一種多肽鈣保健飲料的制作方法

專利名稱：一種多肽鈣保健飲料的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種保健飲料，尤其是一種多肽鈣保健飲料。
技術背景-
丙酮酸是一種對機體能量代謝有較大影響的物質，是機體糖類代 謝、酯類代謝以及碳水化合物降解的中間產物，也是細胞代謝過程中關 鍵的具有樞紐性地位的中間物質，許多代謝途徑可以通過丙酮酸這一共 同的中間產物而聯系起來。由于丙酮酸本身極不穩定，在實際使用時經 常將其制成鹽類以提高穩定性。其中丙酮酸鈣作為一類新型膳食補充劑 受到廣泛關注。國內丙酮酸鈣的生產主要由丙酮酸和鈣離子結合生成，主要工 藝以丙酮酸與石灰乳，經過高溫、蒸發、結晶而成。而原料丙酮酸的生產方法 普遍采用化學合成法，化學合成法制取丙酮酸成本高、收效低、污染嚴重、難 以達到國家對環境的要求，另外，丙酮酸鈣作為食品或化妝品系列產品的原 料，直接被人體利用，化學合成法生產的丙酮酸的安全性有待考慮。另一方 面，丙酮酸國際價格較高，中國在生物醫藥、減肥方面所使用的丙酮酸鈣類產 品及原料絕大部分是從國外進口，提高了丙酮酸鈣產品的生產成本。

發明內容
本發明所要解決的技術問題在于提供一種有利于人體吸收、具有多種保健 作用、安全可靠、可節省生產成本且更加環保的多肽鈣保健飲料。 一種多肽鈣保健飲料，是由以下工藝方法所制備而成的
(1) 發酵培養基配料-
在每1000mL的水中放入口服葡萄糖90g ，g、食品級蛋白胨3 15g、食 品級碳酸鈣30g 40g充分混合，混合物的pH值為5.0 5.6，將上述混合物在108 。C 12(TC溫度下進行10分鐘 15分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將甲絲球擬酵母或光滑球擬酵母在30 32t:下培養16 24小時后進行種子 擴大培養，菌種培養20 24小時，當菌種濃度重量比達到0.8% 1.2%時，轉入
上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在^。C 32。C，壓力為0.03Mpa 0.05Mpa，時間為48 56小時，在發酵過程中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除 了保證菌種的正常生長外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖 降至1%以下時，終止發酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在8(TC 95t:溫度下持續滅活10
分鐘 20分鐘，使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液備用；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用ioor
105'C蒸汽在0.9MPa 1.20MPa壓力下進行10秒 12秒瞬間消毒，在常
溫下加入維生素、水溶性蛋白等其他營養成份即可。為了增加好的口 感，還可加入甜味劑等輔助成份。
調配完成后進行熱罐裝和封蓋，罐裝溫度保持在7(TC 8(TC，密封 后形成一定的真空度。在無菌條件下倒瓶殺菌，溫度為90'C 12(TC， 3 分鐘 5分鐘之后進行燈檢，達到冷卻之后進行套標、噴碼和裝箱，即可 銷售。
上述假絲球擬酵母、光滑球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體 種子培養基，保存在4。C冰箱中，0.5 l年活化更新一次。
上述菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于液體種子培養 基中，進行搖瓶培養，在3(TC 32'C下培養16 24小時，達到菌種的最大生長
對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為10 15g;葡萄糖為20 30g;瓊脂 為15 20g;蒸餾水為1000mL，上述培養基的PH值為5.0 5.6。
液體種子培養基的組成蛋白胨為10 15g;葡萄糖為20 30g;蒸餾水為 1000 mL;上述培養基的PH值為5.0 5.6。
丙酮酸鈣與丙酮酸直接參與人體的新陳代謝，是人體細胞在進行有機物氧 化供能過程中的重要中間產物，每天補充2 6g是顯效的劑量，過多攝入意義不
大，根據上述工藝方法所制備的多肽鈣保健飲料所含有效成份最佳組合方案可 以為每100mL的水中主要含有以下重量份的組份丙酮酸鈣2.0 2.4g、 氨基酸0.85g 0.96g、多肽0.4 0.6g，還可以含有以下重量份的組份 水溶性蛋白0.6 0.78g、維生素0.02 0.035g。
所述維生素是維生素B1、維生素B2、維生素C、維生素E、維生素B12中的 任一種或幾種。
本發明利用生物發酵法生產丙酮酸鈣產品，避免生產過程中直接使用用化 學合成法制備的丙酮酸，保證了產品的安全性，且大大節省了生產成本，在采
5用生物發酵法生產丙酮酸鹽的過程中，沒有污染物排出，減少環境污染，所述 多肽鈣保健飲料其主要成分丙酮酸鈣是一種新型的、安全的食品酸味劑， 它具有加速脂肪消耗、減輕體重、增強人體耐力、吞噬自由基和抑制自 由基的生成等重要生理作用。所述多肽鈣保健飲料充分利用了發酵液中所含 有的對人體有用的營養成份，食用安全，營養豐富，對人體有多種保健作用， 其制備方法與化學合成法相比，所提供的生物發酵法具有原料成本低、來源廣 泛、生產產品純度高、質量好、生產反應條件溫和的優點。
具體實施例方式
實施例l:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入口服葡萄糖90g、食品級蛋白胨3g、 食品級碳酸鈣30g，將上述原料混合，混合物的pH值為5.0，將上述混合物在108 'C溫度下進行10分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將假絲球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在3(TC下培養16小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養20小 時，當菌種濃度達到0.8%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在28。C，壓力為0.03Mpa，時間為48小時，在發酵過程 中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長 外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止發 酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在8(TC溫度下持續滅活10分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用IOO "C蒸汽在0.9MPa壓力下進行10秒瞬間消毒即可。
上述假絲球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4'C冰箱中，半年活化更新一次。
上述假絲球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在3(TC下培養16小時， 達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為10g;葡萄糖為20g;瓊脂為15g;蒸
餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.0。
液體種子培養基的組成蛋白胨為10g;葡萄糖為20g;蒸餾水1000mL， 上述培養基的PH值為5,0。
實施例2:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入葡萄糖95g、蛋白胨7g、碳酸f丐33g， 將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.1，將上述混合物在11(TC溫度下進 行ll分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將假絲球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在30.5。C下培養18小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養21小 時，當菌種濃度達到0.9%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在29'C，壓力為0.035Mpa，時間為49小時，在發酵過 程中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生 長外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止 發酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在82。C溫度下持續滅活12分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用IOI °C蒸汽在1 .OMPa壓力下進行11秒瞬間消毒即可。
