專利名稱：：人乳組合物及其制備和使用方法
技術領域：
：本公開涉及人乳組合物，如人乳增強劑和標準化人乳制劑，以及制備和使用這樣的組合物的方法。
背景技術：
：人乳因為其營養組成和免疫優勢，通常是早產兒和足月兒的食物選擇。人乳來源可以是例如捐贈人或嬰兒母親。然而原乳或經過常規加工的捐贈乳的營養價值會變化，且在很多情況下不足以滿足早產兒的需求。此外，捐贈的原乳可能存在細菌、病毒或其他污染。由于這些以及其他原因，在現代新生兒加強醫護病房(NICUs)中采用來自嬰兒母親的奶水已成為優選的營養途徑。然而，甚至母親自己的奶水也不能在營養上滿足早產兒。通常期望以強化多種添加物(如蛋白質)、附加的熱量(卡路里)和/或礦物質的奶水喂養早產兒。發明概述本公開涉及人乳組合物，如經巴氏殺菌的人乳組合物，以及制備和使用這樣的組合物的方法。所述組合物包含人乳增強劑(如PROLACTPLUS人乳增強劑，如PROLACT+4TM、PROLACT+6TM、PROLACT+8TM禾tV或PROLACT+10),其由人乳制備而成且含有不同濃度的營養成分，例如蛋白質、脂肪、碳水化合物、維生素和/或礦物質。這些10增強劑可添加至授乳母親的奶水中來為如早產兒提供最佳營養成分的奶水。根據母親自身奶水的成分，可將不同濃度的增強劑添加至母乳中。例如，可使用增強劑提高母乳的蛋白質濃度。如上所述，本公開的增強劑是由人乳生產的，從而為嬰兒提供人源營養素。本公開還涉及標準化人乳制劑(以PROLACT20TM、NEO20tm，和/或PROLACT24為例)，其由人乳制備。本文還描述了制備和使用這樣的組合物的方法。這些標準化人乳制劑可用于喂養如早產兒，且無需將其與其他增強劑或奶水混合。它們提供了營養性人源制劑，并且可替代母乳。人乳制劑可含有不同含熱量，例如PROLACT24tm(—種全喂養全乳產品)可含有約24Cal/oz或約81Cal/100mL。本文涉及的方法用于加工大量捐贈乳，例如約75-2,000升/批的原料。在一方面，本公開涉及經巴氏殺菌的人乳組合物，其包含約35-85mg/mL的人類蛋白質組分；約60-110mg/mL的人類脂肪組分和約60-140mg/mL的人類碳水化合物組分。所述碳水化合物可包含乳糖。所述組合物還可包含IgA和/或選自鈣、氯化物、銅、鐵、鎂、錳、磷、鉀、鈉和鋅中的一種或多種組分。在一個實施方案中，所述組合物可與原人乳(mwhumanmilk)混合以提供營養性組合物，其中所述原人乳占所述營養性組合物的約80%、約70%、約60%或約50%。實施方案可包括一個或多個下述特征。在一個實施方案中，所述組合物可包含約55-65mg/mL的蛋白質組分；約85-95mg/mL的脂肪組分和約70-120mg/mL的碳水化合物組分。所述碳水化合物可包含乳糖。所述組合物還可包含IgA和/或選自鈣(例如以約4.0-5.5mg/mL或約2.00-2.90mg/mL的濃度)；氯化物(例如以約0.35-0.95mg/mL或約0.175-0.475mg/mL的濃度)；銅(例如以約0.0005-0.0021mg/mL或約0.00025-0.001mg/mL的濃度)；鐵(例如以約0.001-0.007mg/mL或約0.0005-0.0025mg/mL的濃度)；鎂(例如以約0.180-0.292mg/mL或約0.0卯-0.170mg/mL的濃度)；錳(例如以約0.010-0.092mcg/mL或約0.005-0.046mcg/mL的濃度)；磷(例如以約2.00-3.05mg/mL或約1.00-2.90mg/mL的濃度，例如以約1.00-1.50mg/mL);鉀(例如以約1.90-2.18mg/mL或約0.95-1.41mg/mL的濃度)；鈉(例如以約0.75-0.96mg/mL或約0.375-0.608mg/mL的濃度)和鋅(例如以約0.0200-0.0369mg/mL或約0.010-0.0198mg/mL的濃度)中的一種或多種組分。在一個實施方案中，所述組合物可與原人乳混合以提供營養性組合物，其中所述原人乳占所述營養性組合物的約80%、約70%、約60%或約50%。在另一方面，本公開涉及經巴氏殺菌的人乳組合物，其包含約11-20mg/mL的人類蛋白質組分(如約11-13mg/mL);約35-55mg/mL的人類脂肪組分；和約70-120mg/mL的人類碳水化合物組分(如約80-105mg/mL)。所述碳水化合物組分可包含乳糖。所述組合物的含熱量可為約0.64Cal/mL至約1.10Cal/mL。實施方案可包括一個或多個下述特征。在一個實施方案中，所述經巴氏殺菌的人乳組合物還可包含一種或多種下述組分鈣(例如以約0.40-1.50mg/mL的濃度)；氯化物(例如以約0.30-0.80mg/mL的濃度)；銅(例如以約0.0005-0.0021mg/mL的濃度)；鐵(例如以約0.001-0.005mg/mL的濃度)；鎂(例如以約0.03-0.13mg/mL的濃度)，錳(例如以約0.01-0.092mcg/mL的濃度)；磷(例如以約0.15-0.631mg/mL的濃度)；鉀(例如以約0.60-1,20mg/mL的濃度)；鈉(例如以約0.20-0.60mg/mL的濃度)和/或鋅(例如以約0.0025-0.0120mg/mL的濃度)。本公開還涉及制備各種人乳組合物的方法。在一方面，本公開涉及獲得經巴氏殺菌的人乳組合物的方法。所述方法包括(a)遺傳篩查人乳中的一種或多種病毒；(b)過濾所述乳；(c)熱處理所述乳，例如在約63'C或更高溫度熱處理約30分鐘；(d)將所述乳分離成奶油和脫脂乳；(e)將一部分所述奶油添加至所述脫脂乳中；并(f)巴氏殺菌。實施方案包括一個或多個下述特征。在一個實施方案中，所述方法還可包括在步驟(d)后通過過濾器過濾所述脫脂乳，例如從所述脫脂乳中濾出水。步驟(d)后過濾脫脂乳之后，可清洗過濾中使用的過濾器以獲得洗后溶液。所述洗后溶液可添加至所述脫脂乳中。步驟(a)中的遺傳篩査可以是聚合酶鏈反應和/或可包括篩查一種或多種病毒，如HIV-1、HBV禾B/或HCV。在步驟(b)中可通過約200微米篩過濾所述乳。所述方法還可包括在步驟(d)后通過分離器流出奶油(如約30-50%的奶油)。洗后溶液和脫脂乳的組合物可包含約7.0-7.2%的蛋白質。所述方法還可包括對步驟(e)后獲得的組合物部分進行礦物質分析。所述方法也可包括向步驟(e)后獲得的組合物中添加選自鈣、氯化物、銅、鐵、鎂、錳、磷、鉀、鈉和鋅中的一種或多種的礦物質。所述一種或多種礦物質的添加可包括加熱所述組合物。所述方法也可包括在步驟(f)后冷卻所述組合物，對步驟(f)后的組合物的一部分進行生物學測試和/或對步驟(f)后的組合物的一部分進行營養測試。步驟(a)的人乳可以是混合人乳。本文涉及的方法可用大量原料(如人乳，如混合人乳)進行。該量可以是約75-2,000升/份的原料。步驟(f)后獲得的組合物可包含約8.5-9.5%脂肪、約6.3-7.0%蛋白質和約8.0-10.5%乳糖。在另一方面，本公開涉及用于獲得經巴氏殺菌的人乳組合物的方法。所述方法包括(a)遺傳篩査人乳中的一種或多種病毒；(b)過濾所述乳；(c)添加奶油；并(d)巴氏殺菌。實施方案可包括一個或多個下述特征。在一個實施方案中，步驟(a)中的遺傳篩查可以是聚合酶鏈反應。所述遺傳篩查可包括篩査一種或多種病毒，例如fflV-l、HBV和/或HCV。在步驟(b)中可通過約200微米篩過濾所述乳。所述方法還可包括通過過濾器對步驟(b)后的全乳進行超濾。超濾期間使用的過濾器可被后清洗(postwash)。