對小腸有益的營養(yǎng)組合物的制作方法

專利名稱：對小腸有益的營養(yǎng)組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及對改善腸功能有用的組合物，其包 含乳蛋白水解物、源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和糖類。
背景技術(shù)：
近年來不斷増加的生活方式病與飲食習(xí)慣有重要關(guān)系。為了維持并改善健康，必要的營養(yǎng)素的攝取是重要的，為了高效地消化吸收這些營養(yǎng)素，希望維持正常的腸功能。但是在現(xiàn)實(shí)中，生活方式的混亂、不規(guī)則的飲食習(xí)慣、精神障礙如恐懼、悲哀、驚恐等，導(dǎo)致便秘、腹瀉等腸功能異常。此外，這些腸功能異常的持久存在導(dǎo)致腸病和癌癥等疾病的發(fā)生。迄今為止，使用顯示腸功能改善作用的乳酸細(xì)菌，如乳芽孢桿菌(Lactobacillus)和雙歧桿菌(bifidobacteria)等(益生菌)的酸乳和發(fā)酵飲料被廣泛用作食品。此外，可幫助腸道內(nèi)的有用微生物増殖的寡糖、膳食纖維等具有腸功能調(diào)節(jié)功能的食品也得到了廣泛應(yīng)用。雖然已知這樣的食品具有単獨(dú)地修補(bǔ)腸內(nèi)環(huán)境的作用，但它們不大可能具有促進(jìn)小腸絨毛生長/修復(fù)的功能，人們希望開發(fā)具有如此功能的食品。從臨床觀點(diǎn)看，減少小腸功能表面積的病理狀況可以是腸切除術(shù)、放射、腸道缺血或外傷，克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎等。對于這些病理狀態(tài)而言，對損傷的小腸粘膜的修復(fù)以及提高代償機(jī)能的治療是必要的。為此目的，已知特定的營養(yǎng)素如谷氨酰胺、n-3型多不飽和脂肪酸、以及鋅等是重要的。通過腸道腔補(bǔ)充/施用營養(yǎng)素對于促進(jìn)腸的代謝響應(yīng)性如代謝/內(nèi)分泌順應(yīng)能力和小腸粘膜的増殖/修復(fù)能力是必要的，而膽汁/胰液分泌等生理腸內(nèi)容物的通過是前提。營養(yǎng)可通過靜脈高營養(yǎng)、高熱量輸注、或胃腸道外全面營養(yǎng)來提供，但這些措施常常導(dǎo)致小腸粘膜萎縮，從而進(jìn)一歩降低腸功能。因此，人們希望開發(fā)對腸道有益的藥劑或食品。已經(jīng)開發(fā)了多種經(jīng)腸營養(yǎng)食品，并且已經(jīng)開發(fā)了含有膳食纖維并具有腸功能調(diào)節(jié)作用的食品。然而，尚未開發(fā)出可用于維持/改善腸功能，如促進(jìn)小腸絨毛生長和增加固有肌層厚度的藥劑或綜合營養(yǎng)食品。現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)[專利文獻(xiàn)][專利文獻(xiàn)1]W0 2004/047556[專利文獻(xiàn)2]日本特開(JP-A)2004-99563 (公開未審查的日本專利申請)

發(fā)明內(nèi)容
[發(fā)明要解決的問題]本發(fā)明的ー個(gè)目的是提供可用于維持/改善腸功能的組合物。或者，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供用于促進(jìn)小腸絨毛生長的組合物，用于增加小腸固有肌層厚度的組合物，用于改善腸功能的組合物，用于防止小腸組織損傷的組合物，和抗炎組合物。[解決問題的手段]本發(fā)明的發(fā)明人利用ConA誘發(fā)肝炎的小鼠模型制備了普通液體飲食和本發(fā)明的營養(yǎng)組合物的攝取組的組織樣品，并檢查了小腸組織損傷以及小腸和脾中的細(xì)胞因子產(chǎn)生。對于細(xì)胞因子，除了產(chǎn)生TNF-α和IL-6之外，還調(diào)查了趨化因子MCP-I的產(chǎn)生。結(jié)果，在攝取本發(fā)明的營養(yǎng)組合物的組中，確認(rèn)了抑制小腸和脾中MCP-I和IL-6的產(chǎn)生增加，以及抑制血漿和肝臟中細(xì)胞因子產(chǎn)生的増加的效果。此外，發(fā)現(xiàn)小腸組織的損傷減少(實(shí)施例I和2)。根據(jù)這些結(jié)果，本發(fā)明的發(fā)明人猜測本發(fā)明的營養(yǎng)組合物的攝取給腸道帶來了某種改變，于是測量了正常大鼠在攝取2周后小腸和大腸的重量。此外，制備并評價(jià)了小腸組織的樣品。結(jié)果，小腸和大腸的重量顯示出明顯的增加。此外，與對照組相比，對小腸組織的評價(jià)未顯示絨毛數(shù)的差異，但絨毛的平均長度和固有肌層的厚度顯示出比對照組明顯更高的值。這些結(jié)果顯示存在針對小腸損傷的保護(hù)作用，以及促進(jìn)肌層以及小腸粘膜上皮生長的作用(實(shí)施例3)。此外，本發(fā)明的發(fā)明人使用吲哚美辛誘發(fā)的小腸損傷大鼠模型，針對普通液體飲食或本發(fā)明的營養(yǎng)組合物的攝取組考察了腸道透過性指示物酚磺酞的尿排泄速率。此外，除了一般血液檢查，還考察了細(xì)菌向肝和腸系膜淋巴結(jié)的移位。結(jié)果，在本發(fā)明的營養(yǎng)組合物的攝取組中，顯示出小腸膜透過性的增強(qiáng)以及細(xì)菌向肝和腸系膜淋巴結(jié)的移位被抑制。此外，一般血液檢查結(jié)果顯示，在營養(yǎng)組合物攝取組中，伴隨著由吲哚美辛施用導(dǎo)致的小腸損傷的血中嗜中性粒細(xì)胞數(shù)和單核細(xì)胞數(shù)增加被抑制。由上述結(jié)果可見，所述營養(yǎng)組合物的攝取可保護(hù)腸道，并具有針對如非留類抗炎劑等藥劑抑制小腸損傷的效果。它還可以有效地預(yù)防腸病癥所致的細(xì)菌移位而誘發(fā)的感染如敗血癥和肺炎等，以及維持免疫系統(tǒng)于正常狀態(tài)(實(shí)施例4)。此外，本發(fā)明的發(fā)明人使用了 ConA誘發(fā)肝炎的小鼠模型來考察所得的營養(yǎng)組合物的肝炎抑制作用以及腸功能維持涉及哪些組分，以及它對小腸損傷的保護(hù)作用。結(jié)果顯示，乳清蛋白質(zhì)水解物、異麥芽酮糖及夸克(quark)涉及腸功能的維持(實(shí)施例5)。此外，顯示乳清蛋白質(zhì)水解物和夸克主要涉及肝炎抑制作用(實(shí)施例6)?；谶@些發(fā)現(xiàn)，本申請?zhí)峁┫率霭l(fā)明[I] 一種用于促進(jìn)小腸絨毛生長的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類；[2] [I]的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[3] [I]或[2]的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪；[4] 一種用于増加小腸固有肌層厚度的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類；[5] [4]的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[6] [4]或[5]的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪；[7] 一種用于改善腸功能的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類；