上述假絲球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4t:冰箱中，八個月活化更新一次。
上述假絲球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量廳/500mL，在30.5。C下培養17小 時，達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為llg;葡萄糖為22g;瓊脂為16g;蒸 餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.2。
液體種子培養基的組成蛋白胨為llg;葡萄糖為22g;蒸餾水為IOOO mL，上述培養基的PH值為5.2。實施例3:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的-
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入葡萄糖100g、蛋白胨9g、碳酸^ 35g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.2，將上述混合物在113。C溫度 下進行12分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將假絲球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在3rc下培養20小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養22小 時，當菌種濃度達到1.0%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在3(TC，壓力為0.04Mpa，時間為51小時，在發酵過程 中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長 外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止發 酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在84'C溫度下持續滅活14分鐘， 使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用102'C 蒸汽在1.1 MPa壓力下進行12秒瞬間消毒即可。
上述假絲球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4'C冰箱中，九個月活化更新一次。
上述假絲球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在3rc下培養20小時， 達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為12g;葡萄糖為24g;瓊脂為17g;蒸 餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.3。
液體種子培養基的組成蛋白胨為12g;葡萄糖為24g;蒸餾水為IOOO mL，上述培養基的PH值為5.3。
實施例4:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的 (1)發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入葡萄糖110g、蛋白胨12g、碳酸鈣38g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.4，將上述混合物在118。C溫度
下進行14分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將假絲球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在31.5。C下培養22小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養23小 時，當菌種濃度達到1.1°/。時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在3rC，壓力為0.045Mpa，時間為54小時，在發酵過 程中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生 長外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止 發酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在9(TC溫度下持續滅活18分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用103 'C蒸汽在l，2MPa壓力下進行10秒瞬間消毒即可。
上述假絲球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4。C冰箱中，十個月活化更新一次。
上述假絲球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在31.5'C下培養22小 時，達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨14g;葡萄糖28g;瓊脂19g;蒸
餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.5。
液體種子培養基的組成蛋白胨14g;葡萄糖28g ;蒸餾水1000 mL，上述培養基的PH值為5.5。
實施例5:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入葡萄糖120g、蛋白胨15g、碳酸齊 40g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.6，將上述混合物在12(TC溫度 下進行15分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將假絲球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在32。C下培養24小時，當達到菌種的最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養24小 時，當菌種濃度達到1.2%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在32'C，壓力為0.05Mpa，時間為56小時，在發酵過程 中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長 外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止發 酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在95°C溫度下持續滅活20分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用104 t:蒸汽在0.9MPa壓力下進行ll秒瞬間消毒即可。
上述假絲球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4'C冰箱中，l年活化更新一次。
上述假絲球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在32'C下培養24小時， 達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨15g;葡萄糖30g;瓊脂20g;蒸 餾水勵OmL，上述培養基的PH值為5.6。
液體種子培養基的組成蛋白胨15g;葡萄糖30g ;蒸餾水1000mL，
上述培養基的PH值為5.6。 實施例6:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入口服葡萄糖90g、食品級蛋白胨3g、 食品級碳酸鈣30g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.0，將上述混合 物在10^C溫度下進行10分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養-
將光滑球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在3(TC下培養16小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養20小 時，當菌種濃度達到0.8%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在28'C，壓力為0.03Mpa，時間為48小時，在發酵過程中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長 外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止發
酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在8(TC溫度下持續滅活10分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用105 "C蒸汽在1.0MPa壓力下進行12秒瞬間消毒即可。
上述光滑球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4'C冰箱中，半年活化更新一次。
上述光滑球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在3(TC下培養16小時， 達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為10g;葡萄糖為20g;瓊脂為15g;蒸 餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.0。
液體種子培養基的組成蛋白胨為10g;葡萄糖為20g;蒸餾水1000mL， 上述培養基的PH值為5.0。
實施例7:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入口服葡萄糖95g、食品級蛋白胨7g、 食品級碳酸鈣33g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.1，將上述混合 物在11(TC溫度下進行11分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養-
將光滑球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在30.5X:下培養18小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養21小 時，當菌種濃度達到0.9%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在29"C，壓力為0.035Mpa，時間為49小時，在發酵過 程中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生 長外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1°/。以下時，終止 發酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在82t:溫度下持續滅活12分鐘，使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5)將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用100 。C蒸汽在l.lMPa壓力下進行ll秒瞬間消毒即可。
上述光滑球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4"C冰箱中，八個月活化更新一次。
上述光滑球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于
液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在30.5。C下培養17小 時，達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為llg;葡萄糖為22g;瓊脂為16g;蒸 餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.2。
液體種子培養基的組成蛋白胨為llg;葡萄糖為22g;蒸餾水為IOOO mL，上述培養基的PH值為5.2。
實施例8:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入口服葡萄糖100g、食品級蛋白胨9g、 食品級碳酸鈣35g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.2，將上述混合 物在113。C溫度下進行12分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將光滑球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在3rc下培養20小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養22小 時，當菌種濃度達到1.0%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在3(TC，壓力為0.04Mpa，時間為51小時，在發酵過程 中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長 外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止發 酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在84。C溫度下持續滅活14分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用102 °C蒸汽在1.2MPa壓力下進行12秒瞬間消毒即可。
上述光滑球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保存在4'C冰箱中，九個月活化更新一次。
上述光滑球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于
液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在3rc下培養20小時， 達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為12g;葡萄糖為24g;瓊脂為17g;蒸
餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.3。
液體種子培養基的組成蛋白胨為^g;葡萄糖為24g;蒸餾水為IOOO mL，上述培養基的PH值為5.3。
實施例9:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝歩驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入口服葡萄糖110g、食品級蛋白胨12g 、食品級碳酸鈣38g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.4，將上述混合 物在118"C溫度下進行14分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將光滑球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在31.5t:下培養22小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養23小 時，當菌種濃度達到1.1%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在3rC，壓力為0.045Mpa，時間為54小時，在發酵過 程中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生 長外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止 發酵；
(4) 將上述含有丙酮酸轉和菌種的發酵液在9(TC溫度下持續滅活18分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用104 °C蒸汽在0.9MPa壓力下進行1 O秒瞬間消毒即可。
上述光滑球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4t:冰箱中，十個月活化更新一次。
上述光滑球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在31.5'C下培養22小 時，達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。斜面固體種子培養基的組成蛋白胨14g;葡萄糖28g;瓊脂19g;蒸
餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.5。
液體種子培養基的組成蛋白胨"g;葡萄糖28g ;蒸餾水1000
mL，上述培養基的PH值為5.5。
