專利名稱：生物法提取谷胱甘肽過氧化物酶的工藝的制作方法
技術領域：
本發明屬于生物提取領域，尤其涉及一種生物法提取谷胱甘肽 過氧化物酶的工藝。
背景技術：
谷胱甘肽過氧化物酶(GSn-Px)是機體內廣泛存在的一種
重要的過氧化物分解酶。而硒是谷胱甘肽過氧化物酶系的組成成分，它能
催化谷胱甘肽(GSH)變為氧化型谷胱甘肽(GSSG)，使有毒的過氧化物還原
成無毒的羥基化合物，同時促進過氧化氫(H202)的分解，從而保護細胞
膜的結構及功能不受過氧化物的干擾及損害。谷胱甘肽過氧化物酶
(GSH-Px)的活性中心是硒半胱氨酸，其活力大小可以反映機體硒水平。
GSH--Px酶系主要包括4種不同的GSH-Px，分別為胞漿GSI卜Px、血漿
(;Sl卜Px、磷脂氫過氧化物GSH-Px及胃腸道專屬性GSH-Px。胞漿GSH-Px由
4個相同的分子量大小為22kDa的亞基構成四聚體，每個亞基含有1個分
子硒半胱氨酸，廣泛存在于機體內各個組織，以肝臟紅細胞為最多。它的
生理功能主要是催化GSH參與過氧化反應，清除在細胞呼吸代謝過程中產
生的過氧化物和羥自由基，從而減輕細胞膜多不飽和脂肪酸的過氧化作用。 血衆GSH-Px的構成與胞漿GSH-Px相同，主要分布于血漿中，其功能目前
還不是很清楚，但已經證實與清除細胞外的過氧化氫和參與GSH的運輸有 關。磷脂過氧化氫GSH-Px是分子量為20kDa的單體，含有1個分子硒半胱 氨酸。最初從豬的心臟和肝臟中分離得到，主要存在于睪丸屮，其它組織 中也有少量分布。其生物學功能是可抑制膜磷脂過氧化。胃腸道專屬性 GSH-Px是由4個分子量為22kDa的亞基構成的四聚體，只存在于嚙齒類動 物的胃腸道中，其功能是保護動物免受攝入脂質過氧化物的損害。以上說明谷胱甘肽過氧化物酶是機體內不可缺少的成分，而以往的提取方法比較困難，也比較繁瑣，且效果不佳。
發明內容
發明目的本發明提供一種生物法提取谷胱甘肽過氧化物酶的工藝，其目的是為了解決以往的提取谷胱甘肽過氧化物酶的方法困難、繁瑣和效果不佳的問題。
技術方案本發明是通過以下技術方案實現的
一種生物法提取谷胱甘肽過氧化物酶的工藝，其特征在于該工藝采用蓬躉在富硒的苔蘚中培養來進行生物提取。該工藝的具體步驟為
a、 在溫度為8 10°C，陽光照度為3500 4000LUX的環境中，選取厚度為8 15公分的富硒苔蘚作為培養基質；富硒苔蘚所生長的土壤含水量保證在
50% 65%。
b、 將蓬躉的種子按照株距10 15cm，行距為10 15cm的距離埋進a步驟的富硒苔蘚中；
c、 3個月至3個半月以后，釆摘蓬躉的葉片備用；
d、 用水、食鹽和硒精按照質量比為100: 2: l配置成溶液；
e、 用d步驟中的溶液將c歩驟中的葉片在常溫下浸泡10 20分鐘，然后清洗掉葉片上的雜質，烘干，粉碎即可。
a步驟中的環境選擇在秦嶺海拔2700公尺的秦嶺鎮巴縣的山谷中，播種時間選擇在農歷4月上旬的清明節前后。
b步驟中埋種結束后再覆蓋一層草蓮子，待種子出芽后撤除。a步驟中的溫度為10°C，陽光照度為4000LUX，富硒苔蘚的厚度為10公分，富硒苔蘚所生長的土壤含水量在55%; c步驟中的采摘時間為100天。
優點效果本發明提供一種生物法提取谷胱甘肽過氧化物酶的工藝，該工藝主要是通過蓬躉在富硒的苔蘚中生長，從而形成富含谷胱甘肽過氧化物酶的植被，該工藝的具體步驟為a、在溫度為8 10°C，陽光照度為3500 4000LUX的環境中，選取厚度為8 15公分的富硒苔蘚作為培養基質；富硒苔蘚所生長的土壤含水量保證在50% 65%。 b、將蓬躉的種子按照株距10 15cm，行距為10 15cm的距離埋進a步驟的富硒苔蘚中；c、 3個月至3個半月以后，采摘