[8] [7]的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[9] [7]或[8]的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪；[10] 一種用于防止小腸組織損傷的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類；[11] [10]的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)JL清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物( WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[12] [10]或[11]的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪；[13] ー種抗炎組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類；[14] [13]的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)JL清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[15] [13]或[14]的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪；[16] 一種用于促進(jìn)小腸絨毛生長的方法，其包括施用包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物的步驟；[17] 一種用于増加小腸固有肌層的厚度的方法，其包括施用包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物的步驟；[18] 一種用于改善腸功能的方法，其包括施用包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物的步驟；[19] 一種用于防止小腸組織損傷的方法，其包括施用包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物的步驟；[20] 一種用于抑制炎癥的方法，其包括施用包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物的步驟；[21]包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物在制備用于促進(jìn)小腸絨毛生長的組合物中的用途；[22]包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物在制備用于増加小腸固有肌層的厚度的組合物中的用途；[23]包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物在制備用于改善腸功能的組合物中的用途；[24]包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物在制備用于防止小腸組織損傷的組合物中的用途；[25]包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物在制備抗炎組合物中的用途；[26]包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物，供用于促進(jìn)小腸絨毛生長的方法中使用；
[27]包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物，供用于增加小腸固有肌層的厚度的方法中使用；[28]包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物，供用于改善腸功能的方法中使用；[29]包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物，供用于防止小腸組織損傷的方法中使用；[30]包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物，供用于抑制炎癥的方法中使用；[31] 一種用于改善腸功能的組合物，其包含源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)；[32] 一種用于改善腸功能的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)，以及異麥芽酮糖作為糖類；[33] [32]的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[34] [31]至[33]中任一項(xiàng)的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪；[35] 一種用于防止小腸組織損傷的組合物，其包含源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)；[36] 一種用于防止小腸組織損傷的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)，以及異麥芽酮糖作為糖類；[37] [36]的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[38] [35]至[37]中任一項(xiàng)的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪；[39] ー種抗炎組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)；[40] [39]的組合物，其還包含異麥芽酮糖作為糖類；[41] [39]或[40]的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β_乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[42] [39]至[41]中任一項(xiàng)的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪；[43] 一種用于改善腸功能的方法，其包含施用包含源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)的組合物的步驟；[44] 一種用于改善腸功能的方法，其包括施用包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物的步驟；[45] [44]的方法，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[46] [43]至[45]中任ー項(xiàng)的方法,其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪；[47] 一種用于防止小腸組織損傷的方法，其包含施用包含源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)的組合物的步驟；[48] 