專利名稱：：無菌灌裝設備外表面消毒效果的定量評價方法
技術領域：
：本發明涉及一種啤酒或其他飲料的無菌灌裝設備外表面消毒效果的定量評價方法。技術背景啤酒或其他飲料灌裝區域，尤其是無菌冷灌裝設備外部表面的消毒效果，與灌裝區域是否有發生二次污染的危險有著直接的關系。為此，生產廠家安裝了灌裝設備外部表面自動消毒系統，并設置了相應的消毒程序用消毒劑對設備外部表面進行消毒。對啤酒或其他飲料灌裝區域設備外部表面消毒效果的評價，目前并沒有定量的分析方法來評價其效果的好壞，尤其是消毒系統覆蓋區域內的均一性以及不同消毒程序(包括采用不同消毒劑)之間消毒效果的對比分析評價存在著一定的困難。
發明內容本發明的目的在于針對上述問題，提供一種可快速、定量評價無菌灌裝設備外部表面消毒效果的方法。為達到上述目的，本發明采用如下技術方案-無菌灌裝設備外部表面消毒效果的定量評價方法，由如下步驟組成A、將接有標準微生物的檢測片附著于待測設備外部表面；B、運行設備外部表面消毒程序；C、采集檢測片上的殘存標準微生物，并進行培養和計算，得出標準微生物殘存量數值;D、比較標準微生物殘存量數值和原始量數值，得出評價結果。上述標準微生物為枯草芽孢桿菌，或枯草桿菌。枯草芽孢桿菌或枯草桿菌在啤酒中不能存活和繁殖，不會對啤酒造成危害，既使在試驗中，假如灌裝區域消毒不完全，殘留的枯草芽孢桿菌或枯草桿菌也不會形成二次污染；枯草芽孢桿菌或枯草桿菌易于培養，用常規的營養瓊脂培養基即可，同時其個體形態較易在顯微鏡下觀察和辨別，尤其是枯草芽孢桿菌具有其明顯典型的芽孢體。作為優選，枯草芽孢桿菌或枯草桿菌的濃度為106CfU/ml~108Cfii/ml。進一步，上述檢測片攜帶標準微生物的量為106個/檢測片。上述檢測片是厚度為0.1~0.5mm的金屬片。所述金屬片的規格為2535rnrnx5565mm。所述的金屬片可為鋁材片、鐵材片或不銹鋼材片，優選易于裁剪的鋁材片。上述D步驟中，采用如下公式計算出殺菌力作為評價結果殺菌力-lg標準微生物原始量數值-lg標準微生物殘存量數值。殺菌力值越大，表明消毒效果越理想。對于啤酒和其他飲料廠來說，使用枯草芽孢桿菌的殺菌力值要求^1.5，使用枯草桿菌的殺菌力值要求^3.5。本發明的優點在于能用試驗數據快速、定量地評價無菌灌裝設備外表面的消毒效果，并能判斷消毒系統覆蓋區域內各個地方的消毒效果是否均一，也可以作為一種無菌灌裝設備外表面不同消毒程序(含不同消毒劑)間消毒效果的對比分析評價手段。圖l是本發明的流程圖。現結合附圖和實施例對本發明作進一步說明具體實施方式如圖1所示，本發明所述的無菌灌裝設備外部表面消毒效果的定量評價方法，由如下步驟組成A、將接有標準微生物的檢測片附著于待測設備外部表面B、運行設備外部表面消毒程序；C、采集檢測片上的殘存標準微生物，并進行培養和計算，得出標準微生物殘存量數值；D、比較標準微生物殘存量數值和原始量數值，得出評價結果。在上述A步驟中，需完成如下操作1)檢測片磨花處理，清洗和消毒將厚度為(U0.5mm的金屬片裁剪成規格為25~35mmx5565mm的檢測片；對檢測片一側表面的三分之二面積用360#水砂紙反復打磨，直至檢測片表面有明顯可見的較密凹痕為止。處理后，用水刷洗干凈，然后用75%酒精浸泡30分鐘或18(TC烘箱干燥1小時消毒，備用。2)將接有一定濃度標準微生物的檢測片粘附于待測設備外部表面取一定量(《5(Hxl)106cfu/ml108cfu/ml枯草芽孢桿菌或枯草桿菌菌懸液，通過移液槍均勻地涂布在檢測片經過磨花處理的表面上。待檢測片上菌液完全干燥后，牢固安放于所選定的設備外表面。另外留4片檢測片作為空白對照樣品。上述B步驟中，在安放好檢測片后，正常運行設備外部表面的自動消毒程序。上述C步驟中，需完成如下操作1)采集檢測片上的殘存標準微生物在自動消毒程序完成后，在現場將檢測片經磨花處理的部分借助無菌處理過的剪刀或其他裁剪工具分別直接收集到容量為120ml的無菌取樣袋內；作為空白對照樣品的檢測片同樣分別收集到容量為120ml的無菌取樣袋內。向每個袋內加入100ml無菌生理鹽水,然后將裝有檢測片的樣品袋放在超聲波水浴內震蕩5~10分鐘，以將其上面的殘留標準微生物洗脫下來。2)標準微生物培養和計數對所獲得的液體進行膜過濾處理后培養，空白樣品進行梯度稀釋后培養，以確定初始數量。所用培養基為營養瓊脂培養基。