包括芳香族防腐劑和抗氧化劑的高濃度因子Ⅶ多肽制劑的制作方法

專利名稱：：包括芳香族防腐劑和抗氧化劑的高濃度因子Ⅶ多肽制劑的制作方法包括芳香族防腐劑和抗氧化劑的高濃度因子VII多肽制劑發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及新的可即用因子VII多肽制劑(下文中液體水性藥物組合物)，包括高濃度的因子VII多肽、緩沖劑及至少一種芳香族防腐劑和至少一種抗氧化劑的組合。發(fā)明背景參與凝血級聯(lián)的因子VII已被證明是治療各種病理學(xué)狀況的有效治療劑。因此，越來越需要包括活化因子VII多肽的制劑，所述制劑是藥學(xué)上可接受的并顯示一致的和預(yù)定的臨床功效?，F(xiàn)在商品化供應(yīng)的重組制備的因子VII多肽組合物NovoSeven(NovoNordiskA/S,Denmark)是，例如，以小瓶(約3.0mL容積)存在，包含1.2mg重組人因子Vila,5.84mgNaCl，2.94mgCaCl2，2H20,2.64mgGlyGly,0.14mg聚山梨醇酯80和60.0mg甘露醇。-使用前將該產(chǎn)品用2.0mL注射用水(WFI)重建為pH5.5，乂人而得到因子VII多肽的濃度為約0.6mg/mL。對于需要施用更大量(例如10-20mg)活化因子VII多肽(例如rhFVIIa)的治療應(yīng)用，利用像NovoSevei^組合物的制劑是不方便的，因?yàn)橥ǔＰ枰ㄟ^注射施用相當(dāng)大的體積(例如15-30mL)。因此，需要包括相對較高濃度的活化因子VII多肽的液體藥劑。因子VII多肽的液體制劑容易通過自溶作用降解。這對高濃度制劑來說是特別嚴(yán)重的，限制了液體穩(wěn)定性。包含因子VII抑制劑/穩(wěn)定劑的因子VII多肽的液體制劑先前已經(jīng)被描述過。但是，這些因子VII抑制劑/穩(wěn)定劑必須與因子VII多肽分子一起注射，而因子VII抑制劑/穩(wěn)定劑對人類的影響通常是不知道的。WO2005/002615Al7>開了一種液體、水性藥物組合物，包4舌因子VII多肽；適于維持pH范圍為約5.0到約9.0的緩沖劑；至少一種包含金屬的試劑，其中所述金屬選自由除了鋅以外的氧化態(tài)+n的第一過渡系金屬組成的組；和非離子型表面活性劑。這種類型的一些離子，例如銅，具有已知的毒性，這使該類型的一些制劑不適合給人類施用。WO2005/016365Al公開了一種液體、水性藥物組合物，包4舌至少0.01mg/mL的因子VII多肽(i);適于維持pH范圍為約5.0到約9.0的緩沖劑(ii);和至少一種包括-C(-N-Z-R"-NH-Z、R2基序的穩(wěn)定劑(iii)(例如苯甲脒或精氨酸)。這種類型的一些化合物，例如L-精氨酸，已知具有降低血壓的作用，這使該類型的一些制劑不適合給人類施用。液體制劑對于注射藥劑來說是有益的。如果數(shù)個(gè)注射劑量來自于相同小瓶，防腐劑經(jīng)常是管理機(jī)構(gòu)的要求。大量不同的化合物已經(jīng)在注射產(chǎn)品中被用作防腐劑(S.Nema，N.R.WashkuhnandR丄Brendel:Excipientsandtheiruseininjectableproducts,PDAJournalofPharmaceuticalScienceandTechnology51(4)，166-171)。"Etstudieafmikrotiterpladersanvendelseiformuleringsscreeningafproteiner-medrFVIIasommodelstof，，CatharinaMargretheLerche和CharlottePetersen(PharmaceuticalUniversityofDenmark,2004)公開了包含1mg/mL活化因子VII和2mg/mL間-曱酚的制劑，但不含抗氧化劑。這些作者令人驚訝的發(fā)現(xiàn)，在間甲酚存在的條件下，在25。C溫育4周后約30%的蛋白分子被氧化，表明含防腐劑的制劑對蛋白的穩(wěn)定性非常有害。發(fā)明概述本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)芳香族防腐劑與抗氧化劑組合抑制因子VII多肽(例如rFVIIa)的活性，并增強(qiáng)含高濃度因子VII多肽的制劑的穩(wěn)定性。這些化合物已經(jīng)被批準(zhǔn)給人注射。本發(fā)明基于以下假設(shè)，抑制作用與化合物的芳香族本性有關(guān)。本發(fā)明的第一個(gè)方面涉及一種液體、水性藥物組合物，包括至少10mg/mL的因子VII多肽(i);適于維持pH范圍為約5.0到約9.0的緩沖劑(ii);至少一種濃度為至少0.1mg/mL的芳香族防腐劑(iii);和至少一種濃度為至少0.1mg/mL的抗氧化劑(iv);所述組合物任選的包括其他組分，前提條件是這類其他組分不是選自下列的因子VII多肽穩(wěn)定劑(a)包含金屬的試劑，其中所述金屬選自由除了鋅以外的氧化態(tài)+II的第一過渡系金屬組成的組；和(b)包括-C(-N-Z1-R1)-NH-Z2-R2基序的穩(wěn)定劑。本發(fā)明的第二個(gè)方面涉及用做藥物的本文限定的液體、水性藥物5組合物。本發(fā)明的第三個(gè)方面涉及本文限定的液體、水性藥物組合物在制備用于治療因子VII應(yīng)答性綜合征的藥物中的用途。本發(fā)明的第四個(gè)方面涉及一種治療因子VII應(yīng)答性綜合征的方法，所述方法包括給需要其的受試者施用有效量的本文限定的液體、水性藥物組合物。本發(fā)明的第五個(gè)方面涉及一種氣密容器，包含本文限定的液體、水性藥物組合物和任選的惰性氣體。本發(fā)明的第六個(gè)方面涉及一種用于制備本文限定的組合物的試劑盒，所述試劑盒包括(a)第一容器，包括至少凍干形式的因子VII多肽(i);(b)第二容器，包括水性重建液體，所述液體至少包括緩沖劑(ii)和至少一種芳香族防腐劑(iii)。附圖簡述圖1.選擇的芳香族防腐劑(苯酚和間甲酚)存在條件下rFVIIa的酰胺分解活性。圖2.選擇的防腐劑(苯酚和間甲酚)濃度增加的條件下15mg/mLrFVIIa的濁度。圖3.30mM間曱酚和泊洛沙姆-188濃度增加的條件下15mg/mLrFVIIa的濁度。圖4.30mM間甲酚存在或缺失的條件下，包含5mg/mLrFVIIa的樣品中重鏈片段的形成。將樣品在37。C維持3天。發(fā)明詳述如上所述，本發(fā)明在于開發(fā)一種新的穩(wěn)定的液體、水性藥物組合物，其包括高濃度的因子VII多肽。更具體地，所述液體、水性藥物組合物包括至少10mg/mL的因子VII多肽(i);適于維持pH范圍為約5.0到約9.0的緩沖劑(ii);至少一種濃度為至少1mg/mL的芳香族防腐劑(iii);和至少一種濃度為至少0.1mg/mL的抗氧化劑(iv);所述組合物任選的包括其他組分，前提條件是這類其他組分不是選自下列的因子VII多肽穩(wěn)定劑(a)包含金屬的試劑，其中所述金屬選自由除了鋅以外的氧化態(tài)+II的第一過渡系金屬組成的組；和(b)包括-q^n-z^r、nh-z2-r2基序的穩(wěn)定劑。藥物組合物的生物學(xué)效應(yīng)主要地歸因于因子VII多肽的存在，盡管也可以包括其他活性成分與因子VII多肽的組合。如本文使用的，術(shù)語"因子VII多肽"包括野生型因子VII(即具有美國專利號4,784,950公開的氨基酸序列的多肽)，顯示與野生型因子VII相比生物活性基本上相同或提高的因子VII變體，以及因子VII衍生物和因子vn綴合物。術(shù)語"因子vn"旨在包括未切割(酶原)形式的因子VII多肽，以及已經(jīng)被蛋白水解加工產(chǎn)生它們相應(yīng)生物活性形式的因子vn多肽，它們可以被命名為因子viia。通常，因子vn在殘基152和153之間被切割得到因子VIIa。術(shù)語"因子VII多肽"還包括了包含變體、衍生物和綴合物的多肽，其中與野生型因子Vila的活性相比，因子VIIa生物活性已經(jīng)基本上被改變或稍微降低。這些多肽包括，但不限于，因子VII或因子Vila,其中已經(jīng)導(dǎo)入特定的氨基酸序列改變，這改變或破壞所述多肽的生物活性。血液凝固中因子Vila的生物活性來源于它的下列能力(i)結(jié)合組織因子(TF)和(ii)催化因子IX或因子X的蛋白水解切割產(chǎn)生活化的因子IX或X(分別為因子IXa或Xa)。為了本發(fā)明的目的，可以通過測量制品促進(jìn)血液凝固的能力來定量因子VII多肽的生物活性("因子VII生物活性")，參見本文描述的分析4。在該分析中，生物活性可以表示為相對于對照樣品凝血時(shí)間的減少，并通過與包含1單位/mL因子VII活性的合并人血清標(biāo)準(zhǔn)品相比轉(zhuǎn)化為"因子VII單位"?？蛇x擇地，因子Vila生物活性可以通過以下方式定量(i)在包括嵌入類脂膜的TF和因子X的系統(tǒng)中測量因子VII多肽(例如，因子VIIa)產(chǎn)生活化的因子X(因子Xa)的能力(Persson等，J.Biol.Chem.272:19919-19924,1997);(ii)在含水體系中測量因子X水解("InVitroProteolysisAssay(體外蛋白水解分析)"，參見下文的分析2);(iii)利用基于表面等離子體共振的裝置測量因子VII多肽(例如，因子VIIa)與TF的物理結(jié)合(Persson,FEBSLetts.413:359-363，1997);(iv)測量因子VII多肽(例如，因子VIIa)對合成底物的水解("InVitroHydrolysisAssay(體外水解分析)"，參見下文的分析1);或(v)在7不依賴TF的體外系統(tǒng)中測量凝血酶的產(chǎn)生(參見下文的分析3)。與野生型因子Vila相比生物活性基本上相同或提高的因子VII變體包括當(dāng)在如上所述的凝血分析(分析4)，蛋白水解分析(分析2)或TF結(jié)合分析中的一種或更多種中檢測時(shí)，顯示至少約25%,優(yōu)選的至少約50%,更優(yōu)選的至少約75%和最優(yōu)選的至少約90%的在相同的細(xì)胞類型中產(chǎn)生的因子Vila的特異活性的那些。