一種用于防止小腸組織損傷的方法，其包括施用包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物的步驟；[49] [48]的方法，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[50] [47]至[49]中任ー項(xiàng)的方法,其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪；[51] 一種用于抑制炎癥的方法，其包括施用包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)的組合物的步驟；[52] [51]的方法，其中所述組合物還包含異麥芽酮糖作為糖類；[53] [51]或[52]的方法，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β_乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[54] [51]至[53]中任ー項(xiàng)的方法,其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪；[55]源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)在制備用于改善腸功能的組合物中的用途；[56]乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類在制備用于改善腸功能的組合物中的用途；[57] [56]的用途，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[58] [55]至[57]中任ー項(xiàng)的用途，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪；[59]源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)在制備用于防止小腸組織損傷的組合物中的用途；[60]乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類在制備用于防止小腸組織損傷的組合物中的用途；[61] [60]的用途，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[62] [59]至[61]中任ー項(xiàng)的用途，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪；[63]包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)的組合物在制備抗炎組合物中的用途；
[64] [63]的用途，其中所述組合物還包含異麥芽酮糖作為糖類；[65] [63]或[64]的用途，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[66] [63]至[65]中任ー項(xiàng)的用途，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪； [67] ー種包含源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)的組合物，供用于改善腸功能的方法中使用；[68]包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物，供用于改善腸功能的方法中使用；[69] [68]的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[70] [67]至[69]中任一項(xiàng)的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪；[71]包含源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)的組合物，供用于防止小腸組織損傷的方法中使用；[72]包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類的組合物，供用于防止小腸組織損傷的方法中使用；[73] [72]的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白；[74] [71]至[73]中任一項(xiàng)的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪；[75]包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)的組合物，供用于抑制炎癥的方法中使用；[76] [75]的組合物，其還包含異麥芽酮糖作為糖類；[77] [75]或[76]的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β_乳球蛋白、和乳鐵蛋白；和[78] [75]至[77]中任一項(xiàng)的組合物，其中源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪。附圖
簡要說明圖I呈現(xiàn)了比較小腸面積的圖。圖2顯示小腸組織病理學(xué)圖像的照片(蘇木精-曙紅染色)。圖3顯示正常小腸組織的照片(H-E染色，χ150放大)。圖4呈現(xiàn)顯示PSP尿排出速率的圖。平均值土 SE, Student氏t檢驗(yàn)(第O天η=9 ;第 2 天η = 9-10,第 4 天η = 9-10,第 8 天η = 8)。圖5呈現(xiàn)顯示在施用吲哚美辛后在肝臟(上圖)和腸系膜淋巴結(jié)(下圖)中檢測到的細(xì)菌計(jì)數(shù)。平均值土 SE, Student氏t檢驗(yàn)；* :p < O. 05 (第O天η = 6,第4天η =8-9,第 8 天η = 8)。圖6呈現(xiàn)顯示在施用吲哚美辛后血液嗜中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞計(jì)數(shù)的改變的圖。平均值土 SE, Student 氏 t 檢驗(yàn):p < O. 05 (第 8 天η = 7-8)。圖7呈現(xiàn)顯不在施用刀 球蛋白A 24小時(shí)后小腸(上圖)和續(xù)毛(下圖)的重量的圖。平均值土 SD，Scheffe檢驗(yàn)；* p < O. 05 (η = 8-10)。SF :普通液體飲食；ND :營養(yǎng)組合物；-p :營養(yǎng)組合物-乳清蛋白質(zhì)水解物；-p-i :營養(yǎng)組合物-乳清蛋白質(zhì)水解物-異麥芽酮糖；以及-P-I-Q :營養(yǎng)組合物-乳清蛋白質(zhì)水解物-異麥芽酮糖-夸克。圖8呈現(xiàn)顯示在施用刀豆球蛋白A 8小時(shí)后血漿中AST和ALT活性的圖。平均值土 SE, Mann-Whitney 檢驗(yàn)；* p < O. 05 (η = 5-9)。發(fā)明的實(shí)施方式本發(fā)明提供用于促進(jìn)小腸絨毛生長的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)，油脂作為脂質(zhì)，以及異麥芽酮糖作為糖類。小腸絨毛的生長促進(jìn)小腸上皮細(xì)胞的 増殖。此外，小腸絨毛的生長被認(rèn)為可促進(jìn)營養(yǎng)素的吸收或小腸損傷的修復(fù)。因此，本發(fā)明的組合物可用作，例如，“小腸絨毛生長剤”，“小腸上皮細(xì)胞生長剤”，“營養(yǎng)素吸收促進(jìn)剤”，和“小腸損傷修復(fù)促進(jìn)剤”。