專利名稱：：暗紅產色鏈霉菌及其在病害生物防治中的應用的制作方法
技術領域：
：本發明涉及一種微生物新菌株及其應用，具體涉及--種鏈霉菌屬暗紅產色鏈霉菌菌株及其在病害生物防治中的應用。
背景技術：
：番茄灰霉病是一種世界性重要病害，該病菌主要危害果實，對番茄生產構成極大威脅。我國20世紀80年代開始發生蔓延，目前各地均有發生，已經成為番茄設施栽培的限制性障礙，一般可造成番茄減產20%30%，嚴重時可高達50%以上，嚴重影響番茄的產量和品質。因此，番茄灰霉病的防治已成為保護生產發展的關鍵性措施，直接決定著番茄的產量和經濟效益。番茄灰霉病是由灰葡萄孢菌(BotrytiscinereaPers.)引起的真菌病害，灰葡萄孢菌屬半知菌亞門真菌。孢子梗數根叢生，具隔，褐色，頂端呈卜2次分枝,梗頂稍膨大，呈棒頭狀，其上密生小柄并著生大量分生孢子，孢梗長短與著生部位有關。分生孢子圓形至橢圓形或水滴形，單細胞，近無色，大小(6.2513.75)微米X(6.2510.0)微米，寄主上通常少見菌核，但當田間條件惡化后，則可產生黑色片狀菌核。培養基--匕菌絲透明無色，具隔。病原菌灰葡萄孢(Botrytiscinerea)以菌絲體、分生孢子、菌核隨病殘體在土壤中越冬，菌核萌發產生大量的分生孢子進行初侵染和重復侵染，侵染的最適溫度為1020。C，在2。C和25t;也能侵染。番茄灰霉病主要發生在花期和結果期，可危害花、果實、葉片和莖。采后儲藏和運輸過程中溫度條件適宜時便可大面積發病，是導致果實儲藏損失的直接原因。由于目前尚未發現灰霉病的抗原，抗病育種難以進行，國外多采用栽培防治(調控溫室的溫度、濕度)(MorgenWM，1984)，我國在現有條件很難大范圍的實施，因此主要采用化學防治，應用的藥劑主要有三類苯并咪唑類(Benzimidazoles)、二甲酰氨類(Dicarboximides)、N-苯氨基甲酸酉旨類(N_phenylcarbamat.es)。生產」二應用的各類化學藥劑主要有多菌靈(Carbendazim)、甲基托布津(Thiophanate-methyl)、異菌脲(]:prodione)和乙霉威(Diethofencarb)等。但是在連續使用藥劑的情況下，病菌逐漸產生了抗藥性，防效逐年下降。此外，由于施藥的主體多為果實，所以造成農藥高殘留的隱患。同時，長時間大量的使用這些化學農藥，不僅使灰葡萄孢的高抗菌株成為優勢菌株，甚至出現了多重抗藥性菌株。結果導致這些化學藥劑的防效逐漸下降，同時也造成了環境污染。因此，近年來，人們努力通過尋找對番茄灰霉病菌有抑制作用的有益微生物及其代謝產物，嘗試探索出新的對番茄灰霉病有較好防治效果的生物防治途徑。采用生物防治的方法控制病蟲害，能夠減輕環境污染、維護生態平衡、節約能源，尤其是它的生態效益和社會效益，越來越受到社會各界的重視。目前番茄灰霉病的生物防治方法主要是利用拮抗菌來進行防治，包括真菌、細菌和放線菌，其作用方式有競爭、重寄生和抗生作用。用于控制番茄灰霉病的真菌主要有木霉菌(Trichoderma)、酵母菌和粘帚菌(Giocladium)。Newhook將芽枝霉(Cladosporii皿)孢子懸浮液噴灑在番茄植株上，以減3少果實灰霉病的發生，而成為世界上較早用真菌防治灰霉病菌的例子。通過長時間的探索，國內外的許多研究人員均發現木霉(Trichoderma)和粘帚霉(Giocladium)能夠有效地抑制灰霉菌。木霉主要有哈茨木霉(T.harzianumT39)、綠色木霉(viride)、鉤狀木霉(T.haraatura)和擬康氏木霉(T.pseudoningii)等。Elad等在溫室中用哈茨木霉防治黃瓜灰霉病和葡萄灰霉病，防治效果達到了90%，由該菌株研制出的商品制劑Trichodex，已經在歐洲和北美等20多個國家注冊、推廣。