步驟(d)后可將所述組合物冷卻。可對步驟(d)后的組合物進行生物學和/或營養測試。步驟(a)的人乳可以是混合人乳。本文涉及的方法可用大量原料(如人乳，如混合人乳)進行。該量可以是約75-2,000升/份的原料。所述方法也可包括向步驟(c)后獲得的組合物中添加選自鈣、氯化物、銅、鐵、鎂、錳、磷、鉀、鈉和鋅中的一種或多種的礦物質。在一個實施方案中，步驟(d)后獲得的組合物可包含約11-20mg/mL蛋白質、約35-55mg/mL脂肪和約70-120mg/mL碳水化合物。13在另一方面，本公開涉及試劑盒，其包括本文描述的經巴氏殺菌的人乳組合物(如增強劑)和用于混合所描述的組合物和原人乳的帶刻度容器(如瓶、注射器和罐)。在又一方面，本公開涉及獲得營養性乳組合物的方法。所述方法包括將本文所述的經巴氏殺菌的人乳組合物(如增強劑)添加至原人乳中，從而提高所述原人乳的營養濃度。所述原人乳的熱量成分(caloriccomposition)可被提高約2-10Cal/oz。在另一方面，本公開涉及為早產兒提供附加營養素的方法，所述方法包括將本文所描述組合物(增強劑)添加至原人乳中以獲得混合物并將所述混合物施用于早產兒。術語"早產兒"、"早產"和"低出生體重(LBW)"嬰兒可交換使用，其是指孕齡小于37周出生和/或出生體重小于2500gm的嬰兒。以"全乳"表示未從中去除脂肪的奶水。以"生物負荷量"表示存在于奶水中的微生物學污染物和病原體(通常是活的)，如病毒、細菌、霉菌、真菌等。本文引用的所有專利、專利申請和參考文獻均以其全部引入本文作為參考。圖1是制備人乳增強劑的方法的實施方案的表圖。圖2是制備標準化人乳的方法的實施方案的表圖。發明詳述本公開涉及人乳組合物(例如經巴氏殺菌的人乳組合物)，以及制備和使用這樣的組合物的方法。所述組合物包括人乳增強劑(如PROLACTPLUSTM人乳增強劑，如PR0LACT+4TM、PROLACT+6TM、PROLACT+8tm和/或PROLACT+10tm)，其由人乳制備，并含有不同濃度的營養成分(如維生素和/或礦物質)。這些增強劑可被添加至授乳母親的奶水中來為如早產兒提供最佳營養成分的奶水。根據母親自身奶水的成分，可將不同濃度的增強劑添加至母乳中。例如，可使用增強劑提高母乳的蛋白質濃度和/或含熱量。在一個實施方案中，所描述的增強劑可向接受150mL全喂養(fhllfeed)的嬰兒遞送約3.3g蛋白質/kg/天至約5.5g蛋白質/kg/天和/或每120Cal/kg/天3.2-4.1克蛋白質。本公幵還涉及標準化人乳制劑(以PROLACT20、NEO20tm和/或PROLACT24為例)，其由人乳制備。本文還描述了制備和使用這樣的組合物的方法。這些標準化人乳制劑可用于喂養如早產兒，且無需將其與其他增強劑或奶水混合。因而，所述組合物為嬰兒提供了一種可替代母乳的人源營養制品。人乳制劑可含有不同含熱量，例如PROLACT24tm(全喂養全乳制品)可含有約24Cal/oz或約81Cal/100mL的熱量。本公開的組合物由捐贈乳(如混合乳)產生，其經歷嚴格遺傳篩査、加工(如用以濃縮增強劑組合物中的營養素和/或用以降低生物負荷量)，以及巴氏殺菌。所述乳可添加多種礦物質和/或維生素。因而，本公開也涉及獲得和加工來自捐贈人的奶水的方法。本發明的方法可用于加工大量捐贈乳，如約75-2,000升/份的原料。早產兒的營養需求有許多因素可能影響新生兒如早產兒、嬰兒的臨床結果，早產兒具有脆弱的免疫系統、不成熟的消化系統，以及增加的總熱量需求和特殊營養需求(當通常與足月兒相比時)。因此，向這樣的嬰兒提供營養是他們生長和發育中的重要因素。人們很久以來就認為，人乳因為其營養組成和免疫優勢是早產兒和足月兒的理想食物。但是，不是每個母親都能或將以母乳喂養她的孩子(或使用吸奶器并儲存她的奶水)。例如，患有某些疾病如活動性結核，或正在接受放射性同位素、抗代謝藥或化學治療的母親就不能母乳喂養她們的嬰兒。此外，母親自身的奶水可能不含足夠的營養成分來供養早產兒。使用捐贈乳可能也是有問題的，如這種乳可能不含針對早產兒的足夠營養。本公開涉及用于喂養和/或提高喂給嬰兒如早產兒的奶水的營養價值的人乳組合物以及制備和使用這樣的組合物的方法。本文所述增強劑(如PROLACTPLUS)可遞送高水平的如蛋白質和/或熱量到奶水中從而喂給嬰兒。標準化人乳制劑(如PROLACT20tm和NEO20tm)可用于替代母親自身的奶水。所述組合物可添加多種維生素和/或礦物質。所述組合物也可含有IgA(如分泌型IgA)和本文所述的多種成分。從合格和經挑選的捐贈人獲取人乳本公開的組合物由捐贈的人乳產生。采用多種技術鑒別和認證適宜的捐贈人。可能的捐贈人必須獲得其內科醫生和其子女的兒科醫生的允許以作為鑒定過程的一部分。這有助于確保尤其是捐贈人沒有慢性病且她的孩子不會因為捐贈而遭受損害。例如在美國專利申請11/526,127(U.S.2007/0098863)公開了認證和監測奶水收集和分配的方法和系統，將其全文引入作為參考。通常，捐贈人篩查過程包括會談和生物學樣品處理。在篩查中發現任何陽性血樣(如病毒污染的)都會將捐贈人排除出認證程序。一旦捐贈人合格并開始提供奶水，會對每批發貨的奶水進行測試，如蠟狀芽孢桿菌(及"W)和藥物濫用(如可卡因、阿片類、甲基苯丙胺、苯二氮雜萆、苯丙胺和THC)。任何陽性結果會導致捐贈的延期并銷毀所有之前收集的奶水。捐贈人可能要定期復查(requalify)。例如，如果所述捐贈人希望繼續捐贈，她們會被要求每四個月以她們最初資格中使用的方案進行篩査。未復査或鑒定不合格的捐贈人會被延期直至她們復查或通過鑒定的時候，或者如果復査篩選的結果認為必要，將被永久延期。如果發生后種情況，由該捐贈人提供的所有剩余奶水會被移出庫存并銷毀。合格的捐贈人可在指定場所(如奶水庫)進行捐贈或通常在家壓出奶水。可以由奶水庫或者直接從奶水處理器(奶水庫和處理器可以是相同或不同的實體)給合格的捐贈人提供輔助材料(supplies)以帶回家。所述輔助材料通常會包括在容器上的計算機可讀編碼(如條形碼標簽)，并且還可包括吸奶器。接著所述捐贈人可在家中抽出奶水并在-2(TC或更低溫度下將其冷凍。該捐贈乳將被接受，條件是所述捐贈人是合格的捐贈人；如果這樣的結果令人滿意，會與捐贈人預約在中心供乳，或在家中收集奶水。捐贈人也可將奶水置于由奶水庫或奶水處理器提供的絕熱容器中直接運送至奶水庫中心或奶水處理器。檢查奶水和容器情況并通過數據庫檢查條形碼信息。如果滿意，將該單元置于捐贈乳中心或處理中心的冰箱中(-2(TC或更低)，直至準備進一步測試和處理。因為在本方法的某些實施方案中捐贈人是在其家中擠出奶水而不是在奶水庫的設備收集，所以每個捐贈人的奶水被取樣進行遺傳標記，如DNA標記，以保證奶水真實地來自登記的捐贈人。這樣的受試者辨識技術是本領域已知的(參見例如國際申請PCT/US2006/36827，將其全文在此引入作為參考)。可將奶水儲存(如在-2(TC或更低)并隔離直至收到測試結果。以上整個過程，任何不合格的奶水樣品都會被丟棄，并使捐贈人喪失資格。使用關于捐贈人的所有保密信息(包括血液測試數據)的權利，會被謹慎地控制并符合可隨帶性及可說明性健康保險條例(HIPAA)的要求。處理捐贈的人乳處理所收集的捐贈人乳以獲得如人乳增強劑和/或標準化人乳制劑。蕕淳yC遂鄉膽圖1是說明生產人乳增強劑(如PROLACTPLUSTM)的實施方案的表圖。在下文實施例1中討論具體實施方案。如上所述，出于鑒別目的和避免污染，捐贈乳被仔細分析。