專利名稱：：用于生產蛋白的轉基因蘆薈植物及其相關的方法
技術領域：
：本發明涉及轉基因單子葉植物，并且更具體地涉及轉基因,薈植物，以及用于產生轉基因蘆薈植物的方法和組合物，和從所述轉基因,薈植物提取蛋白的方法。
背景技術：
：具有生物活性的蛋白有持續增長的市場，許多的所述生物活性蛋白被應用于治療目的。目前已有超過160種市售的基于蛋白的藥物。未來的兩年，另外還有大約50種有希望被批準。現在對治療性蛋白生產的需求已經超過了工業的產能。為了克服這個問題，預計所述工業的產能需要提高4-5倍。然而，這些治療性蛋白的生產設備昂貴，并且其建造需要較長的時間。因此，需要更加低成本的生產方法，并且需要所述方法能夠縮短達到大規模生產所需要的時間。可以使用一些基于動物的蛋白生產方法。但是，這些方法經常會引入疾病造成的健康風險。這樣的風險可能來自于疾病的交叉感染，所述疾病可以同時感染所述動物和例如人類患者的最終使用者。因此，存在一個對生產方法的需求，所述方法需要消除所述生產生物和所述終端使用者之間的交叉感染的可能性。另外，許多現有的生產方法需要大量的處理，以從所述動物或產生治療性蛋白的其他宿主生物中提取所述治療性蛋白，并且使所述化合物處于患者可以利用的狀態。經過純化以后，可以將所述蛋白與佐劑或其他栽體材料結合以穩定所述蛋白并且使患者可以利用。然而，涉及對治療性蛋白處理的提取、純化、在其他溶劑中的再懸浮的過程是復雜和繁瑣的，并且可能不利于在對治療有普遍需求的發展中國家中使用。因此，需要一個簡化生產方法，所述方法可以消除或減少治療性蛋白的提取后處理。
發明內容根據本發明的組合物和方法可以解決上述的許多的需求和缺陷，并且將會提供另外的改進和優點，本領域技術人員通過閱讀本發明公開的內容將會理解這些改進和優點。在一方面，本發明可以提供一種穩定地整合目標基因的轉基因聲薈植物。在另一方面，可以提供新的載體和構建體，以將目標DM序列整合進聲薈植物的基因組中。所述目標序列可以編碼一種生物活性的蛋白。所述生物活性的蛋白可以是干擾素、免疫球蛋白、淋巴因子、生長因子、激素、血液因子、組織相容性抗原、酶、化妝品用蛋白和其他哺乳動物蛋白，或其他目標蛋白。在某些方面，所述目標蛋白是人類蛋白。根據本發明的蘆薈植物可以將目標基因轉錄并翻譯成目標蛋白。在一方面，至少一些所述的目標蛋白可以易位到所述蘆薈葉的中央部分。在其他方面，所述的目標蛋白可以包含一個信號序列以便于其易位到所述，薈葉的中央部分。在其他方面，可以提供從聲薈植物上分離單細胞的新方法。仍然在其他的方面，本發明可以提供新的方法，所述方法用于將栽體整合到,薈植物中，并且再生這樣的轉基因聲薈植物。根據本發明的產生哺乳動物蛋白的轉基因,薈植物可以提供用于生產目標蛋白的、更加經濟的可行的選擇，所述的目標蛋白例如各種生物活性的蛋白和化妝品用蛋白。在一方面，所述的目標蛋白可以定位于和/或集中在所述蘆薈葉的凝膠中。所述的目標蛋白的這種定位可以簡化從所述植物中移出所述蛋白。在這方面，所述的目標蛋白可以與位于所述聲薈葉中央部分的非變性凝膠被共提取。因此，本發明可以提供一種轉基因植物，與例如煙草和玉米的大部分的轉基因植物相比，通常可以更容易地從所述轉基因植物獲得目標蛋白。而且，本發明可以提供有效的蛋白分離方法。仍然在其他的方面，所述的目標蛋白可能不是特別地位于所述蘆薈植物中。然而，所述蘆薈植物的解剖學和生理學仍然可以提供生產目標蛋白的某些其他的優點，本領域的技術人員通過閱讀本公開內容將可以理解這些優點。與在細菌和酵母中的產生目標蛋白的常規方法相比，蘆薈植物有各種優點。聲薈植物10的所述優點可以包括以某些方式加工蛋白的能力，所述方式不適合于簡單的單細胞細菌和酵母，并且是產生具有所需形式的蛋白必須的。例如，這種加工可以包括化學修飾(例如通過糖基化)和某些蛋白的折疊。而且，與基于動物細胞的其他蛋白生產方法相比，蘆薈植物生產可以提供顯著的成本優勢、規模優勢和減少可能對人有害的污染的危險。來自根據本發明的轉基因蘆薈植物的蘆薈葉的中心部分的蛋白修飾凝膠從所述蘆薈植物取出就可以被直接應用。這可以避免相對復雜的和昂貴的從天然植物材料中提取目標蛋白的過程。在某些方面，從所述葉中提取的凝膠不需要蛋白的提取或處理就可以被直接應用。所述凝膠可以以髓心的形式，所述髓心是從轉基因，薈植物的斷裂葉的脫落部分機械地提取的。本發明可以為具有生物活性和/或具有化妝品用途的人和其他哺乳動物蛋白的生產提供經濟、可行的選擇。通過閱讀本公開內容，本領域技術人員將會理解本發明的其他改進和優點o圖1顯示聲薈葉的橫斷面解剖的一個實例；圖2顯示產生胼胝體組織的示例性方法；圖3用圖表概述了產生轉基因,薈植物的各個步驟；圖4用圖表顯示包含序列信息的質粒載體的組件；圖5列出來自玉米的泛素啟動子的序列信息，并且突出顯示了所述泛素啟動子區域；圖6A和6B顯示才艮據本發明的方面的質粒載體系統的構建；圖7A至7C顯示根據本發明的方面的另一個質粒載體系統的構建；圖8顯示根據本發明的方面的另外一個質粒載體系統的構建；和圖9顯示根據本發明的方面的整合系統的構建。所有的附圖的顯示僅僅是為了易于解釋本發明的基本教導；在閱讀如下的說明之后，所述附圖關于各種實施方案的數量、位置、序列、關系和組分的擴展將能夠被本領域的技術人員解釋或者將在所述技術人員的理解范圍內。而且，在閱讀如下的說明之后，用于實踐本發明的各種方案、工具和組合物將在本領域的技術人員的理解范圍內。具體實施例方式本說明書中使用的，"一"或"一種"可能指一種或多種。如在權利要求中使用的，當與詞語"包含"一塊使用的時候，詞語"一"或"一種"可能指一種或多于一種。如本文使用的"另一種"可能指至少第二種或更多。本文使用的，一種"轉化的蘆薈細胞"指一種用穩定整合的、非天然的、重組DNA轉化(例如農桿菌介導的轉化或者通過使用包被有重組DNA的微粒或其他方法轟擊)的植物細胞。本發明的一種轉化的聲薈細胞可以是一種原始轉化的以一種微生物或者作為一種子代植物細胞形式存在的植物細胞，所述子代植物細胞再生成分化的組織，例如再生成具有穩定整合的、非天然的重組DNA的轉基因蘆薈植物10，或者衍生自子代轉基因蘆薈植物10的種子或花粉。本文使用的"轉基因,薈植物"指一種基因組被穩定整合的重組DNA改變的,薈植物。一個轉基因的蘆薈植物10包括從一個原始轉化的,薈細胞再生的蘆薈植物，以及來自轉化的聲薈植物10的后代或雜交的子代轉基因蘆薈植物。本文使用的"重組DNA"指經過基因工程改造并且在細胞外構建的DNA,包括含有天然存在的DNA、cDNA、合成的DNA和/或其他DNA。本文使用的"啟動子"指起始轉錄的調控DNA。"植物啟動子"是能夠起始聲薈細胞中的轉錄的啟動子，不管它是否來自于聲薈細胞，例如，眾所周知農桿菌啟動子在蘆薈細胞中起作用。因此，植物啟動子包括從植物、植物病毒和細菌(例如農桿菌和短根瘤菌)獲得的啟動子DM。受發育控制的啟動子的實例包括優先在在特定組織中起始轉錄的啟動子，所述組織例如葉、根或種子。這些啟動子指的是"組6織優選的"。僅僅在特定組織中起始轉錄的啟動子指的是"組織特異性的"。一種"細胞類型"特異性的啟動子主要地驅動在一種或多種器官中的特定細胞類型內的表達，例如在根或葉中的維管細胞。"可誘導的，，或"可抑制的"啟動子是一種受環境控制的啟動子。可能影響誘導型啟動子轉錄的環境條件的實例包括缺氧條件、或者特定的化學試劑、或者光的存在。組織特異性的、組織優選的、細胞類型特異性的和誘導型的啟動子構成"非組成型"啟動子的類。"組成型的"啟動子是一種在大部分條件下有活性的啟動子。所述啟動子可能包含增強子或其他元件，所述其他元件影響轉錄的起始、轉錄的起始位點、轉錄的水平、轉錄的末端位點或者所產生的核糖核酸的任何的后處理。本文使用的術語"遺傳構建體"被限定為一段包含人工排列的至少兩個DM片段的DNA序列，所述DNA序列是為了產生一種轉基因的蘆薈植物。在一個具體的實施方案中，一個片段是一個調控序列，并且另一個片段編碼一種基因產物。本文使用的"有效連接(operablylinked)"的意思是在一個DNA構建體中聯合兩段或多段DNA片段，以至于一段的功能(如編碼蛋白的DNA)被另一段調控(例如啟動子、終止序列等)。本文使用的術語"轉錄"被限定為從一個DNA模板生成一個RNA分子。本文使用的術語"翻譯"被限定為從一個RNA模板生成一個多肽。本文使用的"表達的"指產生的，例如，當一個蛋白的對應的DNA被轉錄成mRM時，所述mRNA被翻譯成一個蛋白，所述蛋白在植物細胞中表達。