益生菌和纖維在腹瀉上的應用的制作方法

專利名稱：益生菌和纖維在腹瀉上的應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于用于預防和/或治療腹瀉的、包括益生菌和纖維的嬰兒營養(yǎng)品領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
腹瀉是嚴重的公共健康問題，是營養(yǎng)不良的主要成因，在發(fā)展中國家小于5歲的 兒童特別是嬰兒中，全部死亡病例的四分之一與之相關(guān)。腹瀉每年導致io億多次的疾病發(fā) 作，全球平均每個兒童發(fā)作3次，全球范圍內(nèi)導致近500萬死亡。 對于急性腹瀉特別是嬰兒的急性腹瀉，目前的建議是補充流體和電解質(zhì)損失，同 時提供營養(yǎng)支持。但是這種治療方法并沒有縮短腹瀉的持續(xù)時間。可縮短腹瀉持續(xù)時間的 選擇包括使用抗生素、抗動力藥物(anti-motility)和抑制分泌藥物。但這并不總是有效， 并經(jīng)常帶來嚴重的副作用。 一般的一致觀點是，在治療嬰兒急性胃腸炎時沒有必要使用藥 理劑。 益生菌(probiotics)，特別是乳桿菌種類(lactobacillus species)，己被用作腹 瀉的預防劑和促進腹瀉治愈的治療劑。 EP 0904784涉及一種用于預防和治療胃腸道疾病的營養(yǎng)制劑，包括一種雙岐桿菌 (Bifidobacterium)、屎腸球菌(Enterococcus faeci咖)和一種乳桿菌菌株，并優(yōu)選地包括 益生元(prebiotics)化合物。該制劑可為食品添加劑、即用食品組合物、嬰兒配方或者管 喂食品(tubefeeding)的形式，任選地包括纖維。 W0 2006/046871涉及一種用于治療和/或預防膿毒癥、菌血癥和/或內(nèi)毒素血癥 的組合物，包括鼠李糖乳桿菌(L. rhamnosus)并任選地包括纖維。 US 6，241，983涉及一種用于促進胃腸健康的組合物，包括益生菌和食物纖維。優(yōu) 選的有益的人腸道微生物包括乳桿菌和雙歧桿菌。 W0 2006/110406涉及一種組合物，包括一種益生菌組分和一種增甜劑組分。
W0 2005/039319涉及 一 種組合物，包括非消化性寡糖和短雙歧桿菌 (Bifidobacterium breve)的混合物。 W0 2006/091103涉及一種組合物，包括短雙歧桿菌、兩種非消化性寡糖以及任選 的副干酪乳桿菌Lactobacillus paracasei)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，包含鼠李糖乳桿菌(L. rhamnosus)以及菊粉(i皿lin)和大豆多糖 (大豆PS)的組合物對縮短腹瀉的持續(xù)時間具有有益效果，該效果至少與所報道的單獨使 用鼠李糖乳桿菌的效果相似，同時該組合物可以通過向結(jié)腸提供可發(fā)酵基質(zhì)來恢復微生物 群，修復由腹瀉導致的粘膜萎縮，并彌補營養(yǎng)缺乏。鼠李糖乳桿菌以及菊粉和大豆PS兩者 的結(jié)合還帶來如下優(yōu)點減輕嬰兒腹瀉，食品中活細菌的存活力增強導致保質(zhì)期延長，所食 入的細菌中以存活形式到達結(jié)腸的數(shù)目增加，剌激結(jié)腸中外源細菌和內(nèi)源細菌的生長和植 入并使這些細菌的代謝作用活化，以及沿著小腸和結(jié)腸發(fā)揮作用。
不溶性大豆多糖的存在有利地使水從液態(tài)糞便中分離出來。包括鼠李糖乳桿菌、 菊粉和大豆多糖的組合的組合物可有利地集合了如下作用縮短腹瀉的作用(如剌激免疫 系統(tǒng)的作用)、提高益生菌菌株的存活力、改善微生物群、抗病原作用、提高礦物保持、提高 水分保持、促進腸壁修復和/或彌補營養(yǎng)缺乏。該作用超出了單個組分的作用。
具體實施例方式
本發(fā)明涉及一種治療和/或預防人受試者的腹瀉、特別是急性腹瀉的方法，所述 方法包括將含有鼠李糖乳桿菌、菊粉和大豆多糖的組合物給予所述的人受試者。換句話說， 本發(fā)明涉及一種含有鼠李糖乳桿菌、菊粉和大豆多糖的組合物在制備用于治療和/或預防 人受試者的腹瀉的營養(yǎng)組合物中的應用。本發(fā)明還可表述為一種用于治療和/或預防人受 試者的腹瀉、特別是急性腹瀉的組合物，包括鼠李糖乳桿菌、菊粉和大豆多糖。
