專利名稱：一種新型生物微膠囊的分裝方法
技術領域：
本發明涉及一種撥i膠囊分裝方法，特別涉及一種新型生物微膠囊的分裝方法。
背景技術：
微膠囊的制備技術起源于20世紀50年代，在70年代中期得到迅猛發展，出現了許多微膠囊化產品和工藝，微膠囊化的方法已經在醫藥、農業和化工等方面得到了廣泛的應用。
鑒于微膠囊化帶來的巨大優越性，目前越來越多的科學工作者正把微膠囊技術應用于更為廣泛的領域中,來改善物質傳遞體系的運行，而且未來還可能有其他用途。用于制備微膠囊的方法很多，目前文獻報道的大約有200多種，這些方法在細節方面各有不同。
對于微膠囊工藝的分類主要有三種方法 一、根據涂層方法進行分類；二、根據懸浮介質的性質進行分類；三、根據微膠囊殼材料的原料類別進行分類。
根據涂層法進行分類的常見工藝有七種相分離法、界面聚合法、噴霧干燥和凍結法、離心擠壓法、氣體中懸浮包裹法、靜電沉積法、盤涂法。
以熔點較高的硬化油為壁材的擠壓法微膠囊化是生物微膠囊化常用的一種方法。此方法一般將菌粉作為芯材懸浮于室溫下不流動的疏水物質(如氫化油脂)中，并以油脂及一定比例的明膠和果膠作為雙層壁材。該產品水溶性低，同時由于很多細菌的耐熱溫度低，制備過程中與熔點較高的油脂接觸時死亡率高，而且細菌在油脂中分散極不均勻，因此導致產品質量不穩定。
以海藻酸鈉作為壁材，采取固定化法制備微膠囊化細菌應用較多，但由于細胞是分散于凝膠中，打斷了凝膠網絡的均勻結構，小分子物質容易通過壁材，因此不能很好的阻隔胃液，產品的耐酸性較差；而如果再將油脂噴涂于顆粒表面，雖然制得的產品耐酸性有很大提高，但同樣由于油脂溫度過高，導致細菌死亡率高。
在相分離凝聚法中，以鄰苯二甲酸醋酸纖維素為壁材，將冷凍干燥菌粉和淀粉混合后研磨成微球作為芯材，制得的微膠囊產品通常在醫藥、農業和化學工業中應用，但不能添加于食品中；而用海藻酸鈉作為壁材，采用相分離法制得的產品，與固定化法結構相同，唯一的區別在于顆粒較小，其耐酸性更差。
噴霧冷卻法由于要用到硬化油，因此存在細菌分散不均勻及制備過程中死亡率高的問題，硬化油固化需要充分的冷卻時間和溫度，對設備要求高,而且容易產生粘壁。
雙重乳狀液法，由于細菌液外有一層固化的油脂膜，在菌體與外水相之間形成屏障，因此產品在低pH條件下穩定性高。但此法操作復雜，而且在形成雙重乳狀液的過程中外水相與內水相極易混溶，產品得率低。
發明內容
本發明的目的在于克服現有技術的缺陷，提供一種將微膠囊技術應用到微生物細菌復合配方的分裝上，微膠囊封裝工藝使細菌處于"休眠"狀態，當產品與水混合后，其保護層被溶解，可確保最高劑量的第一代細菌立即投入工作，保質期長的新型生物微膠囊的分裝方法。
本發明的目的是通過以下技術方案實現的一種新型生物微膠囊的分裝方法，該方法步驟如下-
(1) 菌種經篩選的細菌在培養基中生長，通過檢測后，第一代的接種體被轉移到經無菌處理的生物發酵器中進行至少十二小時的生長；
細菌各組份的重量百分比乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)又稱乳酸鏈球菌(Str印tococcus lactis): 20 25%，植物乳桿菌(Lactobacillus plantar iim): 10 20%，枯草芽孢桿菌(Bacillussubt i 1 is ) : 30 45% ， 啤酒酵母或釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae): 18 35%，屎鏈球菌(Streptococcus faeci u m)又稱屎腸球菌(Enterococcus faecium): 5 15%;
(2) 培養發酵質量檢測確認純度后，接種體被轉移到密封無
菌的不銹鋼發酵器中，無菌的糖及氧氣供應給細菌并控制適當的PH，pH值在5.5 9.5之間，整個周期內，會定期抽樣檢查無雜菌狀況和生長指標；
6(3) 溫和超離心24小時以內，就可以收獲經溫和超離心作用而濃縮的細菌；
(4) 芯材將細菌與分散保護劑乳清和糖蜜的干燥組份混勻，
細菌的重量百分比為80 90%，乳清的重量百分比為5 20%，糖蜜的重量百分比為1 5%;混勻后加入水分并控制水分含量在10%左右，形成芯材，將芯材加入到多孔旋轉圓筒內筒中；