本發明可以提供表達各種目標蛋白的新轉基因蘆薈植物10、可以提供產生轉基因蘆薈植物10的方法和組合物、可以提供從所述轉基因聲薈植物10中提取蛋白的方法，并且可以提供來自所述轉基因蘆薈植物10的組分與目標蛋白的新組合物。根據本發明產生的目標蛋白可以包含一個分泌信號，以幫助所述蛋白在所述髓心l8中或者在蘆薈葉12的髓心中蓄積。在一方面，這種蓄積可以至少部分地出現在轉基因蘆薈植物10的葉的musalegenous細胞中。所述髓心18或蘆薈葉12的漿包含所述葉的組分，當從所述蘆薈葉12提取所述組分的時候，所述葉的組分通常至少部分地指的是"凝膠"。本文使用的"凝膠"將指所提取的髓心18和其他相關物質，在從所述,薈葉12中提取髓心18的時候所述相關物質伴隨于所述髓心18，而不管后續處理的程度。根據本發明的一個或多個方面，來自所述蘆薈葉12的凝膠可以有修飾組分。在一個具體方面，所述凝膠的組分可以被修飾為包含至少一種外源性的蛋白組分，并被稱為"蛋白修飾凝膠"。提取含有相關的目的蛋白的蛋白修飾凝膠可以提供容易獲得的蛋白和/或有效的蛋白分離的方法。根據本發明產生和/或提取的蛋白修飾凝膠不需要進行蛋白提取就可以直接被應用。出于示例性目的，本發明的方面通常顯示在圖1至8中。本發明可以提供轉基因植物、組合物，以及通常可以被應用于百合家族的聲薈屬的方法。典型地，對本發明的描述參考了在物種中的應用，所述物種選自于蘆薈(Aloevera)(庫拉索蘆薈)、開普蘆薈(Aloeferox)、木立蘆薈(Aloearborescence)。所述蘆薈屬通常包括一組大的無莖、叢生、多質單子葉植物。這些植物通常指用于本公開內容目的的,薈植物10。聲薈植物產生的各種化合物已經被應用于藥用目的。當存在于一種蛋白修飾凝膠中的時候，這些化合物可以補充根據本發明的轉基因的,薈植物10的生物活性蛋白的藥學性質。圖l顯示轉基因的聲薈植物10的,薈葉12的橫斷面。所述轉基因的蘆薈植物10的葉包含一種容易提取的凝膠狀蛋白混合物、碳水化合物和所述凝膠中包含的水，所述凝膠主要來自于髓心18。該凝膠狀混合物主要位于蘆薈葉12的中心區域。已經顯示所述凝膠中的各種化合物具有多種藥用性質和應用。在一方面，所述凝膠和/或髓心18可以穩定轉基因的聲薈植物10產生的、并且位于所述凝膠和/或髓心18中的轉基因蛋白。圖l特別地顯示表皮14、皮層或葉肉16和髓心或髓18。所述表皮14形成所述葉的外層細胞。在本發明的一個方面，一個轉基因的蘆薈植物IO可以包含位于一種或多種這些組織中的,薈細胞，所述細胞暫時地或穩定地整合一種遺傳的構建體，所述遺傳構建體被所述蘆薈細胞表達。所述皮層16包含富含葉綠體，以及維管束、木質部和韌皮部的細胞。所述髓心18是海綿狀的薄壁組織并且至少部分地代表所述凝膠，所述薄壁組織幾乎僅由大的皮層細胞組成，所述凝膠可以有助于整合或蓄積一種或多種目標轉基因蛋白。所述表皮14通常由單外層細胞組成。就在所述表皮14的下面是包含維管束網絡的皮層16。所述維管束的外支撐通常由鞘細胞提供。所述維管束由三種常見的管狀結構組成木質部、韌皮部和相關的大的中柱鞘管。所述木質部將水和礦物質從所述植物的根運送到葉。所述韌皮部在整個植物中運輸淀粉和其他合成的物質。所述中柱鞘管包含一種膠乳或樹液，所述膠乳或樹液含有非常多的輕瀉劑蒽醌，特別是聲薈素。所述蒽醌吸收太陽的紫外線，并且防止所述聲薈葉12的中央部分過熱，所述蘆薈葉12通常的功能是作為所述蘆薈植物的水貯藏器官。所述維管束的中柱鞘部分附著到所述表皮14上，而所述維管束的剩余部分突出到所述髓心18中。所述聲薈葉12的最里面和主要部分是髓心18，所述髓心18至少部分地組成所述凝膠。為了提取凝膠，通常認為所述表皮14和皮層16可以包括含有凝膠的鞘。所述提取的凝膠(包含大量的髓心18)通常是稠的并粘的物質，所述物質在歷史上為了醫學的目的已經被局部應用于皮膚上，例如作為一種燒傷和創傷的治療物。所述凝膠通常的功能是作為所述，薈植物的物質的蓄積器。所述皮層16通常合成多種碳水化合物和糖蛋白，所述碳水化合物和糖蛋白是所述聲薈植物需要的。過量合成的碳水化合物通常被轉運到髓心18，與水和某些礦物質一塊儲存。所述碳水化合物被韌皮部管轉運到髓心18的皮層16的細胞的大液泡。然后，因為滲透壓的原因水被所述碳水化合物吸收，從而使所述髓心18作為所述蘆薈植物的水貯藏器官。通過沿其縱軸破碎蘆薈葉12并且擠壓所述葉，將周圍的鞘中的所述凝膠通過所述斷裂面擠出來，可以相對容易地提取所述凝膠。可以將其他的物質與所述凝膠一塊從所述葉組織中提取出來。才法森迷根據一個或多個本發明的轉基因的蘆薈植物10通常包含一種或多種DM構建體，所述DNA構建體穩定地整合在所述植物中以表達一種或多種目標蛋白。根據一個或多個本發明產生一個轉基因的蘆薈植物可以涉及各種新的組合物和方法。典型地，開發一種或多種DNA構建體以在所述轉基因的蘆薈植物10中表達一種或多種蛋白。在一方面，單獨一種構建體可以表達一種mRNA。在另一方面，單獨一種構建體可以表達多種mRNA。在又另一方面，多種構建體可以產生多種mRNA。每種mRNA可以產生一種或多種多肽。為了將所述構建體引入到所述,薈植物中，聲薈細胞或未分化的胼胝體組織通常被應用，如圖2的一般性地顯示。所述,薈細胞和胼胝體組織典型地來自于根或葉分生組織，或者來自于一個聲薈植物的種子。使用許多如圖3中圖表顯示的技術和/或構建體，將所述DNA構建體引入所述聲薈細胞中。通過閱讀本公開內容，本領域的技術人員將會知曉某些技術。可以使用各種技術篩選已整合有所需構建體的蘆薈細胞或胼胝體組織。典型地，所述DNA構建體將包含一種選擇性標記。一旦將目標構建體穩定地引入所述,薈細胞或胼胝體組織，通常從所述蘆薈細胞或胼胝體組織產生聲薈的小植物。可以發育成為包含所述DNA構建的活的轉基因的蘆薈植物10的蘆薈小植物可以組成型地表達或者誘導性地表達目標的一種或多種目標蛋白。依賴于所產生的特定的蛋白和/或是否存在所述蛋白相關的信號序列，目標蛋白可以在所述轉基因的聲薈植物10的局部，或者在所述轉基因的蘆薈植物10的全林中普遍存在。依賴于所述特定的構建體和/或相關的目標蛋白，然后可以通過無性或者有性的方式繁殖所述轉基因的,薈植物10。可以使用許多技術以從所述轉基因的,薈植物10中分離所述蛋白。然后可以進一步地分離和/或進一步地處理所述蛋白。這些處理可以包括酶修飾、化學修飾、摻入合適的佐劑，是可以知曉的。在一個方面，可以處理所述蛋白，將它從一種非活性(前體)的形式轉變成一種活性形式，以進行所述特定蛋白的具體的應用，。勿,^》、岸如圖2中的示例性序列所示，在整合目標構建體之前，通常從一個聲薈植物中分離蘆薈細胞或者蘆薈細胞群。通常基于其再生能力來選擇用于DNA構建體的聲薈細胞類型。可以使用來自蘆薈植物的莖分生組織或根分生組織的分生細胞或者來自聲薈種子的胚的蘆薈細胞。然而，所述蘆薈植物的許多部分保持再生或形成胼胝體組織的能力，并且也可以使用所述部分。通常可以使用許多技術分離所述細胞，本領域的技術人員通過閱讀本公開內容將會知曉所述技術。典型地，使用解剖刀機械地從所述聲薈植物分離所述細胞。或者，其他機械的或非機械的技術可以被應用于分離目標細胞，這是本領域的技術人員通過閱讀本公開內容后可以知曉的。一旦分離了合適的聲薈細胞或者聲薈細胞群，通常使所述聲薈細胞在培養基中生長以形成胼胝體組織。雖然某些技術不需要所述蘆薈細胞首先生長成胼胝體組織，但是所述胼胝體組織提供了未分化聲薈細胞的集合的來源，所述未分化聲薈細胞保持產生轉基因的蘆薈植物10的能力。所述胼胝體組織通常在固體培養基上生長。然而，所述胼胝體組織也可以被置于液體培養基中，并且懸浮生長。所述分生細胞可以從聲薈植物的根尖或葉中分離。分生，薈細胞也可以從頂端分生組織中分離。典型地，用于分離所述組織的,薈植物是年輕健康的,薈植物。通常選擇的所述蘆薈植物不高于八(8)英寸，并具有六(6)個或少于6個的出生莖。通常通過切割成段在一個,薈植物的莖上形成創傷。所述創面可以刺激所述蘆薈細胞生長。通常，所述胼胝體將主要在所述切表面上開始生長。為了從,薈葉12分離,薈細胞，通常從新生枝的遠端切段。然后將所述段部分置于生長培養基上。枝頂端分生組織源自于距新生蘆薈植物的底端一英寸處的切割。將所述,薈葉12從所述切面去除，并且防止所述段。在所述"切口"中發現所述分生組織,薈細胞。