此外，上述的本發(fā)明的組合物可用于健康個(gè)體的小腸功能改善，營養(yǎng)不良的高齡者的營養(yǎng)改善，呼吸、循環(huán)和代謝系統(tǒng)等嚴(yán)重功能障礙的患者(I⑶患者)的腸功能維持，具有腦/神經(jīng)障礙的吞咽困難患者的營養(yǎng)補(bǔ)給和腸功能維持，用于潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩氏病等慢性腸疾患的腸功能改善和營養(yǎng)狀態(tài)改善，針對慢性阻塞性肺病(COPD)和營養(yǎng)不良的腸功能改善和營養(yǎng)狀態(tài)改善，或者由于抗生素和抗癌劑導(dǎo)致的腸障礙患者如癌癥患者的營養(yǎng)狀態(tài)改善。本發(fā)明提供用于增加小腸固有肌層厚度的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、和異麥芽酮糖作為糖類。小腸固有肌層厚度的増加可促進(jìn)小腸和大腸的蠕動運(yùn)動。此外，小腸固有肌層厚度的増加可促進(jìn)腸調(diào)節(jié)效果。因此，本發(fā)明的組合物可用作，例如，“小腸固有肌層厚度増加齊U”、“腸蠕動運(yùn)動促進(jìn)劑”、和“腸調(diào)節(jié)剤”。此外，上述的本發(fā)明的組合物可用于健康個(gè)體的小腸功能改善，營養(yǎng)不良的高齡者的營養(yǎng)改善，呼吸、循環(huán)和代謝系統(tǒng)等嚴(yán)重功能障礙的患者(I⑶患者)的腸功能維持，具有腦/神經(jīng)障礙的吞咽困難患者的營養(yǎng)補(bǔ)給和腸功能維持，用于潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩氏病等慢性腸疾患的腸功能改善和營養(yǎng)狀態(tài)改善，針對慢性阻塞性肺病(COPD)和營養(yǎng)不良的腸功能改善和營養(yǎng)狀態(tài)改善，以及由于抗生素和抗癌劑導(dǎo)致的腸障礙患者如癌癥患者的營養(yǎng)狀態(tài)改善。本發(fā)明提供用于改善腸功能的組合物，其包含源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)。此外，本發(fā)明提供用于改善腸功能的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、和異麥芽酮糖作為糖類。此外，本發(fā)明提供用于改善腸功能的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、和異麥芽酮糖作為糖類。改善腸功能是指促進(jìn)被攝食的營養(yǎng)素的消化和吸收，和促進(jìn)通過腸道蠕動而實(shí)現(xiàn)的廢物排泄。腸道功能低下導(dǎo)致屏障破壞(包括腸相關(guān)淋巴樣組織(GALT)脆弱，細(xì)菌移位(BT)、敗血癥等，導(dǎo)致生物防御機(jī)能低下。腸道功能低下導(dǎo)致營養(yǎng)不良，并且誘發(fā)控制生物功能的胃腸道激素和神經(jīng)遞質(zhì)的產(chǎn)生/分泌不良。此外，在本發(fā)明中，“腸”包括“小腸”和“大腸”。因此，本發(fā)明的用于改善腸功能的組合物具有促進(jìn)消化和吸收的功能或者腸調(diào)節(jié)功能，可用作，例如，“腸功能改善剤”，“消化和吸收促進(jìn)剤”，“抗氣脹藥”，“廢物排泄促進(jìn)劑”，和“腸免疫改善剤”。
所謂腸免疫，是指在腸道中發(fā)生的免疫應(yīng)答。免疫應(yīng)答也稱免疫學(xué)應(yīng)答。當(dāng)抗原(非自身的)進(jìn)入活體吋，活體產(chǎn)生與該抗原特異性反應(yīng)的抗體或者具有特異性免疫功能的淋巴細(xì)胞(致敏淋巴細(xì)胞)，并且誘導(dǎo)多種多祥的生物學(xué)反應(yīng)。響應(yīng)于抗原的侵入而發(fā)生的一系列生物學(xué)反應(yīng)稱為免疫應(yīng)答。由于消化道是容易接觸外來異物的部位，淋巴細(xì)胞包圍著以小腸為中心的腸道，而食物中可成為病原體的病毒以及被消化酶降解的外來蛋白被攝入消化道中。腸道是生物體最先進(jìn)化出來以抑制這些物質(zhì)吸收的重要的免疫組織。消化道功能低下的ー個(gè)例子是腸免疫障礙。腸免疫障礙意思是清除異物(如從外界進(jìn)入的病毒)(即抗原)，和身體中產(chǎn)生的異常細(xì)胞(如癌細(xì)胞)(即抗原)，以及廢物(即抗原)的免疫應(yīng)答機(jī)能的降低，其可増加腸道中發(fā)生的各種疾病的發(fā)病，并延遲治愈。改善由腸免疫障礙導(dǎo)致的這些癥候稱為改善腸免疫。此外，上述的本發(fā)明的組合物可用于健康個(gè)體的小腸功能改善，營養(yǎng)不良的高齡者的營養(yǎng)改善，呼吸、循環(huán)和代謝系統(tǒng)等嚴(yán)重功能障礙的患者(ICU患者)的腸功能維持，具 有腦/神經(jīng)障礙的吞咽困難患者的營養(yǎng)補(bǔ)給和腸功能維持，用于潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩氏病等慢性腸疾患的腸功能改善和營養(yǎng)狀態(tài)改善，針對慢性阻塞性肺病(COPD)和營養(yǎng)不良的腸功能改善和營養(yǎng)狀態(tài)改善，或者由于抗生素和抗癌劑導(dǎo)致的腸障礙患者如癌癥患者的營養(yǎng)狀態(tài)改善。本發(fā)明提供用于防止小腸組織損傷的組合物，其包含源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)。此外，本發(fā)明提供一種用于防止小腸組織損傷的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、和異麥芽酮糖作為糖類。此外，本發(fā)明提供ー種用于用于防止小腸組織損傷的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類。所謂小腸組織損傷，是指由于腸道中發(fā)生癌癥、潰瘍等，或者由于癌癥患者的抗生素、抗癌劑等的攝入而導(dǎo)致的絨毛、粘膜固有肌層等組織的破壞而產(chǎn)生的損傷。上述的本發(fā)明的組合物用于防止這樣的小腸組織損傷。在本申請中，術(shù)語“損傷"(damage)廣義地用于指“機(jī)能發(fā)揮不充分”、“外部傷害”，和“受傷害”。上述的本發(fā)明的組合物具有絨毛修復(fù)促進(jìn)作用和粘膜固有肌層修復(fù)促進(jìn)作用，可以用作，例如，“小腸組織的損傷防止劑” “絨毛的修復(fù)促進(jìn)劑”、和“粘膜固有肌層的修復(fù)促進(jìn)剤”。此外，上述的本發(fā)明的組合物可用于潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩氏病等慢性腸疾患的腸功能改善和營養(yǎng)狀態(tài)改善，以及由于抗生素和抗癌劑導(dǎo)致的腸障礙患者如癌癥患者的營養(yǎng)狀態(tài)改善。本發(fā)明提供抗炎組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類。此外，本發(fā)明提供抗炎組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)。本發(fā)明抗炎組合物針對慢性腸疾病如潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩氏病具有抗炎作用。