專利名稱：：保存及/或穩定化細胞及/或大分子的組合物、系統及方法保存及/或穩定化細胞及/或大分子的組合物、系統及方法相關申請案交叉參者本申請案主張2007年3月14日申請的美國臨時專利申請案第60/894,795號、2007年9月7日申請的美國臨時專利申請案第60/970,881號及2007年10月29日申請的美國臨時專利申請案第60/983,468號的權利。本申請案是2007年3月14日申請的美國申請案第11/686,169號的部分接續申請案。本申請案是2007年3月14日申請的國際PCT申請案第PCT/US07/63982號的部分接續申請案。各前述申請案的全部內容均以引用方式并入本文中。
技術領域：
概括來說，本揭示內容是關于用于保存大分子及/或生物分子的組合物、系統及方法。例如，本揭示內容的組合物、系統及方法可用以保存及/或穩定化大分子及/或生物分子，所述大分子及/或生物分子在所處條件下可以構象特異性及/或序列特異性方式與另一分子相互作用。
背景技術：
：大分子及生物分子在一些條件下可能不穩定。例如，核酸分子在核酸酶存在下可能會降解。同樣，蛋白質分子在蛋白酶存在下可能會降解。大分子及生物分子的降解可能隨時間而增加。包括檢測所述分子的特性(存在性、濃度、序列、構象)在內的分析效能在所述降解發生時可能會降低或喪失。例如，在生物分子發生降解的情況下，依賴于檢測極少量生物分子的診斷或法醫學分析可能不能獲得可靠結果。性傳播疾病(STD)門診定期篩選和治療患諸如淋病和梅毒等疾病的患者。可通過分析DNA樣品來檢測諸如淋球菌等傳染原。根據杰斐(HWJaffe)等人(傳染病期刊(J./"/D&)146:275-279(1982))，可利用遺傳轉化測試(GTT)(例如谷諾斯特(Gonostat)TM(西若診斷學(SierraDiagnostics)公司，索諾拉(Sonora)，加利福尼亞州(Calif.))來檢測取自男性尿道及女性子宮頸及肛門的試樣中的淋球菌DNA。惠廷頓(WLWhittington)等人獲得了類似結果(美國微生物學會年會摘要(屈欲.j朋.Me幼'"g化c.M/cro^W.)，第315頁(1983))。然而，并不總是能夠立即檢驗患者中是否存在傳染原。例如，在許多農村或不發達地區不容易見到臨床實驗室。在所述情況下，需要將患者測試試樣運送到分析實驗室，在此期間所關注靶標可能部分或完全降解。可通過降低大分子或生物分子的溫度來減少大分子及/或生物分子的降解。然而，此選擇并非在所有情況下都可利用，或其可能不能利用足夠長時間段(例如，自樣品采集時間到分析時間)。例如，當在偏遠地區采集樣品(例如，自患者)時，可能難以或不能將靶分子保存足夠長時間，以致于無法將樣品運送到分析樣品的機構。另外，所有樣品的冷卻可能不統一及/或各實驗可能不一致。大分子及/或生物分子的降解可通過將組合物加熱到足以滅活一種或多種核酸酶或蛋白酶的溫度來減少。然而，通過加熱僅使有限數量的蛋白酶及核酸酶滅活。另外，加熱可能會降解而非保存靶分子。疾病的診斷可能依賴于采集與分析間所維持細胞的狀況。然而，與大分子一樣，細胞(例如，全細胞)在其正常環境外可能易發生變化。例如，取自人體的細胞(例如，血細胞)可能在取出后數秒至數分鐘內開始變質(例如，裂解、氧化及/或凝結)。
發明內容因此，當前需要用于保存及/或穩定化細胞(例如，全細胞)的組合物、系統及方法。本揭示內容是關于用于保存及/或穩定化大分子及/或生物分子(統稱為"大分子")的組合物、系統及方法。根據一些實施例，大分子及/或生物分子可包括蛋白質及/或核酸(例如，DNA及RNA)。所屬領域的技術人員應了解，核酸可包括來自多種來源的序列。例如，單核酸可包括人工序列(例如，引物結合位點)、人類序列(例如，腺瘤性結腸息肉(APC)、淀粉樣前蛋白(APP)、乳癌l(BRCA1)、跨膜蛋白酶絲氨酸2(TMPRSS2)、v-ets骨髓成紅細胞增多癥病毒E26致癌基因同系物(ERG))、植物序列、微生物序列(例如，抗生素抗性基因)、病毒序列(例如，HIV蛋白酶)及/或其組合。單核酸序列也可包括來自共同來源的兩個序列的罕見或人工融合物(例如，TMPRSS2:ERG融合物)。只要大分子(若存在)在至少自樣品采集時間到樣品分析時間期間維持可檢測到的形式，即可視為大分子得以保存。在一些實施例中，本揭示內容是關于體液或排泄物(例如，尿、血液、血清、羊水、脊髓液、結膜液、唾液、陰道液、糞便、精液及汗液)中大分子的保存及/或穩定化。在一些實施例中，在所述核酸測試方法中可能觀察到核酸雜交出人意料地改善(例如，與于不存在本揭示內容的保存組合物、系統或方法下實施的相同方法相比)。本揭示內容是關于用于保存及/或穩定化細胞(例如，全細胞)及/或大分子及/或生物分子(統稱為"大分子")的組合物、系統及方法。例如，根據一些實施例，本揭示內容是關于用于保存及/或穩定化細胞(例如，全細胞)的組合物("細胞穩定化組合物")。在一些實施例中，細胞及/或大分子穩定化組合物可包括(a)螯合劑(例如，選自由下列組成的群組的螯合劑乙二胺四乙酸(EDTA)、[亞乙基雙(氧基亞乙基次氮基)]四乙酸(EGTA)、1,2-雙(2-氨基苯氧基)乙院-N，N,N',N'-四乙酸(BAPTA)及其鹽)；(b)至少一種螯合劑增強組份(例如，選自由下列組成的群組的螯合劑增強組份胍、氯化鋰、水楊酸鈉、高氯酸鈉及硫氰酸鈉)；及任選地(C)選自由嘌呤堿基及嘧啶堿基組成的群組的堿基。螯合劑、螯合劑增強組份及/或堿基的濃度可分別選自任一可得到的濃度。例如，螯合劑的濃度可為約0.1mM至約0.1M，螯合劑增強組份的濃度可為約lmM至約5M;及/或堿基的濃度可為約0.1mM至約5M。在一些實施例中，細胞及/或大分子穩定化組合物可調配成水性溶液。在-一些實施例中，螯合劑增強組份可選自由高氯酸鈉、硫氰酸鈉及氯化鋰組成的群組。根據一些實施例，細胞及/或大分子穩定化組合物可包括或不包括至少一種選自由下列組成的群組的酶滅活組份氯化錳、肌氨酰、十二烷基硫酸鈉及其組合。在一些實施例中，細胞及/或大分子穩定化組合物可包括固體、液體及/或水凝膠。在一些實施例中，細胞及/或大分子穩定化組合物可包括溶劑(例如，水及/或有機溶劑)。根據一些實施例，細胞及/或大分子穩定化組合物可包括細胞(例如，完整細胞、全細胞及其類似物)、蛋白質(例如，細胞性蛋白質及/或無細胞蛋白質)及/或核酸(例如，細胞性及/或無細胞RNA、DNA及其類似物)。在一些實施例中，細胞及/或大分子穩定化組合物可包括增塑劑(例如，擰檬酸醇酯)及/或抗凝劑(例如，肝素)。在一些實施例中，細胞及/或大分子穩定化組合物可減少及/或阻止儲存在室溫(例如，約20。C)下的樣品(例如，血液樣品)形成團塊及/或凝結。根據一些實施例，細胞及/或大分子穩定化組合物可包括緩沖劑。例如，緩沖劑可包括選自由下列組成的群組的化合物乙酸鉀、乙酸鈉、磷酸鉀、磷酸鈉、三(羥基氨基)甲烷、N-(2-羥基乙基)哌嗪-N'-(2-乙磺酸)、3-(N-嗎啉基)丙磺酸、2-[(2-氨基-2-氧代乙基)氨基]乙磺酸、N-(2-乙酰胺基)2-亞氨基二乙酸、3-[(l，l-二甲基-2-羥基乙基)氨基]-2-丙磺酸、N,N-雙(2-羥基乙基)-2-氨基乙磺酸、N,N-雙(2-羥基乙基)甘氨酸、雙-(2-羥基乙基)亞氨基-三(羥基甲基)甲烷、3-(環己基氨基)-l-丙磺酸、3-(環己基氨基)-2-羥基-l-丙磺酸、2-(N-環己基氨基)乙磺酸、3-[N,N-雙(2-羥基乙基)氨基]-2-羥基-丙磺酸、N-(2-羥基乙基哌嗪)-N'-(3-丙磺酸)、N-(2-羥基乙基)哌嗪-N'-(2-羥基丙磺酸)、2-(N-嗎啉基)乙磺酸、三乙醇胺緩沖劑、咪唑、甘氨酸、乙醇胺、3-(N-嗎啉基)-2-羥基丙磺酸、哌嗪-N，N'-雙(2-乙磺酸)、哌嗪-N,N'-雙(2-羥基丙磺酸)、N-三[(羥基甲基)甲基]-3-氨基丙磺酸、2-羥基-3-[三(羥基甲基)甲基氨基]-l-丙磺酸、N-[三(羥基甲基)甲基]-2-氨基乙磺酸、N-[三(羥基甲基)甲基]甘氨酸、2-氨基-2-甲基-l,3-丙二醇、2-氨基-2-甲基-l-丙醇及其組合。根據一些實施例，本揭示內容也是關于保存及/或穩定化細胞的方法("細胞穩定化方法")。細胞穩定化方法可包括(例如)使大分子與細胞及/或大分子穩定化組合物接觸，所述細胞及/或大分子穩定化組合物包含(a)螯合劑(例如，選自由下列組成的群組的螯合劑乙二胺四乙酸(EDTA)、[亞乙基雙(氧基亞乙基次氮基)]四乙酸(EGTA)、1，2-雙(2-氨基苯氧基)乙烷-N,N,N'，N'-四乙酸(BAPTA)及其鹽)；(b)至少一種螯合劑增強組份(例如，選自由下列組成的群組的螯合劑增強組份胍、氯化鋰、9水楊酸鈉、高氯酸鈉及硫氰酸鈉)；及(c)堿基(例如，選自由嘌呤堿基及嘧啶堿基組成的群組的堿基)。在一些實施例中，細胞可包括選自由下列組成的群組的細胞哺乳動物細胞、植物細胞、酵母細胞、細菌細胞、受病毒感染的細胞、患病細胞及其組合。在一些實施例中，哺乳動物細胞可包括選自由下列組成的群組的細胞紅細胞、白細胞、淋巴細胞、組織細胞、上皮細胞及其組合。根據一些實施例，哺乳動物細胞可包括人類細胞。根據一些實施例，擬用大分子穩定化組合物及/或方法保存及/或穩定化的大分子可包括選自由DNA、RNA、mRNA及cDNA組成的群組的核酸。例如，核酸可包括原核及/或真核DNA。在一些實施例中，擬用細胞及/或大分子穩定化組合物及/或方法保存及/或穩定化的細胞及/或大分子可存在于獲自人類個體的體液中。體液可包括(例如)選自由下列組成的群組的物質血液、血清、羊水、脊髓液、結膜液、唾液、陰道液、糞便、精液及汗液。在一些實施例中，本揭示內容進一步是關于用于保存及/或穩定化細胞(例如，全細胞)("細胞穩定化系統")及/或大分子("大分子穩定化系統")的系統。細胞及/或大分子穩定化系統可包括樣品容器，其構造及布置成可容納及含有包含細胞及細胞及/或大分子穩定化組合物(例如，包括螯合劑、至少一種螯合劑增強組份及堿基)的樣品。在一些實施例中，系統也可包括使用說明書。在一些實施例中，樣品容器可含有所述細胞及/或大分子穩定化組合物。例如，樣品容器可包括至少一個內表面及至少一個外表面，其中細胞及/或大分子穩定化組合物涂敷到后者上。在一些實施例中，樣品容器可包括至少一種小泡、脂質體及/或微膠粒。細胞及/或大分子穩定化組合物可存在于小泡、脂質體及/或微膠粒的腔中。