鞘氨醇單胞菌和包含固定化載體的制作方法

            文檔序號:574611閱讀:279來源:國知局

            專利名稱::鞘氨醇單胞菌和包含固定化載體的制作方法
            技術領域
            :本發明涉及含有微囊藻毒素的水的處理方法及裝置;特別是對從水花(water—bloom)等藻類產出的微囊藻毒素進行分解處理而無害化的含有微囊藻毒素的水的處理方法及裝置,其中所述的水花是在湖泊、壩堰、壕溝、內海等封閉性水域中出現的。
            背景技術
            :當湖泊、壩堰、壕溝及內海等封閉性水域因臟水等的流入發生過營養化,水域中的藍藻菌(cyanobacterium)類、例如微囊藻屬(microcytis)的藍藻菌大量繁殖,就出現所謂的水花。構成出現的水花的藍藻菌類中,因為有產出被稱作水花毒素的微囊藻毒素的藍藻菌類大量存在,所以封閉性水域受到微囊藻毒素的污染。微囊藻毒素是由7種氨基酸形成的環狀肽所構成,對人或家畜具有肝臟毒性或致癌性。作為從封閉性水域中檢測出的微囊藻毒素的代表毒素的微囊藻毒素LR、微囊藻毒素RR、和微囊藻毒素YR,一旦由人或家畜經口攝入,就會引起中毒癥狀。由這些微囊藻毒素導致的中毒,向在非專利文獻1及2中記載的那樣,無論是人畜在國內外各地均有報道,但是由這些微囊藻毒素引起的肝臟疾病的發病機理沒有明確,目前還沒有治療方法。以前,就微囊藻毒素處理的方法曾對各種方法進行研究,為了預防微囊藻毒素中毒,通常使用抑制水花發生的方法。作為抑制水花發生的方法,采用向發生水花的封閉性水域中添加賴氨酸等藻類增殖抑制劑的方法、或向發生水花的封閉性水域中撒具有殺藻效果的銅離子的專利文獻1的方法。另外,在專利文獻2中,正在研究如下所述的方法,即通過向汲出了已產生水花的封閉性水域的一部分的污染水發送超聲波來破壞水花的細胞而殺死藻類的方法。然而,在這些藍藻菌類的細胞內蓄積由已生成的微囊藻毒素,所以即使迸行水花的除去,從破碎的藍藻菌類中釋放大量微囊藻毒素,就會出現在封閉性水域中的污染進一步擴大的問題。因而,作為從水花產出的微囊藻毒素的處理方法,除了在專利文獻3中記載的通過臭氧的氧化分解的方法之外,正在嘗試通過氯的氧化等。非專利文獻l:渡邊真理代,"水花",東京大學出版社,1999年非專利文獻2:原田健一,"圍繞有毒藍藻菌的最近研究動向",JournalofHealthScience,45(3),150-165,1999專利文獻1:特開平9-239370號公報專利文獻2:特開平8-33888號公報專利文獻3:特開平l卜70395號公報然而,在添加藻類增殖抑制劑的方法中,藻類增殖抑制劑本身為賴氨酸等有機物,通過藻類增殖抑制劑的添加增大封閉性水域中的BOD濃度,成為有機物污染的原因。另外,在專利文獻l的方法中,當將封閉性水域的水用作飲料時,水中銅離子過量存留,不能說該方法優選。還有,在專利文獻2的方法中,超聲波振蕩需要巨大的能量,而且破碎的細胞的殘渣招致過營養化等的二次污染。另一方面,在專利文獻3的方法或使用氯的方法中,盡管可能完全分解封閉水域中的微囊藻毒素自身,但不僅與封閉水域中大量存在的夾雜物質反應而無法對微囊藻毒素進行高效率分解,而且在臭氧或氯的強氧化力的作用下,產生三鹵甲烷等有毒副產物,從而出現新的問題。