所謂抗炎作用，是指抑制炎癥細(xì)胞因子和產(chǎn)生以及涉及單核細(xì)胞和T細(xì)胞浸潤入組織的MCP-I的產(chǎn)生，從而抑制炎癥的持續(xù)和進(jìn)展的作用。MCP-I又稱為單核細(xì)胞趨化和活化因子(MCAF)，是作為一種單核細(xì)胞趨化因子被發(fā)現(xiàn)的。就針對單核細(xì)胞的活性而言，已經(jīng)闡明其不但可增強(qiáng)趨化作用，而且還扮演單核細(xì)胞活化因子的角色，例如增強(qiáng)抗腫瘤活性和溶酶體酶類及活性氧種類的釋放，以及誘導(dǎo)IL-I和IL-6的產(chǎn)生。除了單核細(xì)胞的活性，MCPl還具有誘導(dǎo)嗜堿性粒細(xì)胞釋放化學(xué)遞質(zhì)的活性，以及T細(xì)胞趨化活性。在生物體中的多種細(xì)胞中在細(xì)胞炎癥細(xì)胞因子和LPS刺激下發(fā)現(xiàn)MCP-I的產(chǎn)生和分泌，這些細(xì)胞典型地是單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、或血管內(nèi)皮細(xì)胞，此外，在特定的腫瘤細(xì)胞中觀察到MCP-I的組成性生成(不是其他刺激因子所致)?；谄駷橹沟难芯砍晒?，MCP-I被認(rèn)為參與了多種炎性疾病中單核細(xì)胞和T細(xì)胞的組織浸潤，如動脈硬化、遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、和肺病等。本發(fā)明的抗炎組合物具有抗炎作用或減輕組織損傷的作用，可用作，例如“抗炎剤”和“組織損傷減輕剤”。
此外，上述的本發(fā)明的組合物可用于呼吸、循環(huán)和代謝系統(tǒng)等嚴(yán)重功能障礙的患者(I⑶患者)的腸功能維持，具有腦/神經(jīng)障礙的吞咽困難患者的營養(yǎng)補(bǔ)給和腸功能維持，用于潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩氏病等慢性腸疾患的腸功能改善和營養(yǎng)狀態(tài)改善，針對慢性阻塞性肺病(COPD)和營養(yǎng)不良的腸功能改善和營養(yǎng)狀態(tài)改善，或者由于抗生素和抗癌劑導(dǎo)致的腸障礙患者如癌癥患者的營養(yǎng)狀態(tài)改善。下面對上述各種本發(fā)明組合物中所含的活性成分進(jìn)行綜述。本發(fā)明的組合物包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)。本發(fā)明的乳蛋白水解物的例子包括酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC，又稱全乳蛋白質(zhì)=TMP)、乳清、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α -乳白蛋白(α -La)、β -乳球蛋白(β -Lg)、和乳鐵蛋白水解物。關(guān)于乳蛋白質(zhì)的定義、分類和生產(chǎn)方法,參見Japan Food Science, 1989年7月，pp. 42-48 等，或“ Miruku Sogo Jiten (乳類綜合辭典)”，1992 年 I 月 20 日，Yamauchi K.和Yokoyama K.編，Asakura Shoten 出版。酪蛋白是牛乳等中的主要蛋白質(zhì)，是ー種共價(jià)結(jié)合著磷酸的磷蛋白。牛乳中含酪蛋白大約3%，人乳中大約為O. 9%，且占牛乳中蛋白質(zhì)的大約80%。同時(shí)，乳清是例如從牛乳除去脂肪、酪蛋白脂溶性維生素等之后剰余的水溶性組分。乳清一般指在生產(chǎn)天然乳酪(natural cheese)或凝乳乳酪(rennet casein)時(shí)可作為副產(chǎn)物獲得的乳清(cheese whey)和凝乳乳清(rennet whey)(又稱甜乳清)，或者指從脫脂乳(skim milk)生產(chǎn)酸性酪蛋白(acid casein)或夸克(quark)時(shí)獲得的酪蛋白乳清(casein whey)或夸克乳清(quark whey)(又稱酸乳清)。乳清的主要成分是蛋白質(zhì)(α -乳白蛋白、β -乳球蛋白等)、乳糖、水溶性維生素、以及鹽(礦物質(zhì)組分)，各自的特征已經(jīng)作為牛乳的成分而非乳清的成分的研究中得到了闡明。乳清蛋白質(zhì)是對例如牛乳中除酪蛋白之外的蛋白質(zhì)的總稱。乳清蛋白質(zhì)由多種組分構(gòu)成，如α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳鐵蛋白等，而不包括乳糖、維生素、礦物質(zhì)等。當(dāng)乳源如牛乳被調(diào)整為酸性時(shí)，沉淀出的蛋白質(zhì)是酪蛋白，而不沉淀的蛋白質(zhì)是乳清蛋白質(zhì)?！叭榍尻P(guān)聯(lián)制品”的例子包括通過濃縮乳清產(chǎn)生的濃縮乳清；通過干燥乳清產(chǎn)生的乳清粉；通過利用超濾(UF)法等濃縮乳清的主要蛋白質(zhì)，然后進(jìn)行干燥處理而產(chǎn)生的乳清蛋白質(zhì)濃縮物(下面也稱為“WPC”)；通過利用微濾(MF)法或離心法從乳清中去除脂肪，然后利用UF法和干燥處理進(jìn)行濃縮而生產(chǎn)的脫脂WPC (低脂肪，高蛋白);通過對乳清的主要蛋白質(zhì)進(jìn)行離子交換樹脂法或凝膠過濾法選擇性分級處理，然后干燥處理而產(chǎn)生的乳清蛋白分離物(下文又稱“WPI”)；通過利用納濾(NF)法和電滲析法進(jìn)行脫鹽處理，然后干燥處理而產(chǎn)生的脫鹽乳清；和通過將源自乳清的礦物質(zhì)組分進(jìn)行沉淀處理，然后通過離心法等進(jìn)行濃縮處理而產(chǎn)生的礦物質(zhì)濃縮乳清。在它們之中，含有以干重(固形物含量)計(jì)15% -80%的乳蛋白的WPC于1998年3月30日根據(jù)關(guān)于乳品的省令的部分修改被定義為蛋白質(zhì)濃縮的乳清粉，井分類為乳制品(濃縮乳清、乳清粉、WPC和乳清蛋白質(zhì)濃縮粉，只要其經(jīng)過了關(guān)于乳品的省令中規(guī)定的生產(chǎn)步驟，而與有無脫鹽步驟無關(guān))此外，像WPC和WPI —祥，通過利用MF法或UF法濃縮脫脂乳然后干燥處理而產(chǎn)生的乳蛋白濃縮物(以下也縮寫為“MPC”)所含的乳糖、鹽等的含量降低，而酪蛋白和乳清蛋白質(zhì)的含量相對升高。