本揭示內容的一些實施例可部分地通過參考下文說明及附圖來了解，其中圖1是根據本揭示內容的一個實施例經保存尿中DNA濃度的條形圖2是根據本揭示內容的一個實施例經保存尿的8天連續數據圖3所示圖比較根據本揭示內容的一個實施例未經保存及經保存正常尿的PCR結果；圖4是根據本揭示內容的一個實施例經保存血清的8天連續數據圖；圖5是根據本揭示內容的一個實施例經保存血清中DNA濃度的圖；圖6是根據本揭示內容的一個實施例用于保存DNA的系統的圖解；圖7用圖表繪示在PCR分析中信號應答的比較，其中一種DNA已利用本揭示內容的保存劑進行處理且一種DNA未經處理；圖8繪示本揭示內容試劑增強經受各種儲存條件的血漿樣品的分支DNA分析的信號應答的效能；圖9繪示本揭示內容試劑增強血清和血漿樣品的分支DNA分析的信號應答的效圖10所示圖展示在對未經保護血清中乙型肝炎序列MD03/06的PCR擴增分析中高鐵血紅蛋白對PCR吸光度的干擾；圖11所示圖展示在對經本揭示內容保存劑處理的血清中乙型肝炎序列MD03/06的PCR擴增分析中在減弱高鐵血紅蛋白對PCR吸光度的干擾方面的改良；圖12A所示圖展示獲自實例PCR擴增的代表性結果，所述實例PCR擴增使用MD03及MD06引物及與緩沖液(無保護)、僅胍、僅EGTA或EGTA+胍接觸的血清中的乙型肝炎模板；圖12B所示圖展示獲自實例PCR擴增的代表性結果，所述實例PCR擴增使用MD03及MD06引物及與緩沖液(無保護)、僅EDTA、僅高氯酸鈉或EDTA+高氯酸鈉接觸的血清中的乙型肝炎模板；圖12C所示圖展示獲自實例PCR擴增的代表性結果，所述實例PCR擴增使用MD03及MD06引物及與緩沖液(無保護)、僅EGTA、僅高氯酸鈉或EGTA+高氯酸鈉接觸的血清中的乙型肝炎模板；圖12D所示圖展示獲自實例PCR擴增的代表性結果，所述實例PCR擴增使用MD03及MD06引物及與緩沖液(無保護)、僅EDTA或EDTA+硫氰酸鈉接觸的血清中的乙型肝炎模板；圖12E所示圖展示獲自實例PCR擴增的代表性結果，所述實例PCR擴增使用MD03及MD06引物及與緩沖液(無保護)、僅EGTA或EGTA+硫氰酸鈉接觸的血清中的乙型肝炎模板；圖12F所示圖展示獲自實例PCR擴增的代表性結果，所述實例PCR擴增使用MD03及MD06引物及與緩沖液(無保護)或僅BAPTA接觸的血清中的乙型肝炎模板；圖13A-13G所示圖展示通過單獨添加包括于本揭示內容試劑中的某些組份未獲得對儲存于室溫下并隨后經受PCR檢測的尿中淋球菌DNA的保存效果；圖14A所示圖展示使用與僅胞嘧啶或硫氰酸鈉+EDTA+胞嘧啶接觸的新鮮尿中的淋球菌DNA模板的實例PCR擴增結果；圖14B所示圖展示使用與僅鳥嘌呤或硫氰酸鈉+EDTA+鳥嘌呤接觸的新鮮尿中的淋球菌DNA模板的實例PCR擴增結果；圖14C所示圖展示使用與僅胸腺啼啶或硫氰酸鈉+EDTA+胸腺嘧啶接觸的新鮮尿中的淋球菌DNA模板的實例PCR擴增結果；圖14D所示圖展示使用與僅尿嘧啶或硫氰酸鈉+EDTA+尿嘧啶接觸的新鮮尿中的淋球菌DNA模板的實例PCR擴增結果；圖15A所示圖展示使用與1M腺嘌吟、1M硫氰酸鈉、1MEDTA、或1M硫氰酸鈉+0.01MEDTA+1M腺嘌呤接觸的新鮮尿中的淋球菌DNA模板的實例PCR擴增結果-，11圖15B所示圖展示使用與1M腺嘌呤、1MEDTA、2M硫氰酸鈉+1MEDTA、或2M硫氰酸鈉+1MEDTA+1M腺嘌呤接觸的新鮮尿中的淋球菌DNA模板的實例PCR擴增結果；圖15C所示圖展示使用與1M腺嘌呤、1M胍、1M胍+0.01MEDTA、2M硫氰酸鈉+1MEGTA、或1M胍，HC1+1MEGTA+2M腺嘌呤接觸的新鮮尿中的淋球菌DNA模板的實例PCR擴增結果；圖15D所示圖展示使用與1M腺嘌呤、1M胍、1M胍+0.01MEDTA、1M氯化鋰+1MBAPTA、或2M硫氰酸胍+1MBAPTA+2M腺嘌呤接觸的新鮮尿中的淋球菌DNA模板的實例PCR擴增結果；圖15E所示圖展示使用與1M高氯酸鈉、1M硫氰酸鈉+2MEDTA、或1M高氯酸鈉+1MEDTA接觸的新鮮尿中的淋球菌DNA模板的實例PCR擴增結果；圖16A所示圖展示使用與1M胍'HC1或1M胍，HC1+0.01MBAPTA+4M腺嘌呤接觸的新鮮尿中的淋球菌DNA模板的實例PCR擴增結果；圖16B所示圖展示使用與0.01MEDTA、2M硫氰酸鈉、11\4硫氰酸鈉+0.1MEDTA+1M腺嘌呤、或2M硫氰酸鈉+0.1MEGTA+2M腺嘌呤接觸的新鮮尿中的淋球菌DNA模板的實例PCR擴增結果；圖17A是與測試組合物(例如，本揭示內容的實例性實施例或對照)接觸并經受流式細胞術分析的細胞隨時間的CD3百分比圖17B是與測試組合物(例如，本揭示內容的實例性實施例或對照)接觸并經受流式細胞術分析的細胞隨時間的CD4百分比圖17C是與測試組合物(例如，本揭示內容的實例性實施例或對照)接觸并經受流式細胞術分析的細胞隨時間的絕對CD3計數圖18是與測試組合物(例如，本揭示內容的實例性實施例或對照)接觸的樣品隨時間的總RNA產量圖(測量曲線下面積)；圖19A是與PAX基因(PAXgene)TM組合物接觸的含RNA樣品的電泳圖19B是與EDTA組合物接觸的含RNA樣品的電泳圖19C是與本揭示內容的一個特定實例性實施例的組合物接觸的含RNA樣品的電泳圖；且圖19D是與本揭示內容的一個特定實例性實施例的組合物接觸的含RNA樣品的電泳圖。具體實施例方式本揭示內容是關于用于延遲細胞(例如，全細胞)及/或大分子及/或生物分子("大分子")降解的組合物、系統及方法。根據一些實施例，組合物可保存及/或穩定化細胞("細胞及/或大分子穩定化組合物")。細胞可包括全細胞。全細胞可包括(例如)細胞表面物質(例如，細胞表面蛋白、細胞外基質、細胞壁及/或外膜)。可保存及/或穩定化的細胞包括選自以下的細胞哺乳動物細胞(例如，人類細胞)、植物細胞、酵母細胞、細菌細胞、受病毒感染的細胞、患病細胞及其組合。哺乳動物細胞可包括選自紅細胞、白細胞、淋巴細胞、組織細胞、上皮細胞、干細胞及其組合的細胞。在一些實施例中，細胞可在保持存活下保存及/或穩定化。在一些實施例中，細胞可經保存及/或穩定化，其中其保持在與活體內細胞相同或基本上相同的條件(例如，就形態學、生理學、遺傳學及/或生物化學來說)下。在一些實施例中，細胞可經保存及/或穩定化，其中其保持在與其于體內或體液內時相同或基本上相同的條件(例如，健康或患病)下。例如，可在細胞能量消耗、所存在代謝產物(例如，丙酮酸鹽)的量、所存在游離ATP的量、轉錄及/或轉譯速率及/或存在(或不存在)一種或多種蛋白質及/或核酸等方面對保存及/或穩定化進行評價。根據一些實施例，大分子及/或生物分子可包括蛋白質及/或核酸(例如，DNA及RNA)。所屬領域的技術人員應了解，核酸可包括來自多種來源的序列。例如，單核酸可包括人工序列(例如，引物結合位點)、人類序列(例如，腺瘤性結腸息肉(APC)、淀粉樣前蛋白(APP)、乳癌l(BRCA1)、跨膜蛋白酶絲氨酸2(TMPRSS2)、v-ets骨髓成紅細胞增多癥病毒E26致癌基因同系物(ERG))、植物序列、微生物序列(例如，抗生素抗性基因)、病毒序列(例如，HIV蛋白酶)及/或其組合。單核酸序列也可包括來自共同來源的兩個序列的罕見或人工融合物(例如，TMPRSS2:ERG融合物)。只要大分子(若存在)在至少自樣品采集時間到樣品分析時間期間維持可檢測到的形式，即可視為大分子得以保存。在一些實施例中，本揭示內容是關于體液或排泄物(例如，尿、血液、血清、羊水、脊髓液、結膜液、唾液、陰道液、糞便、精液及汗液)中大分子的保存及/或穩定化。在一些實施例中，在所述核酸測試方法中可能觀察到核酸雜交出人意料地改善(例如，與于不存在本揭示內容的保存組合物、系統或方法下實施的相同方法相比)。降解可認為是致使所關注分子或所關注分子的集合體不可檢測到的分子結構的任何變化。例如，蛋白質降解可包括一級、二級、三級或四級結構的任何改變(例如，二硫鍵還原、肽鍵水解、或共價鍵、離子鍵、疏水鍵、氫鍵或范德華鍵(VanderWaalsbond)的任何其它裂解)。核酸降解可包括雜交狀態(例如，單鏈、雙鏈或三鏈)、螺旋結構(例如，A、B或Z)、超螺旋、或序列的任何改變(例如，嘧啶二聚化、脫氨基作用、氧化、脫嘌呤作用、或共價鍵、離子鍵、疏水鍵或氫鍵的任何其它裂解)。此降解延遲可認為是將大分子以期望形式保存較長或無限期時間段。此延遲也可認為是將大分子以期望形式保存或穩定化確定時間段(例如，自樣品采集時間至分析時間)。本揭示內容一些實施例的組合物、系統及方法可降低或消除生物流體及/或排泄物中大分子的降解。例如，在一些實施例中，本揭示內容的組合物、系統及/或方法可消除體液(例如，尿)中所關注核酸的酶促破壞。可保存及/或穩定化的核酸包括(例如)13天然及/或合成形式的DNA、RNA、RNA/DNA雜合體、及其變體。可保存及/或穩定化的核酸可包括細胞間核酸及/或細胞內核酸。可保存及/或穩定化的DNA可包括(例如)人類DNA、哺乳動物DNA、細菌DNA、真菌DNA及病毒DNA。可保存及/或穩定化的細菌DNA可包括(例如)淋球菌DNA、流感嗜血菌(//<^附0/^//"""/^"^。DNA及枯草芽孢桿菌(5ac/〃ww6"fo)DNA。擬保存及/或穩定化的細胞及/或大分子(及/或生物分子)可包含于體液及/或排泄物、組織(例如，活組織檢査組織)及/或物體(例如，骨)中。例如，大分子可包含于食物顆粒、土壤樣品、法醫學樣品(例如，衣物物品、毛發、指印)、織物、細菌基質、粘土、環境試樣及/或生物戰試樣中。擬保存及/或穩定化的大分子(及/或生物分子)可包含于全細胞及/或全細胞純化物(例如，完全或部分純化)中。組合物、系統及方法可將細胞及/或大分子保存及/或穩定化(例如，在室溫下)至少約1天、至少約2天、至少約3天、至少約4天、至少約5天、至少約6天、至少約1周、至少約2周、至少約3周、及/或至少約4周。組合物、系統及方法可將細胞及/或大分子保存及/或穩定化(例如，在室溫下)長達約1天、長達約2天、長達約3天、長達約4天、長達約5天、長達約6天、長達約1周、長達約2周、長達約3周、及/或長達約4周。在一些實施例中，組合物、系統及方法可在不冷藏條件下將細胞及/或大分子保存及/或穩定化任一前述時間段。例如，保存及/或穩定化可在環境溫度及/或組合物溫度不超過約7(TC、約60。C、約55'C、約5(TC、約45'C及/或約40°C下達成。