            發明內容本發明正是鑒于上述情況而完成的發明,其目的在于,提供能夠在極短的時間內且簡易地進行如下所述的生物處理的含有微囊藻毒素的水的處理方法和裝置,所述的生物處理是對于已發生水花的封閉性水域而言,不影響其環境或生態系統,而對其使所含的微囊藻毒素進行分解以無害化的生物處理。本發明之一為了達成上述目的,提供一種對微囊藻毒素進行無害化處理的含有微囊藻毒素水的處理方法,其中,通過使所述含有微囊藻毒素的水與鞘氨醇單胞菌相接觸,使該含有微囊藻毒素的水中的微囊藻毒素發生生物學分解而進行無毒化,上述鞘氨醇單胞菌是在獨立行政法人產業技術綜合研究所特許生物保藏中心作為MDB1進行保藏的日本國內保藏的受托編號FE鹿P-19480(國際保藏的受領編號FERMABP—10448)菌株。通過本發明,與含有微囊藻毒素的水接觸的鞘氨醇單胞菌具有分解微囊藻毒素的能力。因而,可以對含有微囊藻毒素的水中的微囊藻毒素進行生物學分解而進行無害化,所以能夠防止經過處理產生副產物、或在處理水中殘存有害物質。另外,因鞘氨醇單胞菌能夠通過微囊藻毒素的分解而自然增殖,與以前的處理方法相比,能夠大幅度降低處理所需的運行成本。特別是,本發明人在獨立行政法人產業技術綜合研究所的特許生物保藏中心作為MDB1菌進行保藏的日本國內保藏的受托編號FERMP-19480(國際保藏的受領編號FE應ABP—10448)菌株,屬于上述的鞘氨醇單胞菌,與以前的微囊藻毒素分解菌相比,分解微囊藻毒素的速度極快,而且還具有在常溫下能夠簡單且穩定地繁殖的性質。因此,通過將該菌株用作鞘氨醇單胞菌,不需要在處理條件上用很多工夫,能夠在極短的時間里對含有微囊藻毒素的水進行無毒化處理,能夠提供與各種狀況對應的含有微囊藻毒素的水的高效率處理。本發明之二的特征在于,通過將本發明之一所述的鞘氨醇單胞菌撒在作為上述含有微囊藻毒素的水的水源的封閉性水域的水面上,與上述含有微囊藻毒素的水接觸。通過本發明之二,鞘氨醇單胞菌在微囊藻毒素的存在下高效繁殖而成為優勢菌,在分解處理微囊藻毒素后繁殖能力下降,在含有微囊藻毒素的水中存在的其他微生物成為優勢菌。因而,通過在含有微囊藻毒素的水的5水面上撒鞘氨醇單胞菌而使其接觸,可以有效抑制在含有微囊藻毒素的水中的鞘氨醇單胞菌的存在偏移,所以能夠迸一步縮短微囊藻毒素無毒化處理所需的時間。在此基礎上,即使在分解處理微囊藻毒素之后,能夠將由撒布引起的對環境及生態系統的影響抑制到最小限度,所以能夠大幅度降低處理后所需的時間或成本。本發明之三的特征在于,在上述封閉性水域的水面上以108細胞/1112以上的濃度撒本發明之二所述的鞘氨醇單胞菌。通過在該濃度下撒鞘氨醇單胞菌,可以防止己撒布的鞘氨醇單胞菌被存在于封閉水域中的其他生物所捕食,或防止阻礙由鞘氨醇單胞菌引起的微囊藻毒素的分解。因此,可以在短時間內使鞘氨醇單胞菌成為封閉性水域中的優勢菌,所以能夠將封閉性水域中的微囊藻毒素無毒化處理所需的時間降低到最小限度。本發明之四的特征在于,本發明之一所述的鞘氨醇單胞菌在已固定化的狀態下與上述含有微囊藻毒素的水接觸。另外,本發明之五的特征在于,本發明之四所述的鞘氨醇單胞菌是在通過固定材料附著或包含(entr卿ing)的狀態下被固定化。通過本發明之四和五,使鞘氨醇單胞菌在固定化的狀態的下與含有微囊藻毒素的水接觸,由此能使其與含有微囊藻毒素的水進行均勻接觸,能夠進一步促進微囊藻毒素的分解無毒化的效率。本發明之六為了達成上述目的,提供對含有微囊藻毒素的水進行無毒化處理的含有微囊藻毒素的水的處理裝置,是由導入所述含有微囊藻毒素的水的導入部、使從該導入部導入的含有微囊藻毒素的水與鞘氨醇單胞菌已被固定的載體接觸而進行處理的處理部、對所述處理部進行空氣曝氣(aeration)的曝氣機構、排出已在所述處理部處理的處理水的排出部構成,上述鞘氨醇單胞菌是由獨立行政法人產業技術綜合研究所特許生物保藏中心作為MDB1菌進行保藏的日本國內保藏的受托編號FERMP-19480(國際保藏的受領編號FERMABP—10448)菌株。通過本發明之六,利用導入部從被微囊藻毒素污染的封閉性水域中汲出的含有微囊藻毒素的水,在處理部與載體接觸,由此通過已在載體上固定化的鞘氨醇單胞菌使所含的微囊藻毒素分解,進行無害化處理。如此由處理部處理的水通過送回部作為處理水被送回到封閉性水域中。