專利名稱：：一種豬苓酒的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于發(fā)酵酒制備方法領(lǐng)域，具體涉及一種生產(chǎn)豬苳酒的方法。
背景技術(shù)：
：豬苓(尸o/少pon^w^e/tous(PersJFr.)(1821年定)又叫豬屎苳、豬茯苓、野豬屎、逐苓、地烏桃。在分類學(xué)上屬于無隔擔(dān)子菌亞綱(//o/o6as7Wow_yceri<iae)、無裙菌§(y4o/7/zora/as)、多孑L菌禾斗(尸o/^/orace—、多孔菌屬(尸o^pon^)。其在我國分布很廣，北至黑龍江，南達(dá)福建，西到青海。主產(chǎn)于陜西、云南、山西、河南、甘肅、吉林、四川等省產(chǎn)量也很豐富。豬苓主要是由菌核和子實(shí)體兩部分構(gòu)成。其中菌核作為藥用部分，其藥用價(jià)值在我國古代早有應(yīng)用和記載，中醫(yī)臨床上常用于治療急性腎炎、淋病、糖尿病、全身浮腫、小便不暢、尿急尿頻、尿道疼痛、受暑水瀉以及急性肝炎、急性胃炎等疾病。研究表明，豬苓的主要藥效成分——豬苓多糖，是一種非特異性細(xì)胞免疫刺激劑，能顯著地加強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬細(xì)胞的功能，使癌細(xì)胞生長受到抑制。經(jīng)免疫調(diào)節(jié)試驗(yàn)表明，豬苓多糖對Lewis肺癌及HAC肝癌的殺傷作用明顯，具有調(diào)節(jié)免疫功能。中國中醫(yī)研究院中藥研究所已經(jīng)研制出"豬苓多糖注射液"，可用于治療病毒性肝炎和腫瘤。但是豬苓菌核因其生長周期長，栽培條件要求高等因素，難以依賴人工大規(guī)模生產(chǎn)提高產(chǎn)量。因此近些年來，對于豬苓生產(chǎn)的研究主要集中在通過固體和液體發(fā)酵的方法生產(chǎn)豬苓的營養(yǎng)菌絲，并從中提取豬苓多糖用于醫(yī)藥生產(chǎn)。許廣波等(液體淺層培養(yǎng)對豬苓菌絲體生長及其多糖含量的影響，吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，26(3):287290)對豬苓液體培養(yǎng)的菌絲體和菌核中的豬苓多糖進(jìn)行紅外吸收光譜的比較，證明豬苓菌絲體和豬苓菌核中提取的多糖的主要成分相同，但豬苓營養(yǎng)菌絲體中豬苓多糖的含量比豬苳菌核含量更高些。1979年戴如琴(豬苳菌絲體的液體培養(yǎng)及其抗腫瘤作用的研究，新醫(yī)藥學(xué)雜志，1979，(2):1922)對豬苓菌絲體發(fā)酵液的粗提物進(jìn)行了研究，證明其對小鼠肉瘤細(xì)胞有明顯的抑制作用。在陳文強(qiáng)(豬苓營養(yǎng)菌絲與野生菌核蛋白質(zhì)成分分析，食用菌學(xué)報(bào)，2004.11(2):1619)研究中，他測定和分析了豬苳營養(yǎng)菌絲與野生菌核中蛋白質(zhì)含量和氨基酸種類及含量。結(jié)果表明，豬苓營養(yǎng)菌絲中的粗蛋白含量是32.5%，必需氨基酸含量是3.51%，氨基酸總量是IO.09%，而野生菌核中的粗蛋白含量是6.87%,必需氨基酸含量是1.53%，氨基酸總量是4.53%，因此菌絲的粗蛋白和氨基酸含量顯著高于野生菌核。在他進(jìn)一步研究(秦巴山區(qū)野生與栽培豬苓菌核主要成分的測定，無錫輕工大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，22(6):9698)中，經(jīng)測定，豬苓液體發(fā)酵生產(chǎn)的營養(yǎng)菌絲與栽培菌核都含有17種氨基酸，且豬苓營養(yǎng)菌絲中的粗蛋白質(zhì)量顯著高于栽培菌核，豬苓營養(yǎng)菌絲的人體必需氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)比栽培菌核高228.5%。因此認(rèn)為，經(jīng)過液體發(fā)酵生產(chǎn)的豬苓菌絲不但均備了豬苓菌核的主要營養(yǎng)成分，也保留了豬苓的主要藥效功能。