實施例10:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入口服葡萄糖120g、食品級蛋白胨15g 、食品級碳酸鈣40g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.6，將上述混 合物在12(TC溫度下進行15分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將光滑球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在32i:下培養24小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養24小 時，當菌種濃度達到1.2%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在32。C，壓力為0.05Mpa，時間為56小時，在發酵過程 中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長 外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止發 酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在95°C溫度下持續滅活20分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用102 i:蒸汽在1.0MPa壓力下進行12秒瞬間消毒即可。
上述光滑球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固休種子培養基，保
存在4t:冰箱中，i年活化更新一次。
上述光滑球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于
液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在32'C下培養24小時， 達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨15g;葡萄糖30g;瓊脂20g;蒸
餾水IOOO mL，上述培養基的PH值為5.6。
液體種子培養基的組成蛋白胨15g;葡萄糖30g ;蒸餾水1000mL， 上述培養基的PH值為5.6。實施例ll:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入口服葡萄糖90g、食品級蛋白胨3g、 食品級碳酸鈣30g，將上述原料混合，混合物的pH值為5.0，將上述混合物在108 "溫度下進行10分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將假絲球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在3(TC下培養16小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養20小 時，當菌種濃度達到0.8%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在28t:，壓力為0.03Mpa，時間為48小時，在發酵過程 中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長 外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止發 酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在8(TC溫度下持續滅活10分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用IOO "C蒸汽在l.lMPa壓力下進行10秒瞬間消毒，在常溫下加入維生素C為0.02g 和水溶性蛋白0.6g即可。
上述假絲球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4'C冰箱中，半年活化更新一次。
上述假絲球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/S00mL,在3(TC下培養16小時，
達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為10g;葡萄糖為20g;瓊脂為15g;蒸
餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.0。
液體種子培養基的組成蛋白胨為10g;葡萄糖為20g;蒸餾水1000mL，
上述培養基的PH值為5.0。 實施例12:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的 (1)發酵培養基配料-、蛋白胨7g、碳酸鈣33g， 將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.1，將上述混合物在110'C溫度下進 行ll分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將假絲球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在30.5t:下培養18小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養21小 時，當菌種濃度達到0.9%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在29。C，壓力為0.035Mpa，時間為49小時，在發酵過 程中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生 長外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止 發酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在82i:溫度下持續滅活12分鐘， 使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用iorc
蒸汽在1.2MPa壓力下進行ll秒瞬間消毒在常溫下加入維生素Bl為0.022g 和水溶性蛋白0.62g即可。
上述假絲球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4'C冰箱中，八個月活化更新一次。
上述假絲球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在30.5t:下培養17小 時，達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為llg;葡萄糖為22g;瓊脂為16g;蒸 餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.2。
液體種子培養基的組成蛋白胨為llg;葡萄糖為22g;蒸餾水為IOOO mL，上述培養基的PH值為5.2。
實施例13:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的 (1)發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入葡萄糖100g、蛋白胨9g、碳酸鈣 35g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.2，將上述混合物在113。C溫度 下進行12分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；(2) 發酵菌種培養
將假絲球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在3rc下培養20小時，當達到菌種的
最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養22小
時，當菌種濃度達到1.0%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在3(TC，壓力為0.04Mpa，時間為51小時，在發酵過程 中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長 外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1°/。以下時，終止發 酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在84'C溫度下持續滅活14分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用102。C 蒸汽在l.lMPa壓力下進行12秒瞬間消毒在常溫下加入維生素B2為0.024g 和水溶性蛋白0.63g即可。
上述假絲球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4t:冰箱中，九個月活化更新一次。