鼠3艦, 本發(fā)明的組合物包括鼠李糖乳桿菌。在存在于人腸道中的乳桿菌菌種中，該菌種 是最豐富的菌種之一，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)屬于該菌種的菌株可有效預防和/或治療腹瀉，包括嬰兒 急性腹瀉。據(jù)稱，預防或治療腹瀉的機制包括剌激免疫系統(tǒng)的作用、改善微生物群和/或 直接的抗病原作用。優(yōu)選地，當與典型株鼠李糖乳桿菌ATCC 7469(Stackebrandt&Goebel， 1994， Int. J. Syst. Bacteriol. 44 :846-849)相比時，本發(fā)明中的鼠李糖乳桿菌的16S rRNA 序列具有至少95%、更優(yōu)選至少97%、進一步優(yōu)選至少99%的同一性。鼠李糖乳桿菌在小 腸和結(jié)腸中發(fā)揮它的抗腹瀉作用。優(yōu)選使用鼠李糖乳桿菌而不使用雙歧桿菌，這是因為雙 歧桿菌只在大腸中有活性，鼠李糖乳桿菌在小腸中也可發(fā)揮作用，而小腸是經(jīng)常發(fā)生引起 腹瀉的感染的地方。所以，使用鼠李糖乳桿菌代替雙歧桿菌具有在小腸中也能對抗腹瀉的 優(yōu)點。在乳桿菌菌種中優(yōu)選使用鼠李糖乳桿菌，這是因為屬于該菌種的菌株在腸道中是最 豐富的，是最強健的，在對抗腹瀉時是最有效的。 優(yōu)選的鼠李糖乳桿菌菌株是從母乳喂養(yǎng)的健康人類嬰兒的糞便中分離的那些菌 株。幾種鼠李糖乳桿菌菌株可從乳酸細菌的生產(chǎn)商處購買，但是它們也可以直接從糞便 中分離，然后經(jīng)識別、鑒定和生產(chǎn)。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述組合物包括至少一種 選自下述的鼠李糖乳桿菌鼠李糖乳桿菌LCS-742 (Morinaga)、鼠李糖乳桿菌LR-35 (Chr. Hansen)、鼠李糖乳桿菌GG(Valio)、鼠李糖乳桿菌HN001 (Howaru)、鼠李糖乳桿菌R1039、 R0011、 R0049 (Lallemand)、鼠李糖乳桿菌LBA 12. 5U、 LR-32 (Rhodia)、鼠李糖乳桿菌 271 231 (Probi AB)、鼠李糖乳桿菌KC1 (DSM)、鼠李糖乳桿菌LMG P_22799。更優(yōu)選地， 所述鼠李糖乳桿菌為菌株乳桿菌GG(ATCC 53103)。更優(yōu)選地，所述鼠李糖乳桿菌為菌株 LMGP-22799。鼠李糖乳桿菌菌株LMG P-22799表現(xiàn)出良好的技術(shù)特性，即沒有不想要的抗 生素抗性、在胃腸道中的高存活力、對腸細胞的良好的粘附性以及較好地防止腸病原粘附 在腸細胞上。 該組合物在每克干重中優(yōu)選地含有102至1012菌落形成單位(cfu)的鼠李糖乳桿 菌，優(yōu)選104至10"，更優(yōu)選105至1(T，最優(yōu)選105至5X109。在每100ml即用組合物中，該 組合物優(yōu)選地含有103至1013cfu鼠李糖乳桿菌，優(yōu)選104至1012，更優(yōu)選105至10"，最優(yōu)選 1()6至5X10 fu。本發(fā)明的鼠李糖乳桿菌的劑量優(yōu)選為每日給予102至1013、更優(yōu)選給予 105至10"、最優(yōu)選給予107至5X 101QCfu。
本組合物包含菊粉。菊粉是一種可被人微生物群發(fā)酵的水溶性纖維。在本文中，菊 粉被定義為一種非消化性寡糖，包括一條聚合度(DP)為2至250的13連接的果糖單元的 鏈，90%以上的果糖單元由13 (2 — 1)鍵連接。果糖鏈的末端可以有也可以沒有葡萄糖單 元。因而菊粉可以由GFn或Fn表示，其中G代表葡萄糖基單元，F(xiàn)代表果糖基單元，n為互相 連接的果糖基單元的數(shù)目，n為2或者更多。優(yōu)選地，本發(fā)明中所用的菊粉的平均DP值為7 或者更多。平均DP值優(yōu)選至少10、更優(yōu)選至少20。適合的菊粉例如為可購得的Raftiline ST、 RaftilineHP(Orafti)或者Frutaf it (Sensus)。