所述捐贈乳被冷凍，并在需要時解凍和混合。然后通過如聚合酶鏈反應(PCR)進行篩查(圖1的步驟1)，如遺傳篩查。進行遺傳篩査以鑒別任何污染，例如病毒，如fflV-l、HBV和/或HCV。然后通過如約200微米篩過濾奶水(步驟2)，并熱處理(步驟3)。例如，可將所述組合物在約63X:或更高處理約30分鐘或更久。在步驟4中，將所述乳轉移至分離器，如離心機，將奶油從脫脂乳中分離。將所述脫脂乳轉移至第二處理罐中，所述脫脂乳在其中被保持在約2-8"C直至過濾步驟(步驟5)。任選地，在步驟4中，從所述脫脂乳中分離的奶油可以再次經過分離以產生更多脫脂乳。分離奶油和脫脂乳(步驟4)后，將所需量的奶油添加至所述脫脂乳，并將所述組合物進行進一步過濾(步驟5)，如超濾。該處理通過濾出水從而濃縮脫脂乳中的營養素。濃縮期間獲得的水被稱為滲透物。將超濾期間使用的過濾器進行后清洗并將所得溶液添加至所述脫脂乳以將所得營養素的量最大化，如獲得約7%至7.2%的蛋白質濃度。然后將所述脫脂乳與奶油摻混(步驟6)并取樣分析。在該過程期間，所述組合物通常包含約8.5%至9.5%的脂肪；約6.3%至7.0%的蛋白質和約8%至10.5%的碳水化合物，如乳糖。在步驟4中分離奶油和脫脂乳之后，所述奶油流入保溫罐(holdingtank),如不銹鋼容器。分析奶油的熱量、蛋白質和脂肪含量。當奶油的營養含量已知，可將一部分奶油添加至已經過過濾如超濾(步驟5)的所述脫脂乳中以獲得所制特定產品所要求的熱量、蛋白質和脂肪含量。在巴氏殺菌前可將礦物質加入所述乳中。在這點上，在一個實施方案中，在添加礦物質前可將經處理的組合物冷凍并在進一步處理時解凍。也可將未使用的額外奶油儲存，如冷凍。任選地，在經處理的組合物被冷凍前，對樣品進行礦物質分析。一旦已知經處理乳的礦物質含量，即可解凍所述組合物(如果其被冷凍)并添加所需量的礦物質以達到目標值。在步驟6和/或任選冷凍和/或添加礦物質之后，對所述組合物進行巴氏殺菌(步驟7)。例如，可將所述組合物置于通過鍍鉑硅橡膠管與高溫，短時(HTST)巴氏殺菌器相連的處理罐中。巴氏殺菌后，將所述乳收集至第二處理罐中并冷卻。可采用本領域已知的巴氏殺菌的其他方法。例如，在槽式巴氏殺菌中，在罐中的所述乳被加熱至最低63'C并在該溫度下保持至少30分鐘。所述乳上方的空氣是被加熱到比所述乳溫度至少高3攝氏度的蒸汽。在一個實施方案中，產品溫度約66"C或更高，產品上方的空氣溫度約69'C或更高，產品經巴氏殺菌約30分鐘或更長。在另一實施方案中，實施了HTST和槽式巴氏殺菌。得到的增強劑組合物通常被無菌處理。在冷卻至約2至8'C后，產品被裝入預定體積的容器中，并對不同的增強劑樣品進行營養和生物負荷量分析。所述營養分析確保所述組合物的適當成分。為每個容器打上的標簽反映營養分析。生物負荷量分析測試污染物的存在，如總的需氧計數(aerobkcoiint)、蠟狀芽孢桿菌、大腸桿菌(Kco")、大腸菌、假單胞菌、沙門氏菌、葡萄球菌、酵母和/或霉菌。生物負荷量測試可以是遺傳測試。一旦完成分析并獲得所需結果即可將產品包裝和運送。18蕕淳標準眾乂fZ繊鄉灘圖2和下文的實施例3和4顯示了獲得標準化人乳制劑(如PROLACT20tm和NEO20)的方法的某些實施方案。如上所述，篩査捐贈乳以確保捐贈人的身份并降低污染的可能性。將所述捐贈乳混合并進一步篩査(圖2的步驟1)，如遺傳篩查(如通過PCR)。所述篩查可以鑒別，如病毒，如HIV-1、HBV禾卩/或HCV。丟棄測試呈陽性的奶水。篩查后，對所述組合物進行過濾(步驟2)。通過約200微米篩過濾乳然后超濾。超濾期間，從所述乳中濾出水(被稱為滲透物)并使用滲透物后清洗過濾器。洗后溶液被添加至所述乳中以補償任何損失的蛋白質并提高蛋白質濃度至如約1.2%-約1.5%。參照圖2，在步驟3加入來自另一批次的奶油(如之前增強劑批次的剩余奶油)以提高含熱量。在該處理階段中，所述組合物通常含有約3.5%至5.5%的脂肪；約1.1%至1.3%的蛋白質；和約8%至10.5%的碳水化合物，如乳糖。在此階段，可將所述組合物冷凍并在之后進一步處理時解凍。任選地，如果所述人乳制劑要強化礦物質，則在步驟3后對所述組合物進行礦物質分析。一旦已知所述礦物質含量，可添加期望量的礦物質以達到目標值。在步驟4中，對所述組合物進行巴氏殺菌。巴氏殺菌方法是本領域已知的。例如，可在加套罐中進行巴氏殺菌。可使用熱乙二醇加熱罐。產品溫度可為約63'C或更高而所述產品上方的空氣溫度約66t或更高。對所述產品巴氏殺菌至少約30分鐘。其他巴氏殺菌技術是本領域已知的。冷卻至約2至8"C后，將所述產品裝入預定體積的容器中，并對不同人乳制劑樣品進行營養和生物負荷量分析。所述營養分析確保所述組合物的適當成分。為每個容器打上的標簽反映營養分析。生物負荷量分析測試污染物的存在，總的需氧計數、蠟狀芽孢桿菌、大腸桿菌、大腸菌、假單胞菌、沙門氏菌、葡萄球菌、酵母和/或霉菌。一旦完成分析并獲得所需結果即可將產品包裝和運送。所述方法對人乳的成分和生物負荷量的影響人乳包含約100000個不同分子實體蛋白質、脂質、碳水化合物，維生素和微量礦物質。某些特殊成分包括單體的免疫球蛋白A(IgA)和二聚的分泌型IgA(s[IgAK)、溶菌酶和乳鐵蛋白。因此，本文所述方法(其包括巴氏殺菌)，在有助于確保乳產品安全性的同時，也應該保留足夠量的那些成分，其可能是熱不穩定的。如以下實施例5和表3所描述，本文所述巴氏殺菌方法可保留經處理的乳中的大量IgA、溶菌酶和維生素B6。如下文實施例5和表2所描述，所述方法能降低人乳的任何生物負荷量。人乳組合物本文所描述的組合物含有不同量的營養素，如蛋白質、碳水化合物、脂肪、維生素和礦物質，以及其他乳成分，如IgA和溶菌酶。人乳增強劑提供濃縮量的營養素和熱量，其可被添加至如母乳中。如果需要，標準化人乳制劑可添加維生素和/或礦物質，并可直接喂給嬰兒，如早產兒。生產這些組合物的方法被設計成優化所述組合物中營養素和熱量的量。例如，本文所述組合物可遞送約3.3克至約5.5克的蛋白質/kg/天給每天接受150mL全喂養的嬰兒和/或3.2-4.1克的蛋白質/kg/天給接受120Cal/kg/天的嬰兒。乂^潛強淑本文所述的人乳增強劑含有濃縮量的營養素。在一個實施方案中，所述增強劑可含有約35-85mg/mL的人類蛋白質組分；約60-110mg/mL的人類脂肪組分和約60-140mg/mL的人類碳水化合物組分。所述增強劑的總含熱量可以是如約0.92Cal/mL至約1.89Cal/mL。特別地，一個實施方案可包含約55-65mg/mL的人類蛋白質組分；約85-95mg/mL的人類脂肪組分;和約70-120mg/mL的人類碳水化合物組分。如果需要，所述增強劑可添加礦物質。在一個實施方案中，所述礦物質可包括約4.0-5.5mg/mL的鈣濃度；約0.35-0.95mg/mL的氯化物濃度；約0.0005-0.0021mg/mL的銅濃度；約0.001-0.700mg/mL的鐵濃度；約0.180-0.292mg/mL的鎂濃度；約0.010-0.092mcg/mL的錳濃度；約2.00-3.05mg/mL的磷濃度；約1.90-2.18mg/mL的鉀濃度；約0.75-0.96mg/mL的鈉濃度和約0.0200-0.0396mg/mL的鋅濃度。在另一實施方案中，所述礦物質可包括約2.00-2.9mg/mL的鈣濃度；約0.175-0.475mg/mL的氯化物濃度；約0.00025-0.001mg/mL的銅濃度；約0.0005-0.0025mg/mL的鐵濃度；約0.090-0.170mg/mL的鎂濃度；約0.005-0.046mcg/mL的錳濃度；約1.00-1.50mg/mL的磷濃度；約0.95-1.41mg/mL的鉀濃度；約0.375-0.608mg/mL的鈉濃度和約0.010-0.0198mg/mL的鋅濃度。