蓬躉的葉片備用；d、用水、食鹽和硒精按照質量比為100: 2: l配置成溶液；
e、用d歩驟中的溶液將c步驟中的葉片在常溫下浸泡10 20分鐘，然后清洗
掉葉片上的雜質，烘干，粉碎即可；而上述a步驟中的地點，可以是在農用大
棚里模擬出來的環境也可以具體選擇在秦嶺海拔2700公尺的秦嶺鎮巴縣的山
谷中，播種時間選擇在農歷4月上旬的清明節前后，因為秦嶺海拔2700公尺
的秦嶺鎮巴縣的山谷中年平均降雨量在600 800mm之間，可以很好的保證植
物賴以生長的土壤的濕度，且農歷4月上旬的溫度和照度也恰好滿足上述條
件；而且該地區靠近我國的硒都陜西紫陽，所以該地區的硒含量也相當豐富；
所以選擇該地區的苔蘚作為培養基礎非常合適，且該地區的苔蘚面積較大，比
較利于大面積的培養種植，以進行重復生產。
該方法為純生物的原生態提取法，較之化學的提取方法，簡潔易操作，節
省人力和物力，且效果很好，經過直接比色法檢測所采摘的葉片中谷胱甘肽過
氧化物酶的含量在155. 6u 192. 5u /100克左右，基本達到了一個很好的效果。
具體實施例方式下面結合實施例對本發明做進一步的說明本發明提供一種生物法提取谷胱甘肽過氧化物酶的工藝。實施例1:
a、 選擇溫度在8°C，陽光照度為3500LUX的環境中，土壤含水率為50%的環境中，選取厚度為8公分的富硒苔蘚作為培養基質；該環境可以在大棚中模擬，也可以直接選擇在秦嶺海拔2700公尺的秦嶺鎮巴縣的山谷中，播種時間選擇在農歷4月上旬，也就是清明節前后，因為該時段，該地區的環境與本發明所要求的環境比較接近，且該地區的年平均降雨量在600 800mm之間，所以濕度可以滿足要求，且距離我國的硒都陜西紫陽比較近，所以該地區的硒含量也相當豐富，所以該地區的苔蘚也就含有大量的硒，所以選擇該地區的苔蘚作為培養基礎非常合適；而該地區的苔蘚覆蓋面積又相當大，很適合大面積的推廣作業；如果是在大棚中進行實施的，那么就需要經常的對播種后的富硒苔蘚進行定期的灑水，以保證土壤的含水量，進而保證植物有足夠的水分吸收。
b、 將蓬躉的種子按照株間距為10cm，行距為10cm的距離埋進a步驟的苔蘚中；保證行距和株距是為了可以滿足種子生長過程對養分的吸收，以及谷胱甘肽過氧化物酶的充分提取；
c、 3個月以后，采摘蓬躉的葉片備用；這時，該葉片中即已經含有足量
的谷胱甘肽過氧化物酶；
d、 用水50kg、食鹽:1000g和硒精500g配置成溶液；
e、 用d步驟中的溶液將c步驟中的葉片在常溫下浸泡十分鐘，這樣做是為了在徹底清洗葉片的同時，保證葉片內的營養元素不至于流失，然后清洗掉葉片上的雜質，烘干，粉碎即可；
另外，在b步驟中播種結束后，可以覆蓋一層草蓮子，以便為種子進行保溫，待出芽后撤去草蓮子即可。
這時，經直接比色法檢測粉碎后的葉片中含谷胱甘肽過氧化物酶的量為155. 6u/100克。
實施例2:
a、 選擇溫度在9°C，陽光照度為3500LUX的環境中，土壤含水率為55%的環境中，選取厚度為10公分的富硒苔蘚作為培養基質；該環境可以在大棚中模擬，也可以直接選擇在秦嶺海拔2700公尺的秦嶺鎮巴縣的山谷中，播種吋間選擇在農歷4月上旬，也就是清明節前后，因為該時段，該地區的環境與本發明所要求的環境比較接近，且該地區的年平均降雨量在600 800mm之間，所以濕度可以滿足要求，且距離我國的硒都陜西紫陽比較近，所以該地區的硒含量也相當豐富，所以該地區的苔蘚也就含有大量的硒，所以選擇該地區的苔蘚作為培養基礎非常合適；而該地區的苔蘚覆蓋面積又相當大，很適合大面積的推廣作業；如果是在大棚中進行實施的，那么就需要經常的對播種后的富硒苔蘚進行定期的灑水，以保證土壤的含水量，進而保證植物有足夠的水分吸收。