保存及/或穩定化可在環境溫度及/或組合物溫度為約0'C至約l(TC、約l(TC至約20。C、約15。C至約25。C、約20。C至約30。C、約15。C至約35。C、及/或約3(TC至約40'C下達成。在一些實施例中，溫度范圍的選擇可基于特定樣品的預期及/或期望儲存條件予以選擇。例如，所述組合物、系統及方法可適于保存及/或穩定化在冷藏不可行及/或不具備冷藏條件且日間溫度接近5(TC的不發達國家采集的物質。同樣，所述組合物、系統及方法可適于保存及/或穩定化在運輸條件、儲存條件及/或環境條件包括低于20'C的溫度的地區采集的物質。不受限于任一特定作用機制，本揭示內容的組合物、系統及方法可滅活含有所關注大分子及/或生物分子的測試樣品(例如，體液)中存在的一種或多種金屬依賴性酶及/或一種或多種金屬非依賴性酶。例如，二價金屬螯合劑可結合可得到的金屬(例如，Mg^及C^+)，使得金屬仍然可為金屬依賴性酶(例如，脫氧核糖核酸酶)利用但不足以支持催化(即，核酸降解)。再次不受限于任一特定作用機制，螯合劑增強組份可滅活體液中發現的一種或多種金屬非依賴性酶。例如，金屬非依賴性酶可包括DNA連接酶(例如，D4DNA連接酶)、DNA聚合酶(例如，T7DNA聚合酶)、外切核酸酶(例如，外切核酸酶2、X-外切核酸酶)、激酶(例如，T4聚核苷酸激酶)、磷酸酶(例如，BAP及CIP磷酸酶)、核酸酶(例如，BL31核酸酶及XO核酸酶)及RNA修飾酶(例如，大腸桿菌RNA聚合酶、SP6、T7、T3RNA聚合酶及T4RNA連接酶)。不受限于任一特定作用機制，嘌呤堿基及/或嘧啶堿基可與核酸結合并作為降解DNA及/或RNA的一種或多種酶的同質異構耙標。根據本揭示內容的一些特定實例性實施例，與含有嘌呤堿基的細胞及/或大分子穩定化組合物接觸的耙核酸(例如，淋球菌DNA)的PCR擴增產量比未與含有嘌呤堿基的細胞及/或大分子穩定化組合物接觸的相同耙核酸的PCR擴增產量至少高約2倍、高約3倍、高約4倍、高約5倍、高約6倍、高約7倍、高約8倍、高約9倍及/或高10倍。根據本揭示內容的一些特定實例性實施例，與含有螯合劑、螯合劑增強組份及嘌呤堿基的細胞及/或大分子穩定化組合物接觸的靶核酸(例如，淋球菌DNA)的PCR擴增產量比與含有螯合劑及螯合劑增強組份但不含有嘌呤堿基的細胞及/或大分子穩定化組合物接觸的相同耙核酸的PCR擴增產量高約2倍、高約3倍、高約4倍、高約5倍、高約6倍、高約7倍、高約8倍、高約9倍及/或高10倍。例如，與含有EDTA(例如，0.1M)、硫氰酸鈉(例如，1M)及腺嘌呤的細胞及/或大分子穩定化組合物接觸的靶核酸(例如，淋球菌DNA)的PCR擴增產量比與含有EDTA(例如，0.1M)及硫氰酸鈉(例如，1M)但不含有腺嘌呤的細胞及/或大分子穩定化組合物接觸的相同靶核酸的PCR擴增產量高約10倍。組合物根據本揭示內容的一些實施例，用于保存及/或穩定化大分子及/或生物分子的組合物("大分子穩定化組合物")可包括螯合劑、螯合劑增強組份、嘌呤堿基及/或嘧啶堿基。例如，大分子穩定化組合物可包括螯合劑、螯合劑增強組份及嘌呤堿基。根據本揭示內容的一些實施例，用于保存及/或穩定化細胞(例如，全細胞)的組合物("細胞及/或大分子穩定化組合物")可包括螯合劑、螯合劑增強組份、嘌呤堿基及/或嘧啶堿基。例如，細胞及/或大分子穩定化組合物可包括螯合劑、螯合劑增強組份及嘌呤堿基。螯合劑可包括(例如)乙二胺四乙酸(EDTA)、[亞乙基雙(氧基亞乙基次氮基)]四乙酸(EGTA)及1，2-雙(2-氨基苯氧基)乙烷-N，N,N'，N'-四乙酸(BAPTA)、及/或其鹽。若包括在內，則螯合劑可以任一期望濃度存在。例如，螯合劑可以至少約O.lmM、至少約0.005M、至少約0.01M、至少約0.05M、及/或至少約0.1M的濃度包括在內。螯合劑可以直至約O.lmM、直至約5mM、直至約0.01M、直至約0.05M、及/或直至約O.IM的濃度包括在內。螯合劑可以約0.1mM至約0.1M的濃度包括在內。當在單一組合物中包括兩種或更多種螯合劑時，各螯合劑的濃度或組合螯合劑的總濃度可在任一所提供的范圍內。在一些實施例中，螯合劑可包括EDTA、EGTA、BAPTA、咪唑、亞氨基二乙酸鹽(IDA)、雙(5-脒基-2-苯并咪唑基)甲垸(BABIM)及/或其鹽。螯合劑增強組份可包括(例如)氯化鋰、胍、水楊酸鈉、高氯酸鈉、硫氰酸鈉及其組合。所屬領域的技術人員應了解，胍包括鳥嘌呤、嘌呤堿基及核糖。若包括在內，則螯合劑增強組份可以任一期望濃度存在。例如，螯合劑增強組份可以至少約lmM、至少約10mM、至少約0.05M、至少約0.1M、至少約0.5M、至少約1M、至少約1.5M、至少約1.75M、至少約2M、至少約3M、至少約4M、及/或至少約5M的15濃度包括在內。螯合劑增強組份可以直至約1mM、直至約0.05M、直至約0.1M、直至約0.5M、直至約1M、直至約1.5M、直至約1.75M、及/或直至約2M的濃度包括在內。所存在螯合劑增強組份的濃度可在端點由任一上述濃度界定的范圍內。例如，螯合劑增強組份可以約1mM至約0.5M、約0.1M至約1.75M、約0.1M至約2.0M、約0.1M至約3.0M、約0.5M至約3.0M、及/或約0.1M至約5.0M的濃度包括在內。嘌呤堿基可包括腺嘌呤、鳥嘌呤及其組合。嘌呤堿基也可包括類似物及/或變體(例如，甲基腺嘌呤、甲基鳥嘌呤、乙基腺嘌呤、乙基鳥嘌呤)。嘌呤堿基也可包括結構類似的類似物及/或變體，例如肌苷、咖啡因、尿酸、可可堿、茶堿、2-氨基嘌呤、6-氨基嘌呤、次黃嘌呤(6-氧嘌呤)及黃嘌呤(2,6-二氧嘌呤)。嘌呤堿基可包括鹽(例如，腺嘌呤半硫酸鹽、腺嘌呤鹽酸鹽)。若包括在內，則嘌呤堿基可以任一期望濃度存在。例如，嘌呤堿基可以至少約O.lmM、至少約ImM、至少約10mM、至少約O.lM、至少約0.25M、至少約0.5M、至少約0.75M、至少約1M、至少約1.5M、至少約1.75M、至少約2M、至少約2.5M、至少約3M、至少約4M、至少約5M、至少約6M、及/或至少約7M的濃度包括在內。嘌呤堿基可以直至約0.1mM、直至約1mM、直至約10mM、直至約0.1M、直至約0.25M、直至約0.5M、直至約0.75M、直至約1M、直至約1.5M、直至約2M、直至約2.5M、直至約3M、直至約4M、直至約5M、直至約6M、及/或直至約7M的濃度包括在內。若包括在內，則所存在嘌呤堿基的濃度可在端點由任-v上述濃度界定的范圍內。例如，嘌呤堿基可以約0.1mM至約100mM、約1mM至約10mM、約0.1M至約1.0M、約0.1M至約2.0M、約0.1M至約5.0M、約0.1M至約1.75M、約0.5M至約2.0M、約0.75M至約3M、及/或約0.1M至約7M的濃度包括在內。嘧啶堿基可包括(例如)胞嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶及其組合。嘧啶堿基也可包括類似物及/或變體(例如，甲基胞嘧啶、甲基胸腺嘧啶、甲基尿嘧啶、乙基胞嘧啶、乙基胸腺嘧啶、乙基尿嘧啶)。嘧啶堿基也可包括結構類似的類似物及/或變體，例如乳清酸、硫胺素、5-氟尿嘧啶、6-氮雜尿嘧啶、吡嗪及/或噠嗪。嘧啶堿基可包括鹽(例如，嘧啶鹽、2-哌嗪基嘧啶鹽)。若包括在內，則嘧啶堿基可以任一期望濃度存在。例如，嘧啶堿基可以至少約0.1mM、至少約1mM、至少約10mM、至少約0.1M、至少約0.25M、至少約0.5M、至少約0.75M、至少約1M、至少約1.5M、至少約1.75M、至少約2M、至少約2.5M、至少約3M、至少約4M、至少約5M、至少約6M、及/或至少約7M的濃度包括在內。嘧啶堿基可以直至約0.1mM、直至約1mM、直至約10mM、直至約0.1M、直至約0.25M、直至約0.5M、直至約0.75M、直至約1M、直至約1.5M、直至約2M、直至約2.5M、直至約3M、直至約4M、直至約5M、直至約6M、及/或直至約7M的濃度包括在內。若包括在內，則所存在嘧啶堿基的濃度可在端點由任-上述濃度界定的范圍內。例如，嘧啶堿基可以約0.1mM至約100mM、約1mM至約10mM、約0.1M至約1.0M、約0.1M至約2.0M、約0.1M至約5.0M、約0.1M至約1.75M、約0.5M至約2.0M、約0.75M至約3M、及/或約0.1M至約7M的濃度包括在內。在一些實施例中，細胞及/或大分子穩定化組合物可包括一定量的選自EDTA、EGTA、BAPTA及其鹽的二價金屬螯合劑；及一定量的選自氯化鋰、胍、水楊酸鈉、高氯酸鈉及硫氰酸鈉的至少一種螯合劑增強組份。二價金屬螯合劑的量通常介于約0.1mM至約O.lM范圍內。螯合劑增強組份的量通常介于約1mM至約500mM范圍內。組合物中螯合劑的量可為(例如)至少約0.01M。組合物中螯合劑增強組份的量可為(例如)至少約1M。根據一些實施例，大分子穩定化組合物可包括一定量的至少一種酶滅活組份，例如氯化錳、肌氨酰或十二烷基硫酸鈉，其通常介于約0-5%摩爾濃度范圍內。在一些實施例中，細胞及/或大分子穩定化組合物可包括或不包括酶滅活組份。在一些實施例中，細胞及/或大分子穩定化組合物可包括嘌呤堿基、嘧啶堿基、或嘌呤堿基及嘧啶堿基二者。例如，組合物可包括螯合劑、螯合劑增強組份及嘌呤堿基(例如，腺嘌呤)。在一些實施例中，細胞及/或大分子穩定化組合物可僅包括(a)螯合齊'」、(b)螯合劑增強組份、及(c)嘌呤堿基及/或嘧啶堿基。在其它實施例中，細胞及/或大分子穩定化組合物可包括一種或多種溶劑(例如，水性溶劑及/或有機溶劑)、緩沖劑、鹽、表面活性劑、氧化劑、還原劑及/或其它試劑。在一些實施例中，細胞及/或大分子穩定化組合物可具有約4.5至約8.5的pH值。細胞及/或大分子穩定化組合物可調配成在與擬保存及/或穩定化的樣品(例如，體液)組合后所獲得混合物具有約4.5至約8.5的pH值。在一些實施例中，適宜緩沖劑可選自古德緩沖劑(Goodbuffer)(例如，羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES))、乙酸鉀、磷酸鈉、碳酸氫鉀、三(羥基氨基)甲垸(Tris)及其組合。