(5) 壁材將3-葡聚糖與蔗糖的干燥組份混勻，3-葡聚糖的重量百分比為40 75%，蔗糖的重量百分比為25 60%，混勻后加入水分并控制水分含量在50%左右，形成壁材糊狀溶液，加入到多孔旋轉圓筒外筒中；
(6) 微膠囊制成采用多孔離心法，應用多孔旋轉圓筒裝置，經高速離心，生成50 100um微膠囊。當內部圓筒旋轉時，由于離心力作用向水平方向飛出的內芯物，在通過外筒壁的孔洞時，被沿著外筒壁流下的外膜液體(壁材)所包覆，然后在外筒外面的硬化裝置中硬化，生成外膜，形成微膠囊；
(7) 固化隨后產品在流體冷凍系統里被快速冷凍；
(8) 干燥大型冷凍室，溫度在-4.5 (TC條件下，進行2 4天的冷凍干燥，兩次冷凍干燥過程消除了 95%的水分，確保了菌種的高存活率。
本發明采用以上技術方案后，可以獲得以下有益效果
1、創造性。本發明的穩定性明顯好于采用其他微膠囊技術所制 的產品，由于采用親水性玻璃態基質e -葡聚糖與蔗糖的混合物為壁材，空氣擴散進入的速率非常慢，因而能阻隔水分及氧氣對芯材的作 用。
2、 保質期長。本發明延長了產品的保質期至少可達2年。
3、 成本低。本發明使細菌處于"休眠"狀態，當產品與水混合 后，其保護層被溶解，可確保最高劑量的第一代細菌立即投入工作。 盡管此工藝比噴霧干燥工藝要昂貴一些，但其良好的阻氧性彌補了這 點不足，使其應用成本還低于噴霧干燥法。
4、 效力好。生物產品通常采用液體和粉末兩種形態，由于生物 產品多數是活性有機體，因此大多數生產廠家在液體和干燥的微生物 產品中加入食物源，這些食物源一般是谷類食物，當微生物(細菌) 在這種非實驗室條件下(具體的pH值，溫度，食物源)攝食和繁殖 的時候，產品的效力快速減弱，當這些產品被客戶購買使用的時候， 產品的效力已無法得到保障。雖然一些廠家在產品中使用抑制劑來阻 止細菌的攝食和繁殖，但這類液體和粉末產品的保質期仍非常短。一 般僅為3-6個月，而本發明則至少可達2年。
5、 有效菌含量高。本發明生產的產品有效菌含量可達30-50億/克。
6、 產品穩定。本發明中的e -葡聚糖與蔗糖的混合物形成的壁材， 與細菌的生物相容性極高，利于細菌活性的維持，優于其它壁材。
7、 效率高。現有技術的相分離法形成的凝膠顆粒小，相對表面 積較大，處于表層的菌體量也較多，因而泄漏的菌體也多，產率較小， 本發明的多孔離心法基本上無菌體泄漏，因此微膠囊化產率和效率都比較高。
8、 使用安全。本發明每批產品都經過無沙門氏菌檢測。所用材 料對人畜、動植物無害，具環境生態安全性。使用安全。
9、 性能參數優于現有技術。
微膠囊化產率 70% (相分離凝聚法)98% (本發明) 微膠囊化效率 80% (相分離凝聚法)99% (本發明)。
具體實施例方式
下面結合具體實施例對本發明作進一步詳細說明 實施例1
所述分裝方法步驟如下-(1)經篩選的細菌在培養基中生長，通過檢測后，第一代的接 種體被轉移到經無菌處理的250升生物發酵器中進行至少十二小時的 生長；
細菌各組份的重量百分比乳酸乳球菌(Lactococcus lactis) 又稱乳酸鏈球菌(Str印tococcus lactis) : 20 25%，植物乳桿菌 (Lactobacillus plantar u m) : 10 20%，枯草芽孢桿菌(Bacillus subtil is) : 30 45%，啤酒酵母或釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) : 18 35%，屎鏈球菌(Streptococcus faecium)又 稱屎腸球菌(Enterococcus faecitim) : 5~15%;
(2)質量檢測確認純度后，接種體被轉移到密封無菌的5000升不 銹鋼發酵器中，無菌的糖及氧氣供應給細菌并控制適當的PH， pH值平均范圍在5.5 9.5之間，整個周期內，會定期抽樣檢査無雜菌狀況 和生長指標；
(3) 24小時以內，就可以收獲經溫和超離心作用而濃縮的細菌。
(4) 芯材將細菌與分散保護劑乳清和糖蜜的干燥組份混勻， 細菌的重量百分比為80 90%，乳清的重量百分比為5 20%，糖蜜的 重量百分比為1 5%;混勻后加入水分并控制水分含量在10%左右， 形成芯材；將芯材加入到多孔旋轉圓筒內筒中；