上述假絲球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在3rc下培養20小時， 達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為12g;葡萄糖為24g;瓊脂為17g;蒸 餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.3。
液體種子培養基的組成蛋白胨為12g;葡萄糖為24g;蒸餾水為IOOO mL，上述培養基的PH值為5.3。
實施例14:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料-
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入葡萄糖110g、蛋白胨12g、碳酸轉 38g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.4，將上述混合物在118"C溫度 下進行14分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將假絲球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在31.5"下培養22小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養23小
17時，當菌種濃度達到1.1%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在3rc，壓力為0.045Mpa，時間為54小時，在發酵過 程中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生 長外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1°/。以下時，終止 發酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在9(TC溫度下持續滅活18分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用103 'C蒸汽在1.0MPa壓力下進行10秒瞬間消毒，在常溫下加入維生素E0.025g 和水溶性蛋白0.64g即可。
上述假絲球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4"C冰箱中，十個月活化更新一次。
上述假絲球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在31.5'C下培養22小 時，達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨14g;葡萄糖28g;瓊脂19g;蒸
餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.5。
液體種子培養基的組成蛋白胨14g;葡萄糖28g ;蒸餾水1000
mL，上述培養基的PH值為5.5。
實施例15:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入葡萄糖120g、蛋白胨15g、碳酸鈣 40g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.6，將上述混合物在12(TC溫度 下進行15分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將假絲球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在32。C下培養24小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養24小 時，當菌種濃度達到1.2%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在32t:，壓力為0.05Mpa，時間為56小時，在發酵過程中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長 外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止發 酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在95i:溫度下持續滅活20分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用104 "C蒸汽在0.9MPa壓力下進行ll秒瞬間消毒，在常溫下加入維生素E和維 生素B 12為0.027g和水溶性蛋白0.68g即可。
上述假絲球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4'C冰箱中，l年活化更新一次。
上述假絲球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在32X:下培養24小時， 達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨15g;葡萄糖30g;瓊脂20g;蒸
餾水IOOO mL，上述培養基的PH值為5.6。
液體種子培養基的組成蛋白胨15g;葡萄糖30g ;蒸餾水1000mL，
上述培養基的PH值為5.6。 實施例16:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入口服葡萄糖90g、食品級蛋白胨3g、 食品級碳酸鈣30g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.0，將上述混合 物在108。C溫度下進行10分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將光滑球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在3(TC下培養16小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養20小 時，當菌種濃度達到0.8%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在28'C，壓力為0.03Mpa，時間為48小時，在發酵過程 中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長 外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止發 酵；(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在8(TC溫度下持續滅活10分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用105 "C蒸汽在1.0MPa壓力下進行12秒瞬間消毒，在常溫下加入維生素C 0.03g 和水溶性蛋白0.68g即可。
上述光滑球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4'C冰箱中，半年活化更新一次。
上述光滑球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于
液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在3(TC下培養16小時， 達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為10g;葡萄糖為20g;瓊脂為15g;蒸 餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.0。
液體種子培養基的組成蛋白胨為10g;葡萄糖為20g;蒸餾水1000mL， 上述培養基的PH值為5.0。
實施例17:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入口服葡萄糖95g、食品級蛋白胨7g、 食品級碳酸鈣33g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.1，將上述混合 物在110'C溫度下進行11分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將光滑球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在30.5'C下培養18小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養21小 時，當菌種濃度達到0.9%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在29'C，壓力為0.035Mpa，時間為49小時，在發酵過 程中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生 長外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止 發酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在82t:溫度下持續滅活12分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用IOO