例如，緩沖劑可包括乙酸鉀、乙酸鈉、磷酸鉀、磷酸鈉、Tris、N-(2-羥基乙基)哌嗪-N'-(2-乙磺酸)(HEPES)緩沖劑、3-(N-嗎啉基)丙磺酸(MOPS)緩沖劑、2-[(2-氨基-2-氧代乙基)氨基]乙磺酸(ACES)緩沖劑、N-(2-乙酰胺基)2-亞氨基二乙酸緩沖劑(ADA)、3-[(l，l-二甲基-2-羥基乙基)氨基]-2-丙磺酸(AMPSO)緩沖劑、N,N-雙(2-羥基乙基)-2-氨基乙磺酸(BES)緩沖劑、羥乙基甘氨酸(Bicine)(N,N-雙(2-羥基乙基)甘氨酸)緩沖劑、雙-(2-羥基乙基)亞氨基-三(羥基甲基)甲烷(Bis-Tris)緩沖齊iJ、3-(環己基氨基)-l-丙磺酸(CAPS)緩沖齊U、3-(環己基氨基)-2-羥基-l-丙磺酸(CAPSO)緩沖劑、2-(N-環己基氨基)乙磺酸(CHES)緩沖劑、3-[N,N-雙(2-羥基乙基)氨基]-2-羥基-丙磺酸(DIPS0)緩沖齊i」、N-(2-羥基乙基哌嗪)-N'-(3-丙磺酸)(HEPPS)緩沖劑、N-(2-羥基乙基)哌嗪-N'-(2-羥基丙磺酸)(HEPPSO)緩沖劑、2-(N-嗎啉基)乙磺酸(MES)緩沖劑、三乙醇胺緩沖劑、咪唑緩沖劑、甘氨酸緩沖劑、乙醇胺緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑、3-(N-嗎啉基)-2-羥基丙磺酸(MOPSO)緩沖劑、哌嗪-N,N'-雙(2-乙磺酸)(PIPES)緩沖劑、哌嗪-N，N'-雙(2-羥基丙磺酸)(POPSO)緩沖劑、N-三[(羥基甲基)甲基]-3-氨基丙磺酸(TAPS)緩沖劑、2-羥基-3-[三(羥基甲基)甲基氨基]-l-丙磺酸(TAPSO)緩沖劑、N-[三(羥基甲基)甲基]-2-氨基乙磺斷TES)緩沖劑、N-[三(羥基甲基)甲基]甘氨酸(羥甲基甘氨酸(tricine))緩沖劑、2-氨基-2-甲基-l，3-丙二醇緩沖劑、2-氨基-2-甲基-l-丙醇17緩沖劑及其組合。在一些實施例中，組合物(例如，細胞及/或大分子穩定化組合物)可包括(但不限于)表面活性劑及/或還原劑。在一些實施例中，表面活性劑可包括洗漆劑。洗滌劑可包括(例如)陰離子型洗滌劑、非離子型洗滌劑及/或陽離子型洗滌劑。非離子型洗滌劑可包括聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐單月桂酸酯、辛基-苯氧基聚乙氧基乙醇、壬基-苯氧基聚乙氧基乙醇、辛基吡喃葡萄糖苷、十二烷基吡喃麥芽糖苷、庚基硫代吡喃葡萄糖苷、BigCHAP洗滌劑、聚氧化乙烯十二烷基醚(GenapolX-80)、普流尼克(Pluronic)洗滌劑、垸基苯酚的聚氧乙烯酯(例如，曲拉通(Triton))及/或其衍生物及類似物。根據本揭示內容的一些實施例，組合物(例如，細胞及/或大分子穩定化組合物)可包括長鏈脂肪酸、長鏈脂肪酸酯、長鏈脂肪醇、鋰、肝素、肝素酶、丁基己基檸檬酸酯及/或其組合。在流式細胞術方法中對本揭示內容一些實施例的組合物進行測試。在一些實施例中，組合物(例如，細胞及/或大分子穩定化組合物)可不包括肝素。例如，當不期望存在肝素時(例如，當肝素可能不利影響PCR時)，可略去肝素。在一些情況下，甚至可包括足以移除肝素的量的肝素酶。根據一些實施例，細胞及/或大分子穩定化組合物可以固體、液體或氣體(例如，蒸氣)形式制備及/或使用。在一些實施例中，可能期望具有可用于全細胞分析(例如，流式細胞術)及分子分析(例如，PCR、RT-PCR、組織化學)二者的穩定化組合物。根據一些實施例，細胞及/或大分子穩定化組合物可包括(a)螯合劑(例如，選自以下的螯合劑乙二胺四乙酸(EDTA)、[亞乙基雙(氧基亞乙基次氮基)]四乙酸(EGTA)、1，2-雙(2-氨基苯氧基)乙垸-N，N，N',N'-四乙酸(BAPTA)及其鹽)；(b)至少一種螯合劑增強組份(例如，選自以下的螯合劑增強組份胍、氯化鋰、水楊酸鈉、高氯酸鈉及硫氰酸鈉)；(c)堿基(例如，選自由嘌呤堿基及嘧啶堿基組成的群組的堿基)；(d)抗凝劑(例如，硫酸化糖胺聚糖)；及(e)增塑劑(例如，檸檬酸醇酯)。例如，細胞及/或大分子穩定化組合物可包括如上所述的螯合劑、螯合劑增強組份及堿基。根據一些實施例，細胞及/或大分子穩定化組合物可穩定化一種或多種細胞(例如，紅血球、白血球)，使其很少或不凝結或形成團塊。所述經穩定化的細胞可適用于流式細胞術分析。堿基可以約0.01mg/L至約1mg/L、約0.01mg/L至約0.5mg/L、及/或約0.2mg/L至約0.5mg/L的濃度存在。在一些實施例中，細胞及/或大分子穩定化組合物可進一步包括增塑劑。增塑劑可以約0.1%(v/v)至約10%(v/v)、約0.2%(v/v)至約5%(v/v)、約0.5%(v/v)至約2。/。(v/v)、及/或約1%(v/v)至約5%(v/v)的濃度存在。在一些實施例中，增塑劑可包括檸檬酸醇酯。檸檬酸醇酯的實例可包括擰檬酸三乙酯、檸檬酸乙酰基三乙酯、擰檬酸三丁酯、檸檬酸乙酰基三丁酯、檸檬酸三辛酯、檸檬酸乙酰基三辛酯、檸檬酸三己酯、檸檬酸乙酰基三己酯、檸檬酸丁酰基三己酯(例如，檸檬酸正丁酰基三正己酯)、檸檬酸三甲酯及其組合。在一些實施例中，細胞及/或大分子穩定化組合物可以約200mg/L至約20g/L、18約400mg/L至約5g/L、約500mg/L至約2g/L、及/或約1g/L至約3g/L的濃度包括抗凝劑。在一些實施例中，抗凝劑可包括硫酸化糖胺聚糖。硫酸化糖胺聚糖的實例可包括(但不限于)肝素及/或肝素鹽(例如，肝素銨、肝素鈣、肝素鋰、肝素鉀、肝素鈉及/或肝素鋅鋰)。系統根據本揭示內容的一些實施例，系統可包括細胞及/或大分子穩定化組合物及樣品儲存容器。例如，系統可包括構造及布置成可容納含有擬保存及/或穩定化的大分子及/或生物分子的樣品的容器。容器可構造及布置成可使樣品與細胞及/或大分子穩定化組合物接觸。在一個簡單實例中，調配成固體(例如，片劑、散劑或水凝膠)的細胞及/或大分子穩定化組合物可沉積于小管底部。在將樣品(例如，液體樣品)置于管中后，所述細胞及/或大分子穩定化組合物可與樣品環境接觸并混合。樣品可在置于容器中的同時或一定時間后與細胞及/或大分子穩定化組合物接觸(例如，混合)。在本揭示內容的一些實施例中，系統可包括進一步包括脂質、表面活性劑及/或洗滌劑的細胞及/或大分子穩定化組合物。例如，細胞及/或大分子穩定化組合物可包含于微膠粒、脂質體、小泡及/或膜結合性空腔中。根據一些實施例，系統可包括細胞及/或大分子穩定化組合物及使用說明。在一些實施例中，系統可包括細胞及/或大分子穩定化組合物、樣品儲存容器及使用說明。系統也可包括構造成含有樣品儲存容器及其內含物的可運輸容器。根據一些實施例，系統可包括用于分析所保存分子及/或細胞的分析裝置。分析裝置的實例可包括(但不限于)顯微鏡、讀板儀、按大小分級分離用凝膠、熱循環儀、流式細胞儀、自動血液分析儀、細胞分類計數器、細胞分選儀、珠粒(例如，磁性珠粒)、親和基質及/或分光計。方法根據本揭示內容的-些實施例，保存及/或穩定化大分子及/或生物分子的方法("大分子穩定化方法")可包括使大分子與大分子穩定化組合物接觸。例如，可使包含大分子的體液與含有螯合劑、螯合劑增強組份及嘌呤堿基(例如，腺嘌呤)的大分子穩定化組合物接觸。根據本揭示內容的一些實施例，保存及/或穩定化細胞(例如，全細胞)的方法("細胞穩定化方法")可包括使細胞與細胞及/或大分子穩定化組合物接觸。例如，可使包含細胞的體液與含有螯合劑、螯合劑增強組份及嘌呤堿基(例如，腺嘌呤)的細胞及/或大分子穩定化組合物接觸。本揭示內容也是關于改良測試樣品的分子分析的信號應答的方法，其包括使測試樣品與細胞及/或大分子穩定化組合物接觸以產生經保存及/或穩定化的測試樣品("經保存的測試樣品")、自測試樣品分離及/或純化所關注的分子分析物、及對所分離及/或純化的所關注分子分析物實施分子分析。不受限于任一特定作用機制，核酸分析中信號應答的改良可能部分緣于因使用本揭示內容的細胞及/或大分子穩定化組合物而達成的雜交增強。本揭示內容進一步是關于改良核酸雜交的方法，其包括使測試核酸與細胞及/或大分子穩定化組合物接觸以形成測試溶液及使所述測試溶液與靶核酸在容許測試核酸-靶核酸雜交的條件下接觸。根據一些實施例，方法可包含充分地穩定化及/或保存細胞，以使細胞可經受流式細胞術分析。例如，方法可包括保存及/或穩定化細胞，以使細胞(例如，其所處的環境)無可能干擾流動分析的團塊及/或碎片。保存及/或穩定化可使用任何可利用的度量標準或度量標準組合進行評價。形成團塊及/或碎片可用作保存及/或穩定化度量標準。外觀(例如，顏色)也可用作保存及/或穩定化度量標準。保存及/或穩定化度量標準可包括(例如)一種或多種標記(例如，細胞外標記)隨時間的存在量。保存及/或穩定化標記可包含一種或多種蛋白質、一種或多種碳水化合物、一種或多種脂質、一種或多種核酸及/或其組合。例如，保存標記可包括一種或多種淋巴細胞表面標記。標記實例可包括(例如)B細胞標記(例如，CD19、CD20、CD21、CD22及其組合)、T細胞標記(例如，CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD10及其組合)、NK細胞標記(例如，CD16、CD56、CD57及其組合)、髓系標記(例如，CD13、CD33、CD34及其組合)、單核細胞標記(例如，CD14)及/或全白細胞標記(例如，CD45)。在一些實施例中，就百分比及/或絕對計數來說，與組合物(例如，細胞及/或大分子穩定化組合物)接觸的細胞(例如，淋巴細胞)在室溫(例如，約20°C)下在約48小時、約72小時及/或約96小時時可保留高于約80%、高于約90%、高于約95%及/或高于約99。/。的一種或多種標記(例如，細胞表面標記)。例如，與組合物接觸的淋巴細胞在室溫下可保留至少約8(P/。的一種或多種T細胞標記(例如，CD3、CD4、CD8)達約96小時(t。是使細胞與組合物接觸的時間)。度量標準的另一實例可為經保存及/或穩定化細胞中檢測到的及/或自經保存及/或穩定化細胞回收的一種或多種核酸的數量及/或質量。在一些實施例中，細胞及/或大分子穩定化組合物與樣品的體積及/或重量比可為約1:10至約10:1、約1:10至約1:1、及/或約1:10至約1:5。細胞及/或大分子穩定化組合物可以每毫升及/或每克樣品約10嗎至約10mg細胞及/或大分子穩定化組合物的比率與樣品組合。根據一些實施例，可將細胞及/或大分子穩定化組合物添加到擬保存及/或穩定化的樣品(例如，含有樣品的器皿)中。