專利名稱：一種從青占魚魚骨中提取復合多肽液的方法
技術領域：
本發明涉及復合多肽液提取的方法，特別是涉及一種從青占魚魚骨中提取 復合多肽液的方法。
背景技術：
青占魚作為低值海洋魚類屬于海洋中的中上層回流魚類，近年來，漁獲物 中低值小型魚蝦的比重逐漸上升。浙江省溫州市作為海洋資源大市，其海洋資源 非常豐富，而青占魚也是低值魚中占比重較大的一塊。溫州的名小吃溫州魚丸, 有時也叫溫州魚面，在溫州地區非常流行，這個魚丸就是用青占魚肉制成的， 而每年產生的大量青占魚骨多用作加工價格低廉的魚粉飼料，或者被作垃圾拋 棄，成為不可回收垃圾，造成資源的極大浪費。這些青占魚經濟價值仍然未得 到充分的利用，青占魚骨中蛋白含量高，蛋白中支鏈蛋白含量也較高，若將這
些青占魚魚骨生產高F值復合多肽液，不僅可滿足我省大力發展的體育事業對高 品質營養補給劑的要求，而且可以拓寬青占魚骨深加工途徑，并將成為海洋經 濟的新的增長點。因此，本項目擬研究利用青占魚魚骨為原料，通過多酶聯合 水解，將其加工成富含高F值小肽的，具有顯著抗疲勞功效的多肽營養液。
發明內容
本發明的目的在于提供一種工藝簡單、氨基態氮濃度較高的青占魚魚骨中 提取復合多肽液的方法。
本發明為達到以上目的，是通過這樣的技術方案來實現的 一種從青占魚魚骨中提取復合多肽液的方法，依次包括以下步驟
1) 預處理青占魚魚骨，將其洗凈、絞碎，用去離子水浸泡2-4小時；
2) 酶解用亞麻布過濾除去去離子水，將上述魚骨按l: 5-l:10的質量比例 的加入水，按魚骨質量的1%-5%量按動物蛋白水解酶和中性蛋白酶的質量比為 3:1-1:3的比例加入酶，調節pH在5.5-8.5，然后在45-70。C溫度下酶解3-7個小時；
3) 滅酶將上述酶解液90-10(TC加熱15-30分鐘，以使酶失活；
4) 過濾將上述酶解液用亞麻布過濾，濾液在2000-4000rpm離心10-15min， 得到的上清液通過GPC凝膠凈化，再通過0.22pm孔徑的濾膜過濾除菌，即得到 無菌的復合多肽液；其中氨基態氮濃度為955.48 mg'(100ml)"—l 169.32 mg.(100m1)-1。所述中性蛋白酶為酶活7萬、11萬或13萬的中性蛋白酶。 本發明具有的有益效果是該發明首次使用青占魚魚骨提取復合多肽液，
廢物利用，提取工藝簡單、氨基態氮濃度較高，動物試驗證明抗疲勞效果顯著。
具體實施例方式
實施例l: 一種從青占魚魚骨中提取復合多肽液的方法，依次包括以下步驟:
1) 、預處理稱取30克青占魚魚骨，將其洗凈、絞碎，用去離子水浸泡2小
時；
2) 、酶解用亞麻布過濾除去去離子水，將上述魚骨加入150毫升的水，加 入龐博公司的動物蛋白水解酶0.225§，酶活7萬的中性蛋白酶0.075g，調節pH為 5.5，然后在45t:溫度下酶解3個小時；
3) 、滅酶將上述酶解液9(TC加熱30分鐘，以使酶失活；
4) 、過濾將上述酶解液用用亞麻布過濾，濾液在2000rpm離心10min，得 到的上清液通過GPC凝膠凈化，再通過0.22pm孔徑的濾膜過濾除菌，即得到無 菌的復合多肽液，其中氨基態氮濃度為955.48 mg乂lOOml)-1。
實施例2: —種從青占魚魚骨中提取復合多肽的方法，依次包括以下步驟
1) 、預處理稱取30克青占魚魚骨，將其洗凈、絞碎，用去離子水浸泡4小
時；
2) 、酶解用亞麻布過濾除去去離子水，將上述魚骨加入300毫升的水，加 入龐博公司的動物蛋白水解酶0.6g，酶活13萬的中性蛋白酶0.3g，調節pH為7.5， 然后在50'C酶解4.5小時；