與平均DP值較小的菊粉相比，使用平 均DP值超過7、更優(yōu)選超過10、更加優(yōu)選超過20的菊粉可降低腸道的滲透負擔，從而防止 了在患腹瀉時特別不想要的有害的通便作用。 菊粉的存在選擇性地剌激腸道細菌、特別是乳桿菌的生長和/或活性。這種剌激 尤其是發(fā)生在結(jié)腸中。從而有利地降低了pH值，形成了有機酸，例如乳酸和短鏈脂肪酸(包 括特別是丁酸)，這些有機酸具有抗病原作用(包括引發(fā)腹瀉的病原)，并且作為腸上皮細 胞的能源(從而修復腸壁)，它們還有助于礦物保持，這在腹瀉時是特別有利的。另外，菊粉 可剌激腸道中的益生菌菌株鼠李糖乳桿菌的生長、存活和/或代謝活性。這不僅包括大腸， 還有利地包括小腸。 本發(fā)明營養(yǎng)組合物在每g干重中優(yōu)選含有至少0. 5mg菊粉，優(yōu)選至少1. 5mg，更優(yōu) 選至少5mg，更加優(yōu)選至少10mg。優(yōu)選地，本發(fā)明組合物在每g干重中含有不超過O. 5g菊 粉，更優(yōu)選不超過0.35g，更加優(yōu)選不超過0.2g，最優(yōu)選不超過0. lg。本發(fā)明營養(yǎng)組合物在 每100ml液態(tài)組合物中優(yōu)選含有至少5mg菊粉，優(yōu)選至少15mg，更優(yōu)選每100ml至少50mg， 甚至更加優(yōu)選至少100mg。優(yōu)選地，本發(fā)明組合物在每100ml中含有不超過10g菊粉，更優(yōu) 選每100ml不超過5g，甚至更加優(yōu)選每100ml不超過2g，最優(yōu)選每100ml不超過lg。本發(fā) 明中菊粉的優(yōu)選給予劑量為每天0. 1至10g，更優(yōu)選0. 2至5g，更優(yōu)選0. 5至3g。
大豆多糖 本發(fā)明組合物中含有大豆多糖。在本發(fā)明中，術(shù)語"大豆多糖(PS)"和"大豆纖 維"可互換使用，定義為從大豆中分離的非淀粉性、主要是不溶性的多糖。當在本發(fā)明中提 及大豆多糖時，多糖被定義為DP值超過10、更優(yōu)選超過20、更優(yōu)選超過50、甚至更加優(yōu)選超 過100的糖。大豆纖維的適當來源有Fibrim(Solae)。大豆多糖中含有纖維素性和非纖維 素性食物纖維。適用于本發(fā)明的通常市售來源的大豆多糖含有72-78%的總食物纖維(基 于官方的A0AC法)，該纖維組分由約94-95X的水不溶性纖維(纖維素和半纖維素)和約 5_6%的水溶性纖維(如阿拉伯半乳聚糖之類的多糖)組成。 不溶性大豆多糖的存在有利地使水從液態(tài)糞便中分離出來。另外，大豆PS的存在 有利地導致了丁酸的形成。丁酸是腸上皮細胞的能源，有助于修復由對抗致腹瀉病原的炎 癥反應所引發(fā)的腸損傷。 本發(fā)明營養(yǎng)組合物在每g干重中優(yōu)選含有至少0. 8mg大豆PS，優(yōu)選至少2. 5mg， 更優(yōu)選至少8mg，甚至更加優(yōu)選至少15mg。優(yōu)選地，本發(fā)明組合物在每g干重中含有不超 過0. 8g大豆PS，更優(yōu)選不超過0. 6g，甚至更加優(yōu)選不超過0. 35g，最優(yōu)選每g干重不超過 0. 15g。本發(fā)明營養(yǎng)組合物在每100ml液態(tài)組合物中優(yōu)選含有至少8mg大豆PS，優(yōu)選至少 25mg，更優(yōu)選每100ml至少80mg，甚至更加優(yōu)選每100ml至少150mg。優(yōu)選地，本發(fā)明組合物在每100ml中含有不超過15g大豆PS，更優(yōu)選每100ml不超過8g，甚至更加優(yōu)選每100ml 不超過3g，最優(yōu)選每100ml不超過1. 5g。本發(fā)明中大豆PS的優(yōu)選給予劑量為每日0. 15至 15g，更優(yōu)選0. 3至8g，更優(yōu)選0. 8至5g。 優(yōu)選地，大豆PS與菊粉的重量比在5至0. 2之間，更優(yōu)選在3至0. 5之間，甚至更 加優(yōu)選在2至1之間。菊粉與大豆PS之間有平衡的比例是有利的，這是因為這樣可確保可 溶性纖維與不溶性纖維之間的適當?shù)谋壤约八鼈儗τ诟篂a的不同的有益效果。