(5) 壁材將e-葡聚糖與蔗糖的干燥組份混勻，葡聚糖的 重量百分比為40 75%，蔗糖的重量百分比為25 60%;混勻后加入 水分并控制水分含量在50%左右，形成壁材糊狀溶液，加入到多孔旋 轉圓筒外筒中；
(6) 微膠囊制成采用多孔離心法，應用多孔旋轉圓筒裝置， 經高速離心，生成50 100um微膠囊。當內部圓筒旋轉時，由于離 心力作用向水平方向飛出的內芯物，在通過外筒壁的孔洞時，被沿著 外筒壁流下的外膜液體(壁材)所包覆，然后在外筒外面的硬化裝置 中硬化，生成外膜，形成微膠囊；
(7) 隨后產品在流體冷凍系統里被快速冷凍，在大型冷凍室， 溫度為-4.5 (TC條件下，進行2 4天的冷凍干燥，兩次冷凍干燥過 程消除了 95%的水分，確保了菌種的高存活率；
(8) 每批產品都經過無沙門氏菌檢測。
所述菌種乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)又稱乳酸鏈球菌 (Streptococcus lactis)、 植物季L桿菌(Lactobacillus plantarum)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、啤酒酵母或釀酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae)、屎鏈球菌(Streptococcus faecium) 又稱屎腸球菌(Enterococcusfaecium)，均采購自"廣東省微生物 研究所"，其它單位和個人均可通過向此單位購買而隨時獲得上述菌 種。
上述菌種在自然界是廣泛存在的，非基因工程改造產物，已被我 國農業部列入《允許使用的飼料添加劑品種目錄》，說明以上菌種無 毒，對人畜、動植物無害，具環境生態安全性。
本發明中的多孔離心法為現有技術。 本發明中的機械裝置-多孔旋轉圓筒可采用現有技術。
本發明的其他工藝可采用現有技術，其分裝芯物不限于本實施例 所述，亦可分裝其他微生物，分裝方便，保質期限長。
實施例2
所述分裝方法步驟如下 (1)經篩選的細菌在培養基中生長，通過檢測后，第一代的接 種體被轉移到經無菌處理的250升生物發酵器中進行十二小時的生 長；
細菌各組份的重量百分比乳酸乳球菌(Lactococcus lactis) 又稱乳酸鏈球菌(Str印tococcus lactis): 20%,植物乳桿菌 (Lactobacillus plantar iim): 15%， 枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis): 35%,啤酒酵母或酉良酒酵母(Saccharomyces cerevisiae):20% ， 屎鏈球菌 (Streptococcus faeci um) 又稱屎腸球菌 (Enterococcus faeci um): 10%;
(2) 質量檢測確認純度后，接種體被轉移到密封無菌的5000升 不銹鋼發酵器中。無菌的糖及氧氣供應給細菌并控制適當的pH。 PH 值為9.5，整個周期內，會定期抽樣檢査無雜菌狀況和生長指標；
(3) 24小時，就可以收獲經溫和超離心作用而濃縮的細菌；
(4) 芯材將細菌與分散保護劑乳清和糖蜜的干燥組份混勻， 細菌的重量百分比為80%,乳清的重量百分比為15%,糖蜜的重量百 分比為5%;混勻后加入水分并控制水分含量在10%左右，形成芯材； 將芯材加入到多孔旋轉圓筒內筒中；
(5) 壁材將e-葡聚糖與蔗糖的干燥組份混勻，e-葡聚糖的
重量百分比為75%,蔗糖的重量百分比為25%;混勻后加入水分并控 制水分含量在50.5%，形成壁材糊狀溶液，加入到多孔旋轉圓筒外 筒中；
(6) 微膠囊制成采用多孔離心法，應用多孔旋轉圓筒裝置， 經高速離心，生成50pm微膠囊。當內部圓筒旋轉時，由于離心力作 用向水平方向飛出的內芯物，在通過外筒壁的孔洞時，被沿著外筒壁 流下的外膜液體(壁材)所包覆，然后在外筒外面的硬化裝置中硬化， 生成外膜，形成微膠囊；
(7) 隨后產品在流體冷凍系統里被快速冷凍，并在大型冷凍室， -0.5-C條件下，進行3天的冷凍干燥，兩次冷凍干燥過程消除了 95% 的水分，確保了菌種的高存活率(8)每批產品都經過無沙門氏菌檢測。 其他與實施例l相同。
實施例3
所述分裝方法步驟如下-