我國國內對防病生防真菌研究有趙蕾將篩選出的綠色木霉用于防治黃瓜和番茄灰霉病，其田問防治效果分別為89.97%和74.20%。應用酵母菌防治番茄灰霉病的有黑色酵母菌(Exophialajeanselmei)、淺白隱球酵母菌(Cryptococcusalbidus)和紅酵母菌(Rhodotorulaglutinis)等。Redmond等用黑色酵母菌(E.jeanselmei)和淺白隱球酵母菌(C.albidus)防治玫瑰灰霉病，其中黑色酵母菌防治效果達到了63%，這雖然與殺菌劑撲海因(iprodione)74%的防治效果有一定差距，但足可見其良好的防治前景。Elad等也分離出腐生性酵母菌紅酵母菌(R.glutinis)和淺白隱球酵母菌(C.albidus)，對菜豆和番茄的灰霉病菌都有很好的防治效果，其在溫室內的防治效果已經和哈茨木霉相當。用于控制番茄灰霉病的細菌主要有枯草芽孢桿菌(Bacilussubtilis)、地衣芽孢桿菌(Bacilluslichemformis)禾口熒光假單胞菌(Pseudomonasfluorescens)等。薛德林等分離到的地衣芽孢桿菌，由該菌發酵產生的生物農藥寧康霉素，以100ml/畝用量，稀釋20-40倍，對防治番茄灰霉病效果可達78.4%-89.2%。用于控制番茄灰霉病的拮抗放線菌主要集中在鏈霉菌屬(Str印tomyces)，由鏈霉菌產生的武夷菌素(Wuyiencin)、磷氮霉素(PhosPhzaomzin)、白肽霉素(Albop印ttin)、變構霉素(Taut.omycin)、變構菌素(Tautolnycein)和魚時霉素(EzomycinS)等抗生素對番茄灰霉病均有較好的防治效果。從土壤中分離出可作為果蔬病害生防菌的微生物報道較多。目前微生物中發現的大約80()()中生物活性物質中，近70%為放線菌所產生。利用放線菌的次生代謝產物制備新型防腐劑具有無污染、不易使有害生物產生抗藥性等特點，已成為無公害防腐劑的主體和未來果蔬防腐劑的發展方向。但利用暗紅產色鏈霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)應用于蔬菜灰霉病防治還未見報道。
發明內容本發明的目的在于提供一株暗紅產色鏈霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)新菌株及其在植物病害生物防治中的應用。本發明菌株是從山東壽光溫室番茄種植田土樣中分離得到的暗紅產色鏈霉菌(Str印tomyceseryt.hrochromogenes)新菌株M028。該菌株已于2009年8月17日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(地址北京市朝陽區大屯路甲3號，中國科學院微生物研究所，郵編100101)保藏，分類命名為暗紅產色鏈霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)，保藏號為CGMCCNO.3228。M028具體通過如下方法分離得到的從溫室番茄種植田中采集土樣，取10g的土溶解到90ml無菌生理鹽水的三角瓶中，振蕩15min后靜止lmin，取100u1的上清液加入到裝有■ii1生理鹽水的Eppendorf管中，進行連續梯度稀釋。分別取以上土壤懸4浮液和10—2，10—3，10—4倍土壤懸浮液稀釋液100u1在改良高氏--號培養基(可溶性淀粉20.0g，KN031.0g，KH2P040.5g，MgS04*7H200.5g，NaClO.5g，FeS040.Olg，瓊月旨18.Og，12rC高壓滅菌30min,使用前每300ml培養基加入3%重鉻酸鉀1ml)平板上均勻涂板，超凈工作臺內吹干，每個濃度重復3次。