濃縮處理可以使用普通的裝置和方法，例如可使用這樣的方法利用真空蒸發(fā)器、真空釜、上升式薄膜管狀濃縮器、下降式薄膜管狀濃縮器、平板型濃縮器等等在減壓下加熱。此外，干燥處理也可以使用普通的裝置和方法，例如可以使用噴霧干燥法、轉(zhuǎn)鼓干燥法、冷凍干燥法、真空(減壓)干燥法。生產(chǎn)乳蛋白濃縮物(MPC)的標(biāo)準(zhǔn)方法描述如下(I)將脫脂乳進(jìn)行膜分離然后濃縮脫脂乳的步驟；或(2)將脫脂乳進(jìn)行膜分離然后濃縮并干燥脫脂乳的步驟。乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)是通過利用超濾(UF)法等濃縮乳清的主要蛋白質(zhì)，然后進(jìn)行干燥處理而獲得的物質(zhì)。一般地，它是這樣的物質(zhì)的總稱其中約25%或更多的固形內(nèi)容物是乳清蛋白質(zhì)。它們可以通過降低乳清中的乳糖和鹽以將相對乳清蛋白質(zhì)含量堤高到固形內(nèi)容物的大約25%-80%來獲得。具體地，根據(jù)關(guān)于乳品的省令，將含有干重的15% -80%的乳蛋白的WPC定義為蛋白質(zhì)濃縮的乳清粉。生產(chǎn)乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)的標(biāo)準(zhǔn)方法描述如下(I)將乳清進(jìn)行膜分離然后進(jìn)行濃縮的步驟；或(2)將乳清進(jìn)行膜分離然后進(jìn)行濃縮和干燥的步驟。濃縮處理可以使用普通的裝置和方法，例如可使用這樣的方法利用真空蒸發(fā)器、真空釜、上升式薄膜管狀濃縮器、下降式薄膜管狀濃縮器、平板型濃縮器等等在減壓下加熱。此外，干燥處理也可以使用普通的裝置和方法，例如可以使用噴霧干燥法、轉(zhuǎn)鼓干燥法、冷凍干燥法、真空(減壓)干燥法。乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)是ー種能夠通過利用離子交換樹脂法或電滲析法濃縮乳清的主要蛋白質(zhì)，然后進(jìn)行干燥而獲得的物質(zhì)。一般地，WPI是這樣的物質(zhì)的總稱其中固形內(nèi)容物的大約85%至95%是乳清蛋白質(zhì)。它們可以通過降低乳清中的乳糖、鹽等以將相對乳清蛋白質(zhì)含量提高到固形內(nèi)容物的大約90% (85% -95% )來獲得。生產(chǎn)乳清蛋白質(zhì)分離物(WPC)的標(biāo)準(zhǔn)方法描述如下(I)將乳清進(jìn)行膜分離、離子交換樹脂處理、或電滲析處理，然后進(jìn)行濃縮的步驟；或(2)將乳清進(jìn)行膜分離、離子交換樹脂處理、或電滲析處理，然后進(jìn)行濃縮和干燥的步驟。
濃縮處理可以使用普通的裝置和方法，例如可使用這樣的方法利用真空蒸發(fā)器、真空釜、上升式薄膜管狀濃縮器、下降式薄膜管狀濃縮器、平板型濃縮器等等在減壓下加熱。此外，干燥處理也可以使用普通的裝置和方法，例如可以使用噴霧干燥法、轉(zhuǎn)鼓干燥法、冷凍干燥法、真空(減壓)干燥法。對于本發(fā)明的乳蛋白水解物，正常情況下用于水解乳清蛋白質(zhì)的酶為例如胃蛋白酶、胰蛋白酶、和糜蛋白酶。然而也有將植物來源的木瓜蛋白酶以及細(xì)菌和真菌來源的蛋白酶用于研究的報(bào)道(Food Technol. ,48 :68-71,1994 ；Trends Food Sci. Technol.,7 :120-125,1996 ;Food Proteins and Their Applications :pp. 443-472,1997)。乳清蛋白質(zhì)水解酶活性差異很大。胃蛋白酶降解已變性的α-La和α-La，但不能降解天然m β-Lg(Neth. Milk dairy J.，47 :15-22，1993)。胰蛋白酶緩慢水解 α-La 但很難降解β-Lg(Neth. Milk dairy J. ,45 :225_240，1991)。糜蛋白酶快速降解 α-La，然而降解 β-Lg緩慢。木瓜蛋白酶水解牛血清白蛋白(BSA)和β-Lg,但α-La對其顯示抗性(Int. DairyJournal 6 :13-31,1996a)。然而,在酸性pH條件下,未結(jié)合Ca的α-La被木瓜蛋白酶完全降解(J. Dairy Sci. ,76 :311-320,1993) 通過控制乳蛋白的酶學(xué)降解以修飾該蛋白，可以在較寬pH范圍和處理?xiàng)l件下改變該蛋白的功能性特征(Enzyme and Chemical Modification of proteins in Foodproteins and their Applications pp.393-423,1997 Marcel DeKker, Inc., New York,1997 ；Food Technol. ,48 :68-71，1994)。肽鏈的水解增加帶電基團(tuán)的數(shù)目和疏水性，減小分子量，并且改變分子構(gòu)型(J. Dairy Sci. ,76 =311-320,1993) 0功能性特征的變化很大程度上依賴于水解程度。通常所觀察到的乳清蛋白質(zhì)功能的最大變化是溶解性増加和粘性減小。通常，在水解程度較高時(shí)，水解物不發(fā)生沉淀，即使在加熱情況下也是如此，在3. 5-4. O的pH值條件下高度可溶。水解物也具有比完整蛋白質(zhì)低得多的粘性。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)濃度高時(shí)這種差異尤其明顯。其他的效應(yīng)包括膠凝特性改變、熱穩(wěn)定性増加、乳化和泡沫化能力增強(qiáng)、乳液和泡沫穩(wěn)定性降低(Int. Dairy journal,6 :13-31,1996a ；Dairy Chemistry 4, pp. 347-376,1989 ；J. DairySci. ,79 :782-790,1996)。已經(jīng)知道多種源于乳蛋白的生物活性寡肽((Yoshikawa, M, " New Horizon inMilk Science" ,Yoshikawa,M. ed. ,pp. 188-195,Kougaku Shuppan, 1998 ；0tani,H., " NewHorizon in Milk Science" ,Yoshikawa,M. ed. ,pp. 97-99,Kougaku Shuppan, 1998 ;Otani,H. , Milk Science,47 :183,1998 ；Trends in Food Science and Technology,9 :307-319,1998)。一個(gè)這樣的例子是具有血管緊縮素轉(zhuǎn)換酶(ACE)抑制劑活性(高血壓效應(yīng))的肽。有ー些關(guān)于多種可能具有ACE抑制活性的肽的報(bào)道，這些報(bào)道是通過體外檢測來推測的(例如，J.Dairy Res. ,67 :53-64,2000 ；Br. J. Nutr. ,84 :S33_S37，2000)。也有一些采用不同層析技術(shù)純化和鑒定源于水解物的ACE抑制性肽的研究報(bào)告(for example,Maruyama, S. , & Suzuki, Η. , Agricultural and Biological Chemistry,46 1393-1394,1982 ；Miyoshi S.etaI. , Agri.Biol.Chem. ,55 :1313-1318, 1991 ；Food Science andBiotechnology, 8 :172-178,1999 ；Biosci.Biotech. Biochem. ,57 :922-925,1993)。根據(jù)這些報(bào)道，認(rèn)為ACE抑制活性存在于使用基于柱的分離而獲得的許多分級成 分中。因此，ACE抑制性物質(zhì)的分子特征是多種多樣的。事實(shí)上，發(fā)現(xiàn)ACE抑制可見于多種蛋白質(zhì)、蛋白酶以及在水解條件下產(chǎn)生的水解物。這個(gè)事實(shí)提示，具有不同氨基酸序列的多種肽都可能具有ACE抑制活性。由于這些肽的化學(xué)多祥性，使用層析法純化水解物經(jīng)常伴隨著一部分活性肽的損失。在水解過程中，ACE抑制活性不斷地產(chǎn)生和降解。當(dāng)這兩種進(jìn)程達(dá)到最優(yōu)化時(shí)，獲得最大的水解物活性。ACE抑制活性通過測定所有的水解物肽組合物來獲得，它依賴于水解酶的特異性和處理?xiàng)l件。