與野生型因子VIIa相比生物活性基本上降低的因子VII變體是當(dāng)在如上所述的凝血分析(分析4),蛋白水解分析(分析2)或TF結(jié)合分析中的一種或更多種中才企測時(shí)，顯示低于約25%，優(yōu)選的低于約10%,更優(yōu)選的低于約5%和最優(yōu)選的低于約1%的在相同的細(xì)胞類型中產(chǎn)生的野生型因子Vila的特變體包括，但不限于，顯示不依賴于TF的因子X蛋白水解活性的因子VII變體，和結(jié)合TF但不切割因子X的因子VII變體。因子VII的變體，不論是否顯示與野生型因子VII基本上相同或更好的生物活性，或，可選擇地，顯示與野生型因子VII相比基本上改變或降低的生物活性，包括但不限于，通過一個(gè)或更多個(gè)氨基酸的插入、缺失或取代而具有不同于野生型因子VII序列的氨基酸序列的多肽。如本文使用的術(shù)語"因子VII衍生物"意在指顯示與野生型因子VII相比基本上相同或提高的生物活性的FVII多肽，其中親本肽的一個(gè)或更多個(gè)氨基酸已經(jīng)被遺傳和/或化學(xué)和/或酶修飾，例如通過烷化，糖基化，PEG化，酰化，酯形成或酰胺形成等等。這包括但不限于PEG化的人因子Vila,半胱氨酸-PEG化的人因子VIIa及其變體。因子VII衍生物的非限制性實(shí)例包括糖基聚乙二醇化的FVII4汙生物，如WO03/31464和美國專利申請US20040043446，US20040063911,US20040142856,US20040137557，US20040132640，WO2007022512和US20070105755(NeoseTechnologies,Inc.)所公開的；FVII綴合物，如WO01/04287,美國專利申請20030165996，WO01/58935,WO03/93465(MaxygenApS)和WO02/02764，美國專利申i青20030211094(UniversityofMinnesota)所公開的。術(shù)語"提高的生物活性"是指i)具有與重組野生型人因子Vila相比基本上相同或增加的蛋白水解活性的FVII多肽，或ii)具有與重組野生型人因子Vila相比基本上相同或增加的TF結(jié)合活性的FVII多肽，或iii)具有與重組野生型人因子Vila相比基本上相同或增加的血漿半衰期的FVII多肽。術(shù)語"PEG化的人因子VIIa"表示人因子Vila,具有與人因子Vila多肽綴合的PEG分子。應(yīng)理解，PEG分子可以連接到因子Vila多肽的任意部分，包括因子Vila多肽的任意氨基酸殘基或糖部分。術(shù)語"半胱氨酸-PEG化的人因子VIIa，，表示因子Vila,其具有與引入人因子Vila的半胱氨酸的巰基綴合的PEG分子。具有與野生型因子VII基本上相同生物活性的因子VII變體的非限制性實(shí)例包括S52A-FVIIa，S60A畫FVIIa(Lino等，Arch.Biochem.Biophys.352:182-192,1998);顯示增加的蛋白水解穩(wěn)定性的FVIIa變體，如美國專利號5,580,560所公開的；在殘基2卯和291之間或殘基315和316之間被蛋白水解切割的因子VIIa(Mollerup等，Biotechnol.Bioeng.48:501-505,1995);因子Vila的氧化形式(Kornfdt等，Arch.Biochem.Biophys.363:43-54,1999);PCT/DK02/00189公開的FVII變體；和顯示增加的蛋白水解穩(wěn)定性的FVII變體，如WO02/38162所公開(ScrippsResearchInstitute)的；具有改變的Gla結(jié)構(gòu)域并顯示增強(qiáng)的膜結(jié)合的FVII變體，如WO99/20767所公開(UniversityofMinnesota)的；和WO01/58935公開的FVII變體(MaxygenApS)。具有與野生型FVIIa相比增加的生物活性的因子VII變體的非限制性實(shí)例包括在WO01/83725(NovoNordisk)、WO02/22776(NovoNordisk)、WO02/077218(NovoNordisk)、WO03/27147(NovoNordisk)、WO03/37932、WO02/38162(ScrippsResearchInstitute)中公開的FVII變體；和JP2001061479(Chemo-Sero-ThempeuticResInst.)中7>開的活性增強(qiáng)的FVIIa變體。具有相對于野生型因子VII基本上降低或改變的生物活性的因子VII變體的非限制性實(shí)例包括R152E-FVIIa(Wildgoose等，Biochem29:3413-3420,1990),S344A-FVIIa(Kazama等，J.Biol.Chem.270:66-72,1995),FFR-FVIIa(Hoist等，Eur.J.Vase.Endovasc.Surg.15:515-520,1998)，和缺失Gla結(jié)構(gòu)域的因子VIIa(Nicolaisen等，F(xiàn)EBSLetts.317:245-249,1993)。因子VII多肽的實(shí)例包括，但不限于，9野生型因子VII，L305V-FVII,L305V/M306D/D309S-FVI1,L305I-FVII,L305T-FVII,F374P-FVII,V158T/M298Q-FVII,V158D/E296V/M298Q-FVII,K337A-FVII,M298Q-FVII,V158D/M298Q-FVII,L305V/K337A畫FVII,V158D/E296V/M298Q/L305V-FVII,V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII,V158D/E296V/M298Q/L305V/K337A-FVII,K157A-FVII,E296V-FVII,E296V/M298Q-FVII,V158D/E296V-FVII,V158D/M298K-FVII,和S336G-FVII,L305V/K337A-FVII,L305V/V158D-FVII,L305V/E296V-FVII,L305V/M298Q-FVII,L305V/V158T-FVII,L305V/K337A/V158T-FVII,L305V/K337A/M298Q-FVII,L305V/K337A/E296V-FVII,L305V/K337A/V158D-FVII,L305V/V158D/M298Q-FVII,L305V/V158D/E296V-FVII,L305V/V158T/M298Q-FVII,L305V/V158T/E296V-FVII,L305V/E296V/M298Q-FVII,L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII,L305V/V158T/E296V/M298Q-師，L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII,L305V/V158T/E296V/K337A-FVII,L305V/V158D/K337A/M298Q-FVII,L305V/V158D/E296V/K337A-FVII,L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII,L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII,S314E/K316H-FVII,S314E/K316Q-FVII,S314E/L305V-FVII,S314E/K337A-FVII,S314E/V158D-FVII,S314E/E296V-FVII,S314E/M298Q-FVII,S314E/V158T-FVII,K316H/L305V-FVII,K316H/K337A-FVII,K316H/V158D-R/n,K316H/E296V-FVII,K316H/M298Q-FVII,K316H/V158T-FVn,K316Q/L305V-FVII,K316Q/K337A-FVII,K316Q/V158D-FVII,K316Q/E296V-FVII,K316Q/M298Q-FVII,K316Q/V158T-FVII,S314E/L305V/K337A-FVII,S314E/L305V/V158D-FVII,S314E/L305V/E296V-FVII,S314E/L305V/M298Q-FVII,S314E/L305V/V158T-FVII,S314E/L305V/K337A/V158T-FVII,S314E/L305V/K337A/M298Q-FVII,S314E/L305V/K337A/E296V-FVII,S314E/L305V/K337A/V158D-FVII,S314E/L305V/V158D/M298Q-FVII,S314E/L305V/V158D/E296V-FVII,S314E/L305V/V158T/M298Q-FVII,S314E/L305V/V158T/E296V-FVII,S314E/L305V/E296V/M298Q-FVII,S314E/L305V/N/158D/E296V/M298Q-FVII,S314E/L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII,S314E/L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII,S314E/L305V/V158T/E296V/K337A-FVII,S314E/L305V/V158D/K337A/M298Q-FVI1,S314E/L305V/V158D/E296V/K337A-FVII'S314E/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII,S314E/L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII,O16H/L305V/K337A-FVII,K316H/L305V/V158D-FVII,K316H/L305V/E296V-R/II,K316H/L305V/M298Q-FVII,K316H/L305V/V158T-FVII,K316H/L305V/K337A/V158T-FVII,K316H/L305V/K337A/M298Q-FVII,K316H/L305V/K337A/E296V-FVII,K316H/L305V/K337A/V158D-FVII,K316H/L305V/V158