(1) 經篩選的細菌在培養基中生長，通過檢測后，第一代的接 種體被轉移到經無菌處理的250升生物發酵器中進行十六小時的生 長；
細菌各組份的重量百分比乳酸乳球菌(Lactococcus lactis) 又稱乳酸鏈球菌(Str印tococcus lactis): 25%，植物乳桿菌
(Lactobacillus plantar pm): 20%， 枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis): 30%,啤酒酵母或酉良酒酵母(Saccharomyces cerevisiae): 18% , 屎鏈球菌(Str印tococcus faeci um) 又稱屎腸球菌
(Enterococcus faeci踐)7%;
(2) 質量檢測確認純度后，接種體被轉移到密封無菌的5000升 不銹鋼發酵器中。無菌的糖及氧氣供應給細菌并控制適當的pH， pH 值7.5，整個周期內，會定期抽樣檢査無雜菌狀況和生長指標；
(3) 18小時，就可以收獲經溫和超離心作用而濃縮的細菌；
(4) 芯材將細菌與分散保護劑乳清和糖蜜的干燥組份混勻， 細菌的重量百分比為90%，乳清的重量百分比為5%，糖蜜的重量百分
比為5%;混勻后加入水分并控制水分含量在10%左右，形成芯材；將
芯材加入到多孔旋轉圓筒內筒中；(5) 壁材將P-葡聚糖與蔗糖的干燥組份混勻，葡聚糖的重 量百分比為40%，蔗糖的重量百分比為60%;混勻后加入水分并控制 水分含量在49. 3%，形成壁材糊狀溶液，加入到多孔旋轉圓筒外筒中；
(6) 微膠囊制成采用多孔離心法，應用多孔旋轉圓筒裝置，經
高速離心，生成60nm微膠囊。當內部圓筒旋轉時，由于離心力作用 向水平方向飛出的內芯物，在通過外筒壁的孔洞時，被沿著外筒壁流 下的外膜液體(壁材)所包覆，然后在外筒外面的硬化裝置中硬化， 生成外膜，形成微膠囊；
(7) 隨后產品在流體冷凍系統里被快速冷凍，并在大型冷凍室， -2.5°〇條件下，進行2天的冷凍干燥，兩次冷凍干燥過程消除了 95% 的水分，確保了菌種的高存活率；
(8) 每批產品都經過無沙門氏菌檢測。 其他與實施例l相同。
實施例4
所述分裝方法步驟如下 (1)經篩選的細菌在培養基中生長，通過檢測后，第一代的接 種體被轉移到經無菌處理的250升生物發酵器中進行十八小時的生 長。細菌各組份的重量百分比乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)又 稱乳酸鏈球菌(Streptococcus lactis): 20%,植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum): 10%，枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis): 43%，啤 酒酵母或酸酒酵母(Saccharomyces cerevisiae): 22%，屎鏈球菌(Streptococcus faeci Pm) 又禾爾屎腸球菌 (Enterococcus faecilim): 5%;
(2) 質量檢測確認純度后，接種體被轉移到密封無菌的5000升 不銹鋼發酵器中，無菌的糖及氧氣供應給細菌并控制適當的pH， pH 值5.5，整個周期內，會定期抽樣檢查無雜菌狀況和生長指標；
(3) 20小時，就可以收獲經溫和超離心作用而濃縮的細菌；
(4) 芯材將細菌與分散保護劑乳清和糖蜜的干燥組份混勻， 細菌的重量百分比為85%,乳清的重量百分比為10%，糖蜜的重量百 分比為5%;混勻后加入水分并控制水分含量在10%左右，形成芯材； 將芯材加入到多孔旋轉圓筒內筒中；
(5) 壁材將P-葡聚糖與蔗糖的干燥組份混勻，葡聚糖的 重量百分比為50%，蔗糖的重量百分比為50%;混勻后加入水分并控 制水分含量在50.9%，形成壁材糊狀溶液，加入到多孔旋轉圓筒外筒 中；
(6) 微膠囊制成采用多孔離心法，應用多孔旋轉圓筒裝置， 經高速離心，生成100um微膠囊。當內部圓筒旋轉時，由于離心力 作用向水平方向飛出的內芯物，在通過外筒壁的孔洞時，被沿著外筒 壁流下的外膜液體(壁材)所包覆，然后在外筒外面的硬化裝置中硬 化，生成外膜，形成微膠囊；