28。C溫箱中培養36小時后，用無菌牙簽挑取細菌單菌落劃線純化后，以5mm直徑的番茄灰霉病菌Botrytiscinerea為靶標,采用平板對峙培養法以進行拮抗菌的初步篩選；對獲得的拮抗菌再將其于PDA液體培養基(馬鈴薯200g，葡萄糖20g,水lOOOmL)中搖培，每隔12h取出2ml搖勻的菌懸液，13000rpm，25。C離心5min，取上清發酵液用來檢測對灰霉病的抑制效果；在番茄離體果實、葉片上獲得的菌株對灰霉病的防效檢測試驗，從而篩選出對番茄灰霉病生防效果較好的生防菌暗紅產色鏈霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)M028(保藏號CGMCCNO.3228)。綜合鏈霉菌的形態學特征、生理生化特性、16SrDNA序列結果，將其鑒定為鏈霉菌屬暗紅產色鏈霉菌(Streptomyceserythrochromogenes)。抑菌試驗表明，M028對于部分植物病原真菌具有抑制作用，例如對番茄灰霉病菌(Botryt.iscinerea)、小麥紋枯病菌(Rhizoctoniacerealis)、禾舀癌病菌(Pyriculariaoryzae)、西瓜枯萎病菌(F.oxysporumf.sp.niveum)、百合根腐病菌(Rhizoctoniasolani)、桃褐腐病菌(Moniliniafructicola)、番茄早疫病菌(Alternariasolani)，小長喙霉病菌、串珠鐮刀病菌(Fussariummoniliforme)，水稻紋枯病菌(RhizoctoniasolaniKtihn)等均有平板抑制作用。對部分植物病原細菌也具有抑制作用，例如對茄青枯(Ralstoniasolanacearum)、棉角斑(Xanthomonas)、丁香假單胞(Pseudomonassyringae)、K27(Agrobacteriumrhizogenes)、葡萄根癌病菌K308(Agrobacteriuravitis)、櫻杉^根癌病菌C58(Agrobact.eriumtumefaciens)、鈹紋假單胞菌5819(Pseudomonascorr卿ta)、洋蔥伯克霍爾德病菌ICPM8796(Burkholderiac印acia)等均有抑制作用。在番茄離體果實、葉片上對灰霉病生防效果檢測試驗中，M028對離體果實、葉片灰霉病的防治效果分別為96.56%、78.26%，其中M028對番茄離體果實、葉片灰霉病的防治效果與灰霉盡無顯著性差異。溫室防效檢測結果顯示M028對番茄灰霉、辣椒灰霉、黃瓜灰霉病、茄子灰霉病、草莓灰霉病防治效果為63%77%，與灰霉盡無顯著性差異。本領域技術人員很容易想到將本發明菌株發酵液或菌懸液作為農藥的有效成分用于植物病害的生物防治，或者將本發明菌株制備成菌劑用于植物病害的生物防治。因而，本發明還包括含有所述菌株或者其發酵液的生物農藥，以及含有所述菌株的微生物菌劑。本發明還提供了M028發酵培養方法，包括菌種活化、種子液培養、發酵罐發酵等步驟，具體包括如下步驟[酬1、菌種活化使用PDA培養基，培養基配方為馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂15g，水1000mL。將暗紅產色鏈霉菌M028接種于PM培養基斜面」:l，28"C培養48h。[,]2、種子液培養種子液培養用高氏一號培養基,培養基配方為(可溶性淀粉20.()g，KN()3l.()g，KH2P040.5g，MgS04*7H200.5g，NaCl0.5g，FeS040.Olg，121。C高壓滅菌30min)。將活化好的暗紅產色鏈霉菌M028用生理鹽水配制出108cfu/ml的菌懸液，以1%的接種量接種于液體培養基中，28。