通過它們在培養皿上不斷生長一形成胼胝體組織或再生枝的能力"選擇"或"分離"它們。一旦分離所述分生組織蘆薈細胞，就將它們培養在合適的培養基上，并且處于促進胼胝體組織形成的條件下。從種子分離所述胚的蘆薈細胞通常包括去除所述種皮以暴露所述胚，并且從所述胚機械地剝離目標,薈細胞。所述聲薈種子經典型地滅菌處理，并且除去所述種子的外殼。為了從蘆薈植物或者聲薈胚機械地移出所述^"薈細胞，通常可以使用解剖刀。一旦從所述種皮中分離胚的聲薈細胞，就將它們培養在合適的培養基上，并且處于促進胼胝體組織形成的條件下。當需要胼胝體組織時，所述分離的,薈細胞通常在有利于胼胝體組織的條件下生長，這是本領域的技術人員通過閱讀本公開內容可以知曉的。典型地，將所述分離的聲薈細胞在合適的固體營養培養基中放置并生長，以在轉化之前形成直徑大約為lcm大小的胼胝體組織。,薈細胞通常生長在攝氏23-26度下。合適的培養基包括基礎固體或液體培養基，所述培養基將通常包含補充的無機營養素一常量元素(例如氮、硫、磷、鈣、鎂和鉀)和微量元素(例如鐵、硼、鈷、銅、碘、錳、鉬和鋅)；包括糖(蔗糖或麥芽糖)和維生素以及輔因子(硫胺素、煙酸、生物素、吡哆素、尤其是肌醇)的有機營養素；氨基酸(例如脯氨素和酪蛋白水解產物)；以及主要是生長素源的生長調節劑(通常是(NAA)，1-萘乙酸；(IAA)，-引哚-3-醋酸；或(2，4-D)，2，4-二氯苯氧代乙酸)和細胞分裂素的源(通常為(BAP)6-千氨基噤呤)。這些培養基和維生素通常是以預配制的組合物的形式市售，所述組合物具有各種濃度的無機營養素和維生素，并且已知有MS培養基(Murashige-Skoog)、Gamborg培養基或ChuN6培養基。另外，在培養皿(Petridishe)上生長的細胞通常需要固體基質載體，例如在所述生長培養基中加入瓊脂。扁種建傳^^4'合適的DNA構建體通常被引入到由分離的,薈細胞衍生的胼胝體組織，以通過形成轉基因的蘆薈植物IO產生目標蛋白。也可以將DNA構建體引入分離的聲薈細胞或成熟的蘆薈細胞，這是本領域的技術人員通過閱讀本公開內容后可以知曉的。為了增殖所述構建體并且將其引入所述蘆薈細胞，DNA構建體通常被整合進入栽體(例如質粒或病毒)中。一種示例性質粒載體可以包括由Invitrogen(Carlsbad,California)生產的商品名為pZErO的質粒，出于示例性目的顯示在圖4的圖表中，并且，例如可以包含該質粒的一種或多種功能組件。根據本發明的DNA構建體可以包括能夠在聲薈細胞中起作用的啟動子序列、編碼目的蛋白的序列、終止序列和能夠在蘆薈細胞中起作用的翻譯起始和終止位點。當正確地配置并組合這些組件的時候，它們可以在蘆薈細胞中啟動DNA的轉錄和mRNA的翻譯，以及它們各自的終止。所述DNA構建體還可以包括分泌信號。另外，一些目標蛋白，例如干擾素，可以包含一個天然的或合成的結構域，所述結構域指引干擾素的分泌。當所述蛋白離開所述細胞的時候這些分泌信號通常會被切下來，或者在某些情況下這些分泌信號可以保持在所述蛋白上而基本上不影響所述蛋白的功能。可以將分泌信號加到各種需要分泌信號來進行易位的蛋白上。這些分泌信號可以來自于各種植物的分泌序列。所述DNA構建體或一種相關載體也可以包含至少一種可選標記。在一方面，所述DM構建體可以包含用于所述載體在細菌中的增殖的第一可選標記，和一種用于在,薈細胞中生長的可選標記。另外，所述DNA構建體可以包含其他的調控元件，所述元件也是為了在所述聲薈植物10中的特定聲薈細胞中表達。其他構建體元件可以包含額外的調控元件，例如增強轉錄的5，端引導序列和內含子、3，端非翻譯區(例如多腺苷酸化信號和位點)、運輸肽的DNA。目標DNA序列(例如編碼目標治療蛋白的序列)的擴增可以通過多聚酶鏈反應來實現(參見編號為4，683，202和5，928,906的美國專利，均通過引用納入本文)。通過閱讀本公開內容，本領域的技術人員將會明白，使用本領域的技術人員已知的方法可以修飾所述DNA構建體以改變它們的功能，所述DNA構建體包括啟動子序列、調控序列、穩定序列、靶向序列和/或終止序列。如上文所述，通常可以使用一種在,薈細胞中起作用的啟動子。所述啟動子通常包含調控蛋白和分子可以結合的遺傳元件。這些蛋白通常包括RNA聚合酶和其他轉錄因子。所述啟動子可以在一個功能位置和/或方向上與核酸序列可操作地連接，以控制該序列的轉錄起始和/或表達。可以將所述啟動子與或者不與一個"增強子"連接，所述增強子是指一種順式作用調控序列，所述調控序列涉及一段核酸序列的轉錄激活。自然地，使用一種啟動子和/或增強子是重要的，所述啟動子和/或增強子在表達必需的蘆薈植物10的至少一種細胞類型中可以有效地指導所述DM片段表達。那些分子生物學領域的技術人員通常知曉啟動子、增強子和細胞型組合在蛋白表達中的用途，例如參見Sambrooketal.(1989)，通過引用的方式納入本文中。所述使用的啟動子可以是組成型的、組織特異性的、誘導型的和/或在合適的條件下起作用的啟動子，以指導所述引入的DNA片段的高水平的表達，這對于大規模生產重組蛋白和/或肽是有利的。所述啟動子可以是異源的或者內源的。所述DNA構建體通常需要能夠在,薈細胞中起作用的轉錄和翻譯起始和終止調控信號。可以使用大量的調控轉錄起始的序列。控制轉錄起始的DNA序列可以來自于農桿菌、病毒或植物。來自花椰菜花葉病毒的35S病毒轉錄起始區域(35S-CaMV)可以被用于聲薈植物10。可以被應用于,薈植物10的植物啟動子還可以包括來自各種單子葉或雙子葉植物的核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶UUBISCO)小亞基啟動子或者來自玉米的泛素啟動子。可以使用其他合適啟動子，并且這是本領域的技術人員通過閱讀本公開內容后可以知曉的。如果需要誘導型調控，那么結構域可以來自不同的來源，使得來自一個來源的調控區域與來自另一個來源的RNA多聚酶結合結構域組合。表達的調控可以是在轉基因的蘆薈植物的io發育的特定階段、在所述轉基因的聲薈植物10的特定部分(如根、葉、種子、花、樹液)中，或者可以是在植物部分和發育階段的組合中。對一個特定發育階段或組織的表達調控可能需要其他的DNA元件，這是本領域的技術人員通過閱讀本公開內容后是可以知曉的。許多在植物細胞中有活性的啟動子已經在文獻中有所描述，并且可能被應用于聲薈細胞中。它們包括存在于植物基因組中的啟動子，以及其他來源的啟動子，包括根瘤土壤桿菌的根瘤誘導質粒上攜帶的胭脂堿合酶(N0S)啟動子和章魚堿合酶(0CS)啟動子；和例如花椰菜花葉病毒的花椰菜花葉病毒啟動子。另外，在各種參考文獻中也已經鑒定了各種其他的啟動子，所述參考文獻包括但不限于編號為5,858,742和5,322,938的美國專利，所述專利公開了來自于花椰菜花葉病毒(CaMV35S)的組成型啟動子版本；編號為5，641，876的美國專利，所述專利公開了一種水稻肌動蛋白啟動子；公布號為2002/0192813A1的美國專利申請，所述申請公開了在有效植物表達載體設計中有用的5，，3，和內含子元件；序列號為09/757，089的美國專利申請，所述申請公開了一種玉米葉綠體醛縮酶啟動子；序列號為08/706,946的美國專利申請，所述申請公開了一種水稻谷蛋白啟動子；序列號為09/757,089的美國專利申請，所述申請公開了一種玉米醛縮酶(FDA)啟動子；和序列號為No.60/310，370的美國專利申請，所述申請公開了一種煙胺合酶啟動子，所有這些專利和專利申請通過引用的方式納入本文。這些和大量的在植物細胞中發揮功能的其他啟動子可以被應用于轉基因蘆薈植物中，用于表達目標治療蛋白。作為一個具體的實例，可以使用來自玉米的所述泛素啟動子(SEQ.ID.NO.44)。所述來自玉米的泛素啟動子是一個大的元件，接近2kb長，它由至少三段普通區域組成。所述的啟動子的序列在圖5中給出，并且標出了特別相關的特征。所述泛素啟動子的第一段位于最5，端，并包含基質結合區(MAR),所述MAR是與組蛋白和其他核蛋白相互作用的元件，并且作為"伸向環外的"側翼序列，使之更易于接近所述細胞轉錄裝置。它們也協助將轉錄元件彼此分開，這對于防止在一個位置起始的轉錄"通讀"到第二個序列是重要的。這可以有利于減少形成反義信使的危險。所述第二段包含增強子元件和真正的啟動子。所述增強子元件結合轉錄因子，所述轉錄因子負責指導所述轉錄裝置(polII復合體)結合啟動子并且起始化轉錄。