液體發(fā)酵技術(shù)在理論上可以應(yīng)用于藥用菌的生產(chǎn)。液體發(fā)酵技術(shù)是隨著抗生素工業(yè)發(fā)展起來并運(yùn)用到藥用真菌發(fā)酵中的。近年來，藥用真菌發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用越來越廣泛，改進(jìn)發(fā)酵條件，提高產(chǎn)物品質(zhì)，降低發(fā)酵成本，是液體發(fā)酵研究的重點(diǎn)。中國專利ZL01126705.4中，周曉艷等人經(jīng)過對豬苓菌絲體發(fā)酵工藝的優(yōu)化研究，得到了適應(yīng)豬苓液體發(fā)酵的培養(yǎng)基組成、接種量、培養(yǎng)溫度、通風(fēng)量和攪拌速度。其豬苓菌絲體的獲得率為213%，粗多糖的獲得率為3110%。該發(fā)酵工藝已經(jīng)過小試、中試和生產(chǎn)性試驗(yàn)，可以進(jìn)行工廠化生產(chǎn)。通過液體發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)的豬苓多糖分為胞內(nèi)多糖(IPS)和胞外多糖(EPS)。從發(fā)酵菌絲體里提取的多糖一般稱為胞內(nèi)多糖，由發(fā)酵液里提取的多糖稱為胞外多糖。胞內(nèi)多糖隨發(fā)酵菌絲干燥、儲存，即可直接用于中成藥的制作，或者經(jīng)過水溶、濃縮、醇沉、純化的過程提取出來用于西藥的制作。而胞外多糖必須立刻經(jīng)過濃縮、醇沉、純化的過程提取出來，否則大量的發(fā)酵液無法保存。對于大多數(shù)藥材生產(chǎn)企業(yè)或者食用菌制種企業(yè)，大量提取胞外多糖的成本過高，可行性不強(qiáng)。截止目前，還未見過有關(guān)用豬苓生產(chǎn)酒的報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明的目的在于提供個一種不僅具有良好的保健和藥用功能，而且生產(chǎn)方法簡單、生產(chǎn)成本低的豬苓酒的生產(chǎn)方法。實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的的技術(shù)方案是一種豬苓酒的生產(chǎn)方法，包括下列步驟:將經(jīng)過液體發(fā)酵生產(chǎn)的豬苓發(fā)酵液在無菌條件下進(jìn)行細(xì)胞破壁處理獲得發(fā)酵醪液，再向發(fā)酵醪液中接種釀酒干酵母并添加蔗糖進(jìn)行酒精發(fā)酵，酒精發(fā)酵完成后依次進(jìn)行轉(zhuǎn)罐、后發(fā)酵、澄清或過濾、裝瓶、滅菌處理，即得成品。所述的細(xì)胞破壁處理方法可以選用低溫凍融技術(shù)、超聲波粉碎技術(shù)、酶解技術(shù)、膠體磨破碎技術(shù)中任意一種。所述的釀酒干酵母的添加量為O.20.5g/L，發(fā)酵溫度為1528。C，發(fā)酵時(shí)間為712d。所述的蔗糖的添加量為160200g/L。.所述的后發(fā)酵溫度為1822r，時(shí)間為2035d。所述的裝瓶后滅菌溫度為5070'C，1530min。所述的豬苓發(fā)酵液是發(fā)酵產(chǎn)生的菌絲體和發(fā)酵液整體。所述的釀酒干酵母的接種方法可以采用無菌水接種、糖液接種和醪液接種現(xiàn)有技術(shù)中的任一種。本發(fā)明還有一目的是提供一種豬苓酒的生產(chǎn)方法的另一種技術(shù)方案，包括下列步驟是將經(jīng)過液體發(fā)酵生產(chǎn)的豬苓發(fā)酵液在無菌條件下過濾，去除發(fā)酵菌絲體獲得發(fā)酵醪液，再向發(fā)酵醪液中接種釀酒干酵母并添加蔗糖進(jìn)行酒精發(fā)酵，酒精發(fā)酵完成后，經(jīng)過轉(zhuǎn)罐、后發(fā)酵、澄清或過濾、裝瓶、即成成品；所述的蔗糖的添加量為170210g/L;所述的釀酒干酵母的添加量為O.20.5g/L，發(fā)酵溫度為1828。C，發(fā)酵時(shí)間為712d;.所述的后發(fā)酵溫度為1822'C，時(shí)間為2035d;所述的裝瓶后滅菌溫度為5070'C，1530min。