在處理部的載體上固定的鞘氨醇單胞菌,因使用由獨立行政法人產業技術綜合研究所特許生物保藏中心作為MDB1菌進行保藏的日本國內保藏的受托編號FERMP-19480(國際保藏的受領編號FERMABP—10448)菌株,能夠使在處理部的處理條件的設定簡單化,并且與以前的微囊藻毒素分解菌相比具有極快的分解速度,所以能夠在極短的時間內對微囊藻毒素進行生物學分解而無毒化。以此,能夠使從封閉性水域汲出的含有微囊藻毒素的水與鞘氨醇單胞菌極其有效地接觸,所以能夠提供在不對由微囊藻毒素污染的封閉性水域產生二次污染的情況下將凈化所需的時間縮短到最小限度的裝置。在此基礎上,通過曝氣機構對處理部進行曝氣,所以能夠促進處理部的含有微囊藻毒素水的流動性而改善接觸效率,同時對作為需氧性微生物的鞘氨醇單胞菌提供空氣,能夠改善微囊藻毒素的分解能力。本發明之七的特征在于,具有對本發明之六所述的鞘氨醇單胞菌進行培養并以預先設定的間隔和量向所述處理部提供其培養液的培養部。通過本發明之七,在處理部,已預先設置的間隔和量向處理部提供已在培養部培養了鞘氨醇單胞菌的培養液,由此可以在處理部中時常提供規定菌量的鞘氨醇單胞菌并使其附著在載體上,所以能夠穩定進行高效的微囊藻毒素的處理。本發明之八的特征在于,本發明之六或七所述的處理裝置被設置在作為上述含有微囊藻毒素水的水源的封閉性水域中。以此,不需要確保用于處理含有微囊藻毒素的水的空間,而且能夠大幅度降低從封閉性水域進行含有微囊藻毒素水的導入和排出所需要的能量。如以上說明所示,通過本發明的含有微囊藻毒素水的處理方法及裝置,作為與含有微囊藻毒素的水接觸而可以分解微囊藻毒素以進行無毒化的鞘氨醇單胞菌,特別使用由特許微生物保藏中心中作為MDB1菌進行保藏的日本國內保藏的受托編號FE腹P-19480(國際保藏的受領編號FE固ABP—10448)菌株,所以通過處理可以防止副產物的產出,同時沒有必要進行處理環境等的調整,而且與通過以前的生物處理進行微囊藻毒素的無毒化相比,更能夠改善分解速度。以此,可以在不產生由處理引起的二次污染的情況下,在極短的時間內且低成本地對含有微囊藻毒素的水中的微囊藻毒素進行無毒化處理。圖1是表示以MDB1菌的16SrRNA分析結果的堿基序列為基礎制作的系統圖。圖2是表示用于本發明的MDB1菌中的含有微囊藻毒素水中的微囊藻毒素的分解速度的曲線圖。圖3是表示微囊藻毒素清除率相對于撒布用于本發明的MDB1菌的各菌體濃度的曲線圖。圖4是表示微囊藻毒素清除率相對于固定化用于本發明的MDB1菌的各菌體濃度的曲線圖。圖5是表示作為本發明的第i實施方式的含有微囊藻毒素的水的處理裝置的構成圖。圖6是表示作為本發明的第2實施方式的含有微囊藻毒素的水的處理裝置的構成圖。圖中10、30—含有微囊藻毒素的水的處理裝置,12—導入管,12a一導入泵,14—反應槽,16—載體,18—空氣擴散管,18a—吹風機,20一排出管,32—培養槽,34—供給泵,36—供給管,38—處理部,40—網圈,42—連結部件,44—浮動部件,46—空氣擴散管,48—送氣泵,50—導入部,52—排出部,100—農業用水池。具體實施例方式下面,通過附圖對本發明的含有微囊藻毒素水的處理方法及裝置的優選實施方式進行詳細說明。在本發明中,作為用于處理含有微囊藻毒素的水的鞘氨醇單胞菌,屬于鞘氨醇單胞菌屬,只要是可以分解微囊藻毒素進行無毒化的細菌就沒有特別限定。在本發明中使用的細菌是,本發明人在長葉縣撖訪湖中采集水花正在繁殖的湖水并用普通瓊脂培養基分離的細菌,由產業技術綜合研究所的生命工學技術研究所于2003年8月8日作為MDB1菌進行保藏的日本國內保藏的受托編號FERMP-19480(國際保藏的受領編號FERMABP—10448)菌株(以后記為MDB1菌)。本發明人對該已保藏的MDB1菌的形態的性質、培養的性質、以及生理學性質進行了研究。