C搖床震蕩培養，轉速為180-200rpm,培養時間為48-h。[酬3、發酵罐發酵發酵培養基配方為葡萄糖5g，玉米粉15g，可溶性淀粉5g，黃豆粉15g，KH2P040.5g，CaC033g，MgS040.5g,FeS040.Olg,水1000ml。將培養好的M028種子液以2%的接種量接入發酵罐中，28°C,攪拌速度為16()rpm,通氣量為1:0.6-0.8(發酵液體積每分鐘通氣量體積)、罐壓1.5-2.0F/cm2。發酵96h獲得M028發酵液。本發明鏈霉菌屬暗紅產色鏈霉菌M028除了對番茄灰霉病、辣椒灰霉病和草莓灰霉病具有較好的防治效果外，對小麥紋枯病病菌、稻瘟病菌、西瓜枯萎病菌、百合根腐病菌、桃褐腐病菌、番茄早疫病菌，小長喙霉病菌、串珠鐮刀病菌，水稻紋枯病菌等由植物病原真菌引起的病害和對茄青枯病菌、棉角斑病菌、丁香假單胞病菌、發根土壤桿菌、葡萄根癌病菌、土壤根癌病菌、皺紋假單胞菌病菌、洋蔥伯克霍爾德病菌等由植物病原細菌引起的病害均有潛在的防治效果，具有很高的研究和應用價值。圖1顯示的是菌株M028的形態特征，其中A:基內菌絲，B:氣生菌絲，C:孢子絲，D:孢子鏈，E，F:菌落；圖2顯示的是菌株M028的平板抑菌作用，其中，A:番茄灰霉病菌(B.ci證ea)B:西瓜枯妻病菌(F.oxysporumf.sp.niveum)C:小麥紋枯病菌(R.cerealis)D:小長嫁毒病菌E:番茄早疫病菌(Alternariasolani)F:串珠鐮刀菌(F.Monilofprme)G:百合根腐病菌(R.solani)H:桃褐腐病菌(M.fructicola)I:稻瘟病菌(P.oryzae)J:水稻紋枯病菌(R.Ktihn);圖3菌株M028對番茄果實灰霉病的防效,其中，A陽性對照，B陰性對照，C灰霉盡+灰霉病菌，DM028+灰霉病菌。圖4M028對番茄葉片灰霉病的防效,其中，A:陽性對照，B:陰性對照，C:灰霉盡，D:M()28。具體實施方法以下實施例進一步說明本發明的內容，但不應理解為對本發明的限制。在不背離本發明精神和實質的情況下,對本發明方法、步驟或條件所作的修改或替換,均屬于本發明的范圍。若未特別指明，實施例中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規手段。[,]實施例1M028的鑒定綜合鏈霉菌的形態特征、生理生化特性、16SrDNA序列等，將其鑒定為鏈霉菌屬暗紅產色鏈霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)。具體鑒定結果如下1.菌體形態菌株M028在高氏一號培養基上生長良好，菌落呈橢圓形，深紅褐色，邊緣不規則，氣生菌絲初為白色,23天后呈淡黃灰色，日久呈灰色,基內菌絲無橫隔，不斷裂；氣生菌絲柔曲，多分枝,孢子絲直形、鉤狀、頂端初旋或少數幾個松散螺旋,孢子卵圓形(見圖1)。2.生理生化特性菌株M028生理生化特性如F三個表格(表1、2、3)所示M028菌株可產生4S;明膠液化非常緩慢；牛奶凝固胨化反應呈陰性；不能產生淀粉酶水解淀粉；硝酸鹽還原反應呈陰性。pH值在412的范圍內均能生長并產孢子；在溫度為22t:37t:均能生長并產生孢子，在45。C無法生長。表1菌株M028的生理生化性狀<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注"+"表示生長，"-"表示不生長表3菌株M028的生長溫度范圍溫度值(M028)生長情況22'C+28。C+37。C+45。