D/M298Q-FVII,K316H/L305V/V158D/E296V-FVII,K316H/L305V/V158T/M298Q-FVII,K316H/L305V/V158T/E296V-FVII,K316H/L305V/E296V/M298Q-FVII,K316H/L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII,K316H/L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII,K316H/L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII,K316H/L305V/V158T/E296V/K337A-FVII,K316H/L305V/V158D/K337A/M298Q-FVII,K316H/L305V/V158D/E296V/K337A-FVII,K316H/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII,K316H/L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII,K316Q/L305V/K337A-FVII,K316Q/L305V/V158D-FVII,K316Q/L305V/E296V-FVII,K316Q/L305V/M298Q-FVII,K316Q/L305V/V158T-FVII,K316Q/L305V/K337A/V158T-FVII,K316Q/L305V/K337A/IV1298Q-FVII,K316Q/L305V/K337A/E296V-FVII'K316Q/L305V/K337A/V158D-FVII,O16Q/L305V/V158D/M298Q-R/II,K316Q/L305V/V158D/E296V-FVI1,K316Q/L305V/V158T/M298Q-FVII,K316Q/L305V/V158T/E296V-FVII,K316Q/L305V/E296V/M298Q-FVII,K316Q/L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII,K316Q/L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII,K316Q/L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII,K316Q/L305V/V158T/E296V/K337A-FVII,K316Q/L305V/V158D/K337A/M298Q-FVII,K316Q/L305V/V158D/E296V/K337A-FVII,K316Q/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVIIK316CJ/L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII,F374Y/K337A-FVII,F374Y/V158D-FVII,F374Y/E296V-FVII,F374Y/M298Q-FVII,F374Y/V158T-FVII,F374Y/S314E-FVII,F374Y/L305V-FVII,F374Y/L305V/K337A-FVII,F374Y/L305V/V158D-FVII,F374Y/L305V/E296V-FVII,F374Y/L305V/M298Q-FVII,F374Y/L305V/V158T-FVII,F374Y/L305V/S314E-FVII,F374Y/K337A/S314E-FVII,F374Y/K337A/V158T-FVII,F374Y/K337A/M298Q-FVII,F374Y/K337A/E296V-FVII,F374Y/K337A/V158D-FVII,F374Y/V158D/S314E-FVII,F374Y/V158D/M298Q-FVII,F374Y/V158D/E296V-FVII,F374丫/V158T/S314E-FVn,F374Y/V158T/M298Q-FVII,F374Y/V158T/E296V-FVH,F374Y/E296V/S314E-FVII,F374Y/S314E/M298Q-FVII,F374Y/E296V/M298Q-FVII,F374Y/L305V/K337A/V158D-FVII,F374Y/L305V/K337A/E296V-FVII,F374Y/L305V/K337A/M298Q-FVII,F374Y/L305V/K337A/V158T-R/II,F374Y/L305V/K337A/S314E-FVII,F374Y/L305V/V158D/E296V-FVII,F374Y/L305V/V158D/M298Q-FVII,F374Y/L305V/V158D/S314E-FVII,F374Y/L305V/E296V/M298Q-FVII,F374Y/L305V/E296V/V158T-FVII,F374Y/L305V/E296V/S314E-FVII,F374Y/L305V/M298Q/V158T-FVII,F374Y/L305V/M298Q/S314E-FVII,F374Y/L305V/V158T/S314E-FVII,F374丫/K337A/S314E/V158T-FVII,F374Y/K337A/S314E/M298Q-FVII,F374Y/K337A/S314E/E296V-FVII,F374Y/K337A/S314E/V158D-FVII,F374Y/K337A/V158T/M298Q-FVII,F374Y/K337A/V158T/E296V-FVII,F374Y/K337A/M298Q/E296V-FVI1,F374Y/K337A/M298Q/V158D-FVII,F374Y/K337A/E296V/V158D-FVII,F374Y/V158D/S314E/M298Q-FVII,F374Y/V158D/S314E/E296V-FVII,F374Y/V158D/M298Q/E296V-FVII,F374Y/V158T/S314E/E296V-FVII,F374Y/V158T/S314E/M298Q-FVII,F374Y/V158T/M298Q/E296V-FVII,F374Y/E296V/S314E/M298Q-FVII,F374Y/L305V/M298Q/K337A/S314E-FVII,F374Y/L305V/E296V/K337A/S314E-FVII,F374Y/E296V/M298Q/K337A/S314E-FVI1,F374Y/L305V/E296V/M298Q/K337A-FVII,F374Y/L305V/E296V/M298Q/S314E-FVII,F374Y/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII,F374Y/V158D/E296V/M298Q/S314E-FVII,F374Y/L305V/V158D/K337A/S314E-FVII,F374Y/V158D/M298Q/K337A/S314E-FVII,F374Y/V158D/E296V/K337A/S314E-FVII,F374Y/L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII,F374Y/L305V/V158D/M298Q/K337A-FVII,F374Y/L305V/V158D/E296V/K337A-FVII,F374Y/L305V/V158D/M298Q/S314E-FVII,F374Y/L305V/V158D/E296V/S314E-FVII,F374Y/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII,F374Y/V158T/E296V/M298Q/S314E-FVII,F374Y/L305V/V158T/K337A/S314E-FVI1,F374Y/V158T/M298Q/K337A/S314E-FVII,F374Y/V158T/E296V/K337A/S314E-FVII,F374Y/L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII,F374Y/L305V/V158T/M298Q/K337A-FVII,F374Y/L305V/V158T/E296V/K337A-FVII,F374Y/L305V/V158T/M298Q/S314E-FVII,F374Y/L305V/V158T/E296V/S314E-FVII,F374Y/E296V/M298Q/K337A/V158T/S314E-FVII,F374Y/V158D/E296V/M298Q/K337A/S314E-FVI1,F374Y/L305V/V158D/E296V/M298Q/S314E-FVII'F374Y/L305V/E296V/M298Q/V158T/S314E-FVII,F374Y/L305V/E296V/M298Q/K337A/V158T-FVII,F374Y/L305V/E296V/K337A/V158T/S314E-FVI[,F374Y/L305V/M298Q/K337A/V158T/S314E-FVII,F374Y/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII,F374Y/L305V/V158D/E296V/K337A/S314E-FVII,F374Y/L305V/V158D/M298Q/K337A/S314E-FVII,F374Y/L305V/E296V/M298Q/K337A/V158T/S314E-FVII,F374Y/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A/S314E-FVII,S52A-因子VII,S60A-因子VII;R152E-因子VII,S344A-因子VII,缺失Gla結(jié)構(gòu)域的因子Vila;和P11Q/K33E-FVII,T106N-FVII,K143N/N145T-FVII,V253N-FVII,R290N/A292T-FVII,G291N-FVII,R315N/V317T-FVII'K143N/N145T/R315N/V317T-FVII;和在233Thr到240Asn的氨基酸序列中具有取代、添加或缺失的FVII,在從304Arg到329Cys的氨基酸序列中具有取代、添加或缺失的FVII，和在氨基酸序列Ilel53-Arg223中具有取代、缺失或添加的FVII。