示例性增強劑(如PROLACT+4tm和PROLACT+6)可包含以下成分人乳、碳酸鈣、磷酸鉀、磷酸鈣、甘油磷酸鈣、葡萄糖酸鈣、檸檬酸鈉、氯化鎂、氯化鈣、磷酸鎂、硫酸鋅、硫酸銅和硫酸鎂。每lOOmL示例性增強劑可具有以下特征約135-155Cal;約8.5-9.5g總脂肪；約75-96mg鈉；約190-218mg鉀；約7.0-12.0g總碳水化合物；約5.5-10.0g糖;約5.5-6.5g的白質；約1000-5000IU維生素A;低于約1mg維生素C;約400-550mg轉；約0.1-0.5mg鐵；約200-305mg磷；約18-29.2mg鎂；約35-95mg氯化物；約2.0-4.0mg鋅；約0.05-0.21meg銅和低于約9.2meg錳；以及343mOsm/KgH20的重量克分子滲透濃度(當按約80%原乳比20%增強劑的比例與原人乳混合時)。本公開包括了具有其他組分和不同濃度組分的增強劑。本文所述增強劑可按不同濃度與母乳混合，這取決于母乳的營養成分和嬰兒的需求。例如，可測試原母乳以確定原乳的營養值。每100mL代表性原乳平均包含1.1g蛋白質、3.2g脂肪、7.7g碳水化合物(主要是乳糖)，并提供約64kcal能量。測試后，可以通過添加本文所討論的增強劑組合物調節母乳。例如，當考慮150mL/天和/或3.2-4.1克的蛋白質/kg/天的全喂養量時，所述增強劑可向接受120Cal/kg/天的嬰兒添加約2-約10Cal/oz和/或3.3-5.5g/蛋白質/kg沃。如果需要更低劑量的增強劑和營養素，混合物可包含約20%增強劑和約80%原人乳(添加約4Cal/oz)(如與PROLACT+4tm的混合物)。如果需要更高劑量的營養素，混合物可包含約50%原人乳和約50%增強劑(如與PROLACT+10tm的混合物)。本發明可包括其他比例的混合物，包括(但不限于)約30%增強劑與約70%原人乳(如與PROLACT+6tm的混合物)和約40%增強劑與約60%原人乳(如與PROLACT+8tm的混合物)。下文實施例2和表2說明了所述混合物的某些實施方案和它們的營養信息。本文所述的標準化人乳制劑可用于替代母親自身的奶水以喂養嬰兒，如早產兒。它們包含針對嬰兒生長和發育的多種營養成分。在一個實施方案中，所述標準化人乳制劑可包含約11-20mg/mL人類蛋白質組分；約35-55mg/mL人類脂肪組分和約70-120mg/mL人類碳水化合物組分。在一個特定實施方案中，所述制劑可包含約11-13mg/mL人類蛋白質組分；約35-55mg/mL人類脂肪組分和約80-105mg/mL人類碳水化合物組分。所述制劑的總含熱量可以是例如約0.68Cal/mL-約0.96Cal/mL。所述乳制劑可附加維生素和/或礦物質。在一個實施方案中，所述組合物可包含約0.40-1.50mg/mL的鈣濃度；約0.30-0.80mg/mL的氯化物濃度；約0.0005-0.0021mg/mL的銅濃度；約0.001-0.005mg/mL的鐵濃度；約0.03-0.13mg/mL的鎂濃度；約0.01-0.092mg/mL的錳濃度；約0.15-0.631mg/mL的磷濃度(如約0.15-0.60mg/mL);約0.60-1.20mg/mL的鉀濃度；約0.20-0.60mg/mL的鈉濃度和約0.0025-0.0120mg/mL的鋅濃度。所述人乳制劑可包含不同含熱量，如67Kcal/dL(每盎司20卡路里)和81Kcal/dL(每盎司M卡路里)。示例性人乳制劑(如PROLACT24tm)可包含以下組分人乳、甘油磷酸鈣、檸檬酸鉀、葡萄糖酸鈣、碳酸鈣、磷酸鎂、氯化鈉、檸檬酸鈉、硫酸鋅、硫酸銅和硫酸錳。每100ml該示例性組合物可具有以下特征約81Cal;約4.4g總脂肪；約20.3mg鈉；約60.3mg鉀；約8g總碳水化合物；約5-9g糖；約2.3g蛋白質；約180-250IU維生素A;低于約l.Omg維生素C;約40.0-150.0mg鈣;約100-150mcg鐵;約15-50mg磷；約3-10mg鎂；約25-75.0mg氯化物；約1.2mcg鋅；約140-190mcg銅；低于約60.2mcg錳和約322mOsm/KgH20的重量克分子滲透濃度。本公開包括了具有其他組分和不同濃度組分的乳制劑。鄉船激搬定成分本文所述乳組合物和增強劑的一個成分是蛋白質。在機體中，蛋白質為生長、合成酶和激素所需，并替代皮膚、尿和糞便中失去的蛋白質。這些代謝過程決定了對喂食中蛋白質的總量和特定氨基酸相對量的需求。通過測量生長、氮的吸收和保留、血漿氨基酸、特定血液分析物和代謝反應，決定嬰兒喂食中的適宜的蛋白質量和類型。有益的而不是單純營養原因存在于所述組合物中的一些蛋白質包括人類IgA、溶菌酶和乳鐵蛋白。本文所述乳組合物的另一組分是脂肪。脂肪通常是LBW嬰兒的能量源，不僅因為其高熱量密度還因為其在溶液中的低滲透活性。從而，任選地，本發明乳組合物可附加脂肪組分。這樣的異源脂肪組分包括特定脂肪酸例如二十二碳六烯酸(DHA)和花生四烯酸。維生素和礦物質對于嬰兒的適當營養和發育是重要的。早產兒或LBW嬰兒需要電解質如鈉、鉀和氯化物用于生長和酸堿平衡。也需要攝入足夠的這些電解質用以替代尿和糞便以及皮膚中的損耗。需要鈣、磷和鎂用于固有骨礦化和生長。微量礦物質與細胞分裂、免疫功能和生長相關。因此，足量的微量礦物質對嬰兒生長和發育是必需的。一些重要的礦物質包括如銅、鎂和鐵(其對于如血紅蛋白、肌紅蛋白和含鐵酶的合成是重要的)。鋅被如生長，許多酶的活性，以及DNA、RNA和蛋白質合成所需。銅被如幾種重要酶的活性所必需。鎂被如骨骼和軟骨的發育所需且其對于多糖和糖蛋白的合成很重要。因此，本發明的人乳制劑和增強劑組合物可添加本文所述的維生素和礦物質。對于如生長、細胞分化、視力和免疫系統的適當功能化，維生素A是必不可少的脂溶性維生素。維生素D對于如鈣和更小程度磷的吸收，以及對于骨骼發育是重要的。維生素E(生育酚)防止細胞中多不飽和脂肪酸的過氧化反應，從而防止組織損傷。葉酸在如氨基酸和核苷酸代謝中發揮作用。在低葉酸攝入量的2周齡后LBW嬰兒中，血清葉酸鹽濃度顯示下降至低于正常值。此外，早產乳中存在幾種低濃度的B族維生素。如上所述，人乳維生素和礦物質濃度的差異性和早產兒的高需求通常需要一些強化以確保發育中的嬰兒接受足夠量的維生素和礦物質。可添加至本文所述人乳組合物的維生素和礦物質的實例包括維生素A、維生素Bl、維生素B2、維生素B6、維生素B12、維生素C、維生素D、維生素E、維生素K、生物素、葉酸、泛酸、尼克酸、m-肌醇、鈣、磷、鎂、鋅、錳、銅、鈉、鉀、氯化物、鐵和硒。所述組合物也可添加鉻、鉬、碘、牛磺酸、肉堿，膽堿也需要補充。本文所述人乳增強劑和標準化乳制品的重量克分子滲透濃度可影響所述組合物的吸附、吸收和消化。高重量克分子滲透濃度如高于約400mOsm/KgH20與新生兒的壞死性小腸結腸炎(NEC)、胃腸道病的增加率相關(參見例如Srinivasan等人，Arc/z.D/s.Ozz'WFeto/iVeowato/￡d89:514-17,2004)。所述人乳組合物和增強劑(一旦與原乳混合)的重量克分子滲透濃度通常低于約400mOsm/KgH20。典型的重量克分子滲透濃度為約310mOsm/Kg水至約380mOsm/Kg水。