在一些實施例中，可將擬保存及/或穩定化的樣品添加到細胞及/或大分子穩定化組合物(例如，含有細胞及/或大分子穩定化組合物的器皿)中。根據一些實施例，細胞及/或大分子穩定化組合物及擬保存及/或穩定化的樣品可同時彼此互相添加。例如，二者可添加到另外的空混合器皿中。所屬領域的技術人員應了解，根據本揭示內容實施例可構想出用于保存及/或穩定化細胞及/或大分子及/或生物分子的其它等效或替代組合物、系統及方法，此并不背離其基本特征。例如，細胞及/或大分子穩定化組合物可調配成散劑、顆粒劑、片劑、膠囊、液體、糖漿、糊劑。細胞及/或大分子穩定化組合物可通過任一可用方法沉積于樣品容器中。例如，細胞及/或大分子穩定化組合物可涂敷(例如，噴霧或噴霧干燥)到樣品容器的內表面上，隨后引入含有大分子的樣品。細胞及/或大分子穩定化組合物也可以固體或液體形式簡單地置于樣品容器中。或者，細胞及/或大分子穩定化組合物可保存于單獨容器中，并且僅在將樣品置于樣品容器中之后與樣品接觸。而且，在提供范圍的情況下，所揭示的端點可視特定實施例期望或要求而進行準確及/或估計處理。另外，在一些實施例中，可能期望混合及匹配范圍端點。在一些實施例中，當應用于數值時，術語"約"係指數值加上或減去所述值的約1%、加上或減去所述值的約5%、加上或減去所述值的約10%、加上或減去所述值的約25%及/或加上或減去所述值的約50%。根據一些實施例，當所提供的數值為范圍端點時，視范圍廣度而定，術語"約"可具有或多或少的靈活性。例如，若范圍涵蓋單個數量級(例如，約1至約10)，則"約"可能具有較低靈活性。然而，對于涵蓋數個數量級(例如，約0.1至約100)的范圍，端點可能具有較高靈活性。在一些實施例中，包括術語"直至"的濃度范圍(例如，直至lmMNaCl)可包括達到零以上任一物質量的較低端點值(例如，任一痕量NaCl)。在--些實施例中，術語"直至"可涵蓋及/或要求存在一定非零量特定物質。這些等效形式及替代形式以及顯而易見的改動及修改均意欲包括于本揭示內容范圍內。本揭示內容旨在作為對本揭示內容范圍的例示性而非限定性說明。隨附權利要求書同樣旨在作為對本揭示內容范圍的例示性而非限定性說明。本揭示內容的一些特定實施例可至少部分地通過參考下文特定實例性實施例來了解。這些實例闡釋本揭示內容一些實施例的一些(但不一定全部)方面，且所屬領域的技術人員依據本揭示內容將顯而易見其它變動。實例1圖1是根據本揭示內容的一個實施例經保存及/或穩定化尿中DNA濃度的條形圖。利用GTT每小時計數來測試10種類型尿試樣中轉化體的數量，并隨后進行總結。利用標準谷諾斯特(Gonostat)方案(參見實例2,下文)，且所用保存劑是1M胍HC1/0.01MEDTA。200個菌落的計數顯示經完全保存的試樣。經保存尿中淋球菌轉化體的數量在整個4小時測試期間保持相對恒定，接近200。不同類型尿試樣之間未觀察到保存水平的顯著差異。因此，所測試實例組合物對尿中的DNA提供幾乎完全保護。實例2圖2是根據本揭示內容的一個實施例經保存及/或穩定化尿的8天GTT連續數據圖。將1pg淋球菌DNA摻加到9mL新鮮人尿及lmL含有lM高氯酸鈉及0.01MEGTA的水性大分子穩定化組合物中。將300^L點至谷諾斯特生物體的菌苔上，以24小時間隔持續8天。所述板含有BBL巧克力II瓊脂(BBLChocolateIIagar),并在37'C下培育24小時，隨后進行讀數。整個8天測試時間段期間所觀察到的菌落數介于低計數188至高計數197范圍內。因此，本揭示內容實施例可保存及/或穩定化尿中的DNA達較先前提供時間段顯著較長的時間段。實例3圖3所示圖比較根據本揭示內容的一個實施例未經保存及經保存(經保存及/或穩21定化)正常尿的PCR結果。使用沙眼衣原體(CWamy^afrac/wmafe)主要外膜蛋白(MOMP)模板，并利用標準PCR方案進行擴增。將200拷貝MOMP靶標摻加到含有1M高氯酸鈉及0.01MBAPTA的9mL新鮮人尿中。每隔一小時實施一次PCR，總共8小時。在未經保護尿中，在將DNA添加到尿中后1小時測量到約3個PCR吸光度。截止第6小時，PCR吸光度的數量接近零。相比之下，在經保存及/或穩定化試樣中，在測試1小時時測量到超過3個PCR吸光度。然而，截止第6小時仍然觀察到約3個PCR吸光度。因此，本揭示內容實施例可保存及/或穩定化足夠DNA及核酸序列而容許PCR測試，遠遠超過未經保存尿的測試限值。尿試樣中的所有DNA類型的圖中所示結果一致。實例4本揭示內容的試劑及方法可用以保存其它體液及排泄物(例如血清)。圖4是根據本揭示內容的一個實施例經保存及/或穩定化血清的8天連續數據圖。所用方案與實例3類似，只是使用新鮮人類血清。整個8天測試時間段期間所觀察到的轉化體菌落數介于測量第1天的高計數110至測量第7天的低計數約92范圍內。事實上，測試結果實際上顯示第7天與第8天間轉化體菌落增加。因此，本揭示內容一些實施例可保存及/或穩定化血清中的DNA達較先前獲得時間段顯著較長的時間段。實例5圖5是根據本揭示內容的一個實施例經保存及/或穩定化血清中的DNA濃度的圖。將血清用包含lM胍HCl/0.01MEDTA的大分子穩定化組合物保存及/或穩定化。所用方案與實例3類似，只是使用新鮮人類血清，且研究持續時間為IO小時。在將淋球菌DNA添加到血清中時測量到超過120個轉化體。在測量6小時時計數到約100個轉化體。然而，截止第10小時，測試顯示經保存血清中生物活性DNA的濃度增加到約110個轉化體菌落。實例6用于保存DNA的方法10的實例性實施例示意性地顯示于圖6中。此方案闡述于下文表l中，且已觀察到產生適用于諸如使用尿試樣的PCR、限制性片段長度多肽性分析(RFLP)及核酸探針等測試方法的高產量DNA/RNA。組1.將10mL清潔收集的尿16添加到含有二價金屬螯合劑12及螯合劑增強組份14的試樣試管18中。將試管顛倒兩次或三次以混合尿。2.將試管運送到實驗室。不需要冷藏。注意試管應在涼爽處儲存且避免陽光直射。3.在實驗室，將試管在3200rpm下離心20達10分鐘。4.使用無菌移液管將試管底部的沉淀物22轉移到含有緩沖劑的另一試管24中。(應使盡可能少的尿與沉淀物物質一起轉移。)5.將緩沖物質在2-8'C下儲存26，直至準備測試28。22<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>實例7模擬臨床試樣中DNA的保存在以下實驗中，產生模擬臨床尿試樣并測試是否存在淋球菌DNA。以先前所述濃度向健康成人的尿試樣中添加下文表2中所列示的化學品以及EDTA。緊接地，將淋球菌懸浮液添加到各尿試樣中。所添加淋球菌是普通淋球菌(Wgo"wr/zoea。菌株49191，使其在GC瓊脂培養基上于37。C下于5%。02氣氛中生長過夜。挑選出淋球菌菌落并懸浮于GC緩沖液中。將1/10體積的每毫升含有約10個菌落形成單位(cfu)的懸浮液添加到尿中。作為陽性對照，也將淋球菌懸浮液添加到Hepes緩沖液中。在零時間(即，添加化學品及淋球菌時)，測試所有模擬臨床試樣及Hepes對照。也在于室溫下儲存6天后測試試樣及對照。所選此6天時間段近似于預期的患者試樣采集、郵寄與測試間的最長時間。除含有十二垸基硫酸鈉(SDS)及肌氨酰的尿樣品外，其它模擬試樣及Hepes對照均如下進行處理1.將10mL量在4000rpm下離心30分鐘。2.輕輕倒出上清液，并將沉淀物懸浮于lmL磷酸鹽緩沖液中。3.將懸浮液在60'C水浴中加熱10分鐘。4.冷卻后，將懸浮液用于GTT。含有SDS-EDTA或肌氨酰-EDTA的模擬尿試樣如下進行處理1.將約21/2體積(約25mL)的95%乙醇添加到含有尿及大分子穩定化組合物的試管中。藉由顛倒試管數次將內含物混合。2.將混合物在4000rpm下離心30分鐘。3.將沉淀物懸浮于10mL70。/。醇中，并離心。4.隨后將沉淀物懸浮于lmL磷酸鹽緩沖液中。5.將懸浮液在6(TC水浴中加熱10分鐘。6.冷卻后，將懸浮液用于GTT。將接種的尿在室溫下儲存6天，隨后進行測試。顯示，經調配物保存及/或穩定化(+)或未經保存及/或穩定化(-)的接種尿中的淋球菌DNA在6天后與Hepes緩沖液對照達到近似相同程度。盡管谷諾斯特(Gonostat)TM分析的結果可能是半定量的，但所述測試未設計成給大分子穩定化組合物的相對效能進行分級。因此，表2中給出的結果表明，與特定化學品無關，經保存及/或穩定化尿中的DNA在6天時間段后達到與Hepes緩沖液相同的程度。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>男性尿試樣所展示的92%靈敏性與文獻中所報導的培養物結果相當。另外，女性尿試樣所展示的88%靈敏性超過先前所報導的水平。盡管本揭示內容的一個較佳實施例是關于淋球菌DNA的保存，但所屬領域的技術人員易知本揭示內容也適用于保存其它類型DNA，例如流感嗜血菌DNA及枯草芽孢桿菌DNA。本揭示內容的一些實施例也可用于保存及/或穩定化體液樣品中所含有的RNA。所述經保存的RNA可用于病毒區段的RNA轉錄酶及逆轉錄酶分析及人類基因序列測試。此外，盡管可將大分子穩定化組合物添加到體液(例如，尿試樣)中，但也可將尿試樣添加到大分子穩定化組合物中，此并不損害保存/穩定化效能。DNA的最佳保存可通過將一種本揭示內容的大分子穩定化組合物添加到試樣中來達成。實例8產青霉素酶淋球菌(A^'M^/flgono廳/;efl)的PCR檢測通過以下實例來闡述本揭示內容大分子穩定化組合物的PCR信號增強作用。在PPNG中發現四種編碼TEM的質粒。這四種是6.7kb(4.4Mda)亞洲型(Asiantype)、5.1kb(3.2Mda)非洲型(Africantype)、4.9kb(3.05Mda)多倫多型(Torontotype)和4.8kb(2.9Mda)里約型(RioType)。針對PPNG的此PCR分析利用以下事實TEM-1基因位于靠近轉位子Tn2末端的地方；使用TEM-1基因中的一種引物和遠離Tn2末端的序列中的另一種引物，且對于所有四種質粒均適用，所獲得PCR產物僅來自質粒而非來自編碼TEM-1的質粒。(下文表3)修改與此方案相關的條件以在雜交中包括所述大分子穩定化組合物，并按照標準PCR方案將經處理探針與761bp擴增產物混合。讀取A45()nm結果。