所述的釀酒干酵母的接種方法可以采用無菌水接種、糖液接種和料液接種現(xiàn)有技術(shù)中的任一種。本發(fā)明的方法是在液體發(fā)酵生產(chǎn)藥用真菌技術(shù)的基礎(chǔ)上，再接入釀酒酵母進(jìn)行二次發(fā)酵，從而生產(chǎn)發(fā)酵酒，該技術(shù)可以作為藥用真菌液體發(fā)酵技術(shù)的補(bǔ)充，成為發(fā)酵液和胞外多糖利用的新選擇，同時(shí)也開辟了豬苓新的應(yīng)用途徑。應(yīng)用本發(fā)明方法生產(chǎn)的豬苓酒更具營養(yǎng)、更健康衛(wèi)生，也豐富我國發(fā)酵酒和保健酒市場。圖l為本發(fā)明豬苓酒的生產(chǎn)方法的第一種方案的工藝流程圖；圖2為本發(fā)明豬苓酒的生產(chǎn)方法的第二種方案的工藝流程圖。具體實(shí)施例方式實(shí)施例l.豬苓液體發(fā)酵方法將豬苓的一級母種轉(zhuǎn)接到PDA平板培養(yǎng)基上，25X:恒溫培養(yǎng)7天，挑取旺盛的豬苓菌絲接入三角瓶的液體培養(yǎng)基，25。C恒溫振蕩培養(yǎng)5天制成一級發(fā)酵種子；再將一級發(fā)酵種子以10%的接種量接入5L攪拌式繁殖罐中，25'C恒溫培養(yǎng)3天制成二級發(fā)酵種子；最后將二級發(fā)酵種子以5%的接種量接入10噸發(fā)酵罐中，25°。直溫培養(yǎng)40h即得豬苓液體發(fā)酵產(chǎn)品。上述液體培養(yǎng)基及發(fā)酵培養(yǎng)基的配方采用陳文強(qiáng)、鄧百萬、張娟對豬苓液體培養(yǎng)基的研究結(jié)果玉米粉30g/L、酵母膏30g/L、KH2PO41.0g/L、MgS04'7H2Ol,0g/L、CaCO31.0g/L、VB,O.lg/L、水1000mL、pH5.8(豬苓液體培養(yǎng)基篩選試驗(yàn)，氨基酸和生物資源，2002，22(3):2325)。根據(jù)中國專利發(fā)明01126705.4的記載，許周善，周曉燕將豆粕粉應(yīng)用于豬苓的液體發(fā)酵培養(yǎng)基替代上述培養(yǎng)基中的酵母膏，不但可以降低生產(chǎn)成本，還可以取得大于2%的豬苓菌絲體和大于25。^的豬苓多糖含量，證明液體發(fā)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>酵，否則會引起不良酸腐味；澄清的方法有自然澄清(靜置)、機(jī)械澄清(離心、過濾等)和澄清劑澄清(添加膨潤土或蛋白等)三類方法，可以根據(jù)具體生產(chǎn)條件選用；裝瓶后采用巴氏殺菌法，控制殺菌溫度不宜過高，以免損壞酒內(nèi)的營養(yǎng)成分。本發(fā)明嚴(yán)格遵循發(fā)酵酒的釀造工藝要求，不添加任何酒精、色素、香精和其它添加劑，以產(chǎn)品的營養(yǎng)健康為最終目標(biāo)。同時(shí)本發(fā)明可以根據(jù)豬苳菌絲液體發(fā)酵的目標(biāo)不同選擇不同的釀酒原料和工藝。在本發(fā)明工藝方法l中，將豬苓菌絲細(xì)胞破壁后再發(fā)酵可以提高成品酒的營養(yǎng)價(jià)值。但是在目前的制藥企業(yè)或者制種廠，豬苓液體發(fā)酵產(chǎn)生的豬苓菌絲體將會被過濾出來用于制藥或者制種，因此本發(fā)明補(bǔ)充了工藝方法2，利用豬苓液體發(fā)酵殘?bào)w釀酒，以以有效地提高經(jīng)濟(jì)效益。由本發(fā)明工藝方法2釀造的豬苓酒，經(jīng)檢驗(yàn)，除干浸出物含量略低于我國對葡萄酒的要求標(biāo)準(zhǔn)外，其它指標(biāo)均在國標(biāo)要求之內(nèi)(見表3)，這是因?yàn)榘l(fā)酵,原料中干物質(zhì)在釀造之前就已被過濾的原因造成的。檢驗(yàn)結(jié)果表明，豬苓酒成品富含維生素B1、B2和有機(jī)酸，以及人體所需的各類氨基酸(見表4);經(jīng)感官檢測，豬苓酒成品色澤清亮，澄清透明，呈淺麥稈黃色，兼具菇香和醇香，口感圓潤，略帶酸味，醇厚爽口。