因此，因子VII多肽中的取代變體包括，但不限于以下位置的取代PIO,K32,L305,M306,D309,L305,L305,F374,V158,M298,V158,E296,K337,M298,M298,S336,S314,K316,K316,R374,S52,S60,R152,S344,T106,K143,N145,V253,R290,A292,G291,R315,V317,和從T233到N240或從R304到C329;或從1153到R223的氨基酸序列中的取代、添加或缺失，或其組合，尤其是變體諸如P10Q,K32E,L305V,N1306D,D309S,L305I,L305T,F374P,V158T,M298Q,V158D,E296V,K337A,M298Q,M298K,S336G,S314E,K316H,K316Q,F374Y,S52A,S60A,R152E,S344A,T106N,K143N,N145T,V253N,R2，，A292T,G291N,R315N,V317T,和從T233到N240,或從R304到C329,或從1153到R223的氨基酸序列中的取代、添加或缺失，或其組合。在一些實(shí)施方案中，因子VII多肽是人因子VIIa(hFVIIa)，優(yōu)選的重組制備的人因子VIIa(rhVIIa)。在其他實(shí)施方案中，因子VII多肽是因子VII序列變體。在一些實(shí)施方案中，因子VII多肽具有不同于野生型人因子VII的糖基化。在一些實(shí)施方案中，因子VII多肽是聚乙二醇化的FVII衍生物，優(yōu)選的是糖基聚乙二醇化fvii衍生物。13在目前最感興趣的實(shí)施方案中，蛋白是活化形式的因子VII多肽。在各種實(shí)施方案中，例如因子VII多肽是因子VII序列變體的實(shí)施方案中，當(dāng)按本說明書描述的"體外蛋白水解分析"(分析2)檢測時(shí)，因子VII多肽的活性與天然人因子VIIa(野生型FVila)的活性之間的比例是至少約1.25,優(yōu)選的至少約2.0,或4.0，最優(yōu)選的至少約8.0。在一些實(shí)施方案中，因子VII多肽是因子VII變體，其中在"體外水解分析"(參見下文的分析l)中檢測時(shí)，所述因子VII多肽的活性與天然人因子VIIa(野生型FVIIa)的活性之間的比例是至少約1.25;在其他實(shí)施方案中，該比例是至少約2.0;在其他實(shí)施方案中，該比例是至少約4.0。在藥物組合物中，經(jīng)常希望活性成分的濃度使得單位劑量的施用不會給患者造成不必要的不方便。因此，超過約2-10mL的單位劑量通常是不期望的。因此為了本發(fā)明的目的，因子vn多肽的濃度是相當(dāng)高的，即至少10mg/mL。在不同的實(shí)施方案中，因子VII多肽以下列濃度存在10-90mg/mL;12-80mg/mL;16-80mg/mL;22-70mg/mL;22-60mg/mL;22-50mg/mL;或25-50mg/mL。因子Vila濃度方^更地用mg/mL或1U/mL表示，其中1mg通常代表43,000-56,000IU或更高。緩沖劑(ii)為了使液體、水性藥物組合物可用于哺乳動(dòng)物諸如人的直接腸胃外給藥，通常需要所述組合物的pH值維持在合理的限度內(nèi)，諸如從約5.0到約9.0。為了確保指定條件下合適的pH值，藥物組合物還包括適合將pH范圍保持在約5.0到約9.0的緩沖劑(ii)。術(shù)語"緩沖劑"包括維持溶液pH在約5.0到約9.0的可接受范圍的那些試劑或試劑組合。在一個(gè)實(shí)施方案中，緩沖劑(ii)是選自下列組的至少一種組分MES，PIPES，ACES,BES,TES，HEPES,TRIS,組氨酸，咪哇，甘氨酸，甘氨酰甘氨酸，甘氨酰胺，磷酸，醋酸(例如醋酸鈉或醋酸4丐)，乳酸，戊二酸，檸檬酸，酒石酸，蘋果酸，馬來酸和琥珀酸的酸和鹽。應(yīng)理解緩沖劑可以包括兩種或更多種組分的混合物，其中所述混合物能夠提供特定范圍的pH值。作為實(shí)例可以提及的是醋酸和醋酸鈉，等等。14選擇緩沖劑的濃度以便維持溶液的優(yōu)選PH。在各種實(shí)施方案中，緩沖劑的濃度是1-100mM;1-50mM;1-25mM或2-20mM。在一個(gè)實(shí)施方案中，保持組合物的pH從約5.0到約8.0;諸如從約5.0到約7.5;從約5.0和約7.0;從約5.0到約6.5,從約5.0到約6.0,從約5.5到約7.0;從約5.5到約6.5,,人約6.0到約7.0,從約6.4到約6.6，或從約5.2到約5.7。芳香族防腐劑(iii)藥物組合物還包括至少一種濃度為至少0.1mg/mL的芳香族防腐劑(iii)。組合物中通常包括防腐劑以抑制微生物生長(即芳香族防腐劑具有抑菌/殺菌作用)，從而允許因子VII多肽的"多劑量"包裝。但是，還發(fā)現(xiàn)芳香族防腐劑與抗氧化劑組合對溶于水性溶液的因子VII多肽的穩(wěn)定性有非常顯著的影響，尤其是是在相當(dāng)高濃度的情況下。在下面，術(shù)語"芳香族"是指在其結(jié)構(gòu)中包含碳原子的6元不飽和環(huán)(即苯環(huán))的化合物。芳香族防腐劑的實(shí)例包括苯酚，苯甲醇，鄰曱酚，間甲酚，對甲酚，氯曱酚，對羥基苯甲酸甲酯，對羥苯曱酸丙酯，苯扎氯銨(benzalkoniumchloride),和千索氯銨(benzethoniumchloride)。通常包括濃度為0.1-20mg/mL的至少一種芳香族防腐劑(iii),所述濃度取決于芳香族防腐劑的pH范圍和類型。例如，典型的濃度是1-4mg/mL間曱S^，或1-6mg/mL笨酚，或5-20mg/mL苯曱醇，或1-3mg/mL氯甲酚?？寡趸瘎?iv)如上所述，因子VII多肽在水性組合物中的穩(wěn)定性歸因于芳香族防腐劑(m)和抗氧化劑(iv)的組合。至少一種抗氧化劑以至少o.img/mL的濃度存在。在不同的實(shí)施方案中，所述至少一種抗氧化劑(iv)選自以下組L-曱硫氨酸，D-曱硫氨酸，曱硫氨酸類似物，包含甲硫氨酸的肽，曱硫氨酸同系物，抗壞血酸，半胱氨酸，高半胱氨酸，谷胱甘肽，胱氨酸，和胱硫醚(cysstathionine)。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，抗氧化劑是L-曱硫氨酸。所述至少一種抗氧化劑的濃度通常是0.1-5.0mg/mL,諸如0.1-4.0mg/mL,0.1-3.0mg/mL，0.1-2.0mg/mL或0.5-2.0mg/mL。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，在芳香族防腐劑和抗氧化劑(例如0.5mg/mL曱硫氨酸)同時(shí)存在的條件下，活化因子VII的氧化實(shí)際上進(jìn)行的非常慢。其他組分應(yīng)理解防腐劑和抗氧化劑的存在的組合消除了對上文中(a)和(b)型穩(wěn)定劑的需要，在更優(yōu)選的實(shí)施方案中甚至消除了對其他因子VII多肽穩(wěn)定劑的需要。因此，在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述組合物的其他組分不是因子VII多肽穩(wěn)定劑。就(a)型穩(wěn)定劑來說，這些在WO2005/002615中描述和定義。就(b)型穩(wěn)定劑來說，這些在WO2005/016365中描述和定義(一般而言明確的依據(jù)取代基Z1、Z2、R^和R2的具體含義)。為了方便起見還需提及，Zi和Z2獨(dú)立的選自O(shè)、-S-、NRH-和單鍵，其中RH選自氫，d《烷基，芳基和芳曱基，W和RM蟲立的選自氫，任選取代的d—6-烷基，任選取代的C2—6-鏈烯基，任選取代的芳基，任選取代的雜環(huán)基，或ZZ和112如上面所定義，和ON-Z^R^形成雜環(huán)的一部分，或Zi和R1如上面所定義，-C-NH-Z2-R2形成雜環(huán)的一部分，或-C—N-ZLl^)-NH-Z2-R2形成雜環(huán)，其中-ZLR、r2-Z2-是雙基。除了必需組分外，該所述液體、水性藥物組合物包括有利于組合物的制備、制劑或施用的其他組分。在一些實(shí)施方案中，所述組合物還包括張力調(diào)節(jié)劑(v)。如本文使用的，術(shù)語"張力調(diào)節(jié)劑，，包括有助于溶液重量克分子滲透濃度(osmolality)的試劑。張力調(diào)節(jié)劑(v)包括至少一種選自以下組的試劑中性鹽，氨基酸，2-5個(gè)氨基酸殘基的肽，單糖，二糖，多糖，和糖醇。在一些實(shí)施方案中，組合物包括兩種或更多種這類試劑的組合。"中性鹽"表示當(dāng)溶于水溶液時(shí)既不是酸也不是堿的鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，至少一種張力調(diào)節(jié)劑(v)是選自以下組的中性鹽鈉鹽，鉀鹽，釣鹽，和鎂鹽，諸如氯化鈉，氯化鉀，氯化鈣，醋酸4丐，葡萄糖酸鈣，乙酰丙酸鈣，氯化鎂，醋酸鎂，葡糖酸鎂，和乙酰丙酸4美。在其他實(shí)施方案中，張力調(diào)節(jié)劑(v)包括氯化鈉與選自氯化鈣、醋酸釣、氯化鎂和醋酸鎂中的至少一種的組合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，張力調(diào)節(jié)劑(V)是選自氯化鈉、氯化4丐、蔗糖、葡萄糖和甘露醇中的至少一種。在不同的實(shí)施方案中，張力調(diào)節(jié)劑(v)以至少1mM,至少5mM，至少10mM,至少20mM，至少50mM，至少100mM，至少200mM，至少400mM,至少800mM,至少1000mM,至少1200mM,至少1500mM，至少1800mM，至少2000mM,或至少2200mM的濃度存在。