- ニ硝基水楊酸(DNS)共熱，3，5- ニ硝基水楊酸被還原為棕紅色的3-氨基-5-硝基水楊酸，而還原糖則被氧化成糖酸及其它產(chǎn)物。在一定范圍內(nèi)，還原糖的量與棕紅色物質(zhì)顏色深淺的程度呈ー定比例關(guān)系，在540nm波長(zhǎng)下測(cè)定棕紅色物質(zhì)的消光值，查對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線可求出樣品中還原糖的含量。⑵L-乳酸和D-乳酸濃度的測(cè)定方法為，采用Agilent 1200液相色譜儀，配備手性分離柱(日本三菱化學(xué)公司，MCI GEL-CRS10ff,4. 6mm IDX50mm，光學(xué)異構(gòu)體分離用)。具體操作條件為2mM的硫酸銅作為流動(dòng)相,流量O. 5ml/min,進(jìn)樣量10 μ I,紫外檢測(cè)器,檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，操作溫度25°C。利用L-乳酸和D-乳酸標(biāo)準(zhǔn)品做出標(biāo)準(zhǔn)曲線，再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出發(fā)酵液中レ乳酸和D-乳酸的含量。
(3)糖酸轉(zhuǎn)化率均定義為D_乳酸產(chǎn)量(克/升)+總還原糖的消耗量(克/升)X100%o(4)光學(xué)純度(optical purity):是衡量旋光性樣品中一個(gè)對(duì)映體超過另ー個(gè)對(duì)映體的量的量度，它可用對(duì)映體過量值(enantiomeric excess)表示。本發(fā)明中D-乳酸的光學(xué)純度按以下公式計(jì)算(D-乳酸含量-L-乳酸含量)+ (D-乳酸含量+L-乳酸含量)X100%o菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)為菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)CASD,該菌株已于2007年9月24日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，其保藏編號(hào)為CGMCC No. 2185(專利授權(quán)公告號(hào)CN100485027C)。種子培養(yǎng)基終濃度為50g/L的果糖，終濃度為10g/L的酵母粉，以及終濃度為30g/L的碳酸鈣，余量為水；pH為6. 5。實(shí)施例I、高效生產(chǎn)D-乳酸的最適菊芋水解液濃度的確定本實(shí)施例所用發(fā)酵培養(yǎng)基依據(jù)菊芋水解液濃度的不同，共四種取0.3L(或0.6L，或0. 9し或1.0し)上述菊芋水解液，IOg酵母粉(安琪酵母股份有限公司)，含量為總還原糖質(zhì)量60%的碳酸鈣，用蒸餾水定容至IL ;·ρΗ為6. 5。按照上述方法配制所得的四種發(fā)酵培養(yǎng)基中總還原糖(果糖和葡萄糖的總和，來自于菊芋水解液)的終濃度，依據(jù)菊芋水解液加量由少到多的順序，分別為24. 75g/L、49. 25g/L、73. 5g/L和82. 75g/L。確定用于生產(chǎn)D-乳酸的最適菊芋水解液濃度的具體步驟如下I)種子菌培養(yǎng)將保存在MRS固體培養(yǎng)基上的菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus) CASD CGMCC No. 2185 用接種環(huán)接一環(huán)到含有 6mL 種子培養(yǎng)基的試管中，42°C靜止培養(yǎng)2d，然后從中取3ml轉(zhuǎn)接到含有30mL新鮮種子培養(yǎng)基的三角瓶中，42で靜止培養(yǎng)Id,得到種子液(活化的菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillusinulinus)CASD CGMCC No. 2185) 2)將步驟I)的種子液按體積比I : 10的接種量接到上述四種含有不同濃度菊芋水解液的發(fā)酵培養(yǎng)基中。42°C靜止發(fā)酵96小時(shí)。從Oh(將種子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中的一刻)開始，每隔6h，取發(fā)酵液，12000rpm離心10分鐘后，，取上清液測(cè)定如下參數(shù)總還原糖濃度、L-乳酸濃度和D-乳酸濃度；計(jì)算糖酸轉(zhuǎn)化率。實(shí)驗(yàn)設(shè)3個(gè)重復(fù)，結(jié)果取平均值。結(jié)果如圖I和圖2所示，當(dāng)在含總還原糖24. 75g/L濃度水平時(shí)，發(fā)酵20h時(shí)還原糖基本消耗完畢，總還原糖49. 25g/L (果糖39. 4g/L ;葡萄糖9. 85g/L)的菊芋水解液在發(fā)酵40h時(shí)還原糖基本消耗完畢，總還原糖73. 5g/L和總還原糖82. 75g/L的菊芋水解液在96h發(fā)酵結(jié)束時(shí)殘?zhí)菨舛纫琅f很高；在發(fā)酵40h時(shí)，隨著初始總還原糖含量的由低到高，四種發(fā)酵培養(yǎng)基中D-乳酸的產(chǎn)量分別為24. 5g/L、49g/L、38g/L和33g/L。依據(jù)發(fā)酵時(shí)間短，糖酸轉(zhuǎn)化率高和D-乳酸產(chǎn)量高，確定菊粉水解液的最適濃度為總還原糖49. 25g/L。實(shí)施例2、分批發(fā)酵模式放大實(shí)驗(yàn)高效生產(chǎn)D-乳酸本實(shí)施例所用發(fā)酵培養(yǎng)基的配方如下在發(fā)酵培養(yǎng)基中總還原糖終濃度為49. 25g/L (果糖39. 4g/L ;葡萄糖9. 85g/L)的菊芋水解液(每升發(fā)酵培養(yǎng)基中菊芋水解液的用量為O. 6L);氮源為終濃度10g/L的酵母粉；終濃度為30g/L的碳酸鈣；pH6. 5。分批發(fā)酵模式放大實(shí)驗(yàn)高效生產(chǎn)D-乳酸的具體步驟如下I)種子菌培養(yǎng)將保存在MRS固體培養(yǎng)基上的菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus) CASD CGMCC No. 2185 用接種環(huán)接一環(huán)到含有 6mL 種子培養(yǎng)基的試管中，42°C靜止培養(yǎng)2d，然后從中取3ml轉(zhuǎn)接到含有30mL新鮮種子培養(yǎng)基的三角瓶中，42°C靜止培養(yǎng)ld，接著從中取20ml轉(zhuǎn)接到含有200mL新鮮培養(yǎng)基的三角瓶中，42°C靜止培養(yǎng)Id,得到種子液(活化的菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)CASDCGMCC No. 2185)。2)將步驟I)的種子液按體積比10%的接種量接到2L的上述發(fā)酵培養(yǎng)基中。42°C靜止發(fā)酵96小吋。