可通過本領域已知的方法調整重量克分子滲透濃度。試齊!j盒本公開還涉及包括本文所述的人乳增強劑和用于混合所述增強劑和原人乳的容器的試劑盒。所述容器可包括瓶，如刻度瓶以助于適當稀釋、注射器、罐，以及其他本領域己知的容器。在NICU中處理所述組合物依據患者需求和不同醫院的政策調整如在NICU中所述增強劑和標準化乳產品的制備。因而，會就地確定如與增強劑制備的乳量。當然，只要不偏離本公開的主旨和范圍，可按其他不同于本文提出的方式來實施本公開的實施方案。因此，在所有方面，實施方案都應被認為是示例性而非限制性的。實施例l.PROLACTATM生物科學人乳增強劑(HMF)的制備和組成PROLACTATM生物科學人乳增強劑(HMF)(PROLACTPLUStm)采用下述步驟制備。處理在100000級潔凈室(ISO8級)中完成，罐裝在10000級潔凈室(IS07級)中完成。1.混合捐贈乳。2.采取樣品進行聚合酶鏈反應(PCR)以檢測以下病毒a.HIV-1b.HBV—乙型肝炎c.HCV—丙型肝炎3.通過200微米篩過濾捐贈乳。4.捐贈乳在63r或更高溫度熱處理30分鐘。5.將乳分離成脫脂乳和奶油，其具有以下濃度a.脫脂乳0.3%-0.69%脂肪、0.9%-1.2%蛋白質、6%-10%乳糖b.奶油25%-46%脂肪、0.5%-2%蛋白質、8-10%乳糖6.如果需要，可通過分離器提取并流出奶油a.該步驟產生更多脫脂乳，因為產生越多脫脂乳，可產生越多的HMF,所以可提高其產量。b.從分離器非脫脂乳側流出的產品目前被認為是廢液。7.在濃縮步驟中，為了更好地超濾，將奶油加至脫脂乳中。脫脂乳中的脂肪是蛋白質含量的55%-65%。8.超濾脫脂乳。該步驟從脫脂乳中濾出水。水被稱為滲透物。該步驟中的最終濃度是7%-10%的蛋白質。9.采用滲透物后清洗過濾器以回收超濾處理期間留在過濾器上的蛋白質。將洗后溶液加入濃縮脫脂乳中直至蛋白質濃度達到7.0%-7.2%。10.成批配制期間，加入洗后溶液之后將奶油加入濃縮脫脂乳中。該步驟將熱量提高至適當目標值。此時，產品具有a.脂肪一8.5%-9.5%;b.蛋白質一6.3%-7.0%;禾口c.乳糖_8%-10.5%。11.將該批的樣品運送進行礦物質分析。初始礦物質含量的分析可確定之后產品需要添加的礦物質量(參見例如步驟14)。12.將本批產品冷凍在-20'C或更低。13.當礦物質結果從實驗室返回時，將本批解凍。14.根據原料中的礦物質濃度(上文步驟11所測定的)，計算還需要添加多少礦物質。最終目標濃度如下所列。將PR0LACT+4、PROLACT+6、PROLACT+8tm禾卩PROLACT+10TM增強劑用于和人乳混合，并在下文實施例2中做進一步討論。a.PROLACT+4tm和PROLACT+6TMi.鵒~400.0mg/dL-550.0mg/dLii.氯化物一35mg/dL-95.0mg/dLiii.銅~0.05mg/dL-0.21mg/dLiv.鐵一0.1mg/dL-0.7mg/dLv.鎂一18.0mg/dL-29.2mg/dLvi.錳一1.0mcg/dL-9.2mcg/dLvii.磷^200.0mg/dL-305.0mg/dLviii.鉀一190.0mg/dL-218.0mg/dLix.鈉一75mg/dL-96mg/dLx.鋅一2.0mg/dL-3.96mg/dLb.PROLACT+8丁m和PROLACT+10TMi.拷一200.0mg/dL-290mg/dLii.氯化物一17.5mg/dL-47.5mg/dLiii.銅一0.025mg/dL-0.1mg/dLiv.鐵一0.05mg/dL-0.25mg/dLv.鎂一9.0mg/dL-14.6mg/dLvi.錳一0.5mcg/dL-4.6mcg/dLvii.磷一IOO.Omg/dL-150.0mg/dLviii.鉀一95.0mg/dL-141.0mg/dLix.鈉一37.5mg/dL-60.8mg/dLx.鋅一1,0mg/dL-1.98mg/dLc.也可按下述配方制備PROLACT+6:i.藥一250.0mg/dL-425.0mg/dLii.氯化物一15mg/dL-75.0mg/dLiii.銅"~0,05mg/dL-0.21mg/dLiv.鐵一0.1mg/dL-0.5mg/dLv.鎂一10.0mg/dL畫25.0mg/dLvi.錳一1.0meg/dL-9.2meg/dLvii.磷一125.0mg/dL-225.0mg/dLviii.鉀_60.0mg/dL-105.0mg/dLix.鈉一50.0mg/dL-90mg/dLx.鋅一2.0mg/dL-3.96mg/dL15.將終批加熱至50-55'C，并將礦物質混入終批中。16.混入礦物質之后，產品在罐中進行巴氏殺菌。罐是加套式的，并利用熱甘油加熱罐。所用參數如下a.產品溫度為66-C或更高；b.產品上方的空氣溫度為69'C或更高；并c.對產品進行巴氏殺菌至少30分鐘。17.在加套罐中通入冷甘油將產品溫度降至2t:-8'C。18.在10000級潔凈室中采用Watson-Marlow灌裝機器將產品裝入瓶中。灌裝尺寸如下a.PROLACT+410mLb.PROLACT+420mLc.PROLACT+4TM100mLd.PROLACT+6TM15mLe.PROLACT+630mLf.PROLACT+820mLg.PROLACT+8TM40mLh.PROLACT+1025mi.PROLACT+1050mL。19.完成灌裝時，使用如下的瓶-a.生物負荷量樣品一在灌裝過程的開始、中途和結束時各取2瓶，共取6瓶用于測試；b.營養樣品一在灌裝過程的開始、中途和結束時各取l瓶，共取3瓶用于測試；并c.保留樣品一保留120mL產品。20.對生物負荷量樣品按以下完成分析a.總的需氧計數一<100菌落形成單位/mL;菌落形成單位/mL;c.大腸桿菌一<1菌落形成單位/mL;d.大腸菌一<1菌落形成單位/mL;e.假單胞菌一<1菌落形成單位/mL;f.沙門氏菌一<1菌落形成單位/mL;g.葡萄球菌一<1菌落形成單位/mL;h.酵母一<100菌落形成單位/mL;和i.霉菌一<100菌落形成單位/mL.21.進行如下的營養分析。a.PROLACT+4頂或PROLACT+6TMi.總熱量一1.35Cal/mL-1.55Cal/mLii.蛋白質一5.5g/dL-6.5g/dLiii.脂肪一8.5g/dL-9.5g/dLiv.乳糖一7.0g/dL-12.0g/dLv.^~^00.0mg/dL-550.0mg/dLvi.氯化物一35mg/dL-95.0mg/dLvii.銅~0.05mg/dL-0.21mg/dLviii.鐵一O.lmg/dL-0.7mg/dLix.鎂一18.0mg/dL-29,2mg/dLx.錳一1.0mcg/dL腸9.2mcg/dLxi.磷一200,0mg/dL誦305,0mg/dLxii.鉀一190.0mg/dL-218.0mg/dLxiii.鈉一75mg/dL-96mg/dLxiv.鋅一2.0mg/dL-3.96mg/dLb.PROLACT+8tm或PROLACT+10i.總熱量一1.35Cal/mL-1.55Cal/mLii.蛋白質一5.5g/dL-6.5g/dLiii.脂肪一8.5g/dL-9.5g/dLiv.乳糖一7.0g/dL-12.0g/dLv.!^""200.0mg/dL-275mg/dLvi.氯化物一17.5mg/dL-47.5mg/dLvii.銅一0.025mg/dL-0.1mg/dLviii.鐵一0.05mg/dL畫0.25mg/dLix.