為清楚 起見，應該注意"大豆PS與菊粉的重量比在5至0. 2之間"是指大豆PS的重量除以菊粉的 重量等于一個介于5和0. 2之間的數(shù)。 包括鼠李糖乳桿菌、菊粉和大豆多糖的組合的組合物可有利地集合如下作用沿 著整個腸道縮短腹瀉的作用(如剌激免疫系統(tǒng)的作用)、提高益生菌菌株的存活力、改善微 生物群、抗病原作用、提高礦物保持、提高水分保持、促進腸壁修復和/或彌補營養(yǎng)缺乏。該 作用被認為超出了各單個組分的作用。特別是鼠李糖乳桿菌、大豆PS和菊粉的結(jié)合導致更 多地形成了短鏈脂肪酸，包括丁酸和乳酸，以及在小腸中的作用增強。優(yōu)選地，該組合物在 每克大豆PS加菊粉中含有104至1012菌落形成單位(cfu)鼠李糖乳桿菌，優(yōu)選106至1011， 更優(yōu)選107至1(^，最優(yōu)選1。8至5X109cfu。
微量營養(yǎng)素 本發(fā)明的組合物優(yōu)選地含有鋅。在發(fā)展中國家，兒童缺鋅現(xiàn)象非常普遍。在腹瀉 時補充鋅可縮短該治療的疾病發(fā)作的持續(xù)時間和嚴重程度。在腹瀉期間通常會過量產(chǎn)生一 氧化氮(NO)，作為自由基，一氧化氮可誘導分泌作用和細胞損傷。添加鋅有助于改善小腸的 生理狀態(tài)，并有可能減少腹瀉復發(fā)的風險。優(yōu)選地，該組合物在每g干重中含有至少35 ii g 鋅，更優(yōu)選至少60 ii g。優(yōu)選地，該組合物在每g干重中含有不超過250 ii g鋅。
本發(fā)明組合物優(yōu)選地含有鐵用以補充鐵損失。并且，鐵可縮短腹瀉的持續(xù)時間。優(yōu) 選地，該組合物在每g干重中含有至少40 ii g，更優(yōu)選至少80 ii g。優(yōu)選地，該組合物在每g 干重中含有不超過250iig鐵。 優(yōu)選地，該組合物同時含有鋅和鐵，這是因為發(fā)現(xiàn)同時補充鋅和鐵可減少患嚴重 腹瀉的風險。優(yōu)選地，鐵與鋅的重量比在0.8和1.3之間。鋅與鐵有平衡的比例可確保鋅 和鐵被適當?shù)匚铡?
營養(yǎng)組合物 本發(fā)明的組合物特別適于滿足36個月以下的嬰兒、特別是24個月以下的嬰兒、更 加優(yōu)選12個月以下的嬰兒的每日營養(yǎng)需求。因此，本發(fā)明的組合物優(yōu)選地含有脂質(zhì)組分、 蛋白質(zhì)組分和可消化性碳水化合物組分，其中脂質(zhì)組分提供20至55%的總卡路里，所述蛋 白質(zhì)組分提供5至15%的總卡路里，所述可消化性碳水化合物組分提供30至75%的總卡 路里。優(yōu)選地，本發(fā)明組合物包括提供25至50%的總卡路里的脂質(zhì)組分，提供6至13%的 總卡路里的蛋白質(zhì)組分，以及提供40至65%的總卡路里的可消化性碳水化合物組分。
當為液態(tài)形式，如即用型液態(tài)形式時，該組合物優(yōu)選地每100ml含有1. 0至6. 5g 脂肪，更優(yōu)選每100ml含有1. 8至4. Og。以干重計，本發(fā)明組合物優(yōu)選地含有8至40wt. % 脂肪，更優(yōu)選12至30wt. %。在總脂肪酸中，飽和脂肪酸的量優(yōu)選少于58wt. %，更優(yōu)選少 于45wt. %?；诳傊舅岬闹亓浚瑔尾伙柡椭舅岬臐舛葍?yōu)選在17至60%的范圍。基于 總脂肪酸的重量，多不飽和脂肪酸的濃度優(yōu)選在20至60%的范圍。優(yōu)選地，該組合物含有n-6多不飽和脂肪酸亞油酸(LA)和n-3多不飽和脂肪酸a _亞麻酸(ALA) 。 LA/ALA重量比 優(yōu)選在4和10之間，更優(yōu)選在5和7之間。 優(yōu)選地，該組合物含有長鏈多不飽和脂肪酸，例如花生四烯酸、二十二碳六烯酸和 /或二十碳五烯酸。優(yōu)選存在n-3LC-PUFA，如EPA和/或DHA。 n3-LC-PUFA可減輕腸的炎 癥反應，這對于患腹瀉的嬰兒來說是特別有利的。 當為液態(tài)形式，如即用型液態(tài)形式時，該組合物每100ml優(yōu)選含有0. 5至4g蛋白 質(zhì)，更優(yōu)選每100ml含有1. 0至3. 0g。以干重計，本發(fā)明組合物優(yōu)選含有5至30wt. %蛋白 質(zhì)，更優(yōu)選10至20wt. %。以總蛋白質(zhì)計，本發(fā)明組合物優(yōu)選含有至少50wt. %的非人乳來 源的蛋白質(zhì)，更優(yōu)選至少90wt. %。以總蛋白質(zhì)計，本發(fā)明組合物優(yōu)選含有至少50wt. %牛 乳來源的蛋白質(zhì)，更優(yōu)選至少90wt. %。本發(fā)明組合物優(yōu)選含有酪蛋白和/或乳清蛋白。酪