其中,形態學性質是在培養基中接種MDB1株并在3CTC下培養5天后使用光學顯微鏡和透過型電子顯微鏡而進行的。培養基使用普通瓊脂培養基(肉提取物0.5g/L、蛋白胨1g/L、氯化鈉0.5g/L、瓊脂L0g/L)、或普通肉湯培養基(肉提取物0.5g/L、蛋白胨lg/L、氯化鈉0.5g/L)作為基礎培養基。其結果,MDB1菌是長度為0.79士0.23iim、寬度為0.49±0.08um的短桿菌,是通過鞭毛具有運動性的革蘭式陰性菌。通過普通瓊脂平板培養基可以良好地生長,形成圓形凸出型的黃色菌落。作為最適宜的生長條件,在需氧培養下為30。C、Ri7.0。另外,本發明人為了對MDB1菌的化學分類學的性質進行研究,對MDB1菌的16SrRNA基因的堿基序列進行了測量。其結果如下述的表1所示。1TGGAGAGTTT61AACGMGCCT121T脇AATM181ATCGCCTAAG241CG脇TCCG謝G認C篇361薩CGCGTG421謀TACCGG481GAGCT跳T541AGGTG嵐GC601G織GGTMG661GTGGCGMGG72〗ACAGGATTAG781TTTAGGCTTT841GATT腿CT901CGMGCMCG961TTTCCTTCAG1021TGAG願TG1081GTTGGG面1141TCCTCATGGC1201C組CCCGCG1261C體G腦1321TTCCC纖C1381TGCGCT纖1441腿GGTAGCGATCCTGGCTCAGMCGAACGCTGGCGGWTGCCTMCACATGCMGTCGTCGGGCTTAGTGGCGCACGGGTGCGTMCACGTGGGMTCTGCCCTTAGGCAGTTAG雄TG釘GCTMmCCGT脇TGACTCCGGTCC應ATTTGATGAGCCCGCGTCGGATTAGCTAG賜TGAGGT羅GCTCACCMGG憶TGGTCTG謀G膽T匿C認TGGG跳MJ謀GGCCCAGGAGGCAGCAGTGGGGMTATTGGACAATGGGCG跳CCTG證AGCAAGTGAAGAAGGCCTTAGGGTTGTAMGCTCTTTTACCCGGGATGATAATGGAGMTMGCTCCGGCTMCTCCGTG謀CAGCCGCGGTMTA眼GGTGTTCGGAATC跳GGCGT羅CGCACG腦CGGOTTG雄TTiVGCCGGGGCTCAACTCCGGAACTGCCTTTMGACTGCATCGCTTGMTCTGGTGGMTTCCGAGTGTAGAGGTGMATTCGTAGATATTCGGMGAACACCACGGCTTACTGGACCAGMTTGACGCTGAGGTGCG嵐GCGTGGGGAGCMATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGMJMCTAGCTGTCAGGGCCTGGTGGCGCAGCTMCGCATT脂TCTCCGCCTGGGGAGT脇TCGCMCAAAGGMTTGACGGGGGCCTG"CAAGCGGTGG薦TGTGGTTTAATTCGC紐CCTTACC脇TTTGA匿CTGATCGCGGTTACC腐ATGGTTCGGCTGGATCAGTGACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGGGTTMGTCCCGCMCGAGCGCAACCCTCGTCCTTMHTGCCATCATTCACTMGG嫩CCGCCGGTGATMGCCGGAGGMGGTGGGGATGACGTCMGCCTT謀GCTGGGC鶴CACGTGC磁肌GCGG微CAGTGGGCAGAGGGTGAGCTMTCTCC嵐AGCCGTCTCAGTTCGGATTGTTCTCTGCMTGAAGGCGG/VATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTGTAC認CGCCCG酉雄TGGGAGTTGGTTOCCCGMGGCTGGC雖脇AGC認CACGGTGGGATCAGCG跳GGGTGMGTCGTACGTAGGGGMCCTGCGGCTGGATCACCTCCTT在國立遺傳研究所的相同性檢索系統FASTA中檢索上述的MDB1菌的堿基序列。