專利名稱:瓊脂培養基及其制作方法
技術領域:
本發明涉及一種瓊脂培養技術領域,尤其是一種用于腸道致病菌的分離培養的瓊脂培養基及其制作方法。
背景技術:
市場上該產品使用的狀況為目標菌菌落太小不利于觀察,容易造成漏檢現象。 發明內容
本發明的目的就是提供一種瓊脂培養基及其制作方法,通過增加產品的營養物質,提高目標菌的檢出率,解決目標菌菌落小的現象。
為了達到上述設計目的,本發明采用的技術方案如下
一種瓊脂培養基,其組成成分及質量數為每IOOOml營養液中蛋白胨8_12g、 乳糖9-llg、牛肉浸粉4-6g、瓊脂13-17g、氯化鈉4_6g、中國藍0. 025-0. 035g、玫瑰紅酸 0.025-0. 035go
優選地,其組成成分及質量數為每IOOOml營養液中蛋白胨10g、乳糖10g、牛肉浸粉5g、瓊脂15g、氯化鈉5g、中國藍0. 03g、玫瑰紅酸0. 03g。
優選地,所述營養液的主要成分為氨基酸、維生素、生長因子。
一種瓊脂培養基的制作方法,包括以下步驟
1)將蛋白胨10g、乳糖10g、牛肉浸粉5g、瓊脂15g、氯化鈉5g溶解在IOOOml營養液中;
2)混勻后,加熱煮沸充分溶解;
3)調節pH至7. 3 士0. 1,加入中國藍0. 03g、玫瑰紅酸0. 03g。
4)加熱至115°C,并保持15min,冷卻至50°C左右,傾注到一次性無菌塑料平皿中;
5)無菌檢驗后在2V _8°C環境中冷藏備用。
優選地,用1N-10N氫氧化鈉或1N-10N鹽酸溶液調節pH至7. 3 士0. 1。
其原理為工作原理牛肉浸粉與蛋白胨在培養基中作為基礎營養物質提供細菌生長所需的碳源和氮源,氯化鈉維持體系滲透壓平衡,乳糖為可發酵碳源,中國藍和玫瑰紅酸為指示劑,瓊脂為凝固劑。
能分解乳糖的細菌在上面生長產酸使得其菌落的顏色呈藍色,該培養基的選擇性主要表現在細菌是否能利用乳糖產酸而使指示劑顏色發生改變,沙門氏菌和志賀氏菌屬的細菌不能發酵乳糖,因此其菌落的顏色和培養基本色一致,呈半透明狀,大腸菌群類的細菌能利用乳糖產酸,使得其菌落顏色呈藍色。
本發明所述的瓊脂培養基及其制作方法的有益效果是目標菌的單個菌落大小得到了改善,同比國內外同類產品,單個菌落的大小比同類產品的大50%,使目標菌更加容易觀察,解決了漏檢的問題。菌落大小優勝于國內外同類產品;標本判讀結果的時間比同類產品更短。
具體實施方式
實施例1、
一種瓊脂培養基,其組成成分及質量數為每IOOOml營養液中蛋白胨Sg、乳糖 9g、牛肉浸粉4g、瓊脂17g、氯化鈉6g、中國藍0. 035g、玫瑰紅酸0. 035g。
實施例2
一種瓊脂培養基,其組成成分及質量數為每IOOOml營養液中蛋白胨12g、乳糖 llg、牛肉浸粉6g、瓊脂13g、氯化鈉4g、中國藍0. 025g、玫瑰紅酸0. 025g。
實施例3
一種瓊脂培養基,其組成成分及質量數為每IOOOml營養液中蛋白胨10g、乳糖 log、牛肉浸粉5g、瓊脂15g、氯化鈉5g、中國藍0. 03g、玫瑰紅酸0. 03g。
上述實施例中,所述營養液的主要成分為氨基酸、維生素、生長因子。
實施例4
一種瓊脂培養基的制作方法,包括以下步驟
1)將蛋白胨12g、乳糖llg、牛肉浸粉6g、瓊脂13g、氯化鈉4g溶解在IOOOml營養液中;
2)混勻后,加熱煮沸充分溶解;
3)調節pH至7. 3 士0. 1,加入中國藍0. 035g、玫瑰紅酸0. 035g。
4)加熱至115°C,并保持15min,冷卻至50°C左右,傾注到一次性無菌塑料平皿中;