20。C蒸汽在l.lMPa壓力下進行ll秒瞬間消毒，在常溫下加入維生素E0.032g 和水溶性蛋白0.7g即可。
上述光滑球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4t:冰箱中，八個月活化更新一次。
上述光滑球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于
液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在30.5t下培養17小 時，達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為llg;葡萄糖為22g;瓊脂為16g;蒸 餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.2。
液體種子培養基的組成蛋白胨為llg;葡萄糖為22g;蒸餾水為IOOO mL，上述培養基的PH值為5.2。
實施例18:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入口服葡萄糖100g、食品級蛋白胨9g、 食品級碳酸鈣35g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.2，將上述混合 物在113'C溫度下進行12分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將光滑球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在3rc下培養20小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養22小 時，當菌種濃度達到1.0%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在3(TC，壓力為0.04Mpa，時間為51小時，在發酵過程 中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長 外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止發 酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在84t:溫度下持續滅活14分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質,然后用102t: 蒸汽在1.2MPa壓力下進行12秒瞬間消毒，在常溫下加入維生素Bl為0.033g 和水溶性蛋白0.72g即可。
上述光滑球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保存在4'C冰箱中，九個月活化更新一次。
上述光滑球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于
液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在3rc下培養20小時， 達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為12g;葡萄糖為24g;瓊脂為17g;蒸
餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.3。
液體種子培養基的組成蛋白胨為12g;葡萄糖為24g;蒸餾水為IOOO mL，上述培養基的PH值為5.3。
實施例19:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入口服葡萄糖110g、食品級蛋白胨12g 、食品級碳酸鈣38g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.4，將上述混合 物在118'C溫度下進行14分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養-
將光滑球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在31.5'C下培養22小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養23小 時，當菌種濃度達到1.1%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在3rC，壓力為0.045Mpa，時間為54小時，在發酵過 程中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生 長外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止 發酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在9(TC溫度下持續滅活18分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用104'C 蒸汽在1.0MPa壓力下進行10秒瞬間消毒，在常溫下加入維生素B2為0.035g 和水溶性蛋白0.74g即可。
上述光滑球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4。C冰箱中，十個月活化更新一次。
上述光滑球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在31.5'C下培養22小時，達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨14g;葡萄糖28g;瓊脂19g;蒸
餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.5。
液體種子培養基的組成蛋白胨"g;葡萄糖28g ;蒸餾水1000
mL,上述培養基的PH值為5.5。
實施例20:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入口服葡萄糖120g、食品級蛋白胨15g 、食品級碳酸鈣40g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.6，將上述混 合物在12(TC溫度下進行15分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將光滑球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在32t:下培養24小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養24小 時，當菌種濃度達到1.2%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在32。C，壓力為0.05Mpa，時間為56小時，在發酵過程 中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長 外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止發 酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在95。C溫度下持續滅活20分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用102 'C蒸汽在1.2MPa壓力下進行12秒瞬間消毒，在常溫下加入維生素B12為 0.03g和水溶性蛋白0.78g即可。
上述光滑球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4'C冰箱中，l年活化更新一次。
上述光滑球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在32t:下培養24小時， 達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨15g;葡萄糖30g;瓊脂20g;蒸
餾水IOOO mL，上述培養基的PH值為5.6。