C注"+"表示生長，"-"表示不生長3.16SrDNA鑒定提取暗紅產色鏈霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)M028菌株的基因組，方法是將菌株M028接種于液體LB培養基中搖培24h后，取1mL菌液于1.5離心管中，12000rZmin離心5min后收集菌體；將菌體加500"LTE緩沖液，漩渦振蕩懸起沉淀并充分混勻反應液;加入5liL濃度的10mg/ml的溶菌酶，5uL濃度的20mg/ml蛋白酶K倒管并充分混勻，37°C反應30min;加入50yL的10%SDS和0.5mol/LEDTA，倒管充分混勻,55°C反應lh;加入2/3體積7M預冷乙酸銨溶液,倒管充分混勻,l謹0r/min離心5rain，保留上清;加入2倍體積無水乙醇，-2(TC醇沉30min，12000r/min離心5min，小心棄上清；加入70%乙醇倒管洗沉淀2次(lml/次)，12000r/min離心5min，小心棄上清；真空抽千沉淀并溶于50ii1TE獲得M028基因組。PCR擴增獲得M02816SrDNA,擴增選用通用引物8F:5'CGGGATCCAGAGTTTGATCCTGGCTCAGAACGAACGCT3一和1506R:5—CGGGATCCTACGGCTACCTTGTTACGACTTCACCCC3—，PCR反應體系為10XPCRbuffer(TaKaRa)5y1,dNTP2y1，10pM的引物0.5u1，TaqDNA聚合酶(TaKaRa)O.4ul，基因組模板0.4u1，ddH2041u1。PCR反應條件94。C5min預變性，94。C變性30s,55。C退火lmin,72。C延伸2min,30個循環后；72。C充分延伸5min，(C保存。PCR擴增產物用1%的瓊脂糖凝膠電泳分析，將所獲得的:PCR產物用GelExtractionKit(0MEGA)回收后由北京諾塞基因組研究中心有限公司測序，將測序結果用BLAST程序在GenBank中進行序列比對分析。結果顯示菌株M028與鏈霉菌屬暗紅產色鏈霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)的16SrDNA序列相似性達100%(16SrDNA序列見序列表)。綜合菌體形態、生理生化性狀及其16SrDNA序列結果，將生防菌株M028鑒定為鏈霉菌屬暗纟匸產色鏈霉菌(Streptomyceserythrochromogenes)。實施例2抑菌譜分析對病原真菌的平板抑制檢測采用平板對峙法檢測M028對病原真菌的抑制情況。將M028菌株LB培養基28°C,160rpm搖培培養48h后吸取100"1菌懸液涂高氏一號培養基平板，待M028長滿培養皿后用打孔器打取5mm的M028菌餅；在PM平板上距中央25mm處接種打取的M028菌餅，每皿2個菌餅，2『C培養2天后在平板中央接種直徑5mm的待測病原真菌菌餅，使三個菌餅成一條直線。以只接種靶標病原菌而不接種生防菌的平板為對照，每個處理重復3次,于25t:培養至對照處理長滿整個培養皿,測量病原真菌菌落直徑，計算生長抑制率。生長抑制率=[(C-T)/C]X100%C:對照真菌菌落直徑T:接種生防菌后真菌菌落直徑對病原細菌的平板抑制檢測采用雙層培養法檢測M028對病原細菌的抑制情況。制備M028菌餅方法同病原真菌抑制檢測，將制備好的M028菌餅放在PM培養基平板中央，培養72h后用3.5ml的氯仿以其蒸汽殺死菌體過夜。將活化好的靶標細菌配成108cfU/mi的菌懸液，吸取sou:[菌懸液加入到加入3m:i.融化后冷卻到5(rc的水瓊脂(0.7%瓊脂，pH7.0)中，迅速混勻，立即倒入三氯甲烷殺死M028菌體的培養基上，鋪成均勻的薄層，28t:培養36小時，觀察抑菌圈的情況。