專利名稱：一種魚鱗膠原蛋白肽的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種生物技術，具體涉及的是采用生物技術手段制備魚鱗膠原蛋白肽的方法。
(二)
背景技術：
膠原蛋白肽是一種重要的功能性蛋白質，它是膠原蛋白的水解產物，具有分子量低，易 吸收，低粘度等物理特性，它與細胞增生、分化、運動、免疫、關節潤滑、傷口愈合等密切 相關，具有很強的生物活性。由于膠原蛋白肽的特殊功能，其提取物己被廣泛應用于醫藥、 食品、日用化工、生物合成等工業領域。目前生產膠原蛋白制品的原料基本上是豬、牛等陸 生動物的皮和骨，由于陸生動物的生存環境惡化導致瘋牛病等流行病的發生，使得從陸生動 物的皮、骨中提取的膠原蛋白的危險性增大，從而使其制品的使用受到限制。不少發達國家 已經禁止使用從牛皮和牛骨中提取的膠原蛋白。因此，從水生動物中提取安全、衛生、無害 的膠原蛋白成為這幾年各國研究的一項熱門課題。
近年來，隨著養殖規模的日益擴大和養殖技術的不斷完善，養殖魚類的產量提高很快， 而魚鱗中所含有的豐富膠原蛋白卻未被利用。為充分利用我國現有的豐富的淡水魚資源，提 高其商業價值，降低水產品食品的生產成本，最大限度地提高經濟效益，本項目以魚鱗為原 料，經高溫蒸煮后進行膠體磨磨漿預處理，采用生物法進行水解，膜分離精致后，再經濃縮、 干燥制得膠原蛋白肽粉末。目前，傳統的魚加工業己不能實現魚類資源的充分利用，大量的 魚副產物被拋棄或作為粗飼料，魚經屠宰、采肉后，出肉率僅為30%左右，而有60%以上為下 腳料，如果廢棄掉這部分下腳料將是很大的浪費。我國對魚鱗這一重要的魚副產物的利用還 只是處于初級階段，因此，開展低值淡水魚的深加工的研究，提高副產品的附加值成為但今 研究熱點。
(三)
發明內容
本發明目的在于提供一種制備工藝過程相對其他方法簡單、制備的膠原蛋白肽可完全溶 解于水冷水，水溶液低粘度，在的高濃度下也有流動性，耐酸性能好，在酸、堿的情況下均 無沉淀耐高溫性能好，IO(TC加熱亦無沉淀的魚鱗膠原蛋白肽制備方法。
本發明的目的是這樣實現的
(1) 發酵種子培養基的制備1%大豆蛋白胨，0.5%牛肉粉，0.5%葡萄糖，0. 1%氯化鈉， 0.01%磷酸二氫鉀，其余為蒸餾水，12rC高溫滅菌20分鐘，冷卻后備用；
(2) 發酵種子的制備以枯草芽孢桿菌CICC10071為出發菌株，接種于發酵種子培養基中， 35°C，搖床180r/m，培養48小時，發酵液中枯草芽孢桿菌〉l(f個/ml此時視同為發酵種子 培養成熟；(3) 魚鱗處理過程將新鮮魚鱗洗凈、除雜，加入8倍魚鱗重量的純凈水，經IO(TC蒸煮 30分鐘，冷卻至45。C一50'C，進入膠體磨超微粉碎，漿液透過60目篩網，然后進入發酵罐 121'C高溫滅菌30分鐘后冷卻至35'C等待接種發酵；
(4) 保溫發酵按發酵液體積的5%接種成熟種子，保溫通風發酵60小時；
(5) 分離發酵結束后12rC滅菌10分鐘，冷卻至45'C — 5(TC分離除渣，取上清液準備精
致；
(6) 精致上清液經膜系統分離，將分子量5000以上的大分子截留，取分子量5000以下 的小分子液體；
(7) 干燥將精致液進行真空濃縮至濃度40%左右，然后噴霧干燥得魚鱗膠原蛋白肽粉末 成品。
本發明采用生物技術手段制備魚鱗膠原蛋白肽，具體的說利用枯草芽孢桿菌發酵龜鱗然
后提取膠原蛋白肽的方法。膠原蛋白肽營養及生理功能主要有以下幾方面1)蛋白質營養效 果，其消化吸收率幾乎達100%; 2)保護胃粘膜以及抗潰瘍作用；3)抑制血壓上升作用；4) 促進骨形成作用；5)促進皮膚膠原代謝作用；6)其它還有對關節炎等膠原病具有很好的預 防及治療作用。微生物發酵法生產魚鱗膠原蛋白肽與酶法相比具有很大的優越性首先微生 物可以產生水解酶系作用于底物蛋白，分別切割多種肽鍵，使產物分子量現對較小，而酶法 只能作用于一種肽鍵，而使產物分子量較大，產品中肽的種類比較單一；其次微生物可以定 向修復由于疏水鍵暴露而產生的苦味集團，而酶法無論如何也達不到該項功能；另外微生物 發酵法與酶法相比可以大大降低水解成本。本發明所采用的菌種和水解工藝可以生產出質量