雖然"啟動子"具體地指與所述核心轉錄起始裝置相互作用必需的必要DNA元件，但是所述術語啟動子更廣泛地被應用于包括涉及轉錄起始的所有的DM元件，并且在這種情況下，所述"泛素啟動子"被泛指目標克隆基因5'端的2kb區域或其修飾。第三段包含一段大約lkb的內含子。內含子是轉錄的基因的區域，所述區域被通過剪接的步驟從最終翻譯的信使(mRNA)中去除。也已經發現，通過備選的增強子元件以及通過促進RNA信使從核到細胞質的易位(部分地與剪接相關的過程)增加蛋白的翻譯，內含子可以直接地影響基因表達。然而，在轉基因系統中存在內含子不一定總是導致RM表達或者蛋白翻譯水平的提高。在某些方面，所述泛素內含子可以被修飾以減少所述載體的總大小，并且以評估它們對所述聲薈中的轉基因表達的作用。在本發明的其他方面，可能需要在所述蘆薈植物的綠色組織中優先表達。這種用途需要的啟動子可以包括那些來自于如擬南芥核酮糖-1，5-二磷酸羧4匕酶(Rubisco)小亞基(Fischhoffetal.(1992)PlantMolBiol.20:81-93)、醛縮酶和丙酮酸正磷酸雙激酶(PPDK)(Taniguchietal.(2000)PlantCellPhysiol.41(1):42-48)的基因的啟動子。如前所述，可以改變所述啟動子以包含多個"增強子序列"，以協助增強基因表達。這樣的增強子是本領域中已知的。通過在這樣的構建體中包含一個增強子序列，可以增強所選蛋白的表達。雖然這些增強子通常存在于一個在真核細胞中有功能的啟動子的轉錄起始的5，端，但是也可以將它們插入到所述編碼序列的上游(5，)或下游(3，)。在某些情況下，這些5，端增強元件是內含子。作為增強子特別有用的是水稻肌動蛋白1(參見編號為5,641,876的美國專利)和水稻肌動蛋白2基因的5，端內含子、玉米乙醇脫氫酶基因內含子、玉米熱休克蛋白70基因內含子(編號為5，593，874的美國專利)和玉米皺縮l基因。根據本發明的方面的構建體可以包含一個3，端元件，所述元件通常包含一個多腺苷信號和位點。眾所周知的3，端元件包括那些來自于根癌農桿菌基因的3，端元件，如nos3，、tml3，、tmr3，、tms3，、ocs3，、tr73，，例如在編號為6,090,627的美國專利中公開的，通過引用的方式納入本文；來自如小麥(TriticumaesevUum)熱休克蛋白17(Hspl73，)、小麥泛素基因、小麥果糖-l，6-二磷酸酶基因、水稻谷蛋白基因、水稻乳酸脫氫酶基因和水稻P微管蛋白基因的植物基因的3，端元件，所有這些元件都在美國公布的專利申請2002/0192813Al中公開，該文獻通過引用的方式納入本文；和豌豆(Pisumsativum)核酮糖二磷酸羧化酶基因(rbs3，)，以及來自宿主植物內部的基因的3，端元件。可以被整合進所述DNA構建體中的結構基因編碼一種目標蛋白。所述結構基因可以是一個哺乳動物基因或哺乳動物基因的一部分。目標結構基因可以編碼干擾素、免疫球蛋白、淋巴因子、生長因子、激素、血液因子、組織相容性抗原、酶或其他蛋白。出于示例性目的，干擾素a-2的序列被作為SEQ.ID.NO.33列出。結構基因也可以編碼標記蛋白，例如來自水母的綠色熒光蛋白(GFP)。可以修飾所述結構基因的DNA序列以使其在,薈植物10中高水平表達。所述,薈植物10的密碼子偏好可能不同于用于分離所述結構基因的原始物種的密碼子偏好。可以改造天然的結構基因以優化所述,薈植物10中編碼的蛋白的產生。此外，可以改造所述結構基因的DNA序列以在,薈植物10中提供合適的糖基化，所述糖基化不影響所述蛋白的結構。可以通過能夠在聲薈植物10中起作用的各種轉錄和翻譯終止序列提供轉錄和翻譯的終止。在一方面，所述終止序列可以包括來自于農桿菌的胭脂堿合酶(NOS)基因的序列。在另一方面，所述終止序列可以衍生自蘆薈本身的基因和蛋白的終止序列。在所述DNA構建體中經常整合一個標記基因。利用所述標記基因，可以從所有不包含所述標記基因的細胞群中選擇包含目標基因結構的細胞。標記基因可以包括酶或其他蛋白，所述其他蛋白提供卡那霉素、氯霉素、G418和慶大霉素等抗性。如果以例如農桿菌作為一種栽體，那么可能還需要其他特異性的DNA序列。如果所述DNA被定位于特定的細胞類型，那么可以有其他區域。如上文所述，所述DNA構建體也可以包括一種分泌信號。構建體還可以包含編碼一種信號肽的易位序列，所述信號肽可以定位所述治療蛋白，用于將所述蛋白從產生它的細胞中移出。在文獻中已經鑒定了多種信號序列，所述信號序列在植物中發揮作用，更具體地說是在如聲薈植物的單子葉植物中發揮作用。這些信號序列可以被可操作地整合進入所述構建體中或者目標基因中。在一個方面，可以使用來自于水稻(0ryzasativa)的ct淀粉酶分泌序列(SEQ.IDNO.29)。對這個信號序列的特征的描述參見"Thealpha-amylasegenesinOryzasativa"MolGenGenet.，1990April;221(2):235-44，它的全文通過引用的方法納入本文。或者，一些目標基因一一例如干擾素——可以包含一個結構域(天然的或合成的)，所述結構域指導干擾素的分泌。所述分泌信號在所述蛋白離開細胞時被切掉，或者在某些情況下，可以被所述蛋白保留而基本上不影響所述蛋白的功能。分泌信號可以被加到各種需要分泌信號進行易位的蛋白上。這些分泌序列可以衍生自各種植物分泌序列。圖6A至6B顯示構建體的示例性集合，所述構建體用于從,薈植物產生蛋白。用pzUI(TGC9)標記所述質粒構建體。TGC9包含啟動人干擾素oc-2和pzUEK(TGC12)(SEQ.ID.NO.38)表達的全長的泛素啟動子、啟動包含eGFP(增強的綠色熒光蛋白)(SEQ.ID.NO.31)和卡那霉素抗性蛋白的融合蛋白表達的全長的泛素啟動子。所述融合蛋白將兩個蛋白(選擇和顯示)的篩選性質合并為一。如圖所示，使用每條都包含兩個不同限制性內切酶位點(引物序列見表I)的PCR引物，通過PCR擴增人干擾素oc-2基因產生所述質粒pzI(TGC8)。所述擴增的干擾素(IFN)基因具有5，端的A"和勘/hHI側位點，以及3'端的5^cl和側位點。所述PCR生成的IFN然后作為一個戶Wl/J力o1片段克隆進pZErO載體以產生所述構建體pzI(TGC8)，并且為后續的克隆引入所述勘/aHI和^cl。這個構建體包含全長的IFNa基因和其信號序列，負責指導IFN蛋白從所述細胞的分泌。這顯示在滑動圖(slide)3上。對這些PCR生成的克隆測序以確定不存在任何的DNA突變。如圖所示，通過將IFNa-2基因克隆到所述全長的泛素啟動子的下游產生所述質粒載體pzUI(TGC9)。將所述IFN的尸Wl/J7o1片段從pzl(TGC8)中釋放，并且與pzU(TGCl)連接以產生所述構建體pzUI(TGC9)。這在滑動圖3上顯示。如圖所示，使用包含勘/hHI(5'端)和(3'端)限制性內切酶位點(引物序列見表I)的引物進行eGFP基因的PCR擴增。這個PCR產生的eGFP基因沒有終止密碼子(以最終使一種eGFP-kan融合蛋白可以4皮表達)。因此，翻譯不在所述eGFP序列末端終止。用限制性內切酶勘威I17和消化所述PCR擴增的片段，并且連接到pZEr0的勘/hHI和位點中，產生pzEnostop(TGCIO)。這顯示在滑動圖3上。對這些PCR生成的克隆測序以確定不存在任何的DNA突變。如圖所示，pzEK(TGCll)形成一種eGFP基因和卡那霉素抗性基因之間的融合構建體。將eGFP以勘iaHI/Z力o1片段形式從pzEnostop(TGC10)釋放，并且與pzK(TGC4)連接以產生所述構建體pzEK(TGCll)。所述eGFP基因被克隆到閱讀框內,并且在kan/nos(SEQ.ID.NO.35)的5，。如圖所示，包含eGFP/kan/nos盒的來自pzEK(TGC11)的勘/aHI/J6al片段被克隆到pzUI(TGC9)的勘/hHI和J6al位點，以使eGFP/kan融合基因可以表達。所述IFN序列因此被去除。這個新構建體(pzUEK(TGC12))從全長的泛素啟動子(在滑動圖4中描述)開始表達所述eGFP/kan融合蛋白。該融合蛋白保持每個單獨的蛋白的特性，并且因此明顯同時具有顯示標記和選擇性試劑雙功能。圖7A至7C顯示一個其他示例性構建體集合，所述構建體用于從聲薈植物產生目標蛋白。