b、 將蓬躉的種子按照間距為10cm、行距為15cm的距離埋進a步驟的苔蘚中；保證行距和株距可以滿足種子生長過程對養分的吸收，以及谷胱甘肽過氧化物酶的充分提取；
c、 100天以后，采摘蓬躉的葉片備用；這時，該葉片中即已經含有足量的谷胱甘肽過氧化物酶；該葉片的采摘可以一直持續到12月末；
d、 用水50kg、食鹽1000g和硒精500g配置成溶液；
e、 用d歩驟中的溶液將c步驟中的葉片在常溫下浸泡15分鐘，這樣做是為了在徹底清洗葉片的同時，保證葉片內的營養元素不至于流失，然后清洗掉葉片上的雜質，烘干，粉碎即可；
另外，在b步驟中播種結束后，可以覆蓋一層草蓮子，以便為種子進行保溫，待出芽后撤去草蓮子即可。這時，經直接比色法檢測粉碎后的葉片中含谷胱甘肽過氧化物酶的量為
〗80. 5u/100克。實施例3:
a、 選擇溫度在10。C，陽光照度為4000LUX的環境中，土壤含水率為60%的環境中，選取厚度為15公分的富硒苔蘚作為培養基質；該環境可以在大棚中模擬，也可以直接選擇在秦嶺海拔2700公尺的秦嶺鎮巴縣的山谷中，播種時間選擇在農歷4月上旬，也就是清明節前后，因為該時段，該地區的環境與本發明所要求的環境比較接近，且該地區的年平均降雨量在600 800匪之間，所以濕度可以滿足要求，且距離我國的硒都陜西紫陽比較近，所以該地區的硒含量也相當豐富，所以該地區的苔蘚也就含有大量的硒，所以選擇該地區的苔蘚作為培養基礎非常合適；而該地區的苔蘚覆蓋面積又相當大，很適合大面積的推廣作業；如果是在大棚中進行實施的，那么就需要經常的對播種后的富硒苔蘚進行定期的灑水，以保證土壤的含水量，進而保證植物有足夠的水分吸收。
b、 將蓬躉的種子按照間距為10cm的距離埋進a步驟的苔蘚中，行距為l()cm;保證行距和株距可以滿足種子生長過程對養分的吸收，以及谷胱甘肽過氧化物酶的充分提取；
c、 3個半月以后，采摘蓬躉的葉片備用；這時，該葉片中即已經含有足量的谷胱甘肽過氧化物酶；該葉片的采摘可以一直持續到12月末；
d、 用水50kg、食鹽1000g和硒精500g配置成溶液；
e、 用d步驟中的溶液將c歩驟中的葉片在常溫下浸泡20分鐘，這樣做是為了在徹底清洗葉片的同時，保證葉片內的營養元素不至于流失，然后清洗掉葉片上的雜質，烘干，粉碎即可；
另外，如果選擇在野外作業，在b步驟中播種結束后，可以覆蓋一層草蓮子，以便為種子進行保溫，待出芽后撤去草蓮子即可。這時，經直接比色法檢測粉碎后的葉片中含谷胱甘肽過氧化物酶的量為192. 5u/K)0克。 實施例4:a、 選擇溫度在1(TC，陽光照度為4000LUX的環境中，土壤含水率為55% 的環境中，選取厚度為10公分的富硒苔蘚作為培養基質；該環境可以在大棚 中模擬，也可以直接選擇在秦嶺海拔2700公尺的秦嶺鎮巴縣的山谷中，播種 時間選擇在農歷4月上旬，也就是清明節前后，因為該時段，該地區的環境與 本發明所要求的環境比較接近，且該地區的年平均降雨量在600 8()0mm之間， 所以濕度可以滿足要求，且距離我國的硒都陜西紫陽比較近，所以該地區的硒 含量也相當豐富，所以該地區的苔蘚也就含有大量的硒，所以選擇該地區的苔 蘚作為培養基礎非常合適；而該地區的苔蘚覆蓋面積又相當大，很適合大面積 的推廣作業；如果是在大棚中進行實施的，那么就需要經常的對播種后的富硒 苔蘚進行定期的灑水，以保證土壤的含水量，進而保證植物有足夠的水分吸收。