(7) 隨后產品在流體冷凍系統里被快速冷凍，并在大型冷凍室， -4"C條件下，進行3天的冷凍干燥，兩次冷凍干燥過程消除了 95%的 水分，確保了菌種的高存活率；(8)每批產品都經過無沙門氏菌檢測。 其他與實施例l相同。
實施例5
所述分裝方法步驟如下
(1) 經篩選的細菌在培養基中生長，通過檢測后，第一代的接 種體被轉移到經無菌處理的250升生物發酵器中進行二十小時的生 長；
細菌各組份的重量百分比乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)又 稱乳酸鏈球菌(Streptococcus lactis): 22%,植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum): 18%，枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis): 30%，啤 酒酵母或釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae): 22%,屎鏈球菌 (Streptococcus faeciym ) 又禾爾屎腸球菌 (Enterococcus faecipm): 8%;
(2) 質量檢測確認純度后，接種體被轉移到密封無菌的5000升 不銹鋼發酵器中，無菌的糖及氧氣供應給細菌并控制適當的pH， pH 值6.55，整個周期內，會定期抽樣檢查無雜菌狀況和生長指標；
(3) 6小時后，就可以收獲經溫和超離心作用而濃縮的細菌；
(4) 芯材將細菌與分散保護劑乳清和糖蜜的干燥組份混勻，
細菌的重量百分比為90%,乳清的重量百分比為8%，糖蜜的重量百分
比為2%;混勻后加入水分并控制水分含量在10%左右，形成芯材；將 芯材加入到多孔旋轉圓筒內筒中；(5) 壁材將P-葡聚糖與蔗糖的干燥組份混勻，3-葡聚糖的重 量百分比為60%，蔗糖的重量百分比為40%;混勻后加入水分并控制 水分含量在49.8%，形成壁材糊狀溶液，加入到多孔旋轉圓筒外筒中；
(6) 微膠囊制成采用多孔離心法，應用多孔旋轉圓筒裝置，經
高速離心，生成80um微膠囊。當內部圓筒旋轉時，由于離心力作用 向水平方向飛出的內芯物，在通過外筒壁的孔洞時，被沿著外筒壁流 下的外膜液體(壁材)所包覆，然后在外筒外面的硬化裝置中硬化， 生成外膜，形成微膠囊；
(7) 隨后產品在流體冷凍系統里被快速冷凍，并在大型冷凍室， -1.5'C條件下，進行3天的冷凍干燥，兩次冷凍干燥過程消除了 95% 的水分，確保了菌種的高存活率；
(8) 每批產品都經過無沙門氏菌檢測。 其他與實施例l相同。
實施例6
所述分裝方法步驟如下 (1)經篩選的細菌在培養基中生長，通過檢測后，第一代的接 種體被轉移到經無菌處理的250升生物發酵器中進行二十三小時的 生長；
細菌各組份的重量百分比乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)又 稱乳酸鏈球菌(Streptococcus lactis): 21°/。，植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum): 12%，枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis): 32%，啤
17酒酵母或釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae): 25%，屎鏈球菌 (Streptococcus faecium ) 又禾爾屎腸球菌 (Enterococcus faecium): 10%;
(2) 質量檢測確認純度后，接種體被轉移到密封無菌的5000升 不銹鋼發酵器中，無菌的糖及氧氣供應給細菌并控制適當的pH， pH 值7.4，整個周期內，會定期抽樣檢査無雜菌狀況和生長指標；
(3) 13小時后，就可以收獲經溫和超離心作用而濃縮的細菌；
(4) 芯材將細菌與分散保護劑乳清和糖蜜的干燥組份混勻，
細菌的重量百分比為83%，乳清的重量百分比為13%，糖蜜的重量百
分比為4%;混勻后加入水分并控制水分含量在10%左右，形成芯材； 將芯材加入到多孔旋轉圓筒內筒中；
(5) 壁材將e-葡聚糖與蔗糖的干燥組份混勻，3-葡聚糖的
