專利名稱：革蘭氏陰性桿菌增菌培養基的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種革蘭氏陰性桿菌增菌培養基，其主要成分是胰蛋白胨、枸櫞酸鈉、去氧膽酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鈉、小牛血清、葡萄糖、甘露醇經一定的工藝制成。用以供糞便增菌培養痢疾桿菌。利用培養試驗鑒別細菌的種類，其關鍵在于準確、快速、簡便。而細菌接種量大小，會直接影響檢測結果。往往需要將樣本通過不同方法進行增菌培養，來進行細菌種類的鑒別，這是目前微生物實驗室最常用的手段。由于目前培養條件的應用范圍所限，供糞便痢疾桿菌增菌培養的培養基沒有特效的，存在所需接種量大、培養時間長、易出現假陽性或假陰性等問題。隨著生物研究的進展，國內外對細菌鑒別的增菌培養基研究也在不斷的發展中。生物工作者一直希望能有一種能克服上述不足的增菌培養基----革蘭氏陰性桿菌增菌培養基。
背景技術：
本發明的目的在于提供一種能克服已有鑒別培養基不足的革蘭氏陰性桿菌增菌培養基。與其它同類培養基相比具備下列特點所需接種量小，少量細菌即可迅速繁殖，在通常室溫下或37℃培養5-6小時即可觀察結果；不易出現假陽性和假陰性；能破壞標本中存在的抑菌物質，使細菌生長不受抑制。
發明內容
本發明的要點在于選擇合適的組分，并進行合理混配，經加溫、溶解、混合、冷卻、分裝、高溫滅菌等工藝而成一種革蘭氏陰性桿菌增菌培養基。
本發明選擇的配方如下(組分及其重量百分比％)胰蛋白胨(1.8-2.2)、枸櫞酸鈉(0.4-0.5)、去氧膽酸鈉(0.04-0.06)、磷酸二氫鉀(0.14-0.16)、磷酸氫二鉀(0.38-0.42)、氯化鈉(0.4-0.5)、葡萄糖(0.10-0.12)、甘露醇(0.15-0.25)、小牛血清(0.4-0.5)、蒸餾水加至100ml。
本培養基含有枸櫞酸鈉和去氧膽酸鈉，對革蘭氏陰性菌有抑制作用，大腸桿菌，綠膿桿菌及變形桿菌，在接種6小時內生長緩慢，而痢疾桿菌可相對地得到增殖.氯化鈉用于調整滲透壓；磷酸二氫鉀用于調節pH。胰蛋白胨、小牛血清、葡萄糖、甘露醇是培養基中的營養和支持成分。標本接種后即計算時間，在通常室溫下或37℃培養，均有增菌作用.增菌培養6小時后，即用劃線法移種到腸道選擇性培養基上以分離致病菌。
本發明產品的制備方法是1)、將胰蛋白胨、枸櫞酸鈉、去氧膽酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鈉、葡萄糖、甘露醇按比例加入蒸餾水中，再加熱溶解，矯正pH至7.0矯正pH至6.8，用濾紙過濾；2)、壓力蒸汽滅菌0.70kg15分鐘；3)、無菌條件下，加入無菌小牛血清，分裝安培瓶，每瓶約5ml，存于冰箱中備用。
本發明具有以下優點(1)所需接種量小，培養時間短，少量細菌即可迅速繁殖，在通常室溫下或37℃培養5-6小時即可觀察結果；(2)不易出現假陽性或假陰性；(3)能破壞標本中存在的四環素、金霉素、土霉素、新霉素、多粘菌素及鏈霉素的抑菌作用。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發明作進一步的詳細說明按照下表所列數據(重量百分比％)及其所述步驟進行配置配方一
胰蛋白胨 1.8-2.2枸櫞酸鈉 0.4-0.5去氧膽酸鈉0.04-0.06磷酸二氫鉀0.14-0.16磷酸氫二鉀0.38-0.42氯化鈉0.4-0.5葡萄糖0.10-0.12甘露醇0.15-0.25小牛血清 0.4-0.5蒸餾水加至100