23液體種子培養基的組成蛋白胨15g;葡萄糖30g ;蒸餾水1000mL， 上述培養基的PH值為5.6。 實施例21:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的 (1 )發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入口服葡萄糖110g、食品級蛋白胨12g 、食品級碳酸鈣38g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.4，將上述混合 物在118'C溫度下進行14分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將光滑球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在31.5'C下培養22小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養23小 時，當菌種濃度達到1.1%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在3rC，壓力為0.045Mpa，時間為54小時，在發酵過 程中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生 長外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止 發酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在9(TC溫度下持續滅活18分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質,然后用104'C 蒸汽在0.9MPa壓力下進行10秒瞬間消毒，在常溫下加入水溶性蛋白0.74g 即可。
上述光滑球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4t:冰箱中，十個月活化更新一次。
上述光滑球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在31.5t:下培養22小 時，達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨14g;葡萄糖28g;瓊脂19g;蒸 餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.5。
液體種子培養基的組成蛋白胨14g;葡萄糖28g ;蒸餾水1000
mL，上述培養基的PH值為5.5。 實施例22:本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入口服葡萄糖95g、食品級蛋白胨7g、 食品級碳酸鈣33g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.1，將上述混合 物在110°C溫度下進行11分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將光滑球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在30.5t:下培養18小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養21小 時，當菌種濃度達到0.9%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在29t:，壓力為0.035Mpa，時間為49小時，在發酵過 程中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生 長外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止 發酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在82t:溫度下持續滅活12分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用IOO 'C蒸汽在l.lMPa壓力下進行ll秒瞬間消毒，在常溫下加入水溶性蛋白0.6g即可。
上述光滑球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4'C冰箱中，八個月活化更新一次。
上述光滑球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在30.5t:下培養17小 時，達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為llg;葡萄糖為22g;瓊脂為16g;蒸 餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.2。
液體種子培養基的組成蛋白胨為llg;葡萄糖為22g;蒸餾水為IOOO mL，上述培養基的PH值為5.2。 實施例23:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的 (1)發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入葡萄糖120g、蛋白胨15g、碳酸躬40g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.6，將上述混合物在12(TC溫度
下進行15分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養
將假絲球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在32'C下培養24小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養24小 時，當菌種濃度達到1.2%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在32t:，壓力為0.05Mpa，時間為56小時，在發酵過程 中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長 外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止發 酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在95'C溫度下持續滅活20分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用104 "C蒸汽在1.2MPa壓力下進行ll秒瞬間消毒，在常溫下加水溶性蛋白0.78g 即可。
上述假絲球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4"C冰箱中，l年活化更新一次。
上述假絲球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于
液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在32C下培養24小時， 達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨15g;葡萄糖30g;瓊脂20g;蒸
餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.6。
液體種子培養基的組成蛋白胨15g;葡萄糖30g ;蒸餾水1000mL，
上述培養基的PH值為5.6。
實施例24:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的-
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入葡萄糖100g、蛋白胨9g、碳酸車丐 35g，將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.2，將上述混合物在113。C溫度 下進行12分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養將假絲球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在3rc下培養20小時，當達到菌種的
最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養22小
時，當菌種濃度達到1.0%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在3(TC，壓力為0.04Mpa，時間為51小時，在發酵過程 中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長 外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1°/。以下時，終止發 酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在84i:溫度下持續滅活14分鐘，
使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用102 r蒸汽在1.0MPa壓力下進行12秒瞬間消毒，在常溫下放入維生素E0.02g 即可。
上述假絲球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4"C冰箱中，九個月活化更新一次。