重量百分比為55%，蔗糖的重量百分比為45%;混勻后加入水分并控 制水分含量在50.6%，形成壁材糊狀溶液，加入到多孔旋轉圓筒外筒 中；
(6) 微膠囊制成采用多孔離心法，應用多孔旋轉圓筒裝置，
經高速離心，生成90ym微膠囊。當內部圓筒旋轉時，由于離心力作 用向水平方向飛出的內芯物，在通過外筒壁的孔洞時，被沿著外筒壁 流下的外膜液體(壁材)所包覆，然后在外筒外面的硬化裝置中硬化， 生成外膜，形成微膠囊；
(7) 隨后產品在流體冷凍系統里被快速冷凍，并在大型冷凍室， -3.5r條件下，進行4天的冷凍干燥，兩次冷凍干燥過程消除了 95%的水分，確保了菌種的高存活率；
(8)每批產品都經過無沙門氏菌檢測。 其他與實施例l相同。
實施例7
所述分裝方法步驟如下-(1)經篩選的細菌在培養基中生長，通過檢測后，第一代的接 種體被轉移到經無菌處理的250升生物發酵器中進行十五小時的生 長；
細菌各組份的重量百分比乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)又 稱乳酸鏈球菌(Streptococcus lactis): 20%,植物乳桿菌(Lactobacillus plantarpm): 20%，枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis): 30%，啤 酒酵母或酉良、酒酵母(Saccharomyces cerevisiae): 18%，尿鏈球菌 (Streptococcus faecium ) 又禾爾屎腸球菌 (Enterococcus faecilim): 12%;
(2)質量檢測確認純度后，接種體被轉移到密封無菌的5000升不 銹鋼發酵器中，無菌的糖及氧氣供應給細菌并控制適當的PH， pH值 8.5，整個周期內，會定期抽樣檢査無雜菌狀況和生長指標；
(3) 16小時后，就可以收獲經溫和超離心作用而濃縮的細菌；
(4) 芯材將細菌與分散保護劑乳清和糖蜜的干燥組份混勻， 細菌的重量百分比為88%，乳清的重量百分比為8%，糖蜜的重量百分
比為4%;混勻后加入水分并控制水分含量在10%左右，形成芯材；將芯材加入到多孔旋轉圓筒內筒中；
(5) 壁材將e-葡聚糖與蔗糖的干燥組份混勻，葡聚糖的重 量百分比為70%，蔗糖的重量百分比為30%;混勻后加入水分并控制 水分含量在49. 8%，形成壁材糊狀溶液，加入到多孔旋轉圓筒外筒中；
(6) 微膠囊制成采用多孔離心法，應用多孔旋轉圓筒裝置，經 高速離心，生成85um微膠囊。當內部圓筒旋轉時，由于離心力作用 向水平方向飛出的內芯物，在通過外筒壁的孔洞時，被沿著外筒壁流 下的外膜液體(壁材)所包覆，然后在外筒外面的硬化裝置中硬化， 生成外膜，形成微膠囊；
(7) 隨后產品在流體冷凍系統里被快速冷凍，并在大型冷凍室， -2.6。C條件下，進行4天的冷凍干燥，兩次冷凍干燥過程消除了95% 的水分，確保了菌種的高存活率；
(8) 每批產品都經過無沙門氏菌檢測。 其他與實施例l相同。
實施例8
所述分裝方法步驟如下 (1)經篩選的細菌在培養基中生長，通過檢測后，第一代的接 種體被轉移到經無菌處理的250升生物發酵器中進行十九小時的生 長；
細菌各組份的重量百分比乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)又 稱乳酸鏈球菌(Streptococcus lactis): 23%，植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum): 17%，枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis): 35%,啤 酒酵母或酉良、酒酵母(Saccharomyces cerevisiae): 20%，尿鏈球菌 (Streptococcus faeci um) 又禾爾屎腸球菌 (Enterococcus faeciym): 5%;
(2) 質量檢測確認純度后，接種體被轉移到密封無菌的5000升 不銹鋼發酵器中，無菌的糖及氧氣供應給細菌并控制適當的pH， pH 值7，整個周期內，會定期抽樣檢查無雜菌狀況和生長指標；