從Oh (將種子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中的一刻)開始，每隔6h，取發(fā)酵液，12000rpm離心10分鐘后，取上清液測(cè)定如下參數(shù)總還原糖濃度、L-乳酸濃度和D-乳酸濃度；計(jì)算糖酸轉(zhuǎn)化率和D-乳酸光學(xué)純度。實(shí)驗(yàn)設(shè)3個(gè)重復(fù)，結(jié)果取平均值。結(jié)果如圖3和表I所示，發(fā)酵到48h時(shí)還原糖基本消耗完畢，D-乳酸濃度為45. 7g/し糖酸轉(zhuǎn)化率為92.8%，D-乳酸的光學(xué)純度達(dá)到99%。這ー結(jié)果表明，菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)CASD CGMCC No. 2185在以菊芋水解液為卩隹一碳源發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸中，顯示出了非常好的エ業(yè)應(yīng)用前景。表I分批發(fā)酵模式放大實(shí)驗(yàn)高效生產(chǎn)D-乳酸3次重復(fù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果
權(quán)利要求
1.ー種發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法，包括如下步驟將菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)接種到以菊芋水解液作為卩隹ー碳源的發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，得到D-乳酸；所述菊芋水解液中果糖和葡萄糖的質(zhì)量比為(3-5) I。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于所述菊芋水解液中總還原糖在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度為46-55g/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的方法，其特征在于所述果糖在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度為38-42g/L ;所述葡萄糖在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度為8-12g/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于所述發(fā)酵培養(yǎng)基由所述菊芋水解液、酵母粉和碳酸鈣組成；所述菊芋水解液含有在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中終濃度為49. 25g/L的總還原糖，所述總還原糖為果糖和葡萄糖，所述果糖和所述葡萄糖的質(zhì)量比為(3-5) I ;所述酵母粉的終濃度為10g/L ;所述碳酸鈣的終濃度為30g/L ;所述發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為6. 5。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于所述發(fā)酵培養(yǎng)的溫度為42°C;所述發(fā)酵培養(yǎng)的培養(yǎng)方式為靜止培養(yǎng)；所述發(fā)酵培養(yǎng)的時(shí)間為40-96h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一所述的方法，其特征在干所述菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)為菊糖芽抱乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)CASD CGMCC No. 2185。
7.菊芋水解液在發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸中的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于所述菊芋水解液中果糖和葡萄糖的質(zhì)量比為(3-5) I。
9.發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于所述發(fā)酵培養(yǎng)基由菊芋水解液、酵母粉和碳酸鈣組成；所述菊芋水解液中含有果糖和葡萄糖，所述果糖在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度為38-42g/L，所述葡萄糖在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度為8-12g/L ;所述酵母粉在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度為10g/L ;所述碳酸鈣在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的終濃度為30g/L ;所述發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為 6. 5。
10.權(quán)利要求9所述培養(yǎng)基在發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法。本發(fā)明所提供的發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的方法包括如下步驟將菊糖芽孢乳桿菌Sporolactobacillus inulinus)接種到以菊芋水解液作為唯一碳源的發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，得到D-乳酸；所述菊芋水解液中果糖和葡萄糖的質(zhì)量比為(3-5)∶1；所述菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)為菊糖芽孢乳桿菌(Sporolactobacillus inulinus)CASD CGMCC No.2185。本發(fā)明中2L發(fā)酵體系，以含還原糖49.25g/L的菊芋水解液為原料，發(fā)酵96h，D-乳酸轉(zhuǎn)化率可達(dá)92.8％；本發(fā)明方法可以有效降低發(fā)酵所使用的各原料成本，變廢為寶，降低環(huán)境污染，并高效發(fā)酵產(chǎn)生旋光性99％聚合級(jí)的D-乳酸，具有很好的工業(yè)應(yīng)用型前景。
文檔編號(hào)C12P7/56GK102643875SQ201210122728
公開日2012年8月22日 申請(qǐng)日期2012年4月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月24日
發(fā)明者于波, 梁音, 王麗敏, 馬延和 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院微生物研究所