蛋白與乳清蛋白的重量比優(yōu)選為o : ioo至ioo : o，更優(yōu)選io : 90至90 : io，更優(yōu)選 20 : 80至80 : 20。本發(fā)明中所用的術(shù)語"蛋白質(zhì)"是指蛋白質(zhì)、肽和游離氨基酸的總和。
該組合物可任選地含有水解的蛋白質(zhì)和/或游離氨基酸。優(yōu)選地，該組合物不含有水解的 蛋白質(zhì)和/或游離氨基酸，因為這可增大該組合物的滲透負荷，對患有腹瀉的人受試者來 說是不利的。 當為液態(tài)形式，如即用型液態(tài)形式時，該組合物每100ml優(yōu)選含有2至30g可消 化性碳水化合物，更優(yōu)選每100ml含有5至15g。以干重計，本發(fā)明組合物優(yōu)選含有40至 80wt. X可消化性碳水化合物，更優(yōu)選50至70wt. %。該組合物優(yōu)選含有至少一種選自下述 的可消化性碳水化合物乳糖、麥芽糊精、淀粉、蔗糖、葡萄糖和麥芽糖。優(yōu)選地，本發(fā)明組合 物含有麥芽糊精和/或淀粉。使用具有較高聚合度的可消化性碳水化合物來代替單糖和二 糖可減輕滲透負荷，對患有腹瀉的人受試者來說這是有利的。 本發(fā)明組合物優(yōu)選含有稻米淀粉。與基于葡萄糖的口服補液(ORS)相比，已經(jīng)發(fā) 現(xiàn)基于稻米的口服補液可以更加有效地在患有急性傳染性腹瀉的兒童中減少糞便排出，縮 短腹瀉持續(xù)時間，以及促進液體和電解質(zhì)的腸吸收?；诘久椎腛RS的益處以前歸因于其 較低的滲透負荷、較快的吸收速度以及較高的碳水化合物含量。對于基于稻米的ORS可減 少糞便排出以及促進吸收的另一種解釋是稻米能夠抑制腸分泌。 本發(fā)明組合物優(yōu)選含有果膠(pectin)或果膠降解產(chǎn)物。果膠和/或其降解產(chǎn)物 可有利地抑制引起腹瀉的病原微生物粘附在腸壁上，從而減輕腹瀉。 該組合物優(yōu)選含有半乳寡糖(GOS)，更優(yōu)選P-連接的GOS。這些P-連接的 GOS有益地減少引起腹瀉的細菌與腸細胞之間的粘附。該組合物在每g干重中優(yōu)選含有 10至200mg P-連接的G0S，更優(yōu)選20至90mg。 P _連接的GOS的 一個適當?shù)膩碓词?Vivinal(Borculo)。 該組合物優(yōu)選含有核苷酸?？墒秤玫暮塑账峥捎欣卮龠M修復由導致腹瀉的病原 損害的腸細胞。 本發(fā)明組合物優(yōu)選以液態(tài)形式給予。為滿足嬰兒的熱量需求，該組合物優(yōu)選 含有50至200kcal/100ml液體，更優(yōu)選60至90kcal/100ml液體，甚至更加優(yōu)選60至 75kcal/100ml液體。該熱量密度可確保水和熱量消耗之間的最佳比例。本發(fā)明組合物的滲 透壓優(yōu)選在150和420mOsmo1/1之間，更優(yōu)選260至320mOsmo1/1。該滲透壓對于患腹瀉的 嬰兒來說非常重要，有助于減輕胃腸壓力，緩解腹瀉。
優(yōu)選地，該組合物為液態(tài)形式，其以Brookfield粘度計在20。C、100s—1的切變率 測得的粘度值低于35cps。適當?shù)?，該組合物為粉末形式，可以用水重構(gòu)形成液體，或者為 液體濃縮形式，應該用水稀釋。當該組合物為液體形式時，優(yōu)選每天給予的體積在約80至 2500ml的范圍，更優(yōu)選每天約450至lOOOml。該組合物可用水適當?shù)刂貥?gòu)以形成半流體、 可用匙舀起的組合物。 在一個優(yōu)選的實施方案中，該組合物為包括鼠李糖乳桿菌、菊粉、大豆PS、葡 萄糖以及鈉、鉀、氯離子的補液，且滲透壓在200和320m0smo1/1之間，更優(yōu)選在230和 285m0smo1/1之間，最優(yōu)選在235和245m0smo1/1之間。