(3) 4小時后，就可以收獲經溫和超離心作用而濃縮的細菌；
(4) 芯材將細菌與分散保護劑乳清和糖蜜的干燥組份混勻，
細菌的重量百分比為82%，乳清的重量百分比為16%，糖蜜的重量百
分比為2%;混勻后加入水分并控制水分含量在10%左右，形成芯材； 將芯材加入到多孔旋轉圓筒內筒中；
(5) 壁材將P-葡聚糖與蔗糖的干燥組份混勻，e-葡聚糖的重 量百分比為66%，蔗糖的重量百分比為34%;混勻后加入水分并控制 水分含量在50%，形成壁材糊狀溶液，加入到多孔旋轉圓筒外筒中；
(6) 微膠囊制成采用多孔離心法，應用多孔旋轉圓筒裝置，經
高速離心，生成55um微膠囊。當內部圓筒旋轉時，由于離心力作用 向水平方向飛出的內芯物，在通過外筒壁的孔洞時，被沿著外筒壁流 下的外膜液體(壁材)所包覆，然后在外筒外面的硬化裝置中硬化， 生成外膜，形成微膠囊；
(7) 隨后產品在流體冷凍系統里被快速冷凍，并在大型冷凍室， -3.5'C條件下，進行3天的冷凍干燥，兩次冷凍干燥過程消除了95%的水分，確保了菌種的高存活率；
(8)每批產品都經過無沙門氏菌檢測。 其他與實施例l相同。
實施例9
所述分裝方法步驟如下-(1)經篩選的細菌在培養基中生長，通過檢測后，第一代的接 種體被轉移到經無菌處理的250升生物發酵器中進行十九小時的生 長；
細菌各組份的重量百分比乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)又 稱乳酸鏈球菌(Str印tococcuslactis): 25%，植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum): 10%，枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis): 40%,啤 酒酵母或酉良、酒酵母(Saccharomyces cerevisiae): 20%，尿鏈球菌 (Streptococcus faeci um) 又稱屎腸球菌 (Enterococcus faecium): 5%;
(2)質量檢測確認純度后，接種體被轉移到密封無菌的5000升不 銹鋼發酵器中，無菌的糖及氧氣供應給細菌并控制適當的PH， pH值 5.8，整個周期內，會定期抽樣檢査無雜菌狀況和生長指標；
(3) 8小時后，就可以收獲經溫和超離心作用而濃縮的細菌；
(4) 芯材將細菌與分散保護劑乳清和糖蜜的干燥組份混勻， 細菌的重量百分比為90%,乳清的重量百分比為5%，糖蜜的重量百分
比為5%;混勻后加入水分并控制水分含量在10%左右，形成芯材；將芯材加入到多孔旋轉圓筒內筒中；
(5) 壁材將6-葡聚糖與蔗糖的干燥組份混勻，0-葡聚糖的重 量百分比為75%，蔗糖的重量百分比為25%;混勻后加入水分并控制 水分含量在50. 6%，形成壁材糊狀溶液，加入到多孔旋轉圓筒外筒中；
(6) 微膠囊制成采用多孔離心法，應用多孔旋轉圓筒裝置，經
高速離心，生成75iim微膠囊。當內部圓筒旋轉時，由于離心力作用 向水平方向飛出的內芯物，在通過外筒壁的孔洞時，被沿著外筒壁流 下的外膜液體(壁材)所包覆，然后在外筒外面的硬化裝置中硬化， 生成外膜，形成微膠囊；
(7) 隨后產品在流體冷凍系統里被快速冷凍，并在大型冷凍室， -0.6'C條件下，進行4天的冷凍干燥，兩次冷凍干燥過程消除了 95% 的水分，確保了菌種的高存活率；
(8) 每批產品都經過無沙門氏菌檢測。 其他與實施例l相同。
實施例10
所述分裝方法步驟如下 (1)經篩選的細菌在培養基中生長，通過檢測后，第一代的接 種體被轉移到經無菌處理的250升生物發酵器中進行二十六小時的 生長；
細菌各組份的重量百分比乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)又 稱乳酸鏈球菌(Streptococcus lactis): 22%，植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum): 10%，枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis): 33%，啤 酒酵母或酉良、酒酵母(Saccharomyces cerevisiae): 30%，尿鏈球菌 (Streptococcus faecium ) 又禾爾屎腸球菌 (Enterococcus faecium): 5%;