表3豬苓酒各項(xiàng)指標(biāo)檢測結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表4豬苓酒各類氨基酸含量<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>將豬苓作為發(fā)酵酒的主原料，目的就是盡可能多的保留豬苓菌絲里的營養(yǎng)成分，因此如何在發(fā)酵酒的釀造過程中盡可能大的提取豬苓發(fā)酵體中的營養(yǎng)成分，同時(shí)將營養(yǎng)損耗降到最小是本發(fā)明的關(guān)鍵。其次，應(yīng)用液體發(fā)酵法生產(chǎn)釀酒的原材料，不但可以降低釀酒的成本，還能有效利用發(fā)酵液里的豬苓胞外多糖。權(quán)利要求1、一種豬苓發(fā)酵酒的生產(chǎn)方法，其特征在于，包括下列步驟將經(jīng)過液體發(fā)酵生產(chǎn)的豬苓發(fā)酵液在無菌條件下進(jìn)行細(xì)胞破壁處理獲得發(fā)酵醪液，再向發(fā)酵醪液中接種釀酒干酵母并添加蔗糖進(jìn)行酒精發(fā)酵，酒精發(fā)酵完成后依次進(jìn)行轉(zhuǎn)罐、后發(fā)酵、澄清或過濾、裝瓶、滅菌處理，即得成品。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的豬苓發(fā)酵酒的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的釀酒干酵母的添加量為0.20.5g/L，發(fā)酵溫度為1528'C，發(fā)酵時(shí)間為712d。3、根據(jù)權(quán)利要求l所述的豬苓發(fā)酵酒的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的蔗糖的添加量為160200g/L。4、根據(jù)權(quán)利要求l所述的豬苓發(fā)酵酒的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的后發(fā)酵溫度為1822。C，時(shí)間為2035d。5、根據(jù)權(quán)利要求l所述的豬苓發(fā)酵酒的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的裝瓶后滅菌溫度為5070。C，1530min。6、一種豬苓發(fā)酵酒的生產(chǎn)方法，其特征在于，包括下列步驟是將經(jīng)過液體發(fā)酵生產(chǎn)的豬苓發(fā)酵液在無菌條件下過濾，去除發(fā)酵菌絲體獲得發(fā)酵醪液，再向發(fā)酵醪液中接種釀酒干酵母并添加蔗糖進(jìn)行酒精發(fā)酵，酒精發(fā)酵完成后，經(jīng)過轉(zhuǎn)罐、后發(fā)酵、澄清或過濾、裝瓶、即成成品；所述的蔗糖的添加量為170210g/L;所述的釀酒干酵母的添加量為O.20.5g/L，發(fā)酵溫度為1828。C，發(fā)酵時(shí)間為712d;所述的后發(fā)酵溫度為1822。C，時(shí)間為2035d;所述的澄清劑的添加量為O.5lg/L;所述的裝瓶后滅菌溫度為5070'C，1530min。全文摘要本發(fā)明公開了一種豬苓酒的生產(chǎn)方法，向液體發(fā)酵生產(chǎn)的豬苓發(fā)酵液經(jīng)過無菌過濾去除發(fā)酵菌絲體而獲得的發(fā)酵醪液，或者是液體發(fā)酵生產(chǎn)的豬苓發(fā)酵液在無菌條件下進(jìn)行菌絲體的細(xì)胞破壁處理后獲得的發(fā)酵醪液中，接種釀酒酵母和蔗糖，經(jīng)過酒精發(fā)酵后依次進(jìn)行轉(zhuǎn)罐、后發(fā)酵、澄清或過濾、裝瓶、滅菌處理的過程，即可獲得富含豬苓營養(yǎng)成分的發(fā)酵酒成品。應(yīng)用該方法生產(chǎn)的豬苓酒色澤清亮，澄清透明，呈淺麥稈黃色，兼具菇香和醇香，口感圓潤，略帶酸味，醇厚爽口，同時(shí)具有良好的保健和藥用功能，而且生產(chǎn)方法簡單、生產(chǎn)成本低。文檔編號C12G3/02GK101182443SQ20071018851公開日2008年5月21日申請日期2007年12月7日優(yōu)先權(quán)日2007年12月7日發(fā)明者元周,楊東風(fēng),梁宗鎖,段琦梅申請人:西北農(nóng)林科技大學(xué)