鏈霉菌屬暗紅產色鏈霉菌(Str印tomyceserythrochromogenes)菌株M028對三個亞門九個屬的1()種病原真菌都有一定的抑制作用，對5個屬的病原細菌也有很好的抑制效果。其中對番茄灰霉病菌、西瓜枯萎病菌、串珠鐮刀病菌、番茄早疫病菌、百合根腐病菌的抑制作用均在65%以上，對茄青枯病菌的抑菌圈直徑能達到50.5mm，對棉角斑病菌的抑菌圈達到46.3mm,對丁香假單胞病菌的抑菌圈達到53.7mm,對葡萄根癌k308病菌的抑菌圈達到45.3mm。結果如表4和表5所示，見圖2。8表4生防菌M028對部分植物病原真菌的平板抑制<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表5生防菌M028對部分植物病原細菌的平板抑制<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>實施例3M028在番茄離體果實上對灰霉病的防效檢測室內檢測對番茄果實灰霉病的防治效果。選取番茄離體健康果實，M028在PDA培養基中28°C，160rpm培養96h后12000rpm離心10min,取上清為M028發酵液上清；將番茄灰霉病菌在PDA平板上培養7d后,用無菌水沖洗灰霉病菌孢子，用血球計數板標定到1()6個孢子/mL，制備成灰霉病菌(B.cinerea)孢子懸浮液。檢測M028對番茄果實灰霉病防效設置處理如F:陽性對照(僅接種灰霉病菌)、陰性對照(僅接無菌水)、菌株M028發酵液--匕清+灰霉病菌,28%灰霉盡可濕性粉劑誦倍稀釋液+灰霉病菌。每個處理10個番茄果實，實驗設置5個重復。先用接種針在番茄果實腰部剌1個4鵬(深)X3mm(寬)X3咖(長)的傷口，傷口晾干后，接種M028發酵液上清或28%灰霉盡可濕性粉劑1000倍液各10"L，待接種液被完全吸收后分別接種10liL濃度為106個孢子/mL的B.cinerea孢子懸浮液；陽性對照接種無菌水后接種灰霉菌孢子懸浮液，陰性對照僅接種無菌水；各處理接種番茄后25'C保濕培養3天后，測量發病面積并計算M028對番茄灰霉病的防治效果。試驗結果表明，M028對番茄果實灰霉病的防治效果為96.56%,M028對番茄果實灰霉病的防治效果與灰霉盡無顯著性差異。(見圖3)防治效果:陽性對照發病面積-處理發病而積xl0線陽性對照發病面積實施例4M028在番茄離體葉片上對灰霉病的防效檢測選用葉齡相同、葉片大小基本一致的健康番茄葉片，用無菌水清洗干凈備用；M02S發酵液上清制備同M028番茄離體果實上對灰霉病的防效檢領U。設置菌株M028發酵上清液、28%灰霉盡可濕性粉劑1000倍液、陽性對照(只接種病菌,不接種藥劑)和陰性對照(只接無菌水，不接病菌和藥劑)4個處理，每個處理含8個葉片，重復5次。先將各處理均勻噴灑于葉片上，以葉面剛好溢水為準；晾干后，在每個葉片中間接種1個直徑為5mm的番茄灰霉病菌菌餅，25。C保濕培養3天后，觀察發病情況，統計發病面積，計算防治效果。結果表明，M028對番茄葉片灰霉病的防治效果為78.26%圖4)防治效果=陽性對照發病面積-處理發病面積xl00%陽性對照發病面積實施例5溫室檢測M028對番茄灰霉病、辣椒灰霉、黃瓜灰霉病、茄子灰霉病、草莓灰霉病防效測定用7()%乙醇對番茄、辣椒、黃瓜、茄子的種子表面消毒后催芽育苗,待各作物生長至15cm備用，取草莓生長1個月的扦插苗備用。M028發酵液上清和灰霉病孢子懸浮液制備同M028番茄離體果實....匕對灰霉病的防效檢測。在各作物上對灰霉病防效檢測設置處理與接種方法同M028在番茄離體葉片上對灰霉病的防效檢測；接種M028及灰霉病菌孢子后各作物生長條件為溫室溫度22-25。C，相對濕度70%85%,12h光照；接種7d后調查病情，以葉片為單位，計算病株率、病情指數和防治效果。