在一些實(shí)施方案中，張力調(diào)節(jié)劑(v)以5-2200mM的濃度存在，諸如25-2200mM,50-2200mM,100-2200mM,200-2200mM,400-2200mM,600-2200mM,800-2200mM,1000-2200mM,1200-2200mM,1400-2200mM,1600-2200mM,1800-2200mM,或2000-2200mM;5-1800mM,25-1800mM,50-1800mM,100-1800mM,200-1800mM,400-1800mM,600-1800mM,800-1800mM,1000-1800mM,1200-1,mM,1400-1800mM,1600-1800mM;5-1500mM,25-1400mM,50-1500mM,100-1500mM,200-1500mM,400-1500mM,600-1500mM,800-1500mM,1000-1500mM,1200-1500mM:5-1200mM,25-1200mM,50-1200mM,100-1200mM,200-1200mM,400-1200mM,600-1200mM,或800-1200mM.在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案中，至少一種張力調(diào)節(jié)劑(V)是離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(v/a)。如本文使用的，術(shù)語"離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑"包括有助于溶液離子強(qiáng)度的試劑。該試劑包括，但不限于，中性鹽，氨基酸，2到5個(gè)氨基酸殘基的肽。在一些實(shí)施方案中，組合物包括兩種或更多種這類試劑的組合。離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(v/a)的優(yōu)選實(shí)例是中性鹽諸如氯化鈉，氯化鉀，氯化鉤和氯化4美。優(yōu)選的試劑(v/a)是氯化鈉。術(shù)語"離子強(qiáng)度"是溶液的離子強(qiáng)度(H),其用以下等式定義p二1/2i:([i](Zi2))，其中p是離子強(qiáng)度，[i]是離子的毫摩爾濃度，Zi是所述離子的電荷(+或-)(參見，例長口，Solomon，JournalofChemicalEducation,78(12):1691-92，2001;JamesFritzandGeorgeSchenk:QuantitativeAnalyticalChemistry,1979)。在本發(fā)明不同的實(shí)施方案中，組合物的離子強(qiáng)度是至少50,諸如至少75，至少100，至少150,至少200,至少250,至少400,至少500,至少650，至少800，至少1000，至少1200,至少1600,至少2000,至少2400，至少2800,或至少3200。17在一些特定的實(shí)施方案中，張力調(diào)節(jié)劑(v)和離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(v/a)的總濃度范圍是1-500mM,諸如1-300mM，或10-200mM,或20-150mM，取決于任何其他成分可能對張力和離子強(qiáng)度的影響。在一個(gè)實(shí)施方案中，組合物是等滲的；在另一個(gè)實(shí)施方案中，它是高滲的。術(shù)語"等滲的"表示"與血清等滲"，即為在大約300±50毫滲透分子/kg。張力表示在施用前溶液重量克分子滲透濃度的測量值。術(shù)語"高滲的"表示高于血清生理性水平的重量克分子滲透濃度指定水平，諸如高于300±50毫滲透分子/kg的水平。此外，本發(fā)明的具體實(shí)施方案涉及芳香族防腐劑(iii)和抗氧化劑(iv)與相當(dāng)高濃度的選自鈉鹽、鈣鹽和鎂鹽的離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(v/a)的組合。在該實(shí)施方案中，離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(v/a)，即鈉鹽、鈣鹽和/或鎂鹽，以15-1000mM的濃度存在，諸如25-1000mM,50-1000mM,100-1000mM,200-1000mM,300-1000mM,權(quán)-1000mM,500-1000mM,600-1000mM,700-1000mM;15-800mM,25-800mM,50-800mM,100-800mM,200-800mM,300-800mM,400-800mM,500-80015-600mM,25-600mM,50-600mM,100-600mM,200-600mM,300-600mM;15-400mM,25-400mM,50-400mM,或100-400mM.在這些實(shí)施方案中，鈉鹽可以是氯化鈉，4丐鹽可以選自氯化4丐、醋酸鈣、葡萄糖酸釣和乙酰丙酸4丐，鎂鹽可以選自氯化鎂、醋酸鎂、葡糖酸鎂、乙酰丙酸鎂和強(qiáng)酸的鎂鹽。在更具體的實(shí)施方案中，鈣鹽和/或鎂鹽與氯化鈉組合使用。在當(dāng)前優(yōu)選的實(shí)施方案中，組合物包括一種或更多種選自鈣(Ca2,鹽和鎂(Mg")鹽的離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑，例如一種或更多種選自以下組的鹽氯化釣，醋酸鉤，葡萄糖酸4丐，乙酰丙酸鉤，氯化鎂，醋酸鎂，硫酸鎂，葡糖酸鎂，乙酰丙酸鎂，強(qiáng)酸的鎂鹽。在其一個(gè)實(shí)施方案中，鈣(Ca2+)和/或鎂(Mg3+)鹽的濃度是至少2mM，諸如至少5mM或約10mM。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，組合物包括濃度為至少2mM的Ca2+。在可以與上述組合的其他實(shí)施方案中，藥物組合物還可以包括非離子型表面活性劑(vi)。表面活性劑(亦稱為去污劑)通常包括那些保護(hù)蛋白免受空氣/溶液界面誘發(fā)應(yīng)力和溶液/表面誘發(fā)應(yīng)力(例如導(dǎo)致蛋白聚集)的試劑。典型的非離子型表面活性劑是聚山梨醇酯，泊洛沙姆，聚氧乙烯烷基醚，聚乙烯/聚丙烯嵌段共聚物，聚乙二醇(PEG),硬脂酸聚氧乙烯酯，和聚氧乙烯蓖麻油。非離子型表面活性劑的例示性實(shí)例是Tween,聚山梨醇酯20,聚山梨醇酯80，Brij-35(聚氧乙烯十二醚)，泊洛沙姆188，泊洛沙姆407，PEG8000，Pluronic⑧多元醇，聚氧-23-月桂醚，Myrj49，和CremophorA，尤其是泊洛沙姆188。在一個(gè)實(shí)施方案中，非離子型表面活性劑以0.005-2.0%的量存在(按重量計(jì))。優(yōu)選的實(shí)施方案本發(fā)明人目前確定下列實(shí)施方案是尤其有益的，即如此處限定的液體、水性藥物組合物，其包括10-90mg/mL的因子VII多肽(i);適于維持pH范圍為約5.0到約9.0的緩沖劑(ii);至少一種濃度為0.1-20mg/mL的芳香族防腐劑(iii);和至少一種濃度為0.1-5.0mg/mL的抗氧化劑(iv);穩(wěn)定性本發(fā)明的組合物可用做因子VII多肽的穩(wěn)定可即用組合物。當(dāng)在2。C到8"的溫度范圍內(nèi)保存時(shí)，組合物通常將穩(wěn)定至少6個(gè)月，優(yōu)選的最多36個(gè)月。術(shù)語"穩(wěn)定，，旨在表示，(i)在2。C到8。C保存6個(gè)月后，通過一階段凝血分析(分析4)測量，組合物保留其初始生物活性的至少50%，或(ii)在2。C到8。C保存6個(gè)月后，重鏈降解產(chǎn)物的含量最多為40%(w/w),假定初始樣品不包含重鏈降解產(chǎn)物(即只有因子VII多肽記入百分比的計(jì)算)。優(yōu)選的，在2到8。C保存6個(gè)月后，組合物保留其初始活性的至少70%,諸如至少80%,或至少85%，或至少90%,或至少95%。此外優(yōu)選的，組合物中重鏈降解產(chǎn)物的含量最多為30%(w/w),最多為25%(w/w),最多為20%(w/w),最多為15%(w/w),最多為10%(w/w)，最多為5%(w/w)或最多為3%(w/w)。優(yōu)選的，在2到8。C保存6個(gè)月后，穩(wěn)定組合物保留其初始活性的至少70%,諸如至少80%,或至少85%,或至少90%,或至少95%。優(yōu)選的，在各種實(shí)施方案中，穩(wěn)定組合物中重鏈降解產(chǎn)物的含量最多為30%(w/w),最多為25%(w/w)，最多為20%(w/w),最多為15%19(w/w),最多為10。/。(w/w)，最多為5。/。(w/w)或最多為3%(w/w)。使用方法應(yīng)理解，本文限定的液體、水性藥物組合物可用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。因此，本發(fā)明特別提供用做藥物，更具體的用做治療因子VII應(yīng)答性綜合征的藥物的本文限定的液體、水性藥物組合物。因此，本發(fā)明還提供本文限定的液體、水性藥物組合物在制備治療因子VII應(yīng)答性綜合征的藥物中的用途，以及一種治療因子VII應(yīng)答性綜合征的方法，所述方法包括給需要其的受試者施用有效量的本文限定的液體、水性藥物組合物。本發(fā)明的制品可用于治療任何因子VII應(yīng)答性綜合征，諸如，例如，出血癥，包括由以下原因引起的出血癥凝血因子缺陷(例如，血友病A,血友病B,凝結(jié)因子XI缺陷，凝結(jié)因子VII缺陷)；血小板減少癥或vonWillebmnd's病，或凝血因子抑制劑的獲得，和腦內(nèi)出血，或任意原因(創(chuàng)傷，手術(shù))的過度出血。所述制品還可以給進(jìn)行手術(shù)或具有其他創(chuàng)傷的患者使用，或給接受抗凝療法的患者使用。術(shù)語"有效量，，是由有資格的醫(yī)師確定的有效量，該醫(yī)師可以逐步增高劑量以實(shí)現(xiàn)需要的應(yīng)答。關(guān)于劑量需要考慮的因素包括功效，生物利用率，所需藥代動(dòng)力學(xué)/藥效學(xué)模式，治療的狀況，患者相關(guān)因素(體重，健康，年齡，等等)，共施用藥物(例如，抗凝劑)的存在，施用時(shí)間，或執(zhí)業(yè)醫(yī)生已知的其他因素。術(shù)語"治療"一皮定義為為了抗擊疾病、狀況或病癥，對受試者(例如哺乳動(dòng)物，尤其是人)的處置和護(hù)理，包括施用因子VII多肽以阻止癥狀或并發(fā)癥的發(fā)作，或減輕癥狀或并發(fā)癥，或消除疾病、狀況或病癥。可以將包含因子VII多肽的本發(fā)明藥物組合物給需要這種治療的受試者腸胃外施用。