(2) 質量檢測確認純度后，接種體被轉移到密封無菌的5000升 不銹鋼發酵器中，無菌的糖及氧氣供應給細菌并控制適當的pH， pH 值8.5，整個周期內，會定期抽樣檢査無雜菌狀況和生長指標；
(3) 3小時，就可以收獲經溫和超離心作用而濃縮的細菌；
(4) 芯材將細菌與分散保護劑乳清和糖蜜的干燥組份混勻， 細菌的重量百分比為85%，乳清的重量百分比為10%，糖蜜的重量百 分比為5%;混勻后加入水分并控制水分含量在10%左右，形成芯材； 將芯材加入到多孔旋轉圓筒內筒中；
(5) 壁材將P-葡聚糖與蔗糖的干燥組份混勻，p-葡聚糖的重 量百分比為50%，蔗糖的重量百分比為50%;混勻后加入水分并控制 水分含量在49. 8%，形成壁材糊狀溶液，加入到多孔旋轉圓筒外筒中；
(6) 微膠囊制成采用多孔離心法，應用多孔旋轉圓筒裝置，經
高速離心，生成95um微膠囊。當內部圓筒旋轉時，由于離心力作用 向水平方向飛出的內芯物，在通過外筒壁的孔洞時，被沿著外筒壁流 下的外膜液體(壁材)所包覆，然后在外筒外面的硬化裝置中硬化， 生成外膜，形成微膠囊；
(7) 隨后產品在流體冷凍系統里被快速冷凍，并在大型冷凍室， -1.8匸條件下，進行2天的冷凍干燥，兩次冷凍干燥過程消除了 95%的水分，確保了菌種的高存活率；
(8)每批產品都經過無沙門氏菌檢測。 其他與實施例l相同。
本發明的最佳實施例己經闡明，本領域普通技術人員根據本發明 所做的進一步拓展均落入本發明范圍。
權利要求
1、一種新型生物微膠囊的分裝方法，其特征在于(1)菌種經篩選的細菌在培養基中生長，通過檢測后，第一代的接種體被轉移到經無菌處理的生物發酵器中進行至少十二小時的生長；細菌各組份的重量百分比乳酸乳球菌20～25％，植物乳桿菌10～20％，枯草芽孢桿菌30～45％，啤酒酵母或釀酒酵母18～35％，屎鏈球菌5～15％；(2)培養發酵質量檢測確認純度后，接種體被轉移到密封無菌的不銹鋼發酵器中，無菌的糖及氧氣供應給細菌并控制適當的pH，pH值在5.5～9.5之間，整個周期內，會定期抽樣檢查無雜菌狀況和生長指標；(3)溫和超離心24小時以內，就可以收獲經溫和超離心作用而濃縮的細菌；(4)芯材將細菌與分散保護劑乳清和糖蜜的干燥組份混勻，細菌的重量百分比為80～90％，乳清的重量百分比為5～20％，糖蜜的重量百分比為1～5％；混勻后加入水分并控制水分含量在10％左右，形成芯材；將芯材加入到多孔旋轉圓筒內筒中；(5)壁材將β-葡聚糖與蔗糖的干燥組份混勻，β-葡聚糖的重量百分比為40～75％，蔗糖的重量百分比為25～60％；混勻后加入水分并控制水分含量在50％左右，形成壁材糊狀溶液，加入到多孔旋轉圓筒外筒中；(6)微膠囊制成采用多孔離心法，應用多孔旋轉圓筒裝置，經高速離心，生產出50～100μm微膠囊。當內部圓筒旋轉時，由于離心力作用向水平方向飛出的內芯物，在通過外筒壁的孔洞時，被沿著外筒壁流下的外膜液體(壁材)所包覆，然后在外筒外面的硬化裝置中硬化，生成外膜，形成微膠囊；(7)固化隨后產品在流體冷凍系統里被快速冷凍；(8)干燥在大型冷凍室，溫度在-4.5～0℃條件下，進行2～4天的冷凍干燥，兩次冷凍干燥過程消除了95％的水分，確保了菌種的高存活率。
全文摘要
一種新型生物微膠囊的分裝方法，步驟菌種篩選細菌乳酸乳球菌20～25％，植物乳桿菌10～20％，枯草芽孢桿菌30～45％，啤酒酵母或釀酒酵母18～35％，屎鏈球菌5～15％；至少十二小時生長；檢測，24小時內，獲濃縮細菌；芯材將細菌與分散保護劑乳清和糖蜜干燥組份混勻，細菌重量百分比80～90％，乳清重量百分比5～20％，糖蜜重量百分比1～5％；水分控制在10％左右，加至多孔旋轉圓筒內筒中；壁材將β-葡聚糖與蔗糖干燥組份混勻，β-葡聚糖重量百分比40～75％，蔗糖重量百分比25～60％，水分控制在50％左右，加至多孔旋轉圓筒外筒中；高速離心，生成微膠囊；固化，干燥。
文檔編號C12N1/16GK101676386SQ20081021198
公開日2010年3月24日 申請日期2008年9月16日 優先權日2008年9月16日
發明者范德朋 申請人:佛山市楚一科技有限公司