鎂一9.0mg/dL-14.6mg/dLx.錳_0.5mcg/dL-4.6mcg/dLxi.磷一100.0mg/dL-150.0mg/dLxii.鉀一95.0mg/dL-141.0mg/dLxiii.鈉一37.5mg/dL-60.8mg/dLxiv.鋅一1.0mg/dL畫1.98mg/dLc.也可按如下配方制各PROLACT+6tm:i.總熱量一1.35Cal/mL-1.55Cal/mLii.蛋白質一5.5g/dL-6.5g/dLiii.脂肪一8.5g/dL-9.5g/dLiv.乳糖一7.0g/dL-12.0g/dLv.鈣一250,0mg/dL-425.0mg/dLvi.氯化物一35mg/dL-75.0mg/dLvii.銅一0.05mg/dL-0.21mg/dLviii.鐵一0.1mg/dL-0.5mg/dLix.鎂一IO.Omg/dL-25.0mg/dLx.錳一1.0mcg/dL-9.2mcg/dLxi.磷一125.0mg/dL-225.0mg/dLxii.鉀一190.0mg/dL-218.0mg/dLxiii.鈉一50mg/dL-90mg/dLxiv.鋅一2.0mg/dL-3.96mg/dL22.—旦完成營養分析，則生成具有來自實驗室的實際值的標簽。通常，食品的正常程序是標簽上打平均值。然而這些Prolact產品顯示每瓶的具體成分。23.產品在干冰上的絕緣冷卻器中運送給消費者。也可采用冰塊替代干冰用于運送。實施例2.多種類型基于人乳增強劑的PROLACTATM人乳產品的制備和組成如上實施例1所示制備的人乳增強劑(HMFs)以不同濃度與原人乳混合(如:來自早產兒母親的奶水)。依據母乳自身營養成分和嬰兒的需求，HMF可按不同比例混合。PROLACT+4tm是按約80%原乳與約20%HMF的比例混合而成的組合物。PROLACT+6tm是按約70%原乳與約30%HMF的比例混合而成的組合物。PROLACT+8tm是按約60%原乳與約40%HMF的比例混合而成的組合物。PROLACT+10TM是按約50%原乳與約50%HMF的比例混合而成。混合是由消費者完成，而不是在PROLACTATM設備進行。下表說明在原乳和以不同比例與原乳混合的四種PROLACTPLUStm組合物中的營養素的示例性營養對比。<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>鈣mg28128178128153磷mg1463.187.763.175.4鎂mg3.3810.489.2氯化物mg78,183.486.183.484.7錳meg0.42.363.22.362.79銅mg0.080.10.10.10.1鋅mg0.50.71.10.70.9鐵mg0.10.20.20.20.2重量克分子滲透濃度mOsm/kgH20-290<335<360<325<350+基于多種出版的有關Prolacta生物科學的研究來計算++無法得到有關早產乳的數據；基于總熱量計算脂肪*營養值是基于增強劑PROLACTPLUSTM系列產品生產說明的最小值**基于各生產批次的平均值實施例3.標準化人乳制劑的制備和組成PROLACTAtm生物科學NEO20TM是以下述步驟制備的標準化人乳制劑。處理在100000級潔凈室(IS08級)中完成，罐裝在10000級潔凈室(IS07級)中完成。1.混合捐贈乳。2.采取樣品進行聚合酶鏈反應(PCR)以檢測以下病毒a.HIV-lb.HBV-乙型肝炎c.HCV-丙型肝炎3.通過200微米篩過濾捐贈乳。4.對全乳進行超濾。該步驟從全乳中濾出水分。水作為滲透物。該步驟中蛋白質的最終濃度是1.2%-1.3%。5.采用滲透物后清洗過濾器以回收超濾處理期間留在過濾器上的蛋白質。將洗后溶液加入濃縮全乳中直至蛋白質濃度達到1.2%-1.5%。316.成批配制期間，加入洗后溶液之后將來自之前增強劑批次的奶油加入濃縮全乳中，以將熱量提高至準確目標值。此時，產品具有a.脂肪一3.5%-5.5%;b.蛋白質一1.1%-1.3%;禾口c.乳糖_8%-10.5%。7.接著，將產品在罐中進行巴氏殺菌。罐是加套式的，并采用熱甘油來加熱罐。采用參數如下a.產品溫度是63'C或更高；b.產品上方的空氣溫度是66'C或更高；且c.產品經巴氏殺菌最少30分鐘。8.在加套罐中采用冷甘油將產品溫度降至2'C-8。C。9.在10000級潔凈室中采用Watson-Marlow灌裝機器將產品裝入瓶中。灌裝尺寸如下a.NEO20TM30mL;b.NEO20TM40mL;c.NEO20TM50mL;d.NEO20TM148mL;和e.NEO20TM200mL。10.完成灌裝時，采集樣瓶用于以下檢測a.生物負荷量樣品一在灌裝過程的開始、中途和結束時各取2瓶，共取6瓶；b.營養樣品一在灌裝過程的開始、中途和結束時各取1瓶，共取3瓶;禾口c.保留樣品一保留120mL產品。11.對生物負荷量樣品測試以下參數a.總的需氧計數一<100菌落形成單位/mL;b.蠟狀芽孢桿菌一<10菌落形成單位/mL;c.大腸桿菌—<1菌落形成單位/mL;d.大腸菌一<1菌落形成單位/mL;e.假單胞菌一<1菌落形成單位/mL;f.沙門氏菌一<1菌落形成單位/mL;g.葡萄球菌一<1菌落形成單位/mL;h.酵母_<100菌落形成單位/mL;和i.霉菌一<100菌落形成單位/mL.12.對所有NEO20TM罐裝尺寸進行營養分析。濃度值處于以下范圍中i.總熱量~0.69Cal/mL-0.74Cal/mL;ii.蛋白質一1.1g/dL-1.3g/dL;iii.脂肪一3.5g/dL-5.5g/dL;和iv.乳糖一8.0g/dL-10.5g/dL.13.—旦完成營養分析，則生成有來自實驗室的實際值的標簽。通常，食品的正常程序是標簽上打平均值。然而這些PROLACTATM產品顯示每瓶的具體成分。14.產品在干冰上的絕緣冷卻器中運送給消費者。也可采用冰塊替代干冰用于運送。實施例4.強化礦物質的標準化人乳的制備和組成PROLACTAtm生物科學PROLACT20TM是強化礦物質的標準化人乳產品。其是在100000級潔凈室(IS08級)中采用以下步驟制備而得。罐裝在10000級潔凈室(IS07級)中完成。1.混合捐贈乳。2.采取樣品進行聚合酶鏈反應(PCR)以檢測以下病毒a.HIV-1b.HBV—乙型肝炎c.HCV—丙型肝炎3.通過200微米篩過濾捐贈乳。4.將全乳進行超濾。該步驟從全乳中濾出水分。水被稱為滲透物。該步驟中蛋白質的最終濃度是1.2%-1.3%。5.采用滲透物后清洗過濾器以回收超濾處理期間留在過濾器上的蛋白質。將洗后溶液加入濃縮全乳中直至蛋白質濃度達到1.2%-1.5%。6.成批制備期間，加入洗后溶液之后將來自之前增強劑部分的奶油加入濃標值。此時，產品具有-a.脂肪一3.5%-5.5%;b.蛋白質一1.1%-1.3%;和c.乳糖一8%-10.5%。7.在該階段，可將產品冷凍并在之后進一步處理時解凍。8.根據對起始礦物質的分析，計算還需要添加多少礦物質。最終目標是a.鈣"40mg/dL-150mg/dL;b.氯化物一30mg/dL-80mg/dL;c.銅一0.05mg/dL-0.21mg/dL;d.鐵一0.1mg/dL-0.5mg/dL;e.鎂一3.0mg/dL-13mg/dL;f.錳一1.0mcg/dL-9.2mcg/dL;g.磷一15mg/dL-60mg/dL;h.鉀"60mg/dL-120mg/dL;i.鈉一20mg/dL隱60mg/dL;禾口j,鋅一0.25mg/dL-1.2mg/dL。9.