利用注射器，任選的是筆樣注射器，可以通過皮下、月幾內(nèi)或靜脈注射進(jìn)行腸胃外給藥。可選4奪地，可以通過輸液泵進(jìn)行腸胃外給藥。在重要的實(shí)施方案中，根據(jù)本領(lǐng)域已知的方法藥物組合物適于皮下、月幾內(nèi)或靜脈注射。氣密容器因此，本發(fā)明還提供一種包含本文限定的液體、水性藥物組合物及任選的惰性氣體的氣密容器(例如，小瓶或藥筒(諸如用于筆樣施用器的藥筒))。惰性氣體可以選自氮，氬氣，等等。容器(例如小瓶或藥筒)通常由玻璃或塑料制成，尤其是玻璃，任選的用橡膠隔片或允許滲透的其他密閉裝置密封，以保證藥物組合物的完整性。在其他實(shí)施方案中，容器是裝入密封袋的小瓶或藥筒，例如密封的塑料袋，諸如層壓的(例如金屬(諸如鋁)層壓塑料袋)。包括凍干因子VII多肽的試劑盒上述限定的液體、水性藥物組合物主要預(yù)期用于直接使用，通常用于腸胃外給藥，例如通過注射。但是，還想象得到該液體、水性藥物組合物可能在醫(yī)師或最終用戶實(shí)際腸胃外使用前的一段時(shí)間從相應(yīng)的凍干制劑制備，例如使用前l(fā)-24小時(shí)，或甚至數(shù)周，例如使用前2-4周，例如以多劑量批次的形式。在這種情況下對醫(yī)師或最終用戶來說，得到凍干形式的因子VII多肽以及合適量的水性重建液是方便的。因此，本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及用于制備本文限定的組合物的試劑盒，所述試劑盒包括(a)第一容器，包括至少凍干形式的因子VII多肽(i);(b)第二容器，包括水性重建液體，所述液體至少包括緩沖劑(ii)和至少一種芳香族防腐劑(iii)。方便地，第二容器還包括抗氧化劑(iv)。在一些實(shí)施方案中，第一容器和第二容器可以被安置為裝置的分離小室，例如用于注射器裝置的安瓿，例如筆。實(shí)驗(yàn)一般方法當(dāng)才是及溶于溶液的固體和混入溶液的液體時(shí)，百分比均是(體重/體重)。例如，對于泊洛沙姆188來i兌，它是100%儲液的重量/溶液的重量。適于測定因子VII多肽的生物活性的分析適用于本發(fā)明的因子vn多肽可以通過合適的分析挑選，所述分析可以作為簡單的初步體外試驗(yàn)進(jìn)行。因此，本說明書公開了檢測因子vii多肽活性的簡單試驗(yàn)(稱為"體外水解分析")。第一代凝血分析可以利用基本上如WO92/15686或US5,997,864描述的一階賴:(one-stage)凝血分析測量因子VII多肽的活性。簡單來說，將待測樣品在50mMTris(pH7.5),0.1%BSA中稀釋，并將100|uL與lOOpL因子VII缺陷型血漿和200jaL包含10mMCa2+的促凝血酶原激酶C溫育。測量凝血時(shí)間，并與利用參照標(biāo)準(zhǔn)品或系列稀釋的含檸檬酸鹽的正常人血漿庫的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較。體外水解分析(分析1)可以檢測天然(野生型)因子Vila和因子VII多肽(以下均稱為"因所述分析在微量滴定板(MaxiSorp，Nunc,Denmark)中進(jìn)行。將終濃度1mM的顯色底物D-Ile-Pro-Arg-p-硝基酰替苯胺(nitroanilide)(S-2288,Chromogenix，Sweden)添力口到包含0.1MNaCl,5mMCaCl2禾口1mg/mL牛血清白蛋白的50mMHEPES,pH7.4中的因子Vila(終濃度100nM)。連續(xù)地在SpectraMax340platereader(MolecularDevices,USA)中測量405nm處的吸光度。在20分鐘溫育期間發(fā)展的吸光度，在減去不含酶的空白孔的吸光度后，用于計(jì)算因子VII多肽和野生型因子Vila的活性之間的比例:比例=(A405nm因子VII多肽)/(A405nm因子Vila野生型)?；诖?，可以鑒定出與天然因子VIIa相比活性更低、相當(dāng)或更高的因子VII多肽，諸如，例如，其中因子VII多肽的活性與天然因子VII(野生型FVII)之間的比例為約l.O對高于1.0的因子VII多肽。該分析還可以用于檢測不同緩沖條件下的因子VII活性。因子VII多肽的活性還可以利用生理底物:渚如因子X測量("體外蛋白水解分析")，合適地采用100-1000nM的濃度，其中在添加合適的顯色底物(例如S-2765)后測量產(chǎn)生的因子Xa。此外，可以在生理溫度下進(jìn)行所述活性分析。體外蛋白水解分析(分析2)對天然(野生型)因子Vila和因子VII多肽(以下均稱為"因子Vila")進(jìn)行平行分析以直接比較它們的特異活性。所述分析在微量滴定板(MaxiSorp,Nunc,Denmark)中進(jìn)行。將包含0.1MNaCl,5mMCaCl2和1mg/mL牛血清白蛋白的100(iL50mMHEPES,pH7.4中的因子22VIIa(lOnM)和因子X(0.8microM)溫育15分鐘。然后通過添加包含0.1MNaCl，20mMEDTA和1mg/mL牛血清白蛋白的50|iL50mMHEPES，pH7.4終止因子X切割。通過添加終濃度0.5mM的顯色底物Z-D-Arg-Gly-Arg-p-硝基酰替苯胺(S-2765,Chromogenix,Sweden)來測量產(chǎn)生的因子Xa的量。連續(xù)地在SpectraMaxTM340platereader(MolecularDevices,USA)中測量405nm處的吸光度。在10分鐘溫育期間發(fā)展的吸光度，在減去不含F(xiàn)VIIa的空白孔的吸光度后，用于計(jì)算因子VII多肽和野生型因子Vila的蛋白水解活性之間的比例比例=(A405nm因子VII多肽)/(A405nm因子Vila野生型)。基于此，可以鑒定出與天然因子VIIa相比活性更低、相當(dāng)或更高的因子VII多肽，諸如，例如，其中因子VII多肽的活性與天然因子VII(野生型FVII)之間的比例為約l.O對高于1.0的因子VII多肽。凝血酶產(chǎn)生分析(分析3)可以在包括生理濃度的所有相關(guān)凝血因子和抑制劑(當(dāng)模擬血友病A狀況時(shí)減去因子VIII)和活化的血小板的分析(分析3)中測量因子VII多肽產(chǎn)生凝血酶的能力(如描述于Monroe等(1997)Brit.J.Haematol.99,542-547的第543頁，其在此通過援引并入)。一階段凝結(jié)分析(凝血分析)(分析4)還可以利用一階段凝結(jié)分析(分析4)檢測因子VII多肽的特異活性("凝血活性，，)。為了這個(gè)目的，將待測樣品用50mMPIPES-緩沖液(pH7.2),1%BSA稀釋，并將40pl與40^il因子VII缺陷型血漿及包含10mMCa^和合成磷脂的80)ul人重組組織因子溫育。測量凝結(jié)時(shí)間(凝血時(shí)間)，并與平行系分析中利用參照標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較。重鏈降解分析為了確定重鏈降解產(chǎn)物的含量，在顆粒大小為5lam和孔徑300A的專有4.5x250mm丁基鍵合的二氧化硅柱上進(jìn)行反相HPLC。柱溫70°C。A-緩沖液0.1。/ov/v三氟醋酸。B-緩沖液0.09。/。v/v三氟醋酸，800/。v/v乙腈。在30分鐘內(nèi)利用從X到(X+13)o/。B的線性梯度洗脫柱。調(diào)整X以^更在大約26分鐘的保留時(shí)間洗脫FVIIa。流速1.0mL/分鐘。檢測214nm。上樣25pgFVIIa。從測量到的重鏈降解產(chǎn)物的含量中減去重鏈降解產(chǎn)物的初始含量，即，重鏈降解產(chǎn)物的初始含量被設(shè)為o%。然后在時(shí)間x的重鏈降解產(chǎn)物的含量計(jì)算為%=(HCDP(x)-HCDP(0))/(HCDP(x)-HCDP(0)+FVII(x))xlOO%=(HCDP(x)-HCDP(0))/(FVII(0))x100%其中HCDP(x)是時(shí)間x測量到的重《連降解產(chǎn)物的含量，HCDP(O)是測量到的重鏈降解產(chǎn)物的初始含量，和FVII(x)是時(shí)間x的完整因子VII多肽的含量。通過反相HPLC測定氧化產(chǎn)物HPLC柱4.5x250mm柱，裝有顆粒大小5pm和孔徑300A的丁基鍵合的二氧化硅。柱溫70°C。洗脫液A:水99.9%v/v和三氟醋酸O.l0/。v/v。洗脫液B:乙腈800/ov/v，三氟醋酸0.090/0v/v和水9.90/。v/v。在30分鐘內(nèi)利用從X%B到(X+13)0/0B的線性梯度洗脫柱。流速1.0mL/分鐘。4企測214nm。氧化形式是因子VII多肽的曱硫氨酸亞砜。例如，F(xiàn)VII的兩種主要書f生物是Met(0)298FVII和Met(O)306FVII。氧化形式的含量可以表示為制備(即作為因子VII多肽的氧化形式回收)時(shí)組合物中因子VII多肽初始量的百分比。因子VII多肽的制備和純化適用于本發(fā)明的純化的人因子VIIa優(yōu)選的通過DNA重組技術(shù)制備，例如描迷于Hagen等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA83:2412-2416,1986，或描述于歐洲專利號0200421(ZymoGenetics,Inc.)。因子VII還可以按照以下描述的方法產(chǎn)生Broze和Majems,J.Biol.Chem.255(4):1242-1247,1980以及Hedner和Kisiel,J.Clin.Invest.71:1836-1841,1983。這些方法產(chǎn)生因子VII而沒有可檢測數(shù)量的其他血液凝固因子。通過包括另外的凝膠過濾作為最終純化步驟可以獲得甚至進(jìn)一步純化的因子VII制品。然后通過已知的方法，例如通過數(shù)種不同的血漿蛋白，諸如因子XIIa、IXa或Xa，將因子VII轉(zhuǎn)變?yōu)榛罨囊蜃覸IIa?？蛇x擇地，如Bjoern等所述(ResearchDisclosure,269September1986,pp.564-565)，通過將因子VII穿過離子交換層析柱，諸如MonoQ(PharmaciafineChemicals)或類似物，或通過溶液中的自體活化，可以將因子vn活化?？梢酝ㄟ^野生型因子vn的修飾或通過重組技術(shù)產(chǎn)生包括變體的因子vn多肽。