所示栽體使兩種基因可以作為一個轉錄子表達，雖然所述轉錄子仍然被翻譯成兩個不同的蛋白。為了實現這個目的，通過插入IRES元件(內部核糖體進入序列)(SEQ.ID.NO.34)將兩個基因彼此分開。所述IRES元件可為核糖體附著和翻譯提供一個第二內部位點。所述第二位點使轉錄子克隆到所述IRES元件的3，端，以獨立地翻譯。這些載體，即pzUSEIrK(TGC18)(SEQ.ID.NO.43)和pzUIIrK(TGC19)(SEQ.ID.NO.39)被分步驟地構建，最終使eGFP或IFN(分別地)與所述卡那霉素抗性標記同時表達。如圖所示，通過首先使用包含勘/aHI(5，端)和(3，端)限制性內切酶位點(引物序列見表I)的引物進行eGFP基因的PCR擴增來產生pzEnostart(TGC13)載體。該PCR產物作為一個Aa/DHI/5^cI片段凈皮克隆進pZErO。在這個構建體中的所述eGFP基因缺少ATG翻譯起始位點，因為該蛋白是作為與所述oc淀粉酶信號序列(見構建體pzSE，TGC14)的融合體表達的。這顯示在滑動圖5上。對這些PCR生成的克隆測序以確定不存在任何DM的突變。如圖所示，合成所述oc淀粉酶基因的信號序列的一條鏈，然后通過使用PCR(引物序列見表I)進行填補生成雙鏈。然后，用限制性內切酶戶WI和勘/hHI消化并克隆進pzEnostart(TGC13)。這顯示在滑動圖5上。所述信號序列被克隆到閱讀框中，eGFP的5'端，并且為信號序列eGFP融合體提供翻譯起始位點。對產生的pzSE(TGC14)克隆測序以確定不存在任何的DNA突變。如圖所示，構建所述載體pzUSE(TGC15)以將oc淀粉酶信號序列(ss)-eGFP融合體與具有泛素啟動子相連接。來自pzSE(TGC14)的包含所述ss-eGFP的基因盒被作為一個A"/5^cI片段克隆到pzUI(TGC9)中。這替代所述IFN基因盒(通過用限制性內切酶戶WI和wcl消化從pzUI(TGC9)釋放)產生pzUSE(TGC15)。這顯示在滑動圖5上。如圖所示，使用包含AcI(5，端)和(3，端)限制性內切酶位點的引物進4亍PCR擴增從pIRES2-EGFP(Clontech，BDBiosciences)產生IRES元件。所擴增的IRES元件作為一個Acl/Z&ol片段被克隆到pZEr0中以形成pzlr(TGC16)。這顯示在滑動圖6上。對這些PCR生成的克隆測序以確定不存在任何的DNA突變。如圖所示，然后將來自pzlr(TGC16)的IRES元件作為一個AcI/J7o1片段克隆到pzK(TGC4)中以形成pzIrK(TGC17)。因此，定位所述kan/nos基因盒的IRES上游。如圖所示，所述IRES-kan/nos基因盒作為Acl/Z6al片段被克隆到pzUSE(TGC15)中以形成pzUSEIrK(TGC18)。這顯示在滑動圖6上。該構建體將eGFP作為與所述ot淀粉酶信號序列的融合體表達，定位所述eGFP以從所述細胞中分泌。這使得可視地監視蛋白在所述轉化的植物內的運輸和聚積成為可能。該載體還表達所述卡那霉素抗性蛋白(由所述IRES內部元件翻譯)，并且使得可以在轉基因植物中選擇。如圖所示，所述IRES-kan/nos基因盒可以作為Acl/Z6al片段被克隆到pzUI(TGC9)中以形成pzUIIrK(TGC19)。這顯示在滑動圖7上。該構建體表達IFNoc-2，它具有用于分泌的信號序列。該載體還表達所述卡那霉素抗性蛋白(由所述IRES內部元件翻譯)，并且可以在轉基因植物中選擇。TGC18和TGC19都以單個的轉錄子形式表達兩個基因，省去了對第二啟動子的需求，并且因此縮小了每個栽體的總大小。這是重要的，因為縮小轉染的構建體的總大小會增加這些元件轉移到核中的效率，導致了穩定的整合以及轉基因植物的選擇。單啟動子系統還會降低破壞側翼基因的表達的風險或者其他可能最終影響轉基因表達的情況。上面列出的質粒可以用其他目標編碼序列替代所述oc干擾素。如本領域的技術人員知曉的，這些替代可以在所述質粒中的相同位點或者其他位點。根據本發明的方面，也可以將一種凝血酶原編碼序列(SEQ.ID.NO.36)整合進一個質粒載體，如圖8中所圖示顯示的。凝血酶原是凝血酶的前體蛋白。它被活化的因子X(FactorX)在2位切割以釋放活化的凝血酶，所述凝血酶是一種凝結蛋白，可以將可溶性的血纖蛋白原轉化成不溶的纖維蛋白原帶。使用PCR引物(引物序列見表I)擴增所述凝血酶原基因盒(1874堿基對)。利用限制性內切酶勘/HHI將所述eGFP基因盒從pzUSEIrK(TGC18)栽體上釋放。隨后將所產生的5，突出粘性末端用綠豆核酸酶除去以形成平端。使用小牛腸磷酸酶(CIP)通過在攝氏50度下孵育2個小時進行所述平端的去磷酸化，之后在攝氏15度下與所述凝血酶原基因盒連接過夜。這產生pzUSTIrK(TGC20)(SEQ.ID.NO.42)。對PCR生成的克隆測序以確定不存在任何的DNA突變。根據本發明的方面，也可以將一種皮離蛋白(Dermcidin)(DCD)編碼序列(SEQ.ID.NO.30)整合進一個質粒載體，如圖8中所圖示顯示的。皮離蛋白是一種最近報道的寬光鐠抗菌肽，被發現在汗腺中組成型的表達。該蛋白分泌到汗液中，并且被轉運到表皮的表面。所述PCR擴增的DCD基因盒具有側翼的勘/aHI限制性內切酶的位點(引物序列見表I)。所述勘izHI消化的DCD基因盒與原來被eGFP占據的pzUSEIrK(TGC18)的位點連接，形成pzUSDIrK(TGC21)載體(SEQ.ID.NO.40)。對PCR生成的克隆測序以確定不存在任何的DNA突變。根據本發明的方面，也可以將一種人生長激素(hGH)編碼序列(SEQ.ID.NO.32)整合進一個質粒載體，也如圖8中所圖示顯示的。所述hGH基因盒通過PCR擴增產生，具有側翼的勘感I限制性內切酶的位點(引物序列見表I)。然后將所述AirfH消化的hGH基因盒與原來被eGFP占據的pzUSEIrK(TGC18)的勘威I位點連接，形成pzUSHIrK(TGC22)載體(SEQ.ID.NO.41)。對PCR生成的克隆測序以確定不存在任何的DNA突變。根據本發明的方面，也可以將一種人干擾素Y(hIFNg)編碼序列(SEQ.ID.NO.32)整合進一個質粒載體，也如圖8中所圖示顯示的。所述hlFNg基因盒通過PCR擴增產生，具有側翼的勘感I限制性內切酶的側位點(引物序列見表I)。所然后將述勘/hHI消化的hIFNg基因盒與原來被eGFP占據的pzUSEIrK(TGC18)的勘/sHI位點連接，形成pzUSIfglrK(TGC23)載體(SEQ.ID.NO.37)。對PCR生成的克隆測序以確定不存在任何的DNA突變。表I用于產生其他表達基因的引物序列表<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>常對這些DNA構建體進行設計以促進穩定轉化的聲薈植物10的形成。本領域中已知許多用重組DM轉化植物細胞的方法，所述方法可以被應用到本發明中。用于將包含在栽體中的DNA構建體整合進聲薈細胞或組織以形成穩定的聲薈轉化體的一些方法可以包括用根癌農桿菌或毛根農桿菌感染、用復制缺陷病毒感染、基因槍轉化(biolistictransformation)、原生質體轉化、基因轉移至花粉中、注射至生殖器官中、注射至未成熟胚中或者類似的方法。現在，兩種最常用于植物轉化的方法是農桿菌介導的轉化和基因槍轉化。轉化的，薈細胞或胼胝體組織通常在合適的營養培養基中生長，以篩選轉化的細胞。經常地，選擇培養基包含一種毒素或其他殺死非轉化的細胞的選擇因子。培養基的各種改變將會產生包含目標基因的聲薈植物10，這是本領域的技術人員通過閱讀本>5^開內容可以知曉的。在轉化的實施中，任何一次轉化實驗通常將DNA引入僅少部分的靶植物細胞中。標記基因被應用于為細胞的鑒定提供一個有效的系統，所述被鑒定的細胞是通過將轉基因DNA構建體接受和整合進其基因組中以獲得穩定的轉化。優選的標記基因提供選擇性標記，所述標記提供對一種選擇劑(例如抗生素或除草劑)的抗性。對于選擇性標記來說，被本發明的植物抵抗的任何除草劑都是有用的試劑。潛在的轉化的細胞被暴露于所述選擇劑。存活的細胞群通常將是整合賦予抗性的基因、并且以足夠水平表達以使細胞存活的那些細胞。可以進一步地檢測細胞以確定所述外源DNA的穩定整合。