[固]發病率(％)=發病葉數/調查總葉數X100病情指數=E[(病級葉數X代表數值)]X發病最重級的代表數值/調查的總葉數防治效果(％)=[(對照病情指數-處理病情指數)/對照病情指數]X100病害分級標準0級-無病斑；單葉片有病斑3個；單葉片有病斑46個;單葉片有病斑710個；單葉片有病斑1120個，部分密集成片；單葉片病斑密集占葉面積1/4以上。結果顯示附)28對番茄灰霉病溫室防治效果為72.3%，對黃瓜灰霉病的防治效果為67.4%，對辣椒灰霉病的防治效果為75.5%，對茄子灰霉病的防治效果為77.3%，對草莓灰霉病的防效效果為63.1%。序列表〈11()〉中國農業大學〈120〉暗紅產色鏈霉菌及其在病害生物防治中的應用l級3級5級7級9級1009600608Z099009o寸s08寸。9e08T09.BC-c-.B一c-c-器一FB一器器一器C-SBSBSSSPc-.:ps.:f4c-。。，c-器，4c-一PSc>OSOSdp器，c-一c-一.ssc-:14c-OSS0139e〈T3e〈0T"s〈oo寸〉「一iwHY〈〇〉VN。〈〇〉8e〈TT2〉3:I4。。。。。P833c-0著iII03313Koo寸〉8SW(SU①S0曰0J1P0J1I一1.Ss①c-旨(nd①J4s)輕,製必UJnl繼<X-T2〉0eeT〈TS9-.eUOIS該！5U92〈0卜1:〉e〈09T〉〔025〕〔6呈〔8U0〕〔i〕〔9110〕〔g呈〔寸呈〔s呈〔215〕呈〔ouo〕〔6星〔8010〕〔510〕〔905〕〔solou〔寸olo〕〔510〕〔0010〕〔6600〕〔8600〕〔z-600u9600〕〔寸600〕〔2600〕〔1600〕〔0600〕〔6800〕〔8800〕〔z,800u〔9800〕寸800〕〔e800u〔2800〕試01/6VZS869I0IN3〈212>DNA〈213〉人工序列〈400>3cgggatcctacggctaccttgttacgacttcacccc3權利要求暗紅產色鏈霉菌(Streptomyceserythrochromogenes)MO28，保藏號為CGMCCNO.3228。2.權利要求l所述菌株在制備生物農藥中的應用。3.含有權利要求1所述菌株或其發酵菌液的生物農藥。4.含有權利要求l所述菌株的菌劑。5.權利要求1所述菌株、權利要求3所述的生物農藥或權利要求4所述的菌劑在植物病害生物防治中的應用。6.如權利要求5所述的應用，其中所述植物病害為番茄灰霉病、辣椒灰霉病和草莓灰霉病具有較好的防治效果外，對小麥紋枯病、稻瘟病、西瓜枯萎病、百合根腐病、桃褐腐病、番茄早疫病，小長喙霉病菌、串珠鐮刀病，水稻紋枯病等由植物病原真菌引起的病害和對茄青枯、棉角斑、丁香假單胞病、發根土壤桿菌、葡萄根癌病、土壤根癌病、皺紋假單胞菌病或洋蔥伯克霍爾德病。全文摘要本發明提供了鏈霉菌屬暗紅產色鏈霉菌(Streptomyceserythrochromogenes)MO28，保藏號為CGMCCNo.3228。該菌株具有抑制番茄灰霉病生長的作用。平板抑菌試驗結果表明MO28菌株對多種植物病原真菌和植物病原細菌有較強的抑制作用，其中對串珠鐮刀病菌的抑制能力最強，抑制率達69.9％，對丁香假單胞病菌的抑制直徑可達53.7mm。MO28對番茄果實灰霉病的防治效果為96.56％，對番茄葉片灰霉病的防治效果為78.26％，與灰霉盡相比無顯著性差異。溫室防效檢測結果顯示MO28對番茄灰霉、辣椒灰霉、黃瓜灰霉病、茄子灰霉病、草莓灰霉病防治效果為63％～77％。文檔編號C12N1/20GK101698827SQ20091009233公開日2010年4月28日申請日期2009年9月10日優先權日2009年9月10日發明者吳文良,夏娜,孟凡喬,焦子偉,郭巖彬,齊琳申請人:中國農業大學