專利名稱：一種大腸桿菌高密度培養的培養基的制作方法
技術領域：
本發明:一種大腸桿菌高密度培養的培養基屬于生物領域，特別是涉及一種培養基。
背景技術：
隨著生物制藥的發展，利用重組DNA技術克隆大腸桿菌制得的工程菌，生產生物藥數量越來越多，為生物技術獲得生物藥物產品的主要途徑。一般情況下，生物藥物的產率與大腸桿菌發酵密度密切相關，大腸桿菌的收率直接關系到生物藥物的產率。所以在菌體表達蛋白效率相當的情況下，大腸桿菌的發酵密度直接影響到生物藥物的生產成本。特別是在同樣的純化技術條件下。不斷有學者進行這方面的研究，如根據化學計量模式(stoichiometric model)的方法重新對培養基配方進行設計和優化。在發酵策略方面，為了提高細菌發酵密度，發酵工藝普遍采用補料-分批發酵(fed-batch)的方式提高菌體生長密度和目標產物的表達總量。有必要開發出一種適用于工程菌高密度發酵培養的培養基。對于不同生物工程菌有不同的高密度發酵配方。我們開發了一種新的大腸桿菌高密度發酵配方。
發明內容
本發明的目的在于提供一種工程菌高密度發酵培養的培養基。本發明的目的是通過以下措施來達到的，本發明的培養基每升包含有下列配比組分:
表一:批培養基:__
權利要求
1.一種大腸桿菌高密度培養的培養基，特征:每升批培養基包含下列配比組分: 酵母提取物5.00 g/L 甘油7.75 ml/L 硫酸銨 3.0g/L 磷酸氫二鈉6.0 g/L 磷酸二氫鉀3.0 g/L 朽1檬酸1.7 g/L 硫酸鎂1.2 g/L 培養基用I Mol/L NaOH等堿性溶液調pH值至6.8 每升補料培養基包含有下列配比組分: 酵母提取物(Yeast extract)40 g/1 甘油(Glycerol 100%)631 g/1 = 513 ml/1 二水鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20)0.02 g/1 七水硫酸鎂(MgSO4.7H20)2.0 g/1 五水硫酸銅(CuSO4.5H20)0.007 g/1 二水氯化鈣(CaCl2.2H20)0.665 g/1 六水氯化鈷(CoCl2.6H20)0.007 g/1 六水氯化鐵(FeCl3.6H20)0.20 g/1 硼酸(H3BO3)0.002 g/1 七水硫酸鋅(ZnSO4.7H20)0.05 g/1 生物素(Biotine)0.002 g/1 一水硫酸錳(MnSO4.H2O)0.04 g/1 鹽酸(HCl 37%)1.25 ml/1 谷氨酸鈉(Glutamate de Na)5.0 g/1。
2.根據權利要求1所述的一種大腸桿菌高密度培養的培養基，其特征是在分批發酵模式下單獨用于大腸桿菌工程菌的高密度發酵培養。
3.根據權利要求1所述的一種大腸桿菌高密度培養的培養基，其特征是在補料-分批發酵模式下，與補料培養基聯用，可用大腸桿菌工程菌高密度發酵培養。
全文摘要
本發明一種大腸桿菌高密度培養的培養基屬于生物領域，本發明的批培養基每升包含有下列配比組分酵母提取物5.00g/L，甘油7.75ml/L，硫酸銨3.0g/L，磷酸氫二鈉6.0g/L，磷酸二氫鉀3.0g/L，檸檬酸1.7g/L，硫酸鎂1.2g/L，培養基用1Mol/LNaOH等堿性溶液調pH值至6.8。補料培養基每升包含有下列配比組分酵母提取物40g/l；甘油631g/l；二水鉬酸鈉0.02g/l；七水硫酸鎂2.0g/l；五水硫酸銅0.007g/l；二水氯化鈣0.665g/l；六水氯化鈷0.007g/l；六水氯化鐵0.20g/l；硼酸0.002g/l；七水硫酸鋅0.05g/l；生物素 0.002g/l；一水硫酸錳0.04g/l；鹽酸1.25ml/l；谷氨酸鈉5.0g/l。本發明的培養基能顯著提高大腸桿菌工程菌發酵密度，同時不降低每單位菌體蛋白表達量。提高目的蛋白表達總量，可減少試劑的消耗，節約成本。
文檔編號C12R1/19GK103184172SQ201110454300
公開日2013年7月3日 申請日期2011年12月30日 優先權日2011年12月30日
發明者韋劍, 丘力功, 王燦頂, 孫希海, 蔡小杰 申請人:廣州拜迪生物醫藥有限公司