通常使用的選擇性標記基因包括那些賦予抗生素抗性的基因，所述抗生素例如卡那霉素和巴龍霉素(nptll)、潮霉素B(aphIV)和慶大霉素(aac3和aacC4);或者賦予除草劑抗性的基因，所述除草劑例如草胺磷(barorpat)和草甘膦(aroA或EPSPS)。這些選擇的實例在編號為5,550,318、5,633,435、5,780,708和6,118,047的美國專利中有說明，所有這些專利通過引用的方式納入本文。也可以使用能夠用于可視化鑒定轉化體的選擇性標記，例如一種表達有色蛋白或熒光蛋白(例如螢光素酶或綠色熒光蛋白(GFP))的基因，或者一種表達P葡萄糖苷酸酶的基因，或者其各種顯色底物已知的uidA基因(GUS)。通常，在一種耙植物系的基因組中隨機地引入重組DNA(即在非特異性位點)是有用的。在特定的情況下，靶向重組DNA插入以獲得位點特異性的整合可能是有用的，例如替換基因組中存在的基因、使用所述植物基因組中存在的啟動子或者在已知會活化基因表達的預定位點插入一段重組多核苷酸。存在幾種已知是功能性插入的特異性的重組系統，所述重組系統包括編號為4,959,317的美國專利公開的cre-lox和編號為5,527,695的美國專利公開的FLP-FRT,所述兩個專利通過引用的方式納入本文并且在下文中更詳細的敘述。對于基于根癌農桿菌的植物轉化系統，存在于轉化構建體上的其他元件將包括T-DNA左側和右側序列，以有利于將所述重組體多核苷酸整合進入所述植物基因組中。用農桿菌(根癌農桿菌)侵染，在室溫下將聲薈的胼胝體組織與農桿菌的過夜培養物(包含整合有所述DNA構建體的栽體)共孵育1個小時。所述農桿菌可以在合適的選擇性培養基中生長。所述選擇性培養基通常包含鏈霉素和卡那霉素。所述選擇性培養基還可以包含乙酰丁香酮。濃度為50uM-250uM的乙酰丁香酮通常增加單子葉植物侵染性的效率。在所述選擇性培養基上生長之后，可以將侵染的蘆薈組織轉移到培養皿的無選擇性培養基中，在攝氏25度下黑暗中維持兩(2)天。一種合適的示例性培養基可以是含有乙酰丁香酮的MS培養基。然后可以加入頭孢嚷肟(cefotaxime),維持兩(2)天以殺死農桿菌。然后為細胞更換含有50mg/L的卡那霉素(用于篩選轉化的蘆薈細胞)和枝誘導生長因子(0.2mg/LNAA，2mg/LBAP)的培養基，維持四(4)周，16小時光照。然后可以將再生的枝轉移至生根培養基中(含0.2mg/LNAA的1/2MS)以生成根(約4-6周后)，之后轉移至土壤。利用基因槍轉化，直接用所述載體構建體轟擊聲薈細胞或胼胝體組織。基因槍轉化的各種實施方案和方面在編號為5,015,580(大豆)、5,550,318(玉米)、5,538,880(玉米)、5,914,451(大豆)、6,160,208(玉米)、6,399,861(玉米)和6，153，812(小麥)的美國專利中公開，并且農桿菌介導的轉化在編號為5,159,135(棉花)、5,824,877(大豆)、5,591,616(玉米)和6,384，301(大豆)的美國專利中描述，所有這些專利通過引用的方式納入本文。此外，可以使用各種基因槍轉化的裝置，例如Bio-Rad，Inc的BiolisticPDS-1000/He津立子傳遞系統。在這種方法中，所述載體和關聯的DNA構建體可以被綁定在金或其他顆粒上，并且被直接射進所述，薈細胞。所述被轟擊的,薈細胞在黑暗中無選擇性地生長4天，之后被轉移到選擇性的培養基。同樣，所述選擇性培養基可以包含50mg/L的卡那霉素。通常在8-12周內開始形成轉化體，并且可以將其轉移到長枝和生根培養基繼續維持8-12周。一旦開始形成根，可以將小植物轉移至土壤。也可以使用各種其他技術實現轉化。這些技術包括使用復制妥協的病毒載體系統(replicationcompromisedviralvectorsystem)的病毒感染、電穿孔(特別是對胼胝體細胞或生長在液體培養中的原生質體)，以及PEG或脂質介導的原生質體轉移。然后可以按照與基因槍轉化的步驟相同的基本步驟進行轉化體的選擇。一旦被引入所述,薈胼胝體組織中，構建體可以被整合進入所述植物的遺傳物質中，如圖3中一般性顯示的。在其他方面，所述構建體可以被穩定地整合到所述蘆薈植物10的遺傳物質外的細胞中。根據所述構建體，如果沒有某種形式的轉錄誘導中，目標蛋白可以表達也可以不表達。在一方面，構建體一旦被引入蘆薈細胞，就可以指導蛋白的合成或者指導運輸至所述,薈10的特定組織。典型地，這在目標蛋白中包含靶向信號序列的時候發生。在一方面，本發明可以利用位點特異性的整合或切出引入蘆薈植物中的DNA構建體。位點特異性的整合或切出的一個優點是它可以被用來克服傳統的轉化技術涉及到的問題，其中轉化構建體通常以多拷貝的形式隨機地整合進一個宿主基因組中。如果所述外源DNA插入到一個必需基因中，這種將所要引入的DNA隨機插入所述宿主細胞的基因組中可能是致死的。另外，一個轉基因的表達可能被"位置效應"影響，所述位置效應是由周圍基因組DM引起。此外，因為與植物處理多轉基因拷貝相關的困難，所述困難包括基因沉默、重組和不可預料的遺傳，所以通常需要控制插入到所述轉基因的蘆薈植物10基因組中的DNA構建體的拷貝數量，并且經常僅需要插入單拷貝的所述DNA構建體。通過同源重組可以在植物中完成轉基因或部分的轉基因的位點特異性的整合或切出(例如見編號為5，527，695的美國專利，所述專利的全文通過引用的方式明確地納入本文)。同源重組是任何具有相似核苷酸序列的DM序列對之間的反應，其中所述兩個序列相互作用(重組)以形成新的重組DM片段。隨著所述共享的核苷酸DNA序列長度的增加同源重組的頻率增加，并且線性化的質粒分子的同源重組的頻率比環形質粒分子高。在兩個不完全相同的DNA序列之間可以出現同源重組，但是隨著兩個序列間差異的增加所述重組頻率會降低。通過將目標DNA分子和與所述宿主細胞的內源序列有同源性的序列連接，通過同源重組可以定向引入的DNA序列。一旦所述DNA進入所述蘆薈細胞，所述的兩個同源序列可以相互作用，以在所述同源的基因組DNA序列所處位置插入所述引入的DNA序列。因此，對所述引入的DNA上包含的同源序列的選擇將決定所述引入的DNA通過同源重組整合的位點。例如，如果目標DNA序列和與一個宿主聲薈細胞的單拷貝基因同源的DNA序列連接，那么目標DNA序列將通過同源重組僅插入到單個特異性位點。然而，如果目標DNA序列和與所述宿主真核細胞的多拷貝基因同源的DNA序列連接，那么目標DM序列可以通過同源重組在每個所述基因拷貝存在的特異性位點進行插入。通過涉及單互惠重組(導致插入全長的引入DNA)或者通過雙互惠重組(導致僅僅插入位于所述兩個重組事件之間的DNA)的同源重組反應，可以在所述宿主基因組中插入DNA。例如，如果希望將一個外源基因插入到一個選定基因所處的基因組位點中，所述引入的DNA應該包含與所述選定的基因同源的序列。然后單個的重組事件會導致所述整個的引入DNA序列被插入到所選定的基因中。或者，通過將目標DNA序列(所述意欲插入到所述基因組中的序列)的每一端側接與所選定的基因同源的DNA序列，可以實現雙重組事件。涉及每個所述同源側翼區的同源重組事件將導致所述外源DNA的插入。因此，僅僅那些位于共享基因組同源性的兩個區域之間的DNA序列可以被整合進入所述基因組中。雖然引入的DNA序列可以通過同源重組被定向插入到特異性基因組位點，但是在高等真核生物中，與隨機插入事件相比，同源重組是相對少的事件。在蘆薈細胞中，外源DNA分子在所述蘆薈植物的基因組中發現同源序列，并且以大約0.5-4.2x10—4的頻率重組。因此，包含通過同源重組整合的引入DNA序列的任何轉化的細胞將也可能包含許多拷貝的隨機整合引入的DM序列。避免這些隨機插入的一種方法是^f吏用一種位點特異性重組酶系統。通常，一種位點特異性重組酶系統由三個元件組成兩對DNA序列(所述位點特異性重組序列)和一種特異性酶(所述位點特異性重組酶)。所述位點特異性重組酶將僅催化兩個位點特異性重組序列之間的重組反應。根據本發明，可以使用大量的不同的位點特異性重組酶系統，包括但不限于噬菌體P1的Cre/lox系統(編號為5,658,772的美國專利，所述專利的全文通過引用的方式明確地納入本文)、酵母的FLP/FRT系統(GolicandLindquist，1989)、喧菌體Mu的Gin重組酶(MaeserandKahmann，1991)、E.coli的Pin重組酶(Enomotoetal.