通過已知的方法，例如通過位點(diǎn)特異性誘變，利用在編碼天然因子VII的核酸中改變氨基酸密碼子或者去除一些氨基酸密碼子來改變編碼野生型因子VII的核酸序列，可以產(chǎn)生與野生型因子VII相比具有改變的氨基酸序列的因子VII多肽。以下對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，可在對因子Vila分子的功能關(guān)鍵的區(qū)域以外進(jìn)行取代并仍然產(chǎn)生活性多肽?？梢愿鶕?jù)本領(lǐng)域已知的方法，諸如定點(diǎn)誘變或丙氨酸掃描誘變(參見，例如，CunninghamandWells,1989,Science244:1081-1085)鑒定因子VII多肽活性必需的氨基酸殘基，因此它們優(yōu)選的不進(jìn)行取代。在后一技術(shù)中，突變被引入分子中每個(gè)帶正電荷的殘基，然后對生成的突變分子進(jìn)行凝結(jié)、分別交聯(lián)活性檢測以鑒定對分子活性關(guān)鍵的氨基酸殘基。利用核磁共振分析、結(jié)晶學(xué)或光親和標(biāo)記(參見，例如，deVos等，1992,Science255:306-312;Smith等，992,JournalofMolecularBiology224:899-904;Wlodaver等，1992,FEBSLetters309:59-64)這類技術(shù)測定，通過分析三維結(jié)構(gòu)還可以確定底物酶相互作用的位點(diǎn)。利用本領(lǐng)域已知的任意方法，通過定點(diǎn)誘變可以實(shí)現(xiàn)將突變引入核酸序列以用另一種核苷酸替換一種核苷酸。尤其有效的是以下方法，利用具有感興趣的插入物的超螺旋雙鏈DNA載體和兩條包含所需突變的合成引物。所述寡核苷酸引物，每條與載體的相反鏈互補(bǔ)，通過PfuDNA聚合酶在溫度循環(huán)期間延伸。在引物摻入時(shí)，產(chǎn)生包含交錯(cuò)切口的突變質(zhì)粒。在溫度循環(huán)后，用Dpnl(對甲基化和半甲基化的DNA特異)處理產(chǎn)物以消化親代DNA模板并選擇包含突變的合成DNA。還可以使用本領(lǐng)域已知的產(chǎn)生、鑒定和分離變體的其他方法，諸如，例如，基因改組或噬菌體展示技術(shù)。從多肽的細(xì)胞來源分離多肽可以通過本領(lǐng)域已知的任何方法實(shí)現(xiàn)，包括，但不限于，從粘附細(xì)胞培養(yǎng)物中除去包含所需產(chǎn)物的細(xì)胞培養(yǎng)基；離心或過濾以去除非粘附細(xì)胞；諸如此類。任選的，因子VII多肽可以:故進(jìn)一步純化。純化可以利用本領(lǐng)域已知的任何方法實(shí)現(xiàn)，包括，但不限于，親和層析，諸如，例如，在抗因子VII抗體柱上(參見，例如，Wakabayashi等，J.Biol.Chem.261:11097,1986;和Thim等，Biochem.27:7785,1988);疏水性相互作用層析；離子交換層析；大小排阻層析；電泳方法(例如，制備式等電聚焦IEF),差異溶解性(例如，硫酸銨沉淀)，或萃取等等。一般地參25見,Scopes,ProteinPurification,Springer-Verlag,NewYork,1982;和ProteinPurification,J.C.JansonandLarsRyden,editors,VCHPublishers,NewYork,1989。純化后，按重量計(jì)制品優(yōu)選的包含低于10%源自宿主細(xì)胞的非因子VII多肽，更優(yōu)選的低于5%和最優(yōu)選的低于1%。因子VII多肽可以通過蛋白水解切割活化，利用具有胰蛋白酶樣特異性的因子XIIa或其他蛋白酶，諸如，例如，因子IXa,激肽釋放酶，因子Xa和凝血酶。參見，例如，Osterud等,Biochem.11:2853(1972);Thomas,美國專利號4,456,591;和Hedner等，J.Clin.Invest.71:1836(1983)?？蛇x擇地，通過將其穿過離子交換層析柱，諸如MonoQ(Pharmacia)或類似物，或通過溶液中的自體活化，可以活化因子VII多肽。然后可以按照本申請的描述配制和施用所獲活化的因子VII多肽。下列實(shí)施例例示本發(fā)明的實(shí)施。包括這些實(shí)施例只是用于例示目的，無論如何不是為了限制本發(fā)明所要求的范圍。工作實(shí)施例^滋辨7按照上文所述，在下列條件下3活化的因子VII，50mM咪唑，pH6.5，20mMCaCl2，50mMNaCl，0.5mg/mL牛血清白蛋白，1mMS-2288,通過D-ILE-PRO-ARG-P-硝基酰替苯胺的降解測量活化的因子VII的酰胺分解活性。在大量不同濃度的間甲酚和苯酚中測量活性。所有實(shí)驗(yàn)都進(jìn)行兩次。圖1顯示不同防腐劑濃度下的酰胺分解活性，任意單位。令人意外地，觀察到活性隨著防腐劑濃度的增加而降低。在下列條件下15mg/mL活化的因子VII,10mM組氨酸，pH6.0,20mMCaCl2,8%蔗糖，將活化的因子VII與不同濃度的間曱酚或苯酚混合。將總體積100|ul的樣品分配入石英微量滴定板(Hellma),并在平板讀數(shù)器上通過測量400nm的吸收評價(jià)濁度。濁度是樣品中沉淀的表征。觀察到在研究的最高防腐劑濃度下，樣品中存在顯著的沉淀。該現(xiàn)象可能限制了沒有添加其他賦形劑以補(bǔ)救沉淀的情況下間甲酚和苯酚的使用。^滋辨3在下列條件下15mg/mL活化的因子VII,10mM組氨酸，pH6.0,20mMCaCl2，8%蔗糖，將活化的因子VII與30mM間曱酚和不同濃度的泊洛沙姆188混合。將總體積100pi的樣品分配入石英微量滴定板(Hellma),并在平板讀數(shù)器上通過測量400nm的吸收評價(jià)濁度。觀察到泊洛沙姆188的濃度增加導(dǎo)致濁度的降低。因此，在一些情況下包括非離子型表面活性劑諸如泊洛沙姆188可能是有益的。制備含有下列組分的溶液5mg/mL活化的因子VII,10mM組氨酸，pH6.0，20mMCaCl2，0.1%泊洛沙姆188,8%蔗糖。制備兩種溶液一種含30mM間曱酚，一種不含間曱酚。在37。C溫育三天后，通過反相HPLC測量重鏈降解的量。圖4顯示結(jié)果。觀察到在間曱酚存在的條件下，重鏈降解的量基本上更低，表明這種制劑是有益的。將2mL下列溶液凍干12mg/mL活化的因子VII，0.39mg/mLNaCl，5.15mg/mLCaCl2(2H20)，10mM組氨酸，0.5mg/mL曱硫氨酸，0.07%吐溫80,10mg/mL蔗糖和25mg/mL甘露醇。將凍干的餅狀物溶于2mL水，并在5。C溫育。2周后，重鏈片段的含量從約10%增力口到19.5%。將2mL下列溶液凍干12mg/mL活化的因子VII,0.39mg/mLNaCl,5.15mg/mLCaCl2(2H20)，10mM組氨酸，0.5mg/mL曱硫氨酸，0.07%吐溫80，10mg/mL蔗糖和25mg/mL甘露醇。將凍干的餅狀物溶于2mL1.5%苯甲醇，將pH調(diào)節(jié)至6.0,然后將樣品在5。C溫育。2周后，重鏈片段的含量從約10%增加到14.5%。^滋辨7.'將5mL下列組分凍干1.0mg/mL活化的因子VII，2.34mg/m^NaCl,1.47mg/mL氯化釣，1.32mg/mL甘氨酰甘氨酸，25mg/mL甘露醇，10mg/mL蔗糖，0.5mg/mL曱好u氨酸，0.07mg/mL吐溫80,pH6.00。將凍干的粉末在1.2mL0.3。/。間曱酚，lOmM組氨酸，0.3%泊洛沙姆188,pH6.0中重建。將樣品在5。C溫育。在0、1、2、3和4周后取出等分樣品并冷凍。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，解凍所有樣品，并分析重鏈片段和氧化產(chǎn)物。下表顯示結(jié)果周%重鏈片%氧化產(chǎn)數(shù)段物07.91.518.41.728.91.739.61.8410.11.8重鏈斷裂和氧化均保持在可接受的限度內(nèi)。所有參考文獻(xiàn)，包括本文引用的出版物、專利申請和專利，在此完整通過援引并入，以與每篇參考文獻(xiàn)單獨(dú)和具體的指明通過援引并入，和它們在本文中完整闡述相同的程度(到法律許可的最大程度)。所有標(biāo)題和小標(biāo)題在本文中只是為了方便起見而使用，無論如何不應(yīng)被理解為限制本發(fā)明。本文提供的任意和所有實(shí)施例或示例性語言(例如，"諸如")的使用僅僅是為了更好的說明本發(fā)明，不是為了給本發(fā)明的范圍做出限制，除非另有要求。說明書中沒有語言應(yīng)被理解為指示任意未要求的要素是實(shí)施本發(fā)明必需的。本文中專利文獻(xiàn)的引用和并入只是為了方便起見，不反映對這類專利文獻(xiàn)的有效性、可專利性和/或可執(zhí)行性的任何見解。本發(fā)明包括適用法律許可的所附權(quán)利要求中敘述的主題的所有改變物和同等物。本發(fā)明優(yōu)選特征1.一種液體、水性藥物組合物，包括至少10mg/mL的因子VII多肽(i);適于維持pH范圍為約5.0到約9.0的緩沖劑(ii);至少一種濃度為至少0.1mg/mL的芳香族防腐劑(iii);和至少一種濃度為至少0.1mg/mL的抗氧化劑(iv);所述組合物任選的包括其他組分，條件是這類其他組分不是選自以下的因子VII多肽穩(wěn)定劑(a)包含金屬的試劑，其中所述金屬選自由除了鋅以外的氧化態(tài)+11的第一過渡系金屬組成的組；和(b)包括-C(二N-Z1-111)-NH-Z2-R2基序的穩(wěn)定劑。2.如條款l所述的組合物，其中所述其他組分不是因子VII多肽穩(wěn)定劑。3.如前述條款中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種芳香族防腐劑(iii)選自苯酚，苯甲醇，鄰曱酚，間曱酚，對甲酚，對羥基苯曱酸曱酯，對羥苯曱酸丙酯，苯扎氯銨，和節(jié)索氯銨，尤其是間甲酚、苯酚和苯曱醇。4.如前述條款中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中包括的至少一種芳香族防腐劑的濃度是0.1-20mg/mL。5.