材料和試劑BBL巧克力11瓊脂板無菌Tris緩沖液10mMTris(pH7.4)，1mMEDTA0.5mL基因擴增反應試管無菌一次性巴斯德(Pasteur)吸頭自封閉防回滲吸頭(Aerosol-resistanttip)PCR主體混合物50mMKC12mMMgCl50以下各種試劑脫氧核糖核苷三磷酸；2.5UTaq聚合酶(伯金埃爾默(PerkinElmer));5%甘油；50pmol引物PPNG-L和PNG-R中的每一種(每100反應物)變性溶液1MNa5X登哈特溶液(Denhardt'ssolution)預雜交溶液5XSSC(IXSSC是0.015MNaCl加上0.015M擰檬酸鈉);5X登哈特溶液；0.05%SDS;0.1。/。焦磷酸鈉(SodiumPpi);及100嗎經超聲波處理的鮭魚精DNA/mL。雜交溶液與預雜交溶液相同，只是不含登哈特溶液且包括200nL大分子穩定化組合物1mLDNA/RNA大分子穩定化組合物(1M胍HC1/0.01MEDTA)抗生物素蛋白(Avidin)-HRP過氧化物酶復合物(Zymed)磁性微粒(泰瑞達(Seradyne))^_3功能名稱核苷酸序列5'至3'引物PPNG-LAGTTATCTACACGACGG(SEQIDNO:l)引物PPNG-RGGCGTACTATTCACTC丁(SEQIDNO:2)探針PPNG-CGCGTCAGACCCCTATCTATAAACTC(SEQIDNO:3)方法樣品制備從巧克力瓊脂板中挑選2個菌落。在準備PCR之前將菌落懸浮于去離子水中。根據以上配方制備主體混合物。將5pL新制得的細菌懸浮液添加到95pL主體混合物中。使DNA釋放出來并在熱循環儀中利用三個于94。C下3min和于55。C下3min的循環使其變性。使DNA在所述熱循環儀中通過利用兩階段曲線來擴增于95。C下變性25s和于55。C下復性25s，總共三十個循環。對兩個溫度平臺之間的時間25進行設定以在所述兩個溫度之間能夠盡可能最快的復性。在有及沒有大分子穩定化組合物的情況下在37'C下將15pmol經標記(抗生物素蛋白-HRP復合物)檢測探針PPNG-C添加到結合至磁性微粒的雜交溶液中，并維持1小時。然后將對照和經處理探針添加到擴增產物中，并以A，。m以色度法檢測反應。己發現，獲自用本揭示內容大分子穩定化組合物處理的雜交探針的信號明顯高于未經處理探針的信號。實例9本揭示內容一些實施例的組合物、系統及方法可使利用諸如聚合酶鏈反應(PCR)、LCx和遺傳轉化測試(GTT傳核酸測試方法獲得的信號增加。例如，組合物、系統及方法可使諸如PCR等核酸測試方法中的雜交增強。圖7顯示對于產青霉素酶淋球菌(PPNG)DNA及PPNG-C探針的雜交通過使用本文所揭示大分子穩定化組合物的特定實例性實施例所獲得的雜交得以改善。此PCR方案與實例IO中所述相同。實例10圖8及圖9進一步展示本揭示內容組合物、'系統及方法的特定實例性實施例改良利用核酸測試方法(在此情況下為分支DNA分析(凱龍(Chiron)))所獲得的結果的效能。在圖8中所實施的測試中，使用bDNA分析來評價大分子穩定化組合物的保護作用。將來自丙型肝炎病毒的DNA序列摻加到血清和血漿中。將經保護血清和血漿與9ml血清或血漿和1ml大分子穩定化組合物混合。使用以下調配物1)1M胍HC1/0.01MEDTA;2)1M高氯酸鈉/0.01MBAPTA;3)1M硫氰酸鈉/0.01MEGTA;及4)1M氯化鋰/0.01MEGTA。將調配物在4'C下儲存7天。bDNA分析依賴于雜交；自吸光度結果可以清楚地看到，靶序列不僅受保護免于降解，而且吸光度結果增加了一倍多表明耙序列的雜交/復性增強。圖9展示血清對血漿的研究。將50新鮮人類血漿樣品和1ml新鮮人類血清樣品用1M胍HC1/0.01MEDTA保護，并將所述樣品在20。F下儲存48小時，隨后對這些樣品實施bDNA分析。將結果與未經保護的樣品進行比較。自吸光度結果可以清楚地看到，靶序列不僅受保護免于降解，而且吸光度結果增加了一倍多表明靶序列的雜交/復性增強。實例ll已觀察到諸如高鐵血紅蛋白等血紅素化合物會干擾核酸的PCR擴增。例如，圖10顯示按照實例10實施的一系列PCR分析的結果，其中將模板新鮮人類血清與增加量的高鐵血紅蛋白摻加到一起。如圖所示，吸光度隨高鐵血紅蛋白濃度變化而減小。在最高濃度下，根本觀察不到吸光度(即，擴增)。根據一些實施例，本揭示內容的大分子穩定化組合物在實施的血清PCR分析中可除去血紅素化合物(例如，高鐵血紅蛋白)的干擾。圖11展示通過向血清樣品中添加包含1M硫氰酸鈉及0.1MEDTA的大分子穩定化組合物所獲得的改良(即，擴增增加，如通過吸光度(A45。)所測量)。與對照一樣(圖10),將血清樣品與增加量的高鐵血紅蛋白(至IOdl/mL濃度)摻加到一起。在4小時時間段內實施連續PCR分析。實例12包括二價金屬螯合劑及螯合劑增強組份的實例組合物對于保護血清中的乙型肝炎序列具有令人驚奇的協同效應。具體來說，使乙型肝炎模板與測試組合物(例如，1M高氯酸鈉/0.01MEGTA)在室溫下接觸長達36小時(以2小時間隔取樣)。使樣品經受使用MD03及MD06引物使用如實例10中所述樣品PCR方案的PCR擴增。所獲得的代表性結果提供于圖12A-12F中。總之，這些圖顯示，與單獨添加EGTA或高氯酸鈉相比，使用本揭示內容大分子穩定化組合物的特定實例性實施例時，乙型肝炎序列的保存及/或擴增增加。實例13圖13展示通過單獨添加本揭示內容試劑的組份而提供的對儲存于室溫下且隨后經受PCR檢測的尿中淋球菌DNA的保存效果(相對普通)，即，二價金屬螯合劑0.01MBAPTA(圖13A)、0.01MEDTA(圖13B)、O,OIMEGTA(圖13C);及螯合劑增強組份1M高氯酸鈉(圖13D)、1M水楊酸(圖13E)、1M胍HC1(圖13F)、1M硫氰酸鈉(圖13G)及氯化鋰(圖13H)。利用GTT每小時計數來測試IO種類型尿試樣中轉化體的數量，并隨后進行總結。利用標準谷諾斯特方案(參見實例2，下文)，且展示通過將二價金屬螯合劑與螯合劑增強組份組合而獲得的對儲存于室溫下并隨后經受PCR檢測的尿中淋球菌DNA的協同保護作用。實例14制備含或不含硫氰酸鈉(lM)及EDTA(0.1M)的包含嘌呤堿基或嘧啶堿基(lM)的組合物。采集新鮮人尿樣品，摻加1pg淋球菌DNA，與所述組合物之一組合，并在室溫下培育。8小時后取分液，并通過PCR測試是否存在可擴增的淋球菌DNA。此PCR方案與實例10中所述相同。如圖14中所展示，含有硫氰酸鈉、EDTA及嘌呤或嘧啶堿基的組合物比僅含有嘌呤或噴啶堿基的組合物更有效地穩定化尿中的淋球菌DNA。實例15制備包含硫氰酸鈉、EDTA及/或腺嘌呤的組合物。采集新鮮人尿樣品，摻加lpg淋球菌DNA，與所述組合物之一組合，并在室溫下培育。8小時后取分液，并通過PCR測試是否存在可擴增的淋球菌DNA。此PCR方案與實例10中所述相同。如圖15A中所展示，含有硫氰酸鈉、EDTA及腺嘌呤的組合物通常比不含有所有三種組份的組合物更有效地穩定化尿中的淋球菌DNA。所觀察到的唯一例外是包含硫氰酸鈉及EGTA的組合物。實例16制備包含高氯酸鈉、氯化鋰、胍HC1、硫氰酸胍、EDTA、EGTA、BAPTA及/或腺嘌呤的組合物。采集新鮮人尿樣品，摻加lpg淋球菌DNA，與所述組合物之一組合，并在室溫下培育。8小時后取分液，并通過PCR測試是否存在可擴增的淋球菌DNA。此PCR方案與實例IO中所述相同。如圖15B中所展示，含有螯合劑、螯合劑增強組份及腺嘌呤的組合物比不含有所有三種組份的組合物更有效地穩定化尿中的淋球菌DNA。實例17制備包含硫氰酸鈉、胍HC1、EDTA、EGTA、BAPTA及/或腺嘌呤的組合物。采集新鮮人尿樣品，摻加lpg淋球菌DNA，與所述組合物之一組合，并在室溫下培育。8小時后取分液，并通過PCR測試是否存在可擴增的淋球菌DNA。此PCR方案與實例10中所述相同。如圖16中所展示，含有螯合劑、螯合劑增強組份及腺嘌吟的組合物比僅含有所述組份之一的組合物更有效地穩定化尿中的淋球菌DNA。實例18根據一些實施例，本揭示內容組合物可保存及/或穩定化全細胞("細胞及/或大分子穩定化組合物")。在一特定實例中，自患有一種或多種以下病狀的患者取300份尿試樣急性腎小球腎炎、急性腎盂腎炎、腎病綜合征、急性腎小管壞死、膀胱炎、泌尿道贅瘤形成及病毒感染。在采集后10分鐘內，將尿樣品冷藏(2-8X:)或與含有1M硫氰酸鈉、0.01MEDTA及1M腺嘌呤的細胞及/或大分子穩定化組合物(CSC)組合(9mL尿+1mL大分子穩定化組合物)。在釆集后2小時內處理冷藏樣品。如表4中所示，使用細胞及/或大分子穩定化組合物來保存及/或穩定化多種全細胞至少與冷藏一樣有效。表4:全細胞的保存/穩定化<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>實例19在初始流式細胞術實驗期間，與由0.01MEDTA及1M硫氰酸鈉組成的組合物接觸的一些紅血球似乎在第1天處于良好狀態，但觀察到在所測試的特定條件下在第3-5天形成團塊。含有團塊細胞的樣品可認為難以通過流式細胞術進行分析。因此，尋求可穩定化用于流動分析的細胞的改良調配物。實例20根據一些實施例，所制備調配物應允許保存紅細胞群體及白細胞群體及白細胞上的共存表面抗原標記，而無在一些條件下可能觀察到的溶脹及形成團塊。組合物的實例性實施例可如下制備1.將肝素鋰添加到含有水的混合容器中。混合直至澄清。2.將基因鎖原液化學物質(Genelockstockchemistry)添加到混合容器中。3.添加腺嘌呤并混合直至澄清。4.添加表面活性劑(例如，檸檬酸丁酰基三正己酯)。混合10min。5.添加水以使總體積達到期望最終體積。6.混合15min。7.過濾(例如，殺菌過濾)，得到最終組合物。根據一些實施例，化學上的變化可包括用肝素鋰代替檸檬酸鹽磷酸鹽緩沖系統及腺嘌呤濃度增加。例如，組合物可包括以下成份<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>在第1天抽取血液，以1:7的保存劑:血液比與所述組合物組合，并在環境溫度(例如，室溫(RT))下陳化3天。在貝克曼(Beckman)計數器細胞分析儀上對血液實施分類細胞分析。所述分析顯示白細胞群體及紅細胞群體均保存得非常好。血液呈粉紅色且具有粘性，與剛采集的血液相比顏色變化較小。不存在表明血液發生變化的可見證據，且預期適用于流動分析。