3) 、滅酶將上述酶解液10(TC加熱15分鐘，以使酶失活；
4) 、過濾將上述酶解液用亞麻布過濾，濾液在4000rpm離心15min，得到 的上清液通過GPC凝膠凈化，再通過0.22)im孔徑的濾膜過濾除菌，即得到無菌 的復合多肽液；其中氨基態氮濃度為1169.32 mg'(lOOml)"。
實施例3: —種從青占魚魚骨中提取復合多肽的方法，依次包括以下步驟
1) 、預處理稱取30克青占魚魚骨，將其洗凈、絞碎，用去離子水浸泡3小
時；
2) 、酶解用亞麻布過濾除去去離子水，將上述魚骨加入240毫升的水，加 入龐博公司的動物蛋白水解酶0.375g，酶活ll萬的中性蛋白酶1.125g，調節pH為 8.5，然后在7(TC酶解7小時；
3) 、滅酶將上述酶解液95。C加熱25分鐘，以使酶失活；
4) 、過濾將上述酶解液用亞麻布過濾，濾液在3000rpm離心12min，得到的上清液通過GPC凝膠凈化，再通過0.22,孔徑的濾膜過濾除菌，即得到無 菌的復合多肽液，其中氨基態氮濃度為1055.48 mg《100mi;r1。
最后，還需要注意的是，以上列舉的僅是本發明的若干個具體實施例。顯 然，本發明不限于以上實施例，還可以有許多變形。本領域的普通技術人員能 從本發明公開的內容直接導出或聯想到的所有變形，均應認為是本發明的保護 范圍。
權利要求
1、一種從青占魚魚骨中提取復合多肽液的方法，其特征在于包括以下步驟1)預處理青占魚魚骨，將其洗凈、絞碎，用去離子水浸泡2-4小時；2)酶解用亞麻布過濾除去去離子水，將上述魚骨按1∶5-1∶10的質量比例的加入水，按魚骨質量的1％-5％量按動物蛋白水解酶和中性蛋白酶的質量比為3∶1-1∶3的比例加入酶，調節pH在5.5-8.5，然后在45-70℃溫度下酶解3-7個小時；3)滅酶將上述酶解液90-100℃加熱15-30分鐘，以使酶失活；4)過濾將上述酶解液用亞麻布過濾，濾液在2000-4000rpm離心10-15min，得到的上清液通過GPC凝膠凈化，再通過0.22μm孔徑的濾膜過濾除菌，即得到無菌的復合多肽液；其中氨基態氮濃度為955.48mg·(100ml)-1—1169.32mg·(100ml)-1。
2、 根據權利要求所述的一種從青占魚魚骨中提取復合多肽液的方法，其特征在于所述中性蛋白酶為酶活7萬、11萬或13萬的中性蛋白酶。
全文摘要
本發明公開了一種從青占魚魚骨中提取復合多肽液的方法。包括以下步驟將青占魚魚骨洗凈、絞碎，用去離子水浸泡；過濾除去去離子水，將魚骨按1∶5-1∶10的質量比例的加入水，按魚骨質量的1％-5％量按動物蛋白水解酶和中性蛋白酶的質量比為3∶1-1∶3的比例加入酶，調節pH在5.5-8.5，然后在45-70℃溫度下酶解；將上述酶解液90-100℃加熱，以使酶失活；用亞麻布過濾，濾液在2000-4000rpm離心10-15min，得到的上清液通過GPC凝膠凈化，再過濾除菌得到復合多肽液；其中氨基態氮濃度為955.48mg·(100ml)<sup>-1</sup>-1169.32mg·(100ml)<sup>-1</sup>。該發明廢物利用，提取工藝簡單、氨基態氮濃度較高，動物試驗證明抗疲勞效果顯著。
文檔編號C12P21/06GK101503728SQ20081016417
公開日2009年8月12日 申請日期2008年12月29日 優先權日2008年12月29日
發明者春 張, 施佳慧, 郭海英 申請人:浙江體育科學研究所