有ー篇報(bào)道涉及乳清蛋白質(zhì)水解物最優(yōu)化(采用表面響應(yīng)方法學(xué)，responsesurface methodology)以使ACE抑制活性最大化并且使所需的水解保持在最小程度(International Dairy Journal 12:813-820,2002)。本發(fā)明中使用的乳蛋白水解物具有抑制LPS誘導(dǎo)的TNF-α和IL_6的體內(nèi)產(chǎn)生的作用。因此，以對LPS誘導(dǎo)的TNF- α和/或IL_6產(chǎn)生的抑制效應(yīng)為指示，可以參考上述的文獻(xiàn)來優(yōu)化乳蛋白水解的條件(變性溫度、pH、溫度、水解時(shí)間和酶/底物比)(InternationalDairy Journal 12:813-820,2002)。除了上述引用的文獻(xiàn)，還存在許多有關(guān)乳蛋白水解物的專利(已公布的專利申請和專利)。例子包括涉及酪蛋白和乳清蛋白質(zhì)的分別水解、繼而吸附去除疏水成分、然后將酪蛋白和乳清蛋白質(zhì)以指定比例混合的專利(JP 2，986，764);用來源于芽孢桿菌和放線菌的蛋白酶水解乳清蛋白質(zhì)、繼而去除酶和不溶性水解產(chǎn)物的專利(JP 3, 222,638)；關(guān)于由β_乳白蛋白降解產(chǎn)生的支鏈氨基酸/芳香氨基酸的摩爾比為10%或更高，其中芳香氨基酸少于2.0%，混合物的平均分子量為幾百到幾千的肽混合物的專利(JP3，183，945);有關(guān)乳清蛋白質(zhì)中乳白蛋白的選擇性酶促降解的專利(JP 2，794，305)；使用來自地衣芽孢桿菌(B. Iicheniformis)和/或枯草芽孢桿菌(B. subtilis)的蛋白酶，采用非恒定pH(non-pH-stat)技術(shù)水解乳清蛋白質(zhì)至15% 30% (葡萄糖當(dāng)量；DE),然后獲得截留分子量值大于10，000的超濾膜濾過液的專利(JP 3，167，723)。上述文獻(xiàn)、專利和專利申請中所述的水解物是否抑制LPS誘導(dǎo)的TNF- α和IL_6的生產(chǎn)可以使用已知的檢測系統(tǒng)來測定(如，Experimental Medicine SupplementaryVol. " Bio Manual UP Experiment Series" , Cytokine Experiment Methods,Miyajima,A. , Yamamoto, M. ed. , Yodosha, (1997))。選擇例如預(yù)熱、酶底物比(E/S)、pH、水解溫度和水解時(shí)間作為條件優(yōu)化的五個(gè)參數(shù)。預(yù)熱65-90°CE/S 0. 01-0. 2pH :2-10水解溫度30-65°C水解時(shí)間3小時(shí)至不足20小時(shí)所使用的酶的例子包括下述來自Nova Nordisk的酶I)內(nèi)切蛋白酶地衣芽孢桿菌來源的蛋白酶=Alcalase (注冊■商標(biāo))遲緩芽孢桿菌來源的蛋白酶=Esperase (注冊商標(biāo))枯草芽孢桿菌來源的蛋白酶Neutrase(注冊■商標(biāo))細(xì)菌來源的蛋白酶Protamex (注冊■商標(biāo))
豬胰腺胰蛋白酶PTN (注冊商標(biāo))2)外切蛋白酶米曲霉來源的蛋白酶Flavorzyme (注冊■商標(biāo))豬或牛內(nèi)臟來源的羧肽酶 除上述酶之外的酶的例子包括動物來源的胰酶制劑(pancreastin)、胃蛋白酶、植物來源的木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶(bromeline)、微生物(如,乳桿菌、酵母、霉菌、和分支桿菌)來源的內(nèi)切蛋白酶和外切蛋白酶、以及它們的粗制純化物和細(xì)菌勻漿物。另外，在組合用酶時(shí)也經(jīng)常使用地衣芽孢桿菌來源的Alcalase和豬胰腺來源的PTN(胰蛋白酶)的酶組
ム
ロ ο后述的參考例I的方法是用于制備乳清蛋白質(zhì)水解物的方法的ー個(gè)例子。本發(fā)明中使用的乳蛋白水解物包括本身抑制LPS誘導(dǎo)的TNF-α和/或IL_6產(chǎn)生的酶水解物；超濾后的保留液或透過液；以及顯示類似活性的商品化乳蛋白水解物?？捎糜诒景l(fā)明中的乳清蛋白質(zhì)水解物包括下列實(shí)例。日本特許第3，183，945號公開了ー種乳清蛋白質(zhì)水解物(分子量200 3，000的肽的混合物)，它是通過利用內(nèi)肽酶和外肽酶水解熱變性的乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)，然后利用離子交換樹脂吸附水解物中的芳香氨基酸而制備的。該乳清蛋白質(zhì)水解物的Fischer比為10或更多，支鏈氨基酸含量為15%或更多，且芳香氨基酸含量小于2%。日本專利申請公開特表平6-50756(相應(yīng)于非日文的國際公開的未審查的日本國家階段公開)公開了ー種無氣味、稍有苦味的乳清蛋白質(zhì)水解物。該水解物是如下生產(chǎn)的。將蛋白質(zhì)含量為至少65%的乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)的12%水溶液于60°C或更高的溫度加熱，然后使用源自地衣芽孢桿菌的Alcalase和源自枯草芽孢桿菌的Neutrase水解到15% 35% DH。將該水解物通過截留值高于10，000的超濾(UF)膜，并通過納濾(NF)濃縮，然后將該NF保留溶液噴霧干燥。不受其限制，本發(fā)明中使用的商品化乳蛋白水解物包括，例如，PeptigenIF-3080、Peptigen IF-3090、Peptigen IF-3091 和 Lacprodan DI-3065 (ArlaFoods)、WE80BG (DMV)、Hyprol 3301、Hyprol 8361、Hyprol 8034 (Kerry)、Tatua2016、HMP406 (Tatua) >ffhey Hydrolysate 7050 (Fonterra)、以及 Biozate3 (Davisco)。制備蛋白質(zhì)水解物的方法的ー個(gè)例子是包括下列步驟(I) (5)的乳清蛋白質(zhì)水解物制備方法(I)將以干燥物計(jì)算含至少65%蛋白質(zhì)的乳清蛋白質(zhì)與水混合以產(chǎn)生具有多達(dá)20%的蛋白質(zhì)含量的漿液；(2)加熱到高于60°C的溫度；(3)利用可從地衣芽孢桿菌和/或枯草芽孢桿菌產(chǎn)生的蛋白酶，通過非恒定pH(non-pH-stat)法對來自步驟(2)的混合物進(jìn)行蛋白水解至15% 35% DH ;(4)在具有10，000或更高的截留值的超濾/微濾設(shè)備上將來自步驟(3)的混合物分離，使得透過液構(gòu)成蛋白質(zhì)水解物；和(5)通過將上述酶去活化來停止水解。優(yōu)選地，上述步驟(I)中的漿液具有7% 12%的蛋白質(zhì)含量。優(yōu)選地，上述步驟(2)中的熱處理是在70°C 90°C之間進(jìn)行的。優(yōu)選地，上述步驟(3)中的水解進(jìn)行到20% 30% DH為止。
優(yōu)選地，上述超濾/微濾設(shè)備的截留值是50，000或更高。優(yōu)選地，將上述的步驟(3)或步驟(5)之后獲得的混合物用相對量1% 5% (相對于干燥物質(zhì)含量計(jì)算)的活性炭優(yōu)選在50°C 70°C之間的溫度處理5分鐘以上，然后去除活性炭。優(yōu)選地,在上述步驟(5)之后，將產(chǎn)物通過納濾/超過濾(hyperfiltration)/反滲透，和/或蒸發(fā)優(yōu)選在50°C 70°C之間的溫度進(jìn)行濃縮，然后收集保留的物質(zhì)作為蛋白質(zhì)水解物溶液。優(yōu)選地，將來自上述步驟(5)的蛋白質(zhì)水解物溶液噴霧干燥至水分含量低于6. 5%。