已發(fā)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的組合物特別適合用作嬰兒營養(yǎng)品，特別是早產(chǎn)嬰兒、足月嬰 兒以及處于開始食用固體食物的斷奶期的嬰兒。因此，本發(fā)明提供了一種向人類嬰兒提供 營養(yǎng)的方法，所述方法包括將本發(fā)明組合物給予所述嬰兒。優(yōu)選地，所述嬰兒的年齡介于0 和36個月之間，更加優(yōu)選0和18個月之間，最優(yōu)選0和12個月之間。本發(fā)明組合物可有 利地用于制備預防和/或治療腹瀉、特別是傳染性腹瀉、更特別是輪狀病毒腹瀉的藥物。優(yōu) 選地，所述的含有鼠李糖乳桿菌、菊粉和大豆PS的組合物用于治療急性腹瀉。
在一個優(yōu)選的實施方案中，鼠李糖乳桿菌、菊粉和大豆PS的組合物存在于還包括 葡萄糖和電解質(zhì)的口服補液中，在第一補液步驟中恢復水和電解質(zhì)平衡，同時立即使鼠李 糖乳桿菌、菊粉和大豆PS出現(xiàn)在胃腸道中。 優(yōu)選地，在使用葡萄糖_電解質(zhì)混合物進行約3至4小時的第一補液步驟以恢復 水和電解質(zhì)平衡之后再使用本發(fā)明組合物。鼠李糖乳桿菌、菊粉、大豆PS的組合物與脂質(zhì) 組分、可消化性碳水化合物組分和蛋白質(zhì)組分一起，可快速恢復正常的糞便排出量和稠度， 同時為特別是小腸壁提供生長和修復的營養(yǎng)。本發(fā)明組合物優(yōu)選使用2-10天，更優(yōu)選使用 2-5天，直到腹瀉痊愈。 在本說明書以及權(quán)利要求書中，動詞"包括"及其變化形式以非限制性意義使用， 指該詞后面的項目被包括，但是沒有具體提及的項目并不被排除。另外，用詞語"一"或者 "一個"修飾的要素并不排除該要素有多于一個的可能性，除非上下文明確要求有且只有一 個該要素。因此，詞語"一"或者"一個" 一般指"至少一個"。
實施例 實施例1 :使用鼠李糖乳桿菌、菊粉和大豆多糖的'混合物以及微量營養(yǎng)素的補充
營養(yǎng)來縮短急件嬰〗l』射寫的持續(xù)時間 方法 進行了隨機、雙盲臨床試驗以評價含有鼠李糖乳桿菌(益生菌)和食物纖維(菊 粉和大豆多糖)的嬰兒制劑在治療58名患中度脫水急性腹瀉的3-12個月的營養(yǎng)良好的 印度尼西亞男嬰時的效果。在足夠地口服補液之后，患者被隨機地分配接受低乳糖嬰兒 制劑，包括鼠李糖乳桿菌(5X107l00ml)和食物纖維(0. 15g菊粉/100ml和0. 25g大豆多 糖/100ml)的組合物以及較高濃度的幾種特定的微量營養(yǎng)素(1. lmg鐵/100ml、0.9mg鋅 /100ml、0. 05mg銅/100ml、7ii g錳/100ml、 1. 0 ii g硒/100m1、1. 9mg維生素D3/100ml和 1. 1 P g維生素E/100ml)(實驗組)；或者不含鼠李糖乳桿菌或食物纖維的低乳糖嬰兒制劑(對照組)，該制劑中含有標準濃度的微量營養(yǎng)素(0. 5mg鐵/100ml、0. 5mg鋅/100ml、 0. 04mg銅/100ml、l. 4mg維生素D3/100ml和0. 8 y g維生素E/100ml)(對照組)。記錄每
個嬰兒每天的下列數(shù)據(jù)排便體積、排便頻度和稠度以及精確的體重值。腹瀉的持續(xù)時間被
定義為入院后直到排出最后一次液態(tài)或半液態(tài)糞便(之后在24小時內(nèi)沒有再一次出現(xiàn)異
常糞便)所經(jīng)過的小時數(shù)。
結(jié)果 兩組患者在入院時在年齡、人體測量指標和營養(yǎng)狀態(tài)、臨床特征、治療歷史以及可 能與腹瀉發(fā)病率相關(guān)的實驗室值等方面都是相當?shù)?。實驗組的平均(SD)年齡為8. 1(2.6) 個月，對照組為8.0(2.7)個月。入院時，患者為中度脫水狀態(tài)。在分離病原時，實驗組和對 照組之間沒有檢測到差異。在76%的病例中，輪狀病毒是最主要的致病因素，這在實驗組和 對照組中是相同的。 與對照組相比，實驗組的腹瀉的持續(xù)時間顯著縮短(實驗組和對照組分別為1. 63 和2. 45天；p < 0. 05)，這在第一天的治療后就變得很明顯。該研究提供證據(jù)表明，在發(fā)展 中國家，在口服補液之后提供含有益生菌、益生元和微量營養(yǎng)素的抗腹瀉制劑具有縮短嬰 兒腹瀉的持續(xù)時間的有益效果。與對照組相比，實驗組更傾向于較低的糞便重量。在醫(yī)院 進行補液后，在第一天和第二天，實驗組與對照組相比經(jīng)食物治療后傾向于具有較低的糞 便排出量(以每千克體重每天的克數(shù)計)。