，1983)和pSRl質粒的R/RS系統(Arakietal.，1992)。所述噬菌體PICre/lox和酵母FLP/FRT系統組成用于轉基因的位點特異性整合或切出的兩種特別有用的系統。在這些系統中，一種重組酶(Cre或FLP)將特異性地與其各自的位點特異性重組序列(分別是lox或FRT)相互作用，以反轉或切出所述間隔序列。這兩個系統的序列相對比較短(lox為34bp并且FRT為47bp)，并且因此方便與轉化載體聯合使用。圖8顯示了使用Flp/Frt和Cre/Loxp重組酶系統的一種具體的示例性方案。在一個這樣的系統中，來自噬菌體和酵母的位點特異性重組酶可以被用作在試管中和在活體器官中操作DNA的工具。重組酶/重組位點的組合可以包括Cre-Lox、FLP-FRT和R-RS,其中Cre、FLP和R是重組酶，并且Lox、FRT和RS是重組位點。為了使用這個系統，可以產生一種包含用于重組的特異性位點的轉基因植物。通過轉染一種載體、表達一種選擇性標記并且設計包含串聯排列的Frt和Lox位點，產生一種親代的轉基因的蘆薈植物10。所述Frt和Lox位點都由三個元件組成，在每個長度都是十三個(13)核苷酸的兩個(2)反向重復之間的長度為八個(8)核苷酸的間隔序利。所述反向重復序列作為所述特異性重組酶的DNA結合結構域，而所述間隔元件是可變的，但是對于同源重組是必須的。通過改變LoxP或者FRT位點處的間隔元件，可以產生用于重組的多個不同位點。通過改變Frt和Lox位點，可以形成一個允許多位點定向整合的系統(如在圖8中列出的)。該系統可以具有許多優點。生成所述的初始的親代植物之后，使內源基因的破壞最小。通過位點特異性重組酶的表達可以提高所述轉化的效率。使用串聯排列的lox和frt位點使得可以選擇性的除去選擇的標記而保留目標基因。并且一旦形成一林親代植物，細胞的增殖和再生能力會得到提高。然而，所述親代植物是第一步，并且按照標準的轉化方法(基因槍或農桿菌)形成。通過一種包含LoxP和Frt位點以及目標基因和一種選擇性標記的載體與一種表達所述Cre重組酶的載體共轉染，形成后續的轉基因植物。Cre重組酶的表達誘導所述載體的LoxP位點和所述親本植物的同源重組。通過表達選擇性標記選擇轉化體，并且誘導所述轉化體再生。用表達Flp重組酶的后續轉化可以除去所述選擇性標記并且使得可以隨后整合到其他Loxp位點中。在聲薈細胞或f薈組織轉化之后，所述轉化的聲薈細胞或蘆薈組織可以生長成小植物。可以在再生培養基中培養在所述選擇劑暴露中存活的,薈細胞或者在篩選實驗中得分為正的聲薈細胞，并且使它們發育成轉基因的蘆薈植物10。可以將由轉化的，薈細胞再生的發育中的蘆薈小植物轉移到植物生長基質并硬化，例如在一個大約85%的相對濕度、600ppmC02和25-250微愛因斯坦(microeinstein)m—2S—1的光照的環境控制箱中，然后轉移至一個溫室或生長室中成熟。依賴于所述初始組織，在轉化體被鑒定后，所述轉化的聲薈植物IO再生大約6周至10個月。通常可以測試所述再生的轉化蘆薈植物10或其子代種子或植物的所述重組DNA的表達。從轉化的未分化的胼胝體組織或分生組織再生的轉基因,薈植物10主要涉及生長因子生長素和激動素的處理。所述第一步是啟動枝的生長。枝誘導培養基通常包含低濃度的生長素(0.2mg/LNAA)和相對高濃度的細胞分裂素(2mg/LBAP)。降低糖濃度至2%的蔗糖(影響滲透壓)也可有助于植物的再生。在生枝培養基上的細胞被置于25t:的培養箱中，以12小時的白晝循環。在開始形成的枝達到約2cm的長度后將其從所述原始胼胝體上切除，并且置于生根培養基中。也可以將這些根維持在生枝培養基中以促進其他枝的發育。生根培養基促進根的發育，并且通常包含1/2的MS培養基和相對低濃度的生長素(0.2mg/LNAA)。在根開始發育之后(1-2cm),將所述小植物轉移至土壤眾并且逐漸減少所述相對濕度使之適應環境。一旦產生轉基因的蘆薈植物IO之后，可以通過種子、克隆繁殖的方法或其他的方法繁殖所述轉基因的蘆薈植物10，所述其他方法是本領域的技術人員通過閱讀本公開內容后可以知曉的。雙控參4'控參勿/敏提承并遂必f冷于所述蘆薈植物io的各種組織中，所述組織包括根、塊莖、葉、種子、花、樹液或植物部分和發育階段的結合。在一方面，目標一種或多種蛋白可以富集在所述葉的中央部分的凝膠基質中。在另一方面，當從所述聲薈葉12中提取之后，一種或多種目標蛋白可以是生物活性的并且可以提供某種程度的藥用效果。在另一方面，一種或多種目標蛋白與在所述凝膠基質中存在的至少一種自身的蘆薈蛋白、碳水化合物和/或其他化合物協同地作用，以便為患者提供所需的治療。可以從總生物量或個別的組織提取蛋白。從植物細胞提取蛋白的方法可以包括物理的和化學的方法。從葉中或樹液中提取蛋白的方法可以涉及到過濾、超速離心、化學萃取和親和層析。在一方面，目標蛋白可能積聚在所述轉化的,薈植物10的葉的凝膠中。這個區域主要是水，大約99%，并且沒有有害的蛋白酶。所述凝膠的提取是本領域的技術人員可以理解的已知技術。一些蛋白，特別是化妝品用的蛋白，可以直接被用于補充所述聲薈凝膠，并且絕不需要從所述凝膠中將其單獨地分離出來。實施例分離植物細胞的方法在第一個實例中，用于直接應用或用于胼胝體的初始化的枝分生組織分離自所述蘆薈的莖，所述蘆薈是聲薈(Aloevera)(庫拉索蘆薈)、開普蘆薈(Aloeferox)或木立蘆薈(Aloearborescence)。去除葉部分，并且沿所述,薈葉的縱軸方向從側面將莖切開。用吐溫20(0.05%)和次氯酸鹽(5%)的混合液將組織滅菌10分鐘，之后用乙醇浸泡30秒鐘，用3x的無菌水沖洗。然后將切片暴露表面側向放置在含瓊脂(0.8-1%)的MS培養基的平亞中，所述MS培養基包含各種濃度的所述生長因子、生長素和細胞分裂素，以及2-3%的蔗糖。根據所需的過程，改變生長條件。無枝發育的胼胝體培養通常是通過在沒有BAP或含有低濃度的BAP(0.2mg/L)的NAA(2-5mg/L)中培養這些切片開始。未分化的細胞開始沿被切割的莖的區域生長，并且可以在不同的皿上傳代和維持。通過將這種片段置于生枝培養基上可以直接開始枝誘導，所述生枝培養基是包含O.2mg/LNAA(或IAA0.2mg/L)和2mg/LBAP的MS培養基。NAA和IAA二者都可以作為生長素的來源，并且有效果的生長素和細胞分裂素都有一個濃度范圍。來自未成熟胚的胼胝體細胞可以從市售的種子發育而來。所述種子首先被滅菌(乙醇30秒，5%次氯酸鹽加0.05%的吐溫20中15分鐘，并在無菌水中清洗3次)。然后將滅菌的種子置于水中，4攝氏度下過夜。通過除去種皮分離未成熟胚。在所述三角形的種子的一個角切開一個小口，并且將胚擠出。然后將它置于MS培養基上，所述培養基僅包含生長素(NAA2-5mg/L)以誘導胼胝體，或者包含生長素和細胞分裂素(NAA0.2mg/L，BAP2mg/L)以誘導驕胝體和枝增殖。糖濃度通常是2-3%。在去葉的年輕,薈植物10的底部剪下的1-2厘米的片段，由所述片段可以發育成來自所述枝頂端分生組織的胼胝體細胞。所述片段經過表面滅菌，重新放置于含1%瓊脂的MS培養基中，所述培養基含生長素和細胞分裂素(2mg/LNAA、0.2mg/LBAP)。在1-2周內開始胼胝體細胞的誘導。然后可以從這些培養物中分離細胞，并且將所述細胞用作轉化的起始材料。■構建體i.pBI121泛素干擾素栽體(pBI-UI)。所述pBI121農桿菌二元載體被用作產生pBI-UI的骨架。使用包含5，Pstl和3，Sacl/Xhol限制性位點的基因特異性引物從人293個細胞中擴增具有信號序列的人干擾素oc-2基因。所述587bp的千擾素PCR產物被克隆到pZEr0中并測序。通過擴增來自所述載體pUBI-GFP的區域并克隆進5，Hindin和3，Pstl限制性位點中，來自玉米的1962bp的泛素(Ubi)啟動子元件也被克隆進pZErO。然后，使用Hindm/Pstl(pZEr0UI)將所述Ubi片段亞克隆進入所述pZero干擾素載體。然后使用Hindin/Pstl將所述完整的Ubi干擾素盒亞克隆到pBI121中，并且去除所述CaMV35S啟動子和GUS基因形成pBIUI。該載體保留了農桿菌介導的感染和轉化必需的右側和左側T-元件邊緣區域，并且轉化和表達受Nos啟動子控制的卡那霉素抗性基因(NPTII)。ii.pZErO泛素干擾素IRES卡那霉素。