實例21制備以下細胞及/或大分子穩定化組合物組合物l:分子全血試管群組Ag/L右旋糖(單水合物)31.9檸檬酸鈉(二水合物)26.3檸檬酸(無水)3.27磷酸二氫鈉(單水合物)2.22腺嘌呤0.275群組B硫氰酸鈉405g/LEDTA(0.1M)500mL/L組合物1(A+B)mL群組A1000群組BDIUF水總計組合物FC硫氰酸鈉EDTA(0.1M)腺嘌呤肝素鈉檸檬酸正丁酰基:DRJF水總計組合物U-l硫氰酸鈉EDTA(0.1M)國F水總計組合物U-2硫氰酸鈉EDTA(0.1腺嘌呤DIUF水總計組合物S硫氰酸鈉EDTA(0.1M)DMSO甘油磷酸磷酸鉀100200:正己酯130081g/L100mL0.30g/L2000mg/L10mL/L1000mL81g/L100mL1000mL81g/L100mL0.30g/L足量1000mL8.1g/L賜mL20mL/L25mL/L3.93g/L5.02g/L將新鮮血液以1:7的保存劑:血液比與組合物1及FC之一組合，并在環境溫度(例如，室溫(RT))下陳化3天。24小時后，與組合物U-1組合的血液形成團塊。相比之下，與組合物FC組合的血液在72小時后無團塊。利用錐蟲藍分析來評價生存力。超過99。/。的來自與組合物FC組合的血液的白細胞在72小時后保持完整(得以保存)。結果顯示于表5中。<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>形成團塊無(-)，較少(+)，大量(++)生存力未檢測到(--)，少許存活細胞(-);99%+存活(++)實例22在環境溫度及壓力下通過將螯合劑增強組份(例如，硫氰酸鈉)及去離子超濾(DIUF)水添加到混合容器中并隨后混合10分鐘來制備細胞及/或大分子穩定化組合物。然后，將預溶解的螯合劑(例如，EDTA)添加到混合容器中，并混合10分鐘。隨后將堿基(例如，腺嘌呤)添加到容器中并混合，直至獲得澄清溶液。若期望，則在此時添加緩沖劑(例如，磷酸鹽緩沖劑)。最后，添加DIUF水以使混合容器中的體積達到總期望體積，并將溶液混合10分鐘。通過將所得混合物殺菌過濾到無菌容器(例如，納吉恩瓶(Nalgenebottle))中獲得最終溶液。流式細胞術分析中所用細胞及/或大分子穩定化組合物的數個特定實例的配方詳述于表5中。表5:細胞及/或大分子穩定化組合物<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>實例23在環境溫度及壓力下通過將USP純凈水分液添加到合適大小的容器中、添加螯合劑增強組份(例如，硫氰酸鈉)并隨后混合來制備細胞及/或大分子穩定化組合物。然后，將預溶解的螯合劑(例如，EDTA)添加到混合容器中，并混合。最后，添加USP純凈水以使混合容器中的體積達到總期望體積，并混合溶液。通過將所得混合物殺菌過濾到無菌容器(例如，納吉恩瓶)中獲得最終溶液(溶液A)。向第二容器中添加水。添加右旋糖并混合組合物直至澄清。然后，添加擰檬酸鈉并混合組合物直至澄清。隨后添加檸檬酸，并再次混合組合物直至澄清。添加磷酸二氫鈉并混合組合物直至澄清。隨后添加腺嘌呤并混合組合物直至澄清。最后，添加DUIF水以使混合容器中的體積達到總期望體積，并混合溶液。通過將所得混合物殺菌過濾到無菌容器(例如，納吉恩瓶)中獲得最終溶液(溶液B)。將溶液B的分液添加到容器中，隨后添加溶液A的分液。在環境條件下混合組合的溶液(例如，15分鐘)。流式細胞術分析中所用細胞及/或大分子穩定化組合物的特定實例的配方詳述于表6中。表6:細胞及/或大分子穩定化組合物<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>實例24方法:通過流式細胞術的標準淋巴細胞免疫表型分型是在貝克頓迪肯森流式細胞分析儀(BectonDickensonFacsCalibur)上使用珠粒進行絕對計數校準來實施。利用裂解/免洗技術，在一根管中對全血實施CD3、CD4、CD8及CD45染色，且在另一根管中實施CD16+56、CD19及CD45染色。通過CD45/前向散射設門來識別淋巴細胞且計數到10,000個事件。在第0、24、48、72、96、120、144及160小時報告各CD抗原染色的淋巴細胞百分比及呈各抗原陽性的淋巴細胞絕對計數。對照管包括EDTA(標準紫色頂部)溶液及肝素(標準綠色頂部)溶液以及含EDTA與肝素的溶液以考慮到測試組合物的任何稀釋效應。按照實例22及23來制備穩定化測試試劑。各組合物的pH值顯示于表7中。流動參數顯示于表8中。用于流式細胞術的組合物的pH值<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>結果通過繪制淋巴細胞標記百分比及/或絕對計數隨時間的變化曲線，可將不同細胞及/或大分子穩定化組合物的效力與當前黃金標準保存劑EDTA及肝素進行比較。例如，圖17A繪示所述調配物與對照相比CD3百分比隨時間的變化曲線。同樣，圖17B繪示所述調配物與對照相比CD4百分比隨時間的變化曲線。CD3及CD4百分比甚至在160小時后看起來仍然穩定，該時間遠遠超過了對EDTA及肝素二者所推薦及公認的穩定性時間。另外，CD3的絕對計數(每毫升血液CD3細胞的數量)在96小時后仍穩定(圖17C)。實例25RNA方法:RNA是在不同時間點自PAX基因tm管(其可包括十四烷基三甲基草酸銨及酒石酸)或在紅血球低滲裂解后使用凱俊RNA血液微型試劑盒(QiagenRNABloodMinikit)來分離。隨后確定經分離RNA的數量并使用安捷倫2100生物分析儀(Agilent2100BioAnalyzer)使用皮克柱(Picocartridge)(安捷倫(Agilent))評價其質量。RNA結果如圖18中所示，在長達且包括48小時的時間點，經T8及T10處理而保存的樣品的RNA產量高于PAX基因tm且與EDTA對照近似相等。在第72小時，來自PAX基因tm、T8、T10及EDTA的RNA產量全部大致相等。72小時后一些管不時發生凝固而阻止分析。利用本揭示內容細胞及/或大分子穩定化組合物不僅獲得的rna的量較大，而且來自t8及t10的rna的質量也優于pax基因tmrna的質量且與EDTA對照相當。與PAX基因tm、EDTA、T8及T10接觸的RNA在第72小時的質量數據分別顯示于圖19A、19B、19C及19D中。所述測試的RNA完整性指數(RIN)為6.20(19A)、7.90(19B)、7.90(19C)及7.4(19D)。RNA質量可通過在跡線的右半部分存在兩個核糖體RNA峰來評價。在PAX基因tm管中不存在較大核糖體峰(距右端最遠)，表明顯著降解。權利要求1、一種細胞及/或大分子穩定化組合物，所述組合物包含(a)螯合劑，選自由乙二胺四乙酸(EDTA)、[亞乙基雙(氧基亞乙基次氮基)]四乙酸(EGTA)、1，2-雙(2-氨基苯氧基)乙烷-N，N，N′，N′-四乙酸(BAPTA)及其鹽組成的群組；(b)至少一種螯合劑增強組份，選自由胍、氯化鋰、水楊酸鈉、高氯酸鈉及硫氰酸鈉組成的群組；及(c)堿基，選自由嘌呤堿基及嘧啶堿基組成的群組。2、如權利要求1所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述螯合劑的濃度是約0.1mM至約0.1M。3、如權利要求1所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述至少一種螯合劑增強組份的濃度是約1mM至約5M。4、如權利要求1所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述堿基的濃度是約0.1mM至約5M。5、如權利要求1所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述細胞及/或大分子穩定化組合物調配成水性溶液。6、如權利要求1所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述至少一種螯合劑增強組份選自由高氯酸鈉、硫氰酸鈉及氯化鋰組成的群組。7、如權利要求1所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述至少一種螯合劑增強組份以約1M的量存在。8、如權利要求1所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述二價金屬螯合劑以約1mM的量存在。9、如權利要求1所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述堿基以約2mM的量存在。10、如權利要求1所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其進一步包含緩沖劑。11、如權利要求10所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述緩沖劑包含選自由下列組成的群組的化合物乙酸鉀、乙酸鈉、磷酸鉀、磷酸鈉、三(羥基氨基)甲烷、N-(2-羥基乙基)哌嗪-N'-(2-乙磺酸)、3-(N-嗎啉基)丙磺酸、2-[(2-氨基-2-氧代乙基)氨基]乙磺酸、N-(2-乙酰胺基)2-亞氨基二乙酸、3-[(1，1-二甲基-2-羥基乙基)氨基]-2-丙磺酸、N,N-雙(2-羥基乙基)-2-氨基乙磺酸、N,N-雙(2-羥基乙基)甘氨酸、雙-(2-羥基乙基)亞氨基-三(羥基甲基)甲烷、3-(環己基氨基)-l-丙磺酸、3-(環己基氨基)-2-羥基-1-丙磺酸、2-(N-環己基氨基)乙磺酸及其組合。12、如權利要求10所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述緩沖劑包含選自由下列組成的群組的化合物3-[N，N-雙(2-羥基乙基)氨基]-2-羥基-丙磺酸、N-(2-羥基乙基哌嗪)-N'-(3-丙磺酸)、N-(2-羥基乙基)哌嗪-N'-(2-羥基丙磺酸)、2-(N-嗎啉基)乙磺酸、三乙醇胺緩沖劑、咪唑、甘氨酸、乙醇胺、3-(N-嗎啉基)-2-輕基丙磺酸、哌嗪-N,N'-雙(2-乙磺酸)、哌嗪-N，N'-雙(2-羥基丙磺酸)、N-三[(羥基甲基)甲基]-3-氨基丙磺酸、2-羥基-3-[三(羥基甲基)甲基氨基]-l-丙磺酸、N-[三(羥基甲基)甲基]-2-氨基乙磺酸、N-[三(羥基甲基)甲基]甘氨酸、2-氨基-2-甲基-l，3-丙二醇、2-氨基-2-甲基-1-丙醇及其組合。