因此，該產(chǎn)生乳清蛋白質(zhì)水解物的方法的特征如下(I)將以干燥物計(jì)算含有至少65%蛋白質(zhì)的乳清蛋白質(zhì)與水混合以產(chǎn)生具有多達(dá)約20%，或優(yōu)選12%的蛋白質(zhì)含量的漿液；(2)加熱到高于60°C的溫度；(3)利用可從地衣芽孢桿菌制備的蛋白酶，優(yōu)選Alcalase (注冊商標(biāo))，和/或可從枯草芽孢桿菌的蛋白酶，優(yōu)選Neutrase (注冊■商標(biāo))通過非恒定pH法對來自步驟(2)的混合物進(jìn)行蛋白水解至15% 35% DH ;(4)在具有10，000或更高的截留值的超濾/微濾設(shè)備上將來自步驟(3)的混合物分離，使得透過液構(gòu)成蛋白質(zhì)水解物；和(5)通過將上述酶去活化來停止水解。該乳清蛋白質(zhì)水解物(IF-3090)的氨基酸組成如表I所示。[表 I]
權(quán)利要求
1.一種用于促進(jìn)小腸絨毛的生長的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類。
2.權(quán)利要求I的組合物，其中乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白。
3.權(quán)利要求I或2的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪。
4.一種用于增加小腸固有肌層厚度的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類。
5.權(quán)利要求4的組合物，其中乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白。
6.權(quán)利要求4或5的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪。
7.一種用于改善腸功能的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、和異麥芽酮糖作為糖類。
8.權(quán)利要求7的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白。
9.權(quán)利要求7或8的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪。
10.一種用于防止小腸組織損傷的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類。
11.權(quán)利要求10的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)IL清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白。
12.權(quán)利要求10或11的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪。
13.一種抗炎組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、油脂作為脂質(zhì)、和異麥芽酮糖作為糖類。
14.權(quán)利要求的13組合物，其中乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白。
15.權(quán)利要求13或14的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪。
16.一種用于改善腸功能的組合物，其包含源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)。
17.一種用于改善腸功能的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類。
18.權(quán)利要求17的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)^L清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白。
19.權(quán)利要求16 18中任一項(xiàng)的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪。
20.一種用于防止小腸組織損傷的組合物，其包含源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)。
21.一種用于防止小腸組織損傷的的組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)、以及異麥芽酮糖作為糖類。
22.權(quán)利要求21的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)^L清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、和乳鐵蛋白。
23.權(quán)利要求20 22中任一項(xiàng)的組合物，其中源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪。
24.一種抗炎組合物，其包含乳蛋白水解物和源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)作為蛋白質(zhì)。
25.權(quán)利要求24的組合物，其還包含異麥芽酮糖作為糖類。
26.權(quán)利要求24或25的組合物，其中所述乳蛋白選自下組酪蛋白、乳蛋白濃縮物(MPC)、乳清蛋白質(zhì)、乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)、乳清蛋白質(zhì)分離物(WPI)、α-乳白蛋白、β -乳球蛋白、和乳鐵蛋白。
27.權(quán)利要求24 26中任一項(xiàng)的組合物，其中所述源自發(fā)酵乳的蛋白質(zhì)來源于新鮮乳酪。
全文摘要
利用小鼠ConA誘發(fā)肝炎模型，針對本發(fā)明的組合物攝取組研究了小腸和脾臟中的細(xì)胞因子產(chǎn)生和小腸損傷。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在本發(fā)明的組合物攝取組中，不但肝臟和血漿中細(xì)胞因子的產(chǎn)生上升被抑制，而且確認(rèn)了小腸、肝臟中的MCP-1和IL-6的產(chǎn)生上升抑制作用，還顯示了小腸的組織損傷的減輕。測定、評價(jià)了攝取本發(fā)明的組合物2周后的正常小鼠的小腸重量和大腸重量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，小腸重量和大腸重量顯示出顯著的增加，絨毛的平均長度和固有肌層的厚度與對照組相比均顯著更高。
文檔編號A23L1/305GK102665750SQ20108004876
公開日2012年9月12日 申請日期2010年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月30日
發(fā)明者山地健人, 粂久枝 申請人:株式會社明治