其結果,如圖1的系統圖所示,判定MDB1在分類學上是屬于接近鞘氨醇單胞菌屬的位置的微生物。接著,說明在本發明中使用的MDB1菌的培養方法。在本發明的培養方法中,一般使用通常的需氧性細菌的培養方法。作為培養基,只要是含有合適的可獲得資源的碳源、氮源、無機物和必要的增殖促進物質的培養基,可以使用任何的合成培養基和天然培養基。作為碳源,可以單獨或組合使用葡萄糖、淀粉、糊精、甘露糖、果糖、蔗糖、乳糖、木糖、阿拉伯糖、甘露醇、糖蜜等糖類,醋酸等有機酸,甘油等醇類等。作為氮源,可以單獨或組合使用氯化銨、硫酸銨、硝酸鈉、尿素、蛋白胨、肉提取物、酵母提取物、干燥酵母、玉米漿、大豆粉、酪蛋白氨基酸等。另外,根據需要添加食鹽、氯化鉀、磷酸氫二鉀、硫酸亞鐵、氯化鈣、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銅等無機鹽類。另外,可以適當添加促進本菌株生長的微量成分。另外,作為培養方法,最合適的是液體培養法。就培養溫度而言,3CTC為適溫,培養基的pH值為510,優選為7而可以很好地培養。其中,在普通肉湯培養基150ml中接種l白金圈,在3(TC、120rpm下振蕩培養4天,由此可以使培養基中的菌體濃度為109細胞/mL。圖2是表示MDB1菌在含有微囊藻毒素水中的微囊藻毒素的分解速度的曲線圖,表示間歇式地進行使菌體濃度為4X108細胞/mL的MDB1菌與含有微囊藻毒素的水接觸的處理的結果。其中,虛線表示作為以前的方法的使用己出現水花的封閉性水域中的污泥在相同條件下進行生物處理時的分解速度。如圖2的曲線圖所示,在通過以前的方法的處理中,如虛線所示,幾乎沒有看見微囊藻毒素的濃度相對時間的變化。雖在曲線圖中沒有顯示,但繼續進行處理時,2天以后微囊藻毒素濃度漸漸降低,28天后可以漸漸處理到1.0yg/L以下。另一方面,在使用了本發明的MDB1菌的處理方法中,如實線所示,微囊藻毒素濃度在實驗開始的同時急劇下降,30小時后能夠分解到濃度為LOug/L以下。因此,相對于在作為以前的方法的使用了混合多種微生物的污泥的生物處理中只能以天計算進行處理,通過將MDB1菌用于處理,則能夠以小時計算進行微囊藻毒素的處理,從而能夠大幅度縮短微囊藻毒素處理所需要的時間。在此基礎上,MDB1菌被確認為能夠對所有從湖泊等已高頻度檢測出的3種微囊藻毒素(微囊藻毒素LR、微囊藻毒素RR、微囊藻毒素YR)進行分解。因而該MDB1菌可以說在對微囊藻毒素進行生物處理時是最適合的微生物。不過,在本發明中,作為使含有微囊藻毒素的水與MDB1菌接觸的方法,提出有以規定的濃度向出現水花含有微囊藻毒素的封閉性水域撒已培養的MDB1菌而使其接觸的方法。圖3是表示微囊藻毒素清除率相對于撒布的用于本發明的MDB1菌的各濃度的曲線圖。根據圖3的曲線圖,當撒MDB1菌時,使菌體濃度為108細胞/!112以上、優選為10'°細胞/1112而進行,由此撒布的MDB1菌在封閉性水域中繁殖,能夠高效地分解所含的微囊藻毒素。另一方面,當撒布的菌體濃度為108細胞/m2以下時,微囊藻毒素的清除率有極端下降的傾向。考慮該現象是被所散布的封閉性水域中存在的微生物所捕食,使微囊藻毒素的分解受阻。另外,在本發明中,作為另一種接觸方法,提出在以規定的菌體濃度下使培養的MDB1菌固定化的狀態下使其接觸的方法。