如前述條款中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種抗氧化劑(iv)選自L-曱硫氨酸，D-曱硫氨酸，曱硫氨酸類似物，包含曱硫氨酸的肽，甲硫氨酸同系物，抗壞血酸，半胱氨酸，高半胱氨酸，谷胱甘肽，胱氨酸，和胱》危醚。6.如前述條款中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種抗氧化劑(iv)以0.1-5.0mg/mL的濃度存在。7.如前述條款中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中所述因子vn多肽是人因子VIIa。8.如前述條款中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中所述因子VII多肽是因子VII序列變體。9.如條款8所述的組合物，其中當(dāng)在本文描述的"體外蛋白水解分析"(分析2)中檢測時(shí)，因子VII多肽的活性與天然人因子Vila(野生型FVIIa)的活性之間的比例是至少1.25。10.如前述條款中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中所述因子VII多肽以10-90mg/mL的濃度存在。11.如前述條款中任意一項(xiàng)所述的組合物，其具有約5.0到約8.0的pH值范圍。12.如前述條款中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中所述緩沖劑(ii)包括選自下組的至少一種組分MES,PIPES,ACES,BES,TES，HEPES,TRIS，組氨酸，咪唑，甘氨酸，甘氨酰甘氨酸，甘氨酰胺，磷酸，醋酸，乳酸，戊二酸，檸檬酸，酒石酸，蘋果酸，馬來酸和琥珀酸的酸和鹽。13.如前述條款中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中所述緩沖劑(ii)的濃度是1-100mM。14.如前述條款中任意一項(xiàng)所述的組合物，還包括張力調(diào)節(jié)劑(v)。2915.如條款14所述的組合物，其中所述張力調(diào)節(jié)劑(V)是選自中性鹽，氨基酸，2-5個(gè)氨基酸殘基的肽，單糖，二糖，多糖，和糖醇中的至少一種。16.如條款14-15中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中至少一種張力調(diào)節(jié)劑(v)是選自以下組的中性鹽鈉鹽、鉀鹽、釣鹽和鎂鹽。17.如條款14-15中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中所述張力調(diào)節(jié)劑(v)是氯化鈉與選自氯化鉤、醋酸鈣、氯化鎂和醋酸鎂中的至少一種的組合。18.如條款14-17中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中所述張力調(diào)節(jié)劑(v)以至少1mM的濃度存在。19.如條款14-18中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中至少一種張力調(diào)節(jié)劑(v)是離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(v/a)。20.如前述條款中任意一項(xiàng)所述的組合物，其還包括非離子型表面活性劑(vi)。21.如條款20所述的組合物，其中所述非離子型表面活性劑(vi)是選自以下組中的至少一種聚山梨醇酯，泊洛沙姆，聚氧乙烯烷基醚，乙烯/聚丙烯嵌段共聚物和聚乙二醇(PEG)。22.如條款20-21中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中所述非離子型表面活性劑(vi)的濃度按重量計(jì)為0.005-2%。23.如前述條款中任意一項(xiàng)所述的液體、水性藥物組合物，其包括10-90mg/mL的因子VII多肽(i);適于維持pH范圍為約5.0到約9.0的緩沖劑(ii);至少一種濃度為0.1-20mg/mL的芳香族防腐劑(iii);和至少一種濃度為0.1-5.0mg/mL的抗氧化劑(iv)。24.如前述條款中任意一項(xiàng)所述的組合物，其適用于腸胃外給藥。25.如條款24所述的組合物，其適用于皮下、肌內(nèi)或靜脈注射。26.用做藥物的如條款1-25中任意一項(xiàng)限定的液體、水性藥物組合物。27.如條款1-15中任意一項(xiàng)限定的液體、水性藥物組合物在制備用于治療因子VII應(yīng)答性綜合征的藥物中的用途。28.—種治療因子VII應(yīng)答性綜合征的方法，所述方法包括給需30要其的受試者施用有效量的如條款1-25中任意一項(xiàng)限定的液體、水性藥物組合物。29.—種氣密容器，包含如條款1-25中任意一項(xiàng)限定的液體、水性藥物組合物，和任選的惰性氣體。30.—種用于制備如條款1-25中任意一項(xiàng)限定的組合物的試劑盒，所述試劑盒包括(a)第一容器，包括至少凍干形式的因子VII多肽(i);(b)第二容器，包括水性重建液體，所述液體至少。權(quán)利要求1.一種液體、水性藥物組合物，包括至少10mg/mL的因子VII多肽(i)；適于維持pH范圍為約5.0到約9.0的緩沖劑(ii)；至少一種濃度為至少0.1mg/mL的芳香族防腐劑(iii)；和至少一種濃度為至少0.1mg/mL的抗氧化劑(iv)；所述組合物任選的包括其他組分，條件是這類其他組分不是選自以下的因子VII多肽穩(wěn)定劑(a)包含金屬的試劑，其中所述金屬選自由除了鋅以外的氧化態(tài)+II的第一過渡系金屬組成的組；和(b)包括-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2基序的穩(wěn)定劑。2.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述其他組分不是因子VII多肽穩(wěn)定劑。3.如前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種芳香族防腐劑(iii)選自苯酚，苯甲醇，鄰曱酚，間曱酚，對曱酚，對羥基苯曱酸甲酯，對鞋苯曱酸丙酯，苯扎氯銨，和千索氯銨，尤其是間曱酚、苯酚和苯曱醇。4.如前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中包括的至少一種芳香族防腐劑的濃度是0.1-20mg/mL。5.如前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種抗氧化劑(iv)選自L-曱硫氨酸，D-甲硫氨酸，曱硫氨酸類似物，包含曱硫氨酸的肽，甲硫氨酸同系物，抗壞血酸，半胱氨酸，高半胱氨酸，谷胱甘肽，胱氨酸，和胱;克醚。6.如前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種抗氧化劑(iv)以0.1-5.0mg/mL的濃度存在。7.如前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的組合物，還包括張力調(diào)節(jié)劑(v)。8.如權(quán)利要求7所述的組合物，其中所述張力調(diào)節(jié)劑(v)是選自中性鹽，氨基酸，2-5個(gè)氨基酸殘基的肽，單糖，二糖，多糖和糖醇中的至少一種。9.如權(quán)利要求7-8中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中至少一種張力調(diào)節(jié)劑(v)是選自以下組的中性鹽鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽和鎂鹽。10.如權(quán)利要求7-8中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中所述張力調(diào)節(jié)劑(v)是氯化鈉與選自氯化鈣、醋酸鈣、氯化鎂和醋酸鎂中的至少一種的組合。11.如前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的組合物，其還包括非離子型表面活性劑(vi)。12.如權(quán)利要求11所述的組合物，其中所述非離子型表面活性劑(vi)是選自以下組中的至少一種聚山梨醇酯，泊洛沙姆，聚氧乙烯烷基醚，乙烯/聚丙烯嵌段共聚物和聚乙二醇(PEG)。13，如前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的液體、水性藥物組合物，其包括10-90mg/mL的因子VII多肽(i);適于維持pH范圍為約5.0到約9.0的緩沖劑(ii);至少一種濃度為0.1-20mg/mL的芳香族防腐劑(iii);和至少一種濃度為0.1-5.0mg/mL的抗氧化劑(iv)。14.如權(quán)利要求1-13中任意一項(xiàng)限定的液體、水性藥物組合物在制備用于治療因子VII應(yīng)答性綜合征的藥物中的用途。15.—種氣密容器，包含如權(quán)利要求1-13中任意一項(xiàng)限定的液體、水性藥物組合物，和任選的惰性氣體。16.—種用于制備如權(quán)利要求1-13中任意一項(xiàng)限定的組合物的試劑盒，所述試劑盒包括(a)第一容器，包括至少凍干形式的因子VII多肽(i);(b)第二容器，包括水性重建液體，所述液體至少包括緩沖劑(ii)和至少一種芳香族防腐劑(iii)。全文摘要本發(fā)明涉及藥物組合物，其包括至少10mg/mL的因子VII多肽(i)；適于保持pH范圍為約5.0到約9.0的緩沖劑(ii)；至少一種濃度為至少0.1mg/mL的芳香族防腐劑(iii)；和至少一種濃度為至少0.1mg/mL的抗氧化劑(iv)；所述組合物任選的包括其他組分，前提條件是這類其他組分不是選自以下的因子VII多肽穩(wěn)定劑(a)包含金屬的試劑，其中所述金屬選自由除了鋅以外的氧化態(tài)+II的第一過渡系金屬組成的組；和(b)包括-C(＝N-Z¹-R¹)-NH-Z²-R²基序的穩(wěn)定劑。文檔編號C12N9/64GK101674805SQ200880014075公開日2010年3月17日申請日期2008年4月30日優(yōu)先權(quán)日2007年5月2日發(fā)明者A·D·尼爾森,C·里謝爾,M·B·詹森申請人:諾沃-諾迪斯克保健股份有限公司