配方二胰蛋白胨 1.8-2.0枸櫞酸鈉 0.4-0.45去氧膽酸鈉0.04-0.05磷酸二氫鉀0.14-0.15磷酸氫二鉀0.38-0.40氯化鈉0.4-0.45葡萄糖0.10-0.11甘露醇0.15-0.20小牛血清 0.4-0.45蒸餾水加至100
配方三胰蛋白胨 2.0-2.2枸櫞酸鈉 0.45-0.5去氧膽酸鈉0.05-0.06磷酸二氫鉀0.15-0.16磷酸氫二鉀0.40-0.42氯化鈉0.45-0.5葡萄糖0.11-0.12甘露醇0.18-0.25小牛血清 0.45-0.5蒸餾水加至100
配方四
胰蛋白胨 1.9-2.1枸櫞酸鈉 0.42-0.45去氧膽酸鈉0.05-0.06磷酸二氫鉀0.15-0.16磷酸氫二鉀0.39-0.40氯化鈉0.42-0.45葡萄糖0.11-0.12甘露醇0.17-0.22小牛血清 0.42-0.45蒸餾水加至100
權利要求
1.一種革蘭氏陰性桿菌增菌培養基，是以胰蛋白胨、枸櫞酸鈉、去氧膽酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鈉、小牛血清、葡萄糖、甘露醇為主要成分，其特征在于具有如下配方(組分及其重量百分比％)胰蛋白胨(1.8-2.2)、枸櫞酸鈉(0.4-0.5)、去氧膽酸鈉(0.04-0.06)、磷酸二氫鉀(0.14-0.16)、磷酸氫二鉀(0.38-0.42)、氯化鈉(0.4-0.5)、葡萄糖(0.10-0.12)、甘露醇(0.15-0.25)、小牛血清(0.4-0.5)、蒸餾水100ml。
2.一種權利要求1所述革蘭氏陰性桿菌增菌培養基的制備方法，其特征在于具有如下的步驟1)、將胰蛋白胨、枸櫞酸鈉、去氧膽酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鈉、葡萄糖、甘露醇按比例加入蒸餾水中，再加熱溶解，矯正pH至7.0矯正pH至6.8，用濾紙過濾；2)、壓力蒸汽滅菌0.70kg15分鐘；3)、無菌條件下，加入無菌小牛血清，分裝安培瓶，每瓶約5ml，存于冰箱中備用。
全文摘要
本發明涉及一種革蘭氏陰性桿菌增菌培養基，其主要成分是胰蛋白胨、枸櫞酸鈉、去氧膽酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鈉、小牛血清、葡萄糖、甘露醇經一定的工藝制成。用以供糞便增菌培養痢疾桿菌用。本培養基含有枸櫞酸鈉和去氧膽酸鈉，對革蘭氏陰性菌有抑制作用，大腸桿菌，綠膿桿菌及變形桿菌，在接種6小時內生長緩慢，而痢疾桿菌可相對地得到增殖，氯化鈉用于調整滲透壓；磷酸二氫鉀用于調節pH。胰蛋白胨、小牛血清、葡萄糖、甘露醇是培養基中的營養和支持成分。標本接種后即計算時間，在通常室溫下或37℃培養，均有增菌作用.增菌培養6小時后，即用劃線法移種到腸道選擇性培養基上以分離致病菌。本發明具有以下優點(1)所需接種量小，培養時間短，少量細菌即可迅速繁殖，在通常室溫下或37℃培養5－6小時即可觀察結果；(2)不易出現假陽性或假陰性；(3)能破壞標本中存在的四環素、金霉素、土霉素、新霉素、多粘菌素及鏈霉素的抑菌作用。
文檔編號C12N1/20GK101089174SQ20061004487
公開日2007年12月19日 申請日期2006年6月16日 優先權日2006年6月16日
發明者馬樂好, 曲奕 申請人:馬樂好, 曲奕