(pZUIIK)該載體的產生是通過將所述Ubi啟動子克隆進所述pZErO克隆栽體。在該片段的之后克隆一個盒，所述盒包含人干擾素cx-2、IRES(內部核糖體進入序列)和卡那霉素抗性基因。該單元被表達為單個的轉錄物，30但被翻譯成兩種不同的蛋白(由IRES提供的第二翻譯起始位點導致)。這使得所述選擇性標記和干擾素都在所述Ubi啟動子的控制下表達。iii.使用Cre和Flp重組酶的雙質粒系統。首先產生一個親代植物，所述植物可表達具有用于定向整合的ere和flp位點的選擇性標記。引入具有目標基因的載體的另一次轉染被靶向所述cre位點。然后使用flp去除不需要的遺傳物質。將DNA構建體導入分離的植物細胞i.農桿菌介導的基因轉移用所述pBIUI栽體電穿孔農桿菌菌林LB4404(Invitrogen，Carlsbad,CA)，并且在含50ug/ml的卡那霉素和100ug/ml鏈霉素的LB瓊脂平板上篩選陽性克隆。攝氏30度下，使單克隆在含250uM的乙酰丁香酮的LB培養基中過夜生長。感染的發生是通過將植物片段或胼胝體浸入所述過夜的培養物中，在無菌濾紙上干燥印跡，并且在攝氏25度于黑暗中放置于包含250uM的乙酰丁香酮的MS瓊脂平板上。感染兩天之后，將組織轉移到包含200uM的頭孢噢將(cefotaxime)的MS瓊脂平板上以殺死農桿菌。然后將所述組織轉移到含50mg/L的卡那霉素、0.2mg/L的NAA和2mg/L的BAP的MS瓊脂平板上以篩選轉化體，并且誘導枝再生。所述組織在12小時光照和攝氏25度下生長。使不定枝生長到大約2cm的長度，然后將其剪下并且移植到生根培養基上繼續篩選。檢測表達目標基因的小植物的表達水平，并且將其轉移到土壤中。ii.基因槍基因轉移用包含所述DNA構建體的載體包被金顆粒(0.6-1um)。所述金顆粒在70%的乙醇中攪拌并浸泡清洗15分鐘，之后在無菌水中清洗3次。然后將所述金顆粒重新懸浮于50%的丙三醇中至60mg/ml的濃度。為了在所述清洗的顆粒上包被載體DM，將3mg的顆粒加入1.5ml的微量離心管中。在所述微量離心管中加入5ul濃度為1ug/ul的DNA、50ul2.5MCaCl2和20ul0.1M亞精胺，并且攪拌2-3分鐘。使之沉降、離心l-2秒并棄去液體。加入140ul70%的乙醇，離心并棄去液體。加入140ul100%的乙醇，離心并棄去液體。在沉淀中加入48ul100%的乙醇并輕輕地再懸浮。將所述基因槍裝置(PDS1000/He，Bio-RadLaboratories,Inc.,Hercules,CA)用70%的乙醇滅菌。使用巨攜帶子支撐物(macrocarrierholder)和停止屏(推薦設置)之間的最小間隙距離裝配所述基因槍裝置。用移液管將包被的金顆粒(8ul)滴入所述巨攜帶子中央。根據所述靶組織(6cm組織，9cm胼胝體)設定所述乾距離，破圓盤(rupturedisk)為600-1100psi。在第一實例中，在轟擊后細胞被置于包含2mg/LMA的無選擇性MS瓊脂平板上，在攝氏25度下的黑暗中培養1周。然后將細胞轉移到含用于選擇的50mg/L的卡那霉素的MS瓊脂平板上繼續4-5周，所述瓊脂平板含生長素(2mg/LMA)和細胞分裂素(0.2mg/L，6-節氨基嘌呤)。所述細胞在攝氏25度下以12小時的光照生長。在第二實例中，在一個MS的平板(4g/LMS鹽、lmg/L(1000X)MS維生素儲液、2mg/LNAA、100mg/L肌醇、2.76g/L脯氨酸、30g/L蔗糖、100mg/L酪蛋白水解產物、36.4g/L山梨糖醇、36.4g/L甘露醇、2.5g/L固化劑(gelrite)，pH5.8)上進行微粒轟擊。在轟擊后，所述轟擊的胼胝體留在MSOSM上1個小時，然后轉移到MS初始培養基中(4g/LMS鹽、1mg/L(1000X)MS維生素儲液、2mg/LNAA、100mg/L肌醇、2g/L脯氨酸、30g/L蔗糖、100mg/L酪蛋白水解產物、2.5g/L固化劑(gelrite)，pH5.8)。在MS上7-10天之后，所述轟擊的胼胝體被轉移到含50mg/L的卡那霉素的MSS選擇培養基中(4g/LMS鹽、1mg/L(1000X)MS維生素儲液、2mg/LNAA、100mg/L肌醇、30g/L蔗糖、2.5g/L固化劑(gelrite)，pH5.8)用于篩選轉化的細胞。在3周后，單胼胝體碎片被轉移到新鮮MSS培養基中。在轟擊的6-8周內，由選定的胼胝體碎片產生卡那霉素抗性克隆。iii.原生質體原生質體是沒有其外細胞壁的植物細胞。產生這些細胞的優點是提高轉染的效率，并且可以將這樣的細胞融合形成一種體細胞雜種。體細胞雜種可以將來自不同植物的基因混合，有可能獲得完全新的細胞。使用根據本發明的原生質體的技術可以包括在液體培養中生長所述細胞(對數生長期中的2-3天)。然后離心所述細胞(1000x重力，5分鐘)。所述細胞被重新懸浮于含纖維素酶、浸解酶和果膠酶的溶液中。在攝氏25度黑暗中振蕩過夜。離心(600x重力，5分鐘)并除去上清液。在培養基中重新懸浮所述原生質體，并且多次離心以除去微量的酶。所述原生質體不能被存儲或者用于增殖，并且必須被盡快用于轉染或體細胞融合。產生包含DNA構建體的存活的植物在第一個實例中，利用其細胞毒素(例如卡那霉素)的抗性篩選成功的轉化體。穩定轉染的細胞必須表達所述抗性標記和目標基因，例如編碼干擾素的基因，以及能夠再生成完整的植物。將50mg/L的卡那霉素加到所述MS瓊脂平板以啟動篩選。所述篩選過程部分地依賴于所述細胞復制的速度，但是可以在6-10周間發生。在這個時間中，通過在所述MS瓊脂平板中加入0.2mg/LNAA和2mg/LBAP誘導轉化的組織的再生，并且用12小時/光照循環促進枝的發育(繼續使用選擇壓力)。當不定枝開始發育的時候，在大約2cm長時可以對它們進行基因表達的檢測。隨后將表達目標基因產物的枝(利用RT-PCR、Western印跡和生物檢驗測定)轉移到MS瓊脂平板上以誘導根形成(1/2MS加0.2mg/LNAA)。在第二個實例中，轉基因胼胝體的再生的實現是通過將大約15個小碎片(約4mm)轉移到含有經過濾滅菌的卡那霉素(50mg/L)的再生培養基I中(4.3g/LMS鹽、1ml/L(1000X)MS維生素儲液、100mg/L肌醇、60g/L蔗糖、3g/L固化劑(gelrite)，pH5.8)，并且在攝氏25度下黑暗中孵育2-3周。在光照下將成熟的體細胞胚轉移至在含有經過濾滅菌的卡那霉素(50mg/L)的再生培養基II中(4.3g/LMS鹽、1ml/L(1000X)MS維生素儲液、100mg/L肌醇、30g/L蔗糖、3g/L固化劑(gelrite)，pH5.8)以進行萌發。權利要求1.一種治療組合物，所述組合物包含一種有生物活性的外源蛋白，所述蛋白由在一個聲薈植物中引入的編碼序列表達，并且至少部分的所述蛋白是從所述，薈植物的蘆薈細胞被易位到,薈葉的凝膠中；和一種或多種天然的和治療性蘆薈蛋白或碳水化合物。2.—種產生生物活性蛋白的方法，所述方法包含制備一種DNA構建體，所述DNA構建體含有一個啟動子、一個目的編碼序列、一個終止序列和一個易位序列；將所述DNA構建體克隆到一個聲薈植物的基因組中；增殖所述含所述DNA構建體的蘆薈植物；并且提取一種通過所述DNA構建體表達的目的蛋白，其中至少部分的所述蛋白是從所述,薈植物的,薈細胞被易位到蘆薈葉的凝膠中。3.根據權利要求2的方法，所述方法進一步包含誘導編碼目的蛋白的基因轉錄的步驟。全文摘要本發明可以提供轉基因的蘆薈植物和用于蘆薈植物轉化的重組構建體，本發明的方面可以被應用于其他單子葉植物。所述重組構建體可以包含一個或多個編碼哺乳動物蛋白的DNA序列，和至少一個能夠在蘆薈植物中指導所述重組蛋白表達的啟動子。本發明還提供用于構建和產生一個轉基因蘆薈植物的方法。本發明包括同時用數個目的基因轉染一個蘆薈植物的方法。本發明的所述蘆薈植物的制備方法可以提供經濟地并更安全地大量生產某些生物活性化合物的可能并且更容易為不富裕國家所接受，所述化合物包括用于疾病治療、診斷和預防的生物藥劑。所述蘆薈植物產生方法還可以制備用作化妝品的蛋白。文檔編號C12N15/82GK101313071SQ200680043903公開日2008年11月26日申請日期2006年9月26日優先權日2005年9月26日發明者K·洛里克,M·佩奇斯,N·J·勞特,W·J·勞瑟,W-S·約申請人:綠色細胞有限公司