實施例2 :大豆PS、菊粉和鼠李糖乳桿菌的協(xié)同作用
材料 使用體夕卜半云力態(tài)批量發(fā)酵系統(tǒng)(semi-dynamic batch fermentationsystem)，使 用兒童糞便。 使用Fibrim(Solae公司)作為大豆PS來源。使用RaftilinST(Orafti)作為菊 粉來源，使用L GG(Valio)作為鼠李糖乳桿菌來源。
從2歲的健康兒童獲取新鮮糞便。 實驗介質(zhì)為McBain&MacFarlane介質(zhì)(緩沖胨水3. Og/l、酵母提取物2. 5g/1、 胰蛋白胨3. Og/l、 L-半胱氨酸-HC1 0. 4g/l、膽鹽0. 05g/l、 K2HP04 3H20 2. 6g/l、 NaHC03 0.2g/l、NaCl 4. 5g/l、MgS04 7H20 0.5g/l、CaCl2 0. 228g/l、 FeS04 0 . 00 5g/l)。
方法 將新鮮糞便材料與代表腸內(nèi)環(huán)境的McBain&MacFarlane介質(zhì)混合，重量比為 1 ! 5。 在t = 0時，將6ml糞便懸液與纖維和域L GG混合，轉(zhuǎn)移至100ml瓶中的透析 管中，所述瓶中裝滿緩沖透析介質(zhì)(K2HP04*3H20 2. 6g/l、 NaHC03 0. 2g/l、 NaCl 4. 5g/l、 MgS04 7H20 0. 5g/l、 CaCl2 0. 228g/l、 FeS04 7H20 0. 005g/l， pH 6. 3)。將該瓶蓋好并在 37t:溫育。纖維和L GG的混合物如下所示
混合物1 2_34_^_^_
0 192mg 00 120mg 120mg
0 0 192mg 0 72mg 72mg
0 0 01.2xl09cfu 0 1.2xl09cfu
大豆PS菊粉 LGG
9
48小時后用皮下注射器從透析管和透析緩沖液取0. 5ml樣品，在-lSt:保存。實 驗平行做兩份，所有操作均在無氧箱中進行。 乳酸的檢測通過酶法使用帶有D-和L-乳酸脫氫酶的乳酸檢測試劑盒(Raisio Diagnostics Spa， Rome, Italy)進行。短鏈脂肪酸(SCFA)使用氣相色譜檢測，SCFA在 MilliQ中提取。將2-乙基-丁酸用作內(nèi)部標準。將樣品在帶有FID檢測器的毛細管柱 (Restek Stabilwax DA 15mX0. 53X 1. 0 ii m ;ZB-FFAB 15mX0. 13X 1. 0 ii m)上分禾斤。、 克動 相為氦。 結(jié)果和結(jié)論 結(jié)果以每g纖維形成的乳酸或SCFA的mmol量表示，示于表1中。
表1 :不同纖維混合物發(fā)酵時形成的有機酸(mmol/g纖維)。
混合物123456
乳酸0.451.196.220.191.301.88
SCFA7.1119.0925.427.0121.8023.53
乙酸3.1810.6517.593.2111.8113.56
丙酸1.222.620.621.102.892.84丁酸0.260.210.010.210.840.30 這些結(jié)果表明僅有鼠李糖乳桿菌時不會促進腸內(nèi)發(fā)酵。大豆PS與菊粉相結(jié)合時 與單獨使用大豆PS相比，形成了更多的乳酸和SCFA。鼠李糖乳桿菌的存在進一步促進了大 豆PS和菊粉混合物形成乳酸和SCFA。當單獨使用菊粉時，觀察到較多的乳酸和SCFA的形 成。然而，幾乎沒有丁酸形成。在大豆PS或者大豆PS和鼠李糖乳桿菌的混合物中含有菊 粉有利地促進了丁酸的形成。因此，大豆PS、菊粉和鼠李糖乳桿菌的混合物顯示了對于患腹 瀉的兒童的最佳發(fā)酵特征。