添加礦物質(并解凍，如果產品被冷凍)后，產品在罐中進行巴氏殺菌。罐是加套式的，并利用熱甘油來加熱罐。所用參數如下a.產品溫度為63'C或更高；b.產品上方的空氣溫度為66'C或更高；和c.對產品進行巴氏殺菌至少30分鐘。10.在加套罐中通入冷甘油將產品溫度降至2"C-8X:。11.在IOOOO級潔凈室中采用Watson-Marlow灌裝機械將產品裝入瓶中。灌裝尺寸如下a.PROLACT2030mLb.PROLACT2040mLc.PROLACT20TM50mL。12.完成灌裝時，采用瓶用于以下目的a.生物負荷量樣品一在灌裝過程的開始、中途和結束時各取2瓶，共取6瓶；b.營養樣品一在灌裝過程的開始、中途和結束時各取1瓶，共取3瓶；和c.保留樣品一保留120mL產品。13.對生物負荷量樣品進行如下檢測a.總的需氧計數一<100菌落形成單位/mL;b.蠟狀芽孢桿菌一<10菌落形成單位/mL;c.大腸桿菌一<1菌落形成單位/mL;d.大腸菌一<1菌落形成單位/mL;e.假單胞菌^<1菌落形成單位/mL;f.沙門氏菌^<1菌落形成單位/mL;g.葡萄球菌一<1菌落形成單位/mL;h.酵母一<100菌落形成單位/mL;和i.霉菌—<100菌落形成單位/mL。14.對添加礦物質之后的所有PROLACT20TM罐裝尺寸進行營養分析。范圍包括i.總熱量一0.69Cal/mL-0.74Cal/mL;ii.蛋白質一l.lg/dL-1.3g/dL;iii.脂肪一3.5g/dL-5.5g/dL;iv.乳糖一8.0g/dL-10.5g/dL;v.銬一0mg/dL-150mg/dL;vi.氯化物一30mg/dL-80mg/dL;vii.銅一0.05mg/dL-0.21mg/dL;viii.鐵一O.lmg/dL-0.5mg/dL;ix.鎂一3,0mg/dL-13mg/dL;x.錳一1.0mcg/dL-9.2mcg/dL;xi.磷一15mg/dL-60mg/dL;xii.鉀""60mg/dL-120mg/dL;xiii.鈉一20mg/dL畫60mg/dL;禾口xiv.鋅一0.25mg/dL-1.2mg/dL。15.—旦完成營養分析，則生成有來自實驗室的實際值的標簽。在通常食品。而這些PROLACTATM產品顯示的是每瓶中的具體成分。16.產品在干冰上的絕緣冷卻器中運送給消費者。也可采用冰塊替代干冰用于運送。實施例5.巴氏殺菌法的驗證本公開的方法和組合物保持了在所描述的組合物中所需的重要蛋白質和維生素的活性并消除了生物負荷量(參見例如Terpstra等人，BreastfeedingMed.2(1):27-33，2007)。A全激貞箭量縱進行高溫短時(HTST)巴氏殺菌和槽式巴氏殺菌對人乳生物負荷量的效果進行了驗證。在驗證研究中所用的測試微生物是下述細菌和病毒大腸桿菌、金黃色葡萄球菌(S.""ww)和無乳鏈球菌CS.aga/w//w)、人免疫缺陷病毒(HIV)、甲型肝炎病毒(HAV)、牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)和假狂犬病病毒(PSR)。己知HIV和HAV是潛在的人乳污染物，因此選其作為相關病毒。丙型肝炎病毒(HCV)也是已知的潛在人乳污染物。但是，該病毒不能在實驗室細胞系系統中有效地培養，因此采用特定的模型病毒BVDV。出于相同的技術原因，以類似HBV的脂包膜病毒一一常規模式假性狂犬病病毒替代也是已知的潛在人乳污染物的乙型肝炎病毒(HBV)。采用本文所述方法，獲得如下結果表2..激試微主激游丄o^減少^f病原菌LogK)減少值(HTST)L0gK)減少值(槽中)大腸桿菌>32未檢金黃色葡萄球菌15未檢無乳鏈球菌>26未檢BVDVa>5.84>6.1HIV〉7.27>6.7PSR>7.68>6.8HAV~2~1.7這些病毒log減少值不代表本發明方法可實現的最大減少。盡管金黃色葡萄球菌相當耐熱處理，但是在本公開的處理中該微生物表現出15log的減少。巴氏殺菌后還對不同人乳成分的水平進行了驗證。采用復合ELISA程序定量人乳樣品中的免疫球蛋白A(IgA)和分泌型IgA(S[IgA2])。采用本文所述的HTST進行巴氏殺菌后，與未處理的人乳樣品的相應值比較，IgA濃度平均下降了約27X(如約7%-約47%的范圍)，而分泌型IgA水平平均下降了17%(如約7%-約27%的范圍)。以溶壁微球菌懸浮液作為底物，通過微量滴定測定溶菌酶活性。巴氏殺菌后人乳中溶菌酶活性為約22000IU/mL，是原人乳中初始活性(39000IU/mL)的57X(如約47%-約67%的范圍)。通過ELISA技術測定了乳鐵蛋白濃度。采用本公幵的方法經巴氏殺菌后的人乳中乳鐵蛋白含量為約0.033g/100mL，是原人乳中初始濃度(0.24g/100mL)的約14%(如約4-24%的范圍)通過經驗證的HPLC程序進行維生素分析。巴氏殺菌之后，維生素A、維生素C、以及a-、y-和S-生育酚水平保持不變。人乳的維生素B6含量略微減少至約7.8pg/100mL，為初始濃度8.8pgAOOmL的約89%。這些結果如表3所列。表3.^氏殺朦對乂^成分游嚴喊組分未處理乳巴氏殺菌乳保留％免疫球蛋白A(mg/mL)31523073分泌型IgA(mg/mL)46237982溶菌酶(IU/mL)390002200057乳鐵蛋白(g/100mL)0.240.03314維生素B6Otg/100mL)8.87.889對本領域普通技術人員顯而易見的是那些未偏離本發明范圍或所附權利要求的主旨的本文所描述的發明的其他變化和實施方案。權利要求1.經巴氏殺菌的人乳組合物，其包含約35-85mg/mL的人類蛋白質組分；約60-110mg/mL的人類脂肪組分；和約60-140mg/mL的人類碳水化合物組分。2.權利要求1的組合物，其中所述碳水化合物組分包含乳糖。3.權利要求1的組合物，其還包含人類IgA。4.權利要求l的組合物，其還包含選自鈣、氯化物、銅、鐵、鎂、錳、磷、鉀、鈉和鋅中的一種或多種組分。5.權利要求1的組合物，其包含約55-65mg/mL的蛋白質組分；約85-95mg/mL的脂肪組分；和約70-120mg/mL的碳水化合物組分。6.權利要求5的組合物，其中所述碳水化合物組分包含乳糖。7.權利要求5的組合物，其還包含人類IgA。8.權利要求5的組合物，其還包含選自鈣、氯化物、銅、鐵、鎂、錳、磷、鉀、鈉和鋅中的一種或多種組分。9.權利要求8的組合物，其包含約4.0-5.5mg/mL的鈣濃度；約0.35-0.95mg/mL的氯化物濃度；約0.0005-0.0021mg/mL的銅濃度；約0.001-0.007mg/mL的鐵濃度；約0.180-0.292mg/mL的鎂濃度；約0.010-0.092pg/mL的錳濃度；約2.00-3.05mg/mL的磷濃度；約1.90-2.18mg/mL的鉀濃度；約0.75-0.96mg/mL的鈉濃度；和約0.0200-0.0369mg/mL的鋅濃度。10.權利要求9的組合物，其中所述碳水化合物組分包含乳糖。11.權利要求8的組合物，其包含約2.00-2.90mg/mL的轉濃度；約0.175-0.475mg/mL的氯化物濃度；約0.00025-0.001mg/mL的銅濃度；約0.0005-0.0025mg/mL的鐵濃度；約0.090-0.170mg/mL的鎂濃度；約0.005-0.046jig/mL的錳濃度；約1.00-1.50mg/mL的磷濃度；約0.95-1.41mg/mL的鉀濃度；約0.375-0.608mg/mL的鈉濃度；禾口約0.010-0.0198mg/mL的鋅濃度。