本發明人對MDB1菌的固定化方法進行研究的結果是,得出附著固定化或包含固定化這兩種固定化方法在微囊藻毒素的分解處理中最適合。在通過附著固定化的處理方法中,通過使用球狀或筒狀、帶狀、凝膠狀、無紡布狀的載體等凹凸不平多的固定化材料,能夠使MDB1菌的培養液穩定地附著固定,所以可以改善微囊藻毒素的分解效率。另一方面,在通過包含固定化的處理方法中,混合MDB1菌的培養液和單體或預聚物等固定化材料,通過聚合在凝膠的內部包含固定MDB1菌而形成載體,通過使其與該載體接觸而進行在含有微囊藻毒素的水中所含的微囊藻毒素的分解。作為單體的材料,可以使用丙烯酰胺、亞甲基雙丙烯酰胺、三丙烯酸甲縮醛等。另外,作為預聚物的材料,優選聚二丙烯酸乙二醇酯或聚甲基丙烯酸乙二醇酯,另外也可以使用其衍生物。作為包含固定化載體,優選球狀或立方體狀、帶狀、無紡布狀等凹凸不平較多的形狀。由此,接觸面積增大,所以能夠改善微囊藻毒素的清除率。圖4是表示通過以各菌體濃度固定化的MDB1菌的微囊藻毒素的清除ii率的曲線圖。根據圖4的曲線圖可以判斷出,作為在載體上固定MDB1菌時的菌體濃度,只要為106細胞/mL以上、優選為107細胞/mL以上,就可以以80%以上的高清除率來處理微囊藻毒素。表2是表示在各固定化載體上的微囊藻毒素分解速度的表,是在初期濃度為8X108細胞/mL的濃度下對MDB1菌進行固定化的各載體,與微囊藻毒素濃度為100iig/L的含有微囊藻毒素的水接觸的結果。<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>根據表2可知,在附著固定化載體和包含固定化載體中都以較高的速度分解微囊藻毒素,特別是2種包含固定化載體與3種附著固定化載體相比能夠更高速地進行微囊藻毒素的分解。考慮這是因為能夠保持穩定且最合適的菌體濃度。但是,包含固定化載體的缺點在于,與附著固定化載體相比,其制成所需的成本或工夫更多。因而,如果根據用途選擇附著固定化或包含固定化,能夠進行高效的含有微囊藻毒素水的處理。(實施例1)通過MDB1菌的撒布的處理在實施例1中,對用2L的普通肉湯培養基在3(TC下培養上述的MDB1菌一周的培養液進行離心分離,從培養基成分中回收只有菌體的菌液。然后,進行如下所述的實驗,即向填充了微囊藻毒素濃度為20yg/L的水4m3且水面為4m2的實驗水槽的水面上,撒布已回收的菌液并調整菌體濃度為1()8細胞/m2。在實驗開始后,隨著時間的過去含有微囊藻毒素的水的微囊藻毒素濃度降低,2周后可以被處理成作為WHO的基準值的l!^g/L以下。另外,作為實施例l的變形例,進行如下所述的實驗,即向填充了微囊藻毒素濃度為18ug/L的水4m3且水面為41112的實驗水槽的水面上,每天撒布一次上述的培養液并調整成109細胞/1112的濃度。在實驗開始后,隨著時間的過去含有微囊藻毒素的水的微囊藻毒素濃度降低,5天后可以被處理成作為WHO的基準值的Wg/L以下。MDB1菌因需氧性地進行微囊藻毒素的分解,如上所述,如果以水面上的面積為基準調整撒布的菌體濃度,就能夠使MDB1菌在已撒布的封閉性水域中迅速成為優勢菌,所以能夠在短時間內對封閉性水域中所含有的微囊藻毒素進行分解處理。(實施例2)通過MDB1菌的包含固定化的處理實施例2使用圖5所示的作為本發明的第1實施方式的含有微囊藻毒素水的處理裝置10,進行針對被微囊藻毒素污染的封閉性水域的處理試驗。如圖5所示,在處理裝置10中,通過附屬于作為導入部的導入管12的導入泵12a從封閉性水域汲出,通過導入管12向反應槽14提供含有微囊藻毒素的水。作為處理部的反應槽14內置有已對MDB1菌進行包含固定化的載體16、16…且填充率為38X。在反應槽14的底部設置空氣擴散機構的空氣擴散管18,使附屬的吹風機18a驅動,對空氣進行擴散。