樣品在2526'C培養23天后計數，即得到檢測片上標準微生物的殘存量和空白樣品上的標準微生物的原始量。上述D步驟中，計算出平均細菌減少量(以對數級別計，即殺菌力)。殺菌力(平均細菌減少量，以對數級別計)=lg(標準微生物的原始量)_lg(處理后平均殘存量)。殺菌力值越大，表明消毒效果越理想。對于啤酒和其他飲料廠來說，使用枯草芽孢桿菌的殺菌力值要求>1.5，使用枯草桿菌的殺菌力值要求^3.5。以下為對某啤酒生產線灌裝區域的設備外表面實施本發明1、檢測片為厚度為0.2mm的鋁片，規格為25~35mmx5565mra，共24片。對檢測片一側表面的三分之二面積用360#水砂紙反復打磨，直至鋁片表面有明顯可見的較密凹痕為止。處理后，用水刷洗干凈，然后用75%酒精浸泡30分鐘消毒。2、取50^1的107cfu/ml枯草桿菌菌液，通過移液槍均勻地涂布在檢測片作過磨花處理部分的表面上。在通風櫥內等待檢測片上菌液完全干燥后，將20片檢測片牢固安放于某啤酒生產線灌裝區域的設備外表面。另外留4片檢測片作為空白對照樣品。3、正常啟動某啤酒生產線灌裝區域設備外部表面的自動消毒程序。消毒劑為Vortexx(有效成分為過氧乙酸)。灌裝區域分為IO組進行消毒，每組自動消毒時間如下<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>4、自動消毒程序完成后，在現場將鋁片作過磨花處理過的部分用消毒過的剪刀剪下直接收集到容量為120ral的無菌取樣袋內，然后向每個袋內加入100ml無菌生理鹽水,并將樣品袋放在超聲波水浴內震蕩8分鐘。空白對照樣品作同樣處理。5、對所獲得的液體用孔徑微0.45微米的膜片進行膜過濾處理，同時將空白樣稀釋成100倍，1000倍和10000倍后分別用營養瓊脂培養基、2526"C培養3天后計數，即得到檢測片上標準微生物的殘存量和原始菌量。<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>平均原始細菌量=1.1E+06消毒處理后平均細菌量=1.8E+026、此次設備外部表面消毒效果評價根據殺菌力(平均細菌減少量，以對數級別計)=lg(平均原始細菌量)-lg(處理后平均平均殘存細菌量)，該次Vortexx自動消毒程序的殺菌力值為3.79，整個灌裝區域的殺菌力值范圍為3.643.87，說明該消毒程序效果比較理想，而且消毒所能覆蓋的區域內各部分消毒效果比較均一。權利要求1、無菌灌裝設備外表面消毒效果的定量評價方法，其特征在于，由如下步驟組成A、將接有標準微生物的檢測片附著于待測設備外部表面；B、運行設備外部表面消毒程序；C、采集檢測片上的殘存標準微生物，并進行培養和計算，得出標準微生物殘存量數值；D、比較標準微生物殘存量數值和原始量數值，得出評價結果。2.根據權利要求1所述的醋酸潑尼松龍的生產方法，其特征在于所述的簡單節桿菌是通過下述方法培養的培養基在120122"C下，濕熱滅菌1525min;斜面培養基成分為葡萄糖和酵母膏，3033'C下恒溫培養1~2天，3-5'C保藏待用，保藏時間在1525天。3.根據權利要求1所述的醋酸潑尼松龍的生產方法，其特征在于所述的種子培養基及發酵培養基成分均為葡萄糖、玉米漿、酵母膏和磷酸二氫鉀，采用自來水配制，初始pH值為6.77.0。4.根據權利要求1所述的醋酸潑尼松龍的生產方法，其特征在于所述的親水性有機溶劑為甲醇、乙醇、二甲基亞砜中的一種。全文摘要本發明涉及一種啤酒或其他飲料的無菌灌裝設備外表面消毒效果的定量評價方法。所述定量評價方法，由如下步驟組成A.將接有標準微生物的檢測片附著于待測設備外部表面；B.運行設備外部表面消毒程序；C.采集檢測片上的殘存標準微生物，并進行培養和計算，得出標準微生物殘存量數值；D.比較標準微生物殘存量數值和原始量數值，得出評價結果。本發明的優點在于能用試驗數據快速、定量地評價無菌灌裝設備外表面的消毒效果，并能判斷消毒系統覆蓋區域內各個地方的消毒效果是否均一，也可以作為一種無菌灌裝設備外表面不同消毒程序(含不同消毒劑)間消毒效果的對比分析評價手段。文檔編號C12Q1/06GK101210263SQ20071003276公開日2008年7月2日申請日期2007年12月21日優先權日2007年12月21日發明者方貴權,李惠萍申請人:廣州珠江啤酒股份有限公司