實施例3 :嬰兒營養(yǎng)品
—種嬰兒營養(yǎng)品，包括-植物脂肪組分，提供27 %的總卡路里，多不飽和脂肪酸占總脂肪酸的40% ， LA/ ALA重量比為5. 5。-牛奶蛋白質(zhì)組分，提供12%的總卡路里，由20wt. X的乳清蛋白和80wt. %的酪 蛋白組成，以及-可消化性碳水化合物組分，提供61 %的總卡路里，包括超過80wt. %的麥芽糊精 和淀粉。-鼠李糖乳桿菌5X 108cfu/100ml。
-菊粉0. 15g/100ml
-大豆多糖0. 25/100ml 該嬰兒營養(yǎng)品的包裝的標簽上標明該營養(yǎng)品在腹瀉的情況下使用。
10
實施例4 : —種口服補液，每100ml包括 2. 0g葡萄糖、0. 2g檸檬酸、138mg鈉、78mg鉀、177mg氯離子、1 X 108cfu鼠李糖乳 桿菌、0. 05g菊粉、0. 10g大豆PS。
權(quán)利要求
一種包括鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnosus)、菊粉和大豆多糖的組合物在制備用于治療和/或預防人受試者腹瀉的營養(yǎng)組合物中的應用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l的應用，其中大豆PS :菊粉的重量比在5至0.2之間。
3. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的應用，其中所述組合物進一步包括可提供20至55% 總卡路里的脂質(zhì)組分、可提供5至15%總卡路里的蛋白質(zhì)組分以及可提供30至75%總卡 路里的可消化性碳水化合物組分。
4. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的應用，其中所述的人受試者的年齡小于36個月。
5. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的應用，其中所述組合物在每g干重組合物中含有104 至10"cfu的鼠李糖乳桿菌。
6. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的應用，其中所述鼠李糖乳桿菌為鼠李糖乳桿菌菌株 LMG P-22799。
7. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的應用，其中所述組合物在每g干重組合物中含有1. 5 至350mg的菊粉。
8. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的應用，其中所述組合物在每g干重組合物中含有2. 5 至600mg的大豆多糖。
9. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的應用，其中所述組合物在每g干重組合物中進一步含 有至少35 ii g鋅和/或40 ii g鐵。
10. 根據(jù)權(quán)利要求3-9中任一項的應用，其中所述的可消化性碳水化合物組分包括麥 芽糊精和/或淀粉，并且其中所述的蛋白質(zhì)組分包括非水解的蛋白質(zhì)。
11. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的應用，用于治療急性腹瀉。
12. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的應用，用于治療輪狀病毒腹瀉。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于治療腹瀉的營養(yǎng)組合物，包括鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnosus)、菊粉和大豆多糖。
文檔編號A23L1/30GK101772308SQ200880101552
公開日2010年7月7日 申請日期2008年7月4日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月6日
發(fā)明者A·C·哥德哈特, J·賓德爾斯 申請人:N.V.努特里奇亞