12.權利要求ll的組合物，其中所述碳水化合物組分包含乳糖。13.營養性人乳組合物，其包含權利要求1的組合物和原人乳，其中所述原人乳占所述營養性組合物的約80%。14.營養性人乳組合物，其包含權利要求1的組合物和原人乳，其中所述原人乳占所述營養性組合物的約70%。15.營養性人乳組合物，其包含權利要求1的組合物和原人乳，其中所述原人乳占所述營養性組合物的約60%。16.營養性人乳組合物，其包含權利要求1的組合物和原人乳，其中所述原人乳占所述營養性組合物的約50%。17.營養性人乳組合物，其包含權利要求9的組合物和原人乳，其中所述原人乳占所述營養性組合物的約80%。18.營養性人乳組合物，其包含權利要求9的組合物和原人乳，其中所述原人乳占所述營養性組合物的約70%。19.營養性人乳組合物，其包含權利要求9的組合物和原人乳，其中所述原人乳占所述營養性組合物的約60%。20.營養性人乳組合物，其包含權利要求9的組合物和原人乳，其中所述原人乳占所述營養性組合物的約50%。21.營養性人乳組合物，其包含權利要求ll的組合物和原人乳，其中所述原人乳占所述營養性組合物的約80%。22.營養性人乳組合物，其包含權利要求ll的組合物和原人乳，其中所述原人乳占所述營養性組合物的約70%。23.營養性人乳組合物，其包含權利要求11的組合物和原人乳，其中所述原人乳占所述營養性組合物的約60%。24.營養性人乳組合物，其包含權利要求11的組合物和原人乳，其中所述原人乳占所述營養性組合物的約50%。25.經巴氏殺菌的人乳組合物，其包含約11-20mg/mL的人類蛋白質組分；約35-55mg/mL的人類脂肪組分；約70-120mg/mL的人類碳水化合物組分。26.權利要求25的組合物，其包含約11-13mg/mL的人類蛋白質組分；約35-55mg/mL的人類脂肪組分；和約80-105mg/mL的人類碳水化合物組分。27.權利要求25的組合物，其中所述碳水化合物組分包含乳糖。28.權利要求25的組合物，其中含熱量為約0.64-1.1Cal/mL。29.權利要求25的組合物，其還包含選自鈣、氯化物、銅、鐵、鎂、錳、磷、鉀、鈉和鋅中的一種或多種成分。30.權利要求29的組合物，其包含約0.40-1.50mg/mL的韓濃度；約0.30-0.80mg/mL的氯化物濃度；約0.0005-0.0021mg/mL的銅濃度；約0.001-0.005mg/mL的鐵濃度；約0.03-0.13mg/mL的鎂濃度；約0.01-0.092嗎/mL的錳濃度；約0.15-0.631mg/mL的磷濃度；約0.60-1.20mg/mL的鉀濃度；約0.20-0.60mg/mL的鈉濃度；禾口約0.0025-0.0120mg/mL的鋅濃度。31.權利要求26的組合物，其還包含選自鈣、氯化物、銅、鐵、鎂、錳、磷、鉀、鈉和鋅中的一種或多種成分。32.權利要求31的組合物，其包含約0.40-1.50mg/mL的l濃度；約0.30-0.80mg/mL的氯化物濃度；約0.0005-0.0021mg/mL的銅濃度；約0.001-0.005mg/mL的鐵濃度；約0.03-0.13mg/mL的鎂濃度；約0.01-0.092ng/mL的錳濃度；約0.15-0.631mg/mL的磷濃度；約0.60-1.20mg/mL的鉀濃度；約0.20-0.60mg/mL的鈉濃度；和約0.0025-0.0120mg/mL的鋅濃度。33.獲得經巴氏殺菌的人乳組合物的方法，所述方法包括(a)遺傳篩查人乳中的一種或多種病毒；(b)過濾所述乳；(c)熱處理所述乳；(d)將所述乳分離成奶油和脫脂乳；(e)將一部分所述奶油添加至所述脫脂乳中；并(f)巴氏殺菌。34.權利要求33的方法，其中所述熱處理包括在約63'C或更高溫度處理所述乳約30分鐘。35.權利要求33的方法，其還包括在步驟(d)后通過過濾器過濾所述脫脂乳。36.權利要求33的方法，其中步驟(a)中的遺傳篩查包括聚合酶鏈反應。37.權利要求33的方法，其中所述遺傳篩查包括篩查選自HIV-1、HBV和HCV中的一種或多種病毒。38.權利要求33的方法，其中在步驟(b)中通過約200微米篩過濾所述乳。39.權利要求33的方法，其還包括在步驟(d)后通過分離器流出奶油。40.權利要求35的方法，其中過濾所述脫脂乳包括從所述脫脂乳中濾出水。41.權利要求35的方法，其還包括清洗所述過濾器以獲得洗后溶液。42.權利要求41的方法，其還包括將所述洗后溶液加入脫脂乳中。43.權利要求42的方法，其中所述洗后溶液和脫脂乳的組合物包含約7.0-7.2%的蛋白質。44.權利要求33的方法，其還包括對步驟(e)后獲得的組合物部分進行礦物質分析。45.權利要求33的方法，其還包括向步驟(e)后獲得的組合物中添加選自鈣、氯化物、銅、鐵、鎂、錳、磷、鉀、鈉和鋅中的一種或多種礦物質。46.權利要求45的方法，其中所述一種或多種礦物質的添加包括加熱所述組合物。47.權利要求33的方法，其還包括在步驟(f)后冷卻所述組合物。48.權利要求33的方法，其還包括對步驟(f)后的組合物的一部分進行生物學測試。49.權利要求33的方法，其還包括對步驟(f)后的組合物的一部分進行營養測試。50.權利要求33的方法，其中步驟(a)的人乳包含混合人乳。51.權利要求33的方法，其中步驟(f)后獲得的組合物包含約8.5-9.5%脂肪、約6.3-7.0%蛋白質和約8.0-10.5%乳糖。52.獲得經巴氏殺菌的人乳組合物的方法，所述方法包括(a)遺傳篩查人乳中的一種或多種病毒；(b)過濾所述乳；(c)添加奶油；并(d)巴氏殺菌。53.權利要求52的方法，其中步驟(a)中的遺傳篩査包括聚合酶鏈反應。54.權利要求52的方法，其中所述遺傳篩查包括篩査選自HIV-1、HBV和HCV中的一種或多種病毒。55.權利要求52的方法，其中在步驟(b)中通過約200微米篩過濾所述乳。56.權利要求52的方法，其還包括通過過濾器對步驟(b)后的全乳進行超濾。57.權利要求56的方法，其還包括對用于超濾的過濾器進行后清洗。58.權利要求52的方法，其還包括在步驟(d)后冷卻所述組合物。59.權利要求52的方法，其還包括對步驟(d)后的組合物的一部分進行生物學測試。60.權利要求52的方法，其還包括對步驟(d)后的組合物的一部分進行營養測試。61.權利要求52的方法，其中步驟(a)的人乳包括混合人乳。62.權利要求52的方法，其還包括向步驟(c)后獲得的組合物中添加選自鈣、氯化物、銅、鐵、鎂、錳、磷、鉀、鈉和鋅中的一種或多種礦物質。63.權利要求52的方法，其中步驟(d)后獲得的組合物包含約11-20mg/mL蛋白質、約35-55mg/mL脂肪和約70-120mg/mL碳水化合物。64.試劑盒，其包含權利要求1的經巴氏殺菌的人乳組合物和用于混合權利要求1的組合物和原人乳的帶刻度容器。65.權利要求64的試劑盒，其中所述容器選自瓶、注射器和罐。全文摘要本發明公開涉及人乳增強劑組合物、標準化人乳及其制備和使用方法。在一個實施方案中，經巴氏殺菌的人乳組合物包含約35-85mg/ml的人類蛋白質組分；約60-110mg/ml的人類脂肪組分和約60-140mg/ml的人類碳水化合物組分。文檔編號A23L1/30GK101626697SQ200780050590公開日2010年1月13日申請日期2007年11月29日優先權日2006年11月29日發明者D·J·雷希特曼,E·M·梅多,J·富爾耐爾,M·L·李申請人:普羅萊克塔生物科學公司