穩定，效果明顯的魚鱗膠原蛋白肽。
本發明制備的膠原蛋白肽可完全溶解于水冷水，水溶液低粘度，在的高濃度K也有流動 性，耐酸性能好，在酸、堿的情況下均無沉淀耐高溫性能好，IOO'C加熱亦無沉淀，由于其分 子量較小，所以更易被人體吸收。膠原多肽與植物性蛋白質相比，其吸收利用率更高。膠原 蛋白肽的多種些生理調節功能，使其在食品、化工、醫療、化妝品行業具有廣泛的應用。綜 上所述，膠原蛋白是動物體內含量最大的一種蛋白質，近年來因瘋牛病恐慌以及穆斯林信仰 者的需求，尋找豬、牛皮和骨以外的膠原蛋白原料成為當務之急，而水產加工廢棄物魚鱗是 理想的替代原料。魚鱗膠原蛋白肽的研究成功將對水產及水產品加工業的發展提供廣闊的前 景。
(四)
圖1為本發明的工藝流程圖。
具體實施方式
下面結合具體實施例對本發明作更詳細的描述 實施例
1) 將枯草芽孢桿菌CICC10071進行擴大培養，待種子液中菌體含量108個/ml，視同為種
子成熟。
2) 將魚鱗洗凈、除雜后，加入8倍重量的純凈水10(TC蒸煮30分鐘，然后進入膠體磨 粉漿，漿液透過60目篩網后進入發酵罐12rC、 30分鐘高溫滅菌，冷卻后準備接種發酵。
3) 將成熟種子按魚鱗漿液體積的5%接種，35'C保溫發酵60小時后，12rC滅菌滅菌10 分鐘，冷卻至45'C—5(TC分離除渣，取上清液準備精致。
4)上清液經膜系統分離，將分子量5000以上的大分子截留，取分子量5000以下的小 分子液體進行真空濃縮至濃度40%左右，然后噴霧干燥得魚鱗膠原蛋白肽粉末成品。
權利要求
1、一種魚鱗膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于(1)發酵種子培養基的制備1％大豆蛋白胨，0.5％牛肉粉，0.5％葡萄糖，0.1％氯化鈉，0.01％磷酸二氫鉀，其余為蒸餾水，121℃高溫滅菌20分鐘，冷卻后備用；(2)發酵種子的制備以枯草芽孢桿菌為出發菌株，接種于發酵種子培養基中，35℃，搖床180r/m，培養48小時，發酵液中枯草芽孢桿菌＞108個/ml此時視同為發酵種子培養成熟；(3)魚鱗處理過程將新鮮魚鱗洗凈、除雜，加入8倍魚鱗重量的純凈水，經100℃蒸煮30分鐘，冷卻至45℃-50℃，進入膠體磨超微粉碎，漿液透過60目篩網，然后進入發酵罐121℃高溫滅菌30分鐘后冷卻至35℃等待接種發酵；(4)保溫發酵按發酵液體積的5％接種成熟種子，保溫通風發酵60小時；(5)分離發酵結束后121℃滅菌10分鐘，冷卻至45℃-50℃分離除渣，取上清液準備精致；(6)精致上清液經膜系統分離，將分子量5000以上的大分子截留，取分子量5000以下的小分子液體；(7)干燥將精致液進行真空濃縮至濃度40％左右，然后噴霧干燥得魚鱗膠原蛋白肽粉末成品。
全文摘要
本發明提供了一種魚鱗膠原蛋白肽制備方法。它是這樣實現的(1)發酵種子培養基的制備；(2)發酵種子的制備；(3)魚鱗處理過程；(4)保溫發酵；(5)分離；(6)精致；(7)干燥，得魚鱗膠原蛋白肽粉末成品。本發明的制備工藝過程相對其他方法簡單、制備的膠原蛋白肽可完全溶解于水冷水，水溶液低粘度，在的高濃度下也有流動性，耐酸性能好，在酸、堿的情況下均無沉淀耐高溫性能好，100℃加熱亦無沉淀。
文檔編號C12R1/125GK101240313SQ20081006407
公開日2008年8月13日 申請日期2008年3月7日 優先權日2008年3月7日
發明者滕春紅, 成 陳 申請人:成 陳