13、如權利要求1所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其進一步包含細胞。14、如權利要求13所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述細胞包含選自由下列組成的群組的細胞哺乳動物細胞、植物細胞、酵母細胞、細菌細胞、受病毒感染的細胞、患病細胞及其組合。15、如權利要求14所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述哺乳動物細胞包含選自由下列組成的群組的細胞紅細胞、白細胞、淋巴細胞、組織細胞、上皮細胞及其組合。16、如權利要求1所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其進一步包含核酸。17、如權利要求16所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述核酸包含選自由核糖核酸、脫氧核糖核酸及其組合組成的群組的聚核酸。18、如權利要求1所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其進一步包含增塑劑。19、如權利要求18所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述增塑劑包含選自由下列組成的群組的檸檬酸醇酯檸檬酸三乙酯、檸檬酸乙酰基三乙酯、檸檬酸三丁酯、擰檬酸乙酰基三丁酯、檸檬酸三辛酯、檸檬酸乙酰基三辛酯、檸檬酸三己酯、檸檬酸乙酰基三己酯、檸檬酸丁酰基三己酯、檸檬酸三甲酯及其組合。20、如權利要求18所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述增塑劑是檸檬酸丁酰基三己酯。21、如權利要求20所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述檸檬酸丁酰基三己酯包含檸檬酸正丁酰基三正己酯。22、如權利要求18所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述增塑劑的濃度是約0.1%(v/v)至約10%(v/v)。23、如權利要求1所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其進一步包含抗凝劑。24、如權利要求23所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述抗凝劑包含選自由肝素、肝素鹽及其組合組成的群組的硫酸化糖胺聚糖。25、如權利要求23所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述抗凝劑是選自由下列組成的群組的肝素鹽肝素銨、肝素鈣、肝素鋰、肝素鉀、肝素鈉、肝素鋅鋰及其組合。26、如權利要求23所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其中所述抗凝劑的濃度是約200mg/L至約20g/L。27、如權利要求1所述的細胞及/或大分子穩定化組合物，其進一步包含肝素酶。28、一種保存及/或穩定化細胞的方法，所述方法包含使細胞與細胞及/或大分子穩定化組合物接觸，所述細胞及/或大分子穩定化組合物包含(a)螯合劑，選自由乙二胺四乙酸(EDTA)、[亞乙基雙(氧基亞乙基次氮基)]四乙酸(EGTA)、1,2-雙(2-氨基苯氧基)乙院-N，N,N'，N'-四乙酸(BAPTA)及其鹽組成的群組；及(b)至少一種螯合劑增強組份，選自由胍、氯化鋰、水楊酸鈉、高氯酸鈉及硫氰酸鈉組成的群組。29、如權利要求28所述的方法，其中所述細胞及/或大分子穩定化組合物進一步包含選自由嘌呤堿基及嘧啶堿基組成的群組的堿基。30、如權利要求28所述的方法，其中所述細胞包含選自由哺乳動物細胞、受病毒感染的細胞、患病細胞及其組合組成的群組的細胞。31、如權利要求30所述的方法，其中所述哺乳動物細胞包含選自由下列組成的群組的細胞紅細胞、白細胞、淋巴細胞、組織細胞、上皮細胞及其組合。32、如權利要求30所述的方法，其中所述哺乳動物細胞包含人類細胞。33、如權利要求28所述的方法，其中所述螯合劑的濃度是約0.1mM至約0.1M。34、如權利要求28所述的方法，其中所述至少一種螯合劑增強組份的濃度是約0.1mM至約0.5M。35、如權利要求29所述的方法，其中所述堿基的濃度是約0.1mM至約5M。36、如權利要求28所述的方法，其中所述細胞及/或大分子穩定化組合物調配成水性溶液。37、如權利要求28所述的方法，其中所述至少一種螯合劑增強組份選自由高氯酸鈉、硫氰酸鈉及氯化鋰組成的群組。38、如權利要求28所述的方法，其進一步包含保存細胞內核酸，其中所述核酸選自由DNA、RNA、mRNA及cDNA組成的群組。39、如權利要求38所述的方法，其中所述核酸是真核RNA。40、如權利要求28所述的方法，其中所述細胞存在于獲自人類個體的體液中。41、如權利要求40所述的方法，其中細胞及/或大分子組合物與體液的體積比是約1:10至約10:1。42、如權利要求40所述的方法，其中所述使所述細胞與所述細胞及/或大分子穩定化組合物接觸包含將所述細胞添加到所述細胞及/或大分子穩定化組合物中。43、如權利要求40所述的方法，其中所述使所述細胞與所述細胞及/或大分子穩定化組合物接觸包含將所述細胞及/或大分子穩定化組合物添加到所述細胞中。44、如權利要求40所述的方法，其中在使所述細胞與所述細胞及/或大分子穩定化組合物接觸后，所述細胞及/或大分子穩定化組合物與所述體液一起形成穩定的體液組合物，其保持基本上無團塊長達約5天。45、如權利要求40所述的方法，其中所述體液包含選自由下列組成的群組的物質血液、血清、羊水、脊髓液、結膜液、唾液、陰道液、糞便、精液及汗液。46、如權利要求28所述的方法，其中所述細胞是淋巴細胞。47、如權利要求28所述的方法，其中在所述使所述細胞與所述細胞及/或大分子穩定化組合物接觸后，所述細胞保留至少約80%的細胞外標記至少約3天。48、如權利要求47所述的方法，其中所述細胞外標記選自由下列組成的群組-CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CDIO、CD13、CD14、CD16、CD19、CD20、CD21、CD22、CD33、CD34、CD45、CD56、CD57及其組合。49、如權利要求28所述的方法，其中在所述使所述細胞與所述細胞及/或大分子穩定化組合物接觸后約5天時所述細胞保留至少約95%的細胞外標記。50、如權利要求28所述的方法，其中所述細胞及/或大分子穩定化組合物進一步包含至少一種選自由下列組成的群組的化合物長鏈脂肪酸、長鏈脂肪酸酯、長鏈脂肪醇、鋰、肝素、肝素酶、丁基己基檸檬酸酯及/或其組合。51、如權利要求29所述的方法，其進一步包含使所述細胞與流式細胞儀接觸。52、如權利要求51所述的方法，其中所述使所述細胞與流式細胞儀接觸發生在所述與細胞及/或大分子穩定化組合物接觸后長達約2天、長達約3天、長達約4天、長達約5天、長達約6天或長達約7天時。53、一種用于保存樣品中的細胞的系統，所述系統包含樣品容器，其構造及布置成可容納及含有包含所述細胞的樣品；及細胞及/或大分子穩定化組合物，其包含(a)螯合劑，選自由乙二胺四乙酸(EDTA)、[亞乙基雙(氧基亞乙基次氮基)]四乙酸(EGTA)、1，2-雙(2-氨基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸(BAPTA)及其鹽組成的群組；(b)至少一種螯合劑增強組份，選自由胍、氯化鋰、水楊酸鈉、高氯酸鈉及硫氰酸鈉組成的群組；及(c)堿基，選自由嘌呤堿基及嘧啶堿基組成的群組。54、如權利要求53所述的系統，其進一步包含使用說明書。55、如權利要求53所述的系統，其中所述樣品容器含有所述細胞及/或大分子穩定化組合物。56、如權利要求53所述的系統，其中所述細胞及/或大分子穩定化組合物進一步包含固體、液體或水凝膠。57、如權利要求53所述的系統，其中所述樣品容器包含至少一個內表面及至少一個外表面。58、如權利要求53所述的系統，其中所述細胞及/或大分子穩定化組合物是位于所述至少一個內表面上的涂層。59、一種系統，其包含(a)所保存的細胞；(b)細胞及/或大分子穩定化組合物，所述組合物包含(i)螯合劑，選自由乙二胺四乙酸(EDTA)、[亞乙基雙(氧基亞乙基次氮基)]四乙酸(EGTA)、1，2-雙(2-氨基苯氧基)乙烷-N，N,N'，N'-四乙酸(BAPTA)及其鹽組成的群組；(ii)至少一種螯合劑增強組份，選自由胍、氯化鋰、水楊酸鈉、高氯酸鈉及硫氰酸鈉組成的群組；及(m)堿基，選自由嘌呤堿基及嘧啶堿基組成的群組；及(c)分析裝置。60、如權利要求59所述的系統，其中所述細胞及/或大分子穩定化組合物進一步包含增塑劑及抗凝劑。61、如權利要求59所述的系統，其中所述分析裝置選自由下列組成的群組顯微鏡、讀板儀、按大小分級分離用凝膠、熱循環儀、流式細胞儀、自動血液分析儀、細胞分類計數器、細胞分選儀、珠粒、親和基質、分光計及其組合。全文摘要本揭示內容是關于用于保存及/或穩定化細胞(例如，全細胞)的組合物、系統及方法。細胞及/或大分子穩定化組合物可包括螯合劑、螯合劑增強組份及任選堿基(例如，嘌呤堿基或嘧啶堿基)。細胞穩定化方法可包括使細胞與細胞及/或大分子穩定化組合物接觸。細胞穩定化系統可包括適于容納含有細胞及細胞及/或大分子穩定化組合物的樣品的容器。細胞可在環境條件(例如，不冷藏)下保存及/或穩定化。細胞可包括蛋白質、核酸及/或細胞保存及/或穩定化的另一生物分子標記。組合物可構造為可保存及/或穩定化一種或多種用于流式細胞術分析的細胞及同時保存及/或穩定化一種或多種用于分子分析的細胞內核酸。文檔編號C12N15/10GK101668854SQ200880013925公開日2010年3月10日申請日期2008年3月14日優先權日2007年3月14日發明者托尼·貝克申請人:謝拉分子公司