5)無菌檢驗后在2V _8°C環境中冷藏備用。
實施例5
一種瓊脂培養基的制作方法,包括以下步驟
1)將蛋白胨Sg、乳糖9g、牛肉浸粉4g、瓊脂17g、氯化鈉6g溶解在IOOOml營養液中;
2)混勻后,加熱煮沸充分溶解;
3)調節pH至7. 3 士0. 1,加入中國藍0. 025g、玫瑰紅酸0. 025g。
4)加熱至115°C,并保持15min,冷卻至50°C左右,傾注到一次性無菌塑料平皿中;
5)無菌檢驗后在2V _8°C環境中冷藏備用。
實施例6
一種瓊脂培養基的制作方法,包括以下步驟
1)將蛋白胨10g、乳糖10g、牛肉浸粉5g、瓊脂15g、氯化鈉5g溶解在IOOOml營養液中;
2)混勻后,加熱煮沸充分溶解;
3)調節pH至7. 3 士0. 1,加入中國藍0. 03g、玫瑰紅酸0. 03g。
4)加熱至115°C,并保持15min,冷卻至50°C左右,傾注到一次性無菌塑料平皿中;
5)無菌檢驗后在2V _8°C環境中冷藏備用。
上述實施例中,用1N-10N氫氧化鈉或1N-10N鹽酸溶液調節pH至7. 3 士0. 1。
本具體實施方式
只本發明的優選實施例,并不能對本發明進行限定,具體各項權利保護范圍由權利要求書限定。
權利要求
1.一種瓊脂培養基,其特征在于其組成成分及質量數為每IOOOml營養液中蛋白胨8-12g、乳糖9-llg、牛肉浸粉4-6g、瓊脂13-17g、氯化鈉4_6g、中國藍0. 025-0. 035g、玫瑰紅酸 0. 025-0. 035g。
2.根據權利要求1所述的瓊脂培養基,其特征在于其組成成分及質量數為每 IOOOml營養液中蛋白胨10g、乳糖10g、牛肉浸粉5g、瓊脂15g、氯化鈉5g、中國藍0. 03g、 玫瑰紅酸0. 03g。
3.根據權利要求1或2所述的瓊脂培養基,其特征在于所述營養液的主要成分為氨基酸、維生素、生長因子。
4.一種瓊脂培養基的制作方法,其特征在于包括以下步驟1)將蛋白胨10g、乳糖10g、牛肉浸粉5g、瓊脂15g、氯化鈉5g溶解在IOOOml營養液中;2)混勻后,加熱煮沸充分溶解;3)調節pH至7.3士0. 1,加入中國藍0. 03g、玫瑰紅酸0. 03g。4)加熱至115°C,并保持15min,冷卻至50°C左右,傾注到一次性無菌塑料平皿中;5)無菌檢驗后在2°C_8°C環境中冷藏備用。
5.根據權利要求4所述的瓊脂培養基的制作方法,其特征在于用1N-10N氫氧化鈉或 1N-10N鹽酸溶液調節pH至7. 3 士 0. 1。
全文摘要
本發明公開了一種瓊脂培養基,其組成成分及質量數為每1000ml營養液中蛋白胨8-12g、乳糖9-11g、牛肉浸粉4-6g、瓊脂13-17g、氯化鈉4-6g、中國藍0.025-0.035g、玫瑰紅酸0.025-0.035g。其制作方法,1)將蛋白胨10g、乳糖10g、牛肉浸粉5g、瓊脂15g、氯化鈉5g溶解在1000ml營養液中;2)混勻后,加熱煮沸充分溶解;3)調節pH至7.3±0.1,加入中國藍0.03g、玫瑰紅酸0.03g。4)加熱至115℃,并保持15min,冷卻至50℃左右,傾注到一次性無菌塑料平皿中;5)無菌檢驗后在2℃-8℃環境中冷藏備用。
文檔編號C12Q1/10GK102492766SQ20111041409
公開日2012年6月13日 申請日期2011年12月13日 優先權日2011年12月13日
發明者王立超 申請人:江門市凱林貿易有限公司