上述假絲球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于 液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在3rc下培養20小時， 達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為12g;葡萄糖為24g;瓊脂為17g;蒸 餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.3。
液體種子培養基的組成蛋白胨為12g;葡萄糖為2^;蒸餾水為IOOO mL，上述培養基的PH值為5.3。
實施例25:
本實施例中多肽IM呆健飲料是由以下工藝步驟制備而成的 (1 )發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入口服葡萄糖90g、食品級蛋白胨3g、 食品級碳酸鈣30g，將上述原料混合，混合物的pH值為5.0，將上述混合物在108 'C溫度下進行10分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用； (2)發酵菌種培養
將假絲球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在3(TC下培養16小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養20小 時，當菌種濃度達到0.8%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
27(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在28t:，壓力為0.03Mpa，時間為48小時，在發酵過程 中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長 外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止發 酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在8(TC溫度下持續滅活10分鐘， 使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質,然后用10(TC 蒸汽在l.lMPa壓力下進行10秒瞬間消毒,在常溫下加入維生素E和維生素 Bl為0.03g即可。
上述假絲球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保
存在4"C冰箱中，半年活化更新一次。
上述假絲球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于
液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/500mL，在3(TC下培養16小時， 達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為10g;葡萄糖為20g;瓊脂為15g;蒸 餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.0。
液體種子培養基的組成蛋白胨為10g;葡萄糖為20g;蒸餾水1000mL， 上述培養基的PH值為5.0。
實施例26:
本實施例中多肽鈣保健飲料是由以下工藝步驟制備而成的
(1) 發酵培養基配料
在常溫下，在1000mL的蒸餾水中放入葡萄糖95g、蛋白胨7g、碳酸鈣33g， 將上述混合物充分混合，混合物的pH值為5.1，將上述混合物在11(TC溫度下進 行ll分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；
(2) 發酵菌種培養-
將假絲球擬酵母菌種進行搖瓶培養，在30.5。C下培養18小時，當達到菌種的 最大生長對數期時進入種子罐進行種子擴大培養，菌種在種子罐中培養21小 時，當菌種濃度達到0.9%時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；
(3) 發酵
發酵過程中溫度控制在29'C，壓力為0.035Mpa，時間為49小時，在發酵過 程中，發酵罐中含有高濃度的葡萄糖，此時的葡萄糖，除了保證菌種的正常生長外，還為生產丙酮酸提供原料，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1%以下時，終止 發酵；
(4) 將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在82r溫度下持續滅活12分鐘， 使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液；
(5) 將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質,然后用iorc
蒸汽在1.2旨3壓力下進行11秒瞬間消毒，在常溫下加入維生素82為0.035§即可。
上述假絲球擬酵母菌種的保存將上述菌種置于斜面固體種子培養基，保 存在4。C冰箱中，八個月活化更新一次。
上述假絲球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于
液體種子培養基中，進行搖瓶培養，裝液量100/S00mL，在30.5。C下培養17小 時，達到菌種的最大生長對數期，進入種子罐進行種子擴大培養。
斜面固體種子培養基的組成蛋白胨為llg;葡萄糖為22g;瓊脂為16g;蒸 餾水1000mL，上述培養基的PH值為5.2。
液體種子培養基的組成蛋白胨為llg;葡萄糖為22g;蒸餾水為IOOO mL，上述培養基的PH值為5.2。
29
權利要求
1、一種多肽鈣保健飲料，其特征在于是由下述工藝方法所制備而成的(1)發酵培養基配料在每1000mL的水中放入口服葡萄糖90g～120g、食品級蛋白胨3～15g、食品級碳酸鈣30g～40g充分混合，混合物的pH值為5.0～5.6，將上述混合物在108℃～120℃溫度下進行10分鐘～15分鐘滅菌后，放入發酵罐中備用；(2)發酵菌種培養將甲絲球擬酵母或光滑球擬酵母在30～32℃下培養16～24小時后進行種子擴大培養，菌種培養20～24小時，當菌種濃度重量比達到0.8％～1.2％時，轉入上述發酵罐中進行發酵培養；(3)發酵發酵過程中溫度控制在28℃～32℃，壓力為0.03Mpa～0.05Mpa，時間為48～56小時，當發酵液中葡萄糖殘糖降至1％以下時，終止發酵；(4)將上述含有丙酮酸鈣和菌種的發酵液在80℃～95℃溫度下持續滅活10分鐘～20分鐘，使菌種失去活力，即得丙酮酸鈣溶液備用；(5)將上述所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后用100℃～105℃蒸汽在0.9MPa～1.20MPa壓力下進行10秒～12秒瞬間消毒即可。
2、 如權利要求l所述的多肽鈣保健飲料，其特征在于所述工藝步驟中用IOO t: 105t:蒸汽在0.9MPa 1.2MPa壓力下進行10秒 12秒瞬間消毒之后,在常溫下加入維生素和水溶性蛋白其中的一種或兩種即可。
3、 如權利要求l所述的多肽鈣保健飲料，其特征在于所述假絲球擬酵母或 光滑球擬酵母菌種的活化在斜面固體種子培養基上取一環菌種置于液體種子 培養基中，進行搖瓶培養，在3(TC 32t:下培養16 24小時后，進入種子罐進行種子擴大培養。
4、 如權利要求3所述的多肽鈣保健飲料，其特征在于所述斜面固體種子培 養基的組成蛋白胨為10 15g;葡萄糖為20 30g;瓊脂為15 20g;蒸餾水 1000 mL，上述培養基的PH值為5.0 5.6。
5、 如權利要求3所述的多肽鈣保健飲料，其特征在于所述液體種子培養基 的組成蛋白胨為10 15g;葡萄糖為20 30g;蒸餾水1000mL，上述培養基 的PH值為5.0 5.6。
6、 如權利要求l、 2、 3、 4、或5所述的多肽鈣保健飲料，其特征在于每lOOmL的水中主要含有以下重量份的組份丙酮酸鈣2.0 2.4g、氨基酸，0.85g 0.96g、多肽0.4 0.6g。
7、 如權利要求6所述的多肽鈣保健飲料，其特征在于含有以下重量份的組 份水溶性蛋白0.6 0.78g。
8、 如權利要求6所述的多肽鈣保健飲料，其特征在于含有以下重量份的組 份維生素0.02 0.035g。
9、 如權利要求2或8所述的多肽鈣保健飲料，其特征在于所述維生素是維生 素B1、維生素B2、維生素C、維生素E、維生素B12中的任一種或幾種。
全文摘要
本發明涉及一種多肽鈣保健飲料，特點是由下述工藝方法所制備(1)發酵培養基配料；(2)發酵菌種培養；(3)發酵；(4)將所得丙酮酸鈣溶液沉淀，經過濾去除雜質，然后瞬間消毒即可。本發明利用生物發酵法生產丙酮酸鈣產品，避免生產過程中直接使用用化學合成法制備的丙酮酸，保證了產品的安全性，且節省了生產成本，在采用生物發酵法生產丙酮酸鹽的過程中，沒有污染物排出，減少環境污染，本發明充分利用了發酵液中所含有的對人體有用的營養成份，食用安全，營養豐富，對人體有多種保健作用，其制備方法與化學合成法相比，所提供的生物發酵法具有原料成本低、來源廣泛、生產產品純度高、質量好、生產反應條件溫和的優點。
文檔編號A23L2/66GK101589816SQ20091011324
公開日2009年12月2日 申請日期2009年3月5日 優先權日2009年3月5日
發明者剛 葉, 健 張, 李良泉, 健 王, 俊 陶, 碩 韓, 偉 黃 申請人:石河子開發區天富飲品有限公司