b、 將蓬躉的種子按照間距為15cm、行距為10cm的距離埋進a步驟的苔 蘚中；保證行距和株距可以滿足種子生長過程對養分的吸收，以及谷胱甘肽過 氧化物酶的充分提取；c、 3個半月以后，采摘蓬躉的葉片備用；這時，該葉片中即已經含有足 量的谷胱甘肽過氧化物酶；該葉片的采摘可以一直持續到12月末；d、 用水50kg、食鹽1000g和硒精500g配置成溶液；e、 用d步驟中的溶液將c步驟中的葉片在常溫下浸泡20分鐘，這樣做是 為了在徹底清洗葉片的同時，保證葉片內的營養元素不至于流失，然后清洗掉 葉片上的雜質，烘干，粉碎即可；另外，在b步驟中播種結束后，可以覆蓋一層草蓮子，以便為種子進行保 溫，待出芽后撤去草蓮子即可。這時，經直接比色法檢測粉碎后的葉片中含谷胱甘肽過氧化物酶的量為182. 7u/100克。該方法為純生物提取法，較之化學的提取方法，簡潔易操作，節省人力和 物力，且效果很好，經過檢測所采摘的葉片中谷胱甘肽過氧化物酶的含量在 155.6u 192. 5u /100克左右，基本達到了一個很好的效果。
權利要求
1、一種生物法提取谷胱甘肽過氧化物酶的工藝，其特征在于該工藝采用蓬虆在富硒的苔蘚中培養來進行生物提取。
2、 根據權利要求1所述的生物法提取谷胱甘肽過氧化物酶的工藝，其特征在于該工藝的具體步驟為a、 在溫度為8 1(TC，陽光照度為3500 4000LUX的環境中，選取厚度為8 15公分的富硒苔蘚作為培養基質；富硒苔蘚所生長的土壤含水量保證在50% 65%。b、 將蓬躉的種子按照株距10 15cm，行距為10 15cm的距離埋進a步驟的富硒苔蘚中；c、 3個月至3個半月以后，采摘蓬躉的葉片備用；d、 用水、食鹽和硒精按照質量比為100: 2: l配置成溶液；e、 用d歩驟中的溶液將c步驟中的葉片在常溫下浸泡10 20分鐘，然后清洗掉葉片上的雜質，烘干，粉碎即可。
3、 根據權利要求2所述的牛物法提取谷胱甘肽過氧化物酶的工藝，其特征在于a步驟中的環境選擇在秦嶺海拔2700公尺的秦嶺鎮巴縣的山谷中，播種時間選擇在農歷4月卜.旬的清明節前后。
4、 根據權利要求2所述的生物法提取谷胱甘肽過氧化物酶的工藝，其特征在于b歩驟中埋種結束后再覆蓋一層草蓮子，待種子出芽后撤除。
5、 根據權利要求2或3所述的生物法提取谷胱甘肽過氧化物酶的工藝，其特征在于a步驟中的溫度為l(TC，陽光照度為4000LUX，富硒苔蘚的厚度為10公分，富硒苔蘚所生長的土壤含水量在55%; c歩驟中的采摘時間為100
全文摘要
本發明提供一種生物法提取谷胱甘肽過氧化物酶的工藝，該工藝的具體步驟為a、在溫度為8～10℃，陽光照度為3500～4000LUX的環境中，選取厚度為8～15公分的富硒苔蘚作為培養基質；富硒苔蘚所生長的土壤含水量保證在50％～65％。b、將蓬虆的種子按照株距10～15cm，行距為10～15cm的距離埋進a步驟的富硒苔蘚中；c、3個月至3個半月以后，采摘蓬虆的葉片備用；d、用水、食鹽和硒精按照質量比為100∶2∶1配置成溶液；e、用d步驟中的溶液將c步驟中的葉片在常溫下浸泡10～20分鐘，然后清洗掉葉片上的雜質，烘干，粉碎即可。該方法為純生物提取法，較之化學的提取方法，簡潔易操作，節省人力和物力，且效果很好。
文檔編號C12N9/08GK101671658SQ200910187898
公開日2010年3月17日 申請日期2009年10月16日 優先權日2009年10月16日
發明者崔所亮, 王翠霞 申請人:崔所亮