以此,在反應槽14中提供空氣,促進載體16、16…內的MDB1菌的需氧性處理,同時攪拌己充填后的載體16、16…而使接觸率提高。另外,在反應槽14中設置作為排出部的排出管20,從反應槽14的底部將在反應槽14內被處理的含有微囊藻毒素的水作為處理水而導出來。在處置裝置10中使用的載體16、16…是以如下所示的步驟制作的,即在普通肉湯培養基上且在3(TC下,需氧性培養上述的MDB1菌4天,從該培養液中經過離心分離回收菌體并調整到109細胞/0113,與10%的聚二丙烯酸乙二醇酯混合之后,添加0.25%的過硫酸鉀使其聚合而包含固定,將得到物質成型為3mm直徑的球形,從而制成。在該處理裝置10中,為了使含有微囊藻毒素10yg/L的含有微囊藻毒素的水在反應槽14的滯留時間為30分鐘而設定流量以進行處理。其結果是可以穩定地連續處理成處理水中的微囊藻毒素濃度在lyg/L以下。(實施例3)通過MDB1菌的附著固定化的處理在實施例3中,使用圖6所示的作為本發明的第2實施方式的含有微囊藻毒素水的處理裝置30,進行針對作為含有微囊藻毒素的封閉性水域的農業用水池100的處理實驗。處理裝置30在農業用水池100的一側岸上設置作為培養供給部的培養槽32,通過在內部充填的普通肉湯培養基培養MDB1菌。已培養的菌液通過配設的供給泵34的驅動從供給管36被提供給設置在農業用水池100內的處理部38。處理部38通過連結部件42使多個網圈40、40…連結固定,同時在通過多個浮動部件44、44在水面上浮游的狀態下被設置。其中,網圈40、40…的構成材質優由可以有效地將從供給管36提供的MDB1菌附著固定化。在處理部38的下方配置有空氣擴散管46,通過在一岸設置的送氣泵48的驅動,對在網圈40、40…上附著固定的MDB1菌進行曝氣。另外,處理部38在下方形成導入部50,同時在其上方設置排出部52。因而,在處理部38中,從導入部50流入農業用水池100的水,另一方面,把微囊藻毒素已被分解處理的水作為處理水從排出部52排向農業用水池100。使用如此構成的處理裝置30,進行微囊藻毒素濃度維40ug/L、10001113的農業用水池100中的含有微囊藻毒素的水的處理試驗。另外,培養槽32使用容量為100L的槽。然后,用在培養槽32中充填的普通肉湯培養基培養MDB1菌一周,將如此得到的菌液從供給管36以10L/天的流量提供給處理部38,進行10天。其結果,在運行開始后20天,在農業用水池IOO中含有的微囊藻毒素的濃度可以降低到Wg/L以下。序列表<U0>申請人名稱角野立夫、小笠原多佳子和樸虎東<120>發明名稱鞘氨醇單孢菌和包含固定化載體<160>序列號1<210>SEQIDNO1<211>長度1441<212>類型DNA<213>生物Sphingomonassp.<400>11TGGAGAGTTTGATCCTGGCTCAGMCGMC61AACGMGCCTTCGGGCTTAGTGGCGCACGG121薦GAATAACAGTTAGAAATG線CTM181ATCGCCTMGG纖GCCCGCGTCGGATTA241CGACGATCCG麗TGGTCTGAGAGGATGA301GACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGMTA361ATGCCGCGTGAGTGAAGAAGGCCTTAGGGT421ACAGTACCGGGAGAATAAGCTCCGGCTMC481GAGCTAGCGTTGTTCGGMTCACTGGGCGT541AGGTG嵐GCCCGGGGCTCAACTCCGGAAC601GAGAGGTMGTGGMTTCCGAGTGT織GG661GTGGCGMGGCGGCTTACTGGA謀MTT721ACAGG腿GA薦CTGGTAGTCCACGCC781TTTAGGCTTTGGTGGCGCAGCTAACGCATT841GATT麵CTC薦G節G媒GGGCC901CGMGCMCGCGC腿CCTT扁GCGTT961TTTCCTTCAGTTCGGCTGGATCAGTGACiVG1021TGAGAT區GGTT認CCCGCAA謀C1081GTTGGG眼CTMGG組CCGCCGG麗1141TCC麗GGCCCTTACGCGCTGGGC雄C1201CAMCCCGCGAGGGTGAGCTMTCTCCAM1261CTCGAGAGCATGAAGGCGGAATCGCTAGTA1321TTCCCAGGCCTTGTAC瓶CGCCCGTCAC1381TGCGCTMCCGCMGGAGGCAGCAGACCAC1441ACMGGTAGCCGTAGGGGMCCTGCGGCTGGCTGGCGGCATGCCTMCACATGCMGTCGGTGCGT證CGTGGGMTCTGCCCTTAGGTACCGTATGATGACTCCGGTCC嫩GATTTGCTAGTTGGTGAGGTAAAGGCTCACCMGGTCAGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCATTGGACMTGGGCG跳CCTGATCC脇TGT嵐GCTCTTTTACCCGGGATG腿TGTCCGTGCCAGCAGCCGCGGT讓CGGAGGAAAGCGCACG酉CGGCTTTG雄TTAGTGCCTTTAAGACTGCATCGCTTGAATCTGGTG磁TTCGTAGATATTCGGMGMCACCAGACGCTGAGGTGCGMAGCGTGGGGAGCMGT匿GATG腿CTAGCTGTCAGGGCCTMGTTCTCCGCCTGGGGAGTACGGTCGCMTGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGHTMTTTG薩CCTGATCGCGGTTACC露ATGGGTGCTGCATGGCTCTCGTCAGCTXGTGTICGGCAACCCTCGTCCTTAGTTGCCATCATTCAMGCCGGAGG維TGGGGATG認區ACGTGCTACiVATGGCGGTGACAGTGGGCAGAGCCGTCTCAGTTCGGATTGTTCTCTGCAAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGM腦ACCATGGGAGTTGGTTTCA_CCCG駆CTGGGTGGGATCAGCGACTGGGGTGMGTCGTAGATC脂CCTT1權利要求1.一種鞘氨醇單胞菌,其特征在于,由在獨立行政法人產業技術綜合研究所特許生物保藏中心作為MDB1菌進行保藏的日本國內保藏的受托編號FERMP-19480的菌株構成,所述作為MDB1菌進行保藏的日本國內保藏的受托編號為FERMP-19480的菌株的國際保藏的受托編號為FERMABP-10448。2.—種包含固定化載體,其特征在于,包含固定化了權利要求1所述的鞘氨醇單孢菌。全文摘要本發明提供了一種鞘氨醇單胞菌,其特征在于,由在獨立行政法人產業技術綜合研究所特許生物保藏中心作為MDB1菌進行保藏的日本國內保藏的受托編號FERMP-19480的菌株構成,所述作為MDB1菌進行保藏的日本國內保藏的受托編號為FERMP-19480的菌株的國際保藏的受托編號為FERMABP-10448。還提供了一種包含固定化了上述鞘氨醇單孢菌的包含固定化載體。文檔編號C12N1/20GK101597584SQ20091012693公開日2009年12月9日申請日期2005年11